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以牛Ⅰ型胶原作为人工皮肤支架的研究
目的 探索以牛Ⅰ型胶原作为人工皮肤支架的可行性.方法 将牛型Ⅰ胶原用醋酸溶解后,采用-70℃预冻,再采用真空干燥的方法获得作为人工真皮的胶原海绵支架.结果 得到膜状的胶原海绵支架,其切面可见胶原纤维相互连接成多孔网状结构,孔径大致相同.结论 牛Ⅰ型胶原是一种良好的细胞外基质,可以用来构建人工皮肤的真皮支架.
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组织工程技术尿道重建的实验研究
目的利用组织工程技术进行人工管状皮肤的培养,探讨其用于尿道重建的可行性.方法用Wistar大鼠乳鼠皮肤为细胞来源,结合管状壳多糖基质网架,在体外共同培养成复层皮肤结构,移植到裸鼠皮下.分别于移植的5、7、14、28、35 d收取标本,光镜下观察移植物生长情况.以没有种植细胞的壳多糖基质网架作为对照组,进行对比分析.结果移植物在裸鼠皮下生长良好,未发生收缩.移植初期细胞数量少,排列不规律;随着时间的延长,细胞数量逐渐增多,排列趋于规律.所有移植物均见成纤维细胞生长,约5-7层,细胞呈长梭形,成纤维细胞向表皮细胞层游走,并规律的生长在表皮细胞层下,细胞大致按层生长,只有少量细胞相互长入对方.在移植后的5 d,可见有毛细血管长入.之后,毛细血管的数目日渐增多.移植物的表皮层生长良好,呈4-6层,但分化较差.对照组可见有大量炎性细胞.结论移植物的成纤维细胞生长、分化较好,表皮细胞增殖较好,但分化差.以壳多糖为支架的人工皮肤进行尿道修复具有可行性.
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UVA1照射对人工皮肤分泌MMP-1影响的初步研究
目的:探讨不同UVA1剂量照射对人工皮肤分泌MMP-1的影响,明确光致人工皮肤损伤的UVA1剂量.方法:通过ELISA法检测不同剂量的UVA1(0~90J/cm2)对人工皮肤表达MMP-1分泌的变化.结果:与OJ/cm2相比,UVAl剂量为10J/cm2时MMP-1的分泌量无明显变化(P>0.05),当UVA1剂量大于20J/cm2时人工皮肤分泌MMP-1的量逐渐增高(P<0.05,P<0.0001),UVA1剂量在小于50J/cm2以前呈剂量依赖性增高,至70J/cm2以后分泌量较前有所降低.结论:引起人工皮肤光损伤的初始UVA1照射剂量为20J/cm2.
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干细胞构建组织工程皮肤的研究进展
组织工程学是近年来细胞生物学、工程材料学和临床医学交叉发展起来的一门新兴学科.组织工程学基本的思路是在体外将分离的种子细胞接种到具有一定空间结构的载体支架上,通过细胞与细胞之间的相互作用形成具有一定结构功能的组织或器官.从组织工程学的观点来看,人工皮肤主要有三类:①表皮替代物,即培养表皮片;②真皮替代物,即胶原凝胶、胶原海绵合成膜、透明质酸膜及壳聚糖膜等构成的人工真皮;③具有双层结构的人工皮肤,包括:活性皮肤替代物、脱细胞异体真皮和人工网膜上培养的表皮片构成的复合皮.
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复方壳多糖皮肤替代物的制备
组织工程人工皮肤为各种原因所致的皮肤缺损提供了新选择,在国外已有多种商品化产品出售并用于临床[1],国内也有数家单位正致力于该领域的研究开发.现将笔者制作的复方壳多糖人工皮肤报告如下.
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组织工程皮肤的应用研究
目前,人们对人工活性皮肤替代物(细胞工程或组织工程人工皮肤)的研究已进行了约半个世纪.将表皮细胞培养于经辐照的鼠成纤维细胞(Fb)滋养层,是组织工程皮肤治疗大面积烧伤的里程碑[1].由于培养基的改良与商品化,促使角质形成细胞的无血清层和无滋养层培养成功,结合早期切痂和应用临时皮肤覆盖物,无论多大面积的烧伤创面,理论上均可在伤后3~4周被覆盖,但现实情况距之甚远.
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生物合成支架材料的研究进展
皮肤组织工程就是应用组织工程学技术的基本方法,将组织细胞(表皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞等)经体外培养扩增后,黏附于一种生物相容性良好并可被人体逐步降解吸收的真皮支架上,进行人工皮肤构建和培养.其中,真皮支架为细胞的增殖、繁衍提供三维空间,使之进行营养和气体交换、排除废物,因此真皮支架材料的性能直接影响着体外构建人工皮的质量和移植后的创面愈合质量.目前,用于制备真皮支架的材料种类较多,难以明确分类,一般多根据材料的来源大体分为天然生物材料和合成生物材料两大类.
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复合壳多糖人工皮肤修复家兔全层皮肤缺损的实验研究
目的探讨复合壳多糖人工皮肤在修复新西兰家兔全层皮肤缺损中的作用.方法在无菌条件下将成纤维细胞与复方真皮基质凝胶混合制成真皮替代物,然后接种角质形成细胞,培养1周后升至液面,继续培养1~2周,形成人工皮肤.将复合壳多糖人工皮肤移植于家兔的全层皮肤缺损处,观察家兔反应,定期活检,作组织病理检查.结果所有家兔创面愈合良好,无一例出现移植物下积脓、出血和感染,没有明显的免疫排斥反应,能长期覆盖创面,且具有较好的弹性和抗撕拉性,便于操作.结论复合壳多糖人工皮肤是一种操作简便的具有良好的组织相容性的生物活性敷料.