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血小板裂解液对人根尖牙乳头干细胞体外增殖的影响
目的:评价血小板裂解液(PL)对根尖乳头干细胞(SCAP)增殖的影响,为PL代替胎牛血清(FBS)提供依据.方法:用显微镜观察SCAP的生长特征,用流式细胞仪检测细胞的表面标志物,用茜素红染色检测细胞的成骨分化能力.将SCAP分为四组,分别在培养基中加入PL(2％、5％和l0％)和10％ FBS.培养第1、3、5、7d后用MTT检测各组SCAP的增殖情况.结果:流式细胞分析表明SCAP表达CD73、CD90和CD105呈阳性,CD14、CD34和CD45呈阴性.SCAP骨向分化呈阳性.2％ PL与10％ FBS组之间细胞增殖差异不具有统计学意义(P＜0.05),5％ PL组与10％ FBS组之间细胞增殖差异有统计学意义(P＜0.05).结论:在对SCAP的增殖方面,2％ PL与10％ FBS的作用相近.5％ PL强于10％ FBS.
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根尖乳头干细胞在含KH2PO4矿化诱导液中的增殖变化
目的 探讨根尖乳头干细胞在含/ 不含KH2PO4 矿化诱导液中的增殖变化.方法 从未发育完全的根尖孔分离乳头组织,消化提纯出根尖乳头干细胞,分别用含/ 不含KH2PO4 矿化诱导液处理,对照组为DMEM 培养液;通过流式细胞术检测细胞周期,分析对根尖乳头干细胞的增殖变化.结果 在含KH2PO4 矿化诱导液组根尖乳头干细胞的增殖指数高,与其他两组相比有统计学差异(P <0.05).结论 含KH2PO4 矿化诱导液能促进根尖乳头干细胞的增殖能力.
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富血小板血浆对根尖乳头干细胞生物性能的影响
目的 探讨富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对体外培养的根尖乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)生物学效应的影响.方法 将SCAP细胞分别在标准培养液、PRP培养液、矿化诱导液及PRP+矿化诱导液中培养.通过缩胆囊素八肽(cell counting kit-8,CCK-8)法、碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase activity,ALP)检测、Western Blotting检测SCAP增殖及分化能力的改变.结果 PRP组及PRP+矿化诱导液组SCAP的增殖能力强于其他组(P＜0.05).与其他组相比较,PRP+矿化诱导液组SCAP的ALP活性及牙本质涎蛋白(dentin sialophos protein,DSP)表达水平明显上调,矿化能力显著提高(P＜0.05).结论 PRP可明显促进SCAP细胞的增殖能力,与矿化诱导液联合应用对SCAP的矿化能力具有促进作用.
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根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞的生物学行为比较
背景：根尖乳头干细胞是一种新发现的间充质干细胞，其能否应用于牙根再生是目前研究的关键。目的：体外培养鼠根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞，研究比较两者生物学行为，为根尖乳头干细胞用于牙根再生的可能性提供实验依据。方法：取幼鼠根尖尚未发育完全的健康下颌牙，用酶消化法获得根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞，免疫荧光法鉴定干细胞表面标志物，MTT法测定细胞生长曲线，茜素红染色观察细胞矿化结节形成情况。结果与结论：①鼠根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞均呈STRO-1强阳性表达，根尖乳头干细胞呈CD90强阳性表达而CD146阳性表达稍弱，牙周膜干细胞呈CD146强阳性表达而CD90阳性表达稍弱。②根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞吸光度值随着时间的递增呈现出增高的状态，第8天起趋于平稳。自第4天起根尖乳头干细胞的增殖活力明显强于牙周膜干细胞，差异有显著性意义(P <0.05)。③与牙周膜干细胞相比，根尖乳头干细胞染色明显较深，可推测矿化结节形成数量较多。④结果表明与牙周膜干细胞相比，根尖乳头干细胞具有较强的增殖活性和矿化能力。
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根尖牙乳头间充质干细胞移植对胶原诱导性关节炎的影响
目的:探讨根尖牙乳头间充质干细胞(SCAP)移植对胶原诱导性关节炎(CIA)的影响.方法:用Ⅱ型胶原蛋白免疫20只DBA/1J品系小鼠诱导CIA,然后小鼠被随机平分为2组(SCAP治疗组及阳性对照组),于初次免疫后的第21天分别静脉注射人SCAP及PBS,另有6只正常DBA/1J小鼠作为阴性对照组.ELISA检测TNF-α及抗CⅡ抗体水平,通过关节炎指数评分组织病理学分析及显微CT分析来评估关节炎的严重程度.流式细胞分析比较各组脾脏CD4+Th细胞亚群的水平.结果:一次性静脉输入SCAP能明显降低实验性关节炎的严重程度,恢复Th亚群的平衡.结论:SCAP移植治疗能诱导调节性T细胞水平,从而获得免疫耐受,缓解CIA炎症.
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牙周膜干细胞与根尖乳头干细胞成骨及成牙本质能力比较的实验研究
目的 体外培养人根尖乳头干细胞(Stem cells from apical papilla,SCAP)与牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),比较两者成骨及成牙本质能力,为干细胞应用于牙根再生研究提供理论依据.方法 采用酶消化结合组织块化法获得SCAP及PDLSCs,通过流式细胞仪检测间充质干细胞表面标记物CD90、CD146的表达,采用CCK-8法测定SCAP及PDLSCs生长曲线;通过茜素红染色、实时定量PCR,检测SCAP及PDLSCs成骨能力;实时定量PCR检测SCAP及PDLSCs牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)的表达.结果 流式细胞仪检测结果显示两种细胞CD105、CD90及CD146表达阳性;CCK-8法结果显示SCAP增殖活力高于PDLSCs(P<0.05);茜素红染色结果显示,与PDLSCs相比,SCAP矿化结节增多;qRT-PCR结果显示,SCAP骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2,Runx2)较PDLSCs表达量升高(P<0.05);牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)同样较PDLSCs表达水平高(P<0.05).结论 根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞相比有较强的增殖、成骨及成牙本质能力.
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TNF-α影响鼠根尖乳头干细胞成骨/成牙本质能力的实验研究
目的 研究肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对鼠根尖乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)增殖及成骨/成牙本质能力的影响.方法 分离大鼠根尖乳头组织,采用酶消化法结合组织块法获得SCAP并通过免疫荧光法进行细胞鉴定;将细胞分为实验组(TNF-α浓度5、10、15、20、30、40、50 μg/L)和对照组(TNF-α浓度0 μg/L),CCK-8法检测细胞增殖能力;采用碱性磷酸酶活性、茜素红染色及实时定量PCR检测TNF-α对SCAP成骨/成牙本质能力的影响.结果 体外培养SCAP符合间充质干细胞来源的特征且具有多向分化能力;细胞增殖能力结果显示:各浓度组均能促进SCAP增殖(P<0.05);ALP活性结果显示:各浓度TNF-α均能明显降低ALP活性(P<0.05);茜素红染色结果显示:随着TNF-α的浓度的增加,染色逐渐变浅,红色结节逐渐变小,形成数量逐渐减少;qRT-PCR结果显示:3 d时,实验组OC、DMP-1表达量明显降低(P<0.05),牙本质涎磷蛋白(DSPP)表达量降低(P>0.05),骨涎蛋白(BSP)表达量稍有增加(P<0.05).7 d时,OC、DSPP表达量明显降低(P>0.05),DMP-1表达量明显降低(P<0.05),BSP表达量与对照组相比仍稍有增加(P>0.05);14 d时,BSP、OC、DMP-1表达量均明显降低(P<0.05),DSPP表达量稍有增加(P>0.05).结论 炎性因子TNF-α对SCAP的增殖有促进作用同时不同程度抑制SCAP成骨/成牙本质向分化能力.
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人牙根尖乳头细胞体外无支架三维培养的生物学行为研究
目的 探讨根尖乳头干细胞(stem cells from the apical papilla,SCAP)在无支架三维培养条件下的生物学行为.方法 用显微镜和HR染色观察SCAP球的大体形态,组织学结构;用免疫组化法检测SCAP球中骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)和血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的表达.结果 细胞球的大小对球体内部细胞的生长有影响,SCAP球具有向成骨和向内皮分化的潜能.结论 无支架三维培养是一种可行的SCAP培养方法.
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TNF-α对根尖乳头干细胞体外增殖及成牙成骨向分化能力的影响
目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对根尖乳头干细胞(SCAP)外增殖及成牙成骨向分化能力的影响.方法:采用酶消化法结合组织块法获得根尖乳头干细胞,免疫荧光免疫组化法鉴定细胞来源,通过不同浓度的TNF-α进行干预后检测对SCAP增殖,矿化成牙成骨能力的影响.结果:MTT检测显示各浓度组TNF-α均能刺激SCAP的体外增殖,10、50 mg/L的TNF-α实验组可明显促进SCAP增殖(P＜0.05),差异具有统计学意义;茜素红染色显示与对照组(0 mg/L TNF-α)相比,实验组(5、10、50 mg/L TNF-α)染色明显变浅,矿化结节形成的较小,对照组形成红色结节范围大且呈深橘色;免疫组化染色显示SCAP胞浆中DSP、BSP均有表达,实验组部分细胞胞浆染色且染色较浅,呈褐色为阳性表达,对照组(0 mg/L TNF-α)细胞胞浆完全着色呈深褐色,为强阳性表达.结论:不同浓度TNF-α对SCAP的生长增殖均有促进作用,TNF-α在不同程度上对SCAP矿化及成牙成骨向分化有抑制作用.
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根尖乳头干细胞向牙髓牙本质复合体分化能力的实验研究
目的:应用组织工程方法,探讨根尖乳头干细胞(SCAP)分别在炎性环境(肿瘤坏死因子-α)及正常环境下向牙髓牙本质复合分化的可能性.方法:分离大鼠根尖乳头组织,采用酶消化法结合组织块法获得SCAP,鉴定细胞来源,进行MTT生长曲线的测定,分正常组、炎症组(10 ng/mL TNF-α)及空白对照组行体外成骨能力茜素红及免疫组化实验,并将3个组分别移植到大鼠背部皮下观察8/12周后新生组织的形成情况.结果:MTT结果显示10 ng/mLTNF-α组显著高于正常SCAP组,差异有统计学意义(P＜0.5);茜素红染色显示均有矿化结节生成,与炎性组(10 ng/mL TNF-α)相比,正常组SCAP染色显著,矿化结节形成的范围大且呈深橘色;免疫组化染色显示SCAP胞浆中DSP/BSP均有表达;正常、炎症组移植物可见牙髓牙本质样结构形成,且DSP/BSP均阳性表达,空白对照组未见矿化组织形成.结论:SCAP具有高增殖及成骨向分化能力,可进行牙髓牙本质复合体的再生,炎性因子TNF-α对SCAP的生长增殖有促进作用同时不同程度上对SCAP矿化及成牙成骨向分化有抑制作用.
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富血小板血浆对根尖乳头干细胞增殖及矿化的影响
目的:探讨不同浓度富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)对根尖乳头干细胞(Stem cell from the apical papilla,SCAP)增殖及矿化的影响.方法:两步离心法制备PRP,通过ELISA的方法测定PRP中血小板源性生长因子(PDGF-AB)和转化生长因子(TGF-β1)的浓度;CCK-8法、ALP活性检测法观察5％、10％、15％、20％PRP与对照组在1d、2d、3d、4d、5d、6d时对根尖乳头干细胞增殖及矿化作用的影响.结果:PRP中血小板浓度大于全血中血小板浓度,为全血中的5倍以上.CCK-8法测定不同浓度组的PRP对根尖乳头细胞增殖均有促进作用,以10％PRP增殖作用显着,P ＜0.05.PRP组与对照组相比,3d时,ALP活性无显著性差异(P ＞0.05);6 d时,差异有显著性(P＜0.05).结论:PRP对根尖乳头干细胞的增殖及矿化均具有促进作用,以10％PRP增殖效应为显著.
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组织工程牙髓的研究进展
牙髓组织由于特殊的解剖结构,感染后难以自行愈合.目前,虽然根管治疗是一种治疗牙髓病变的有效手段,但仍存在诸多并发症.随着组织工程学的发展和牙源性干细胞的发现,已有学者试图进行牙髓组织再生的实验,并取得一定成果.本文就近年来组织工程牙髓的研究进展进行综述.
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瘦素对人根尖乳头干细胞成骨/成牙本质相关基因表达的影响
目的 探讨瘦素(leptin)对人根尖乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)增殖及成骨/成牙本质相关基因表达的影响,为临床年轻恒牙根尖持续发育的研究提供实验基础.方法 采用人根尖乳头组织块培养法获得hSCAPs,以免疫荧光染色法、Western blot和qRT-PCR分别检测hSCAPs中leptin及其受体OBRb蛋白及基因的表达.实验组用质量分数为0.1μg/mL的leptin(0.1μg/mL组)和1.5μg/mL的leptin(1.5μg/mL组)分别刺激hSCAPs,对照组仅加入α-MEM培养基,CCK-8、流式细胞仪法、qRT-PCR分别检测各组hSCAPs增殖情况及成骨/成牙本质相关基因:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA的表达.结果 hSCAPs表达leptin及其受体OBRb的蛋白及基因.与对照组相比,实验组细胞增殖能力及S期细胞比例均高于对照组(P<0.05),且其中1.5μg/mL组高于0.1μg/mL组(P<0.05).3 d和7 d时,0.1μg/mL组、1.5μg/mL组hSCAPs的ALP、DMP-1、DSPP mRNA的表达量高于对照组,且1.5μg/mL组高于0.1μg/mL组,差异有统计学意义(P<0.05),14 d时0.1μg/mL组、1.5μg/mL组hSCAPs的ALP、DMP-1、DSPP mRNA的表达量明显低于对照组(P<0.05);0.1μg/mL组、1.5μg/mL组OCN mRNA的表达量于7 d、14 d时高于对照组,且1.5μg/mL组均高于0.1μg/mL组,差异有统计学意义(P<0.05),于14 d达到峰值.结论 Leptin可促进hSCAPs增殖,并上调hSCAPs成骨/成牙本质相关基因的表达.
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不同浓度MTA对根尖乳头干细胞增殖及分化的影响
目的 探讨不同浓度无机三氧化矿物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)对根尖乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)增殖及分化能力的影响及促进其向成牙本质细胞分化的潜力.方法 向SCAP分别加入不同浓度MTA培养液,配制成浓度为0.01、0.02、0.1、0.2、1、2、10、20 mg/mL的MTA实验组;设不含MTA而含有15％胎牛血清的α-MEM培养液为对照组,CCK-8法测定1、3、5、7 d的细胞数,观察不同浓度MTA对SCAP增殖的影响,使用Real-time PCR检测分化相关基因牙本质涎蛋白(dentinsialoprotein,DSPP)、Runt相关转录因子(runt-related transcription factor 2,Runx2)表达的变化.结果 培养1 d时,各实验组的MTA实验组对SCAP的体外增殖的促进作用与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05);而在培养3、5及7 d时,0.01 mg/mL组的体外增殖作用比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),0.02、0.1、0.2、1 mg/mL组与对照组差异均无统计学意义(P>0.05),2、10、20 mg/mL组的体外增殖作用均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).Real-time PCR检测显示,经0.01 mg/mL MTA处理7 d的实验组细胞DSPP(t=-11.12,P<0.05)及Runx2(t=-10.62,P<0.05)表达水平高于对照组.结论 0.01 mg/mL浓度组对SCAP的增殖、成牙本质分化及成骨分化有显著促进作用,而高浓度MTA则抑制SCAP的增殖.
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抑制自噬对根尖乳头干细胞成骨分化水平的影响
目的 探讨抑制自噬对根尖乳头干细胞成骨分化水平的影响.方法 5、10 ng/mL肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别处理根尖乳头干细胞(SCAPs),对照组不做处理,检测自噬相关蛋白LC3-II表达水平,GFP-LC3质粒转染并检测细胞内GFP-LC3数目,吖啶橙染色检测酸性囊泡情况.TNF-α,TNF-α+3-MA分别处理SCAPs,检测LC3-II的表达水平,GFP-LC3质粒转染并检测GFP-LC3数目,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡.TNF-α、TNF-α+3-MA分别处理SCAPs,对照组不做处理,诱导成骨向分化,qRT-PCR检测分化第3、7、14天时成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)的表达.结果 TNF-α可诱导SCAPs自噬活化:TNF-α组LC3-II/β-actin水平较对照组升高且具有浓度依赖性(P<0.05),TNF-α组GFP-LC3数目较对照组升高且具有浓度依赖性(P<0.05),TNF-α组酸性囊泡较对照组增多.3-MA可抑制TNF-α诱导的SCAPs自噬活化:TNF-α+3-MA组LC3-II/β-actin水平及细胞内GFP-LC3数目较TNF-α组显著降低(P<0.05),并下调细胞活力(P<0.05),上调细胞凋亡水平(P<0.05).抑制自噬导致SCAPs成骨分化的抑制:TNF-α+3-MA组ALP、BSP表达量在分化第3、7、14天均较TNF-α组降低(P<0.05),OCN的表达量在第3、7天较TNF-α组降低(P<0.05).结论 TNF-α可诱导SCAPs自噬水平的活化;自噬可能对TNF-α作用下的SCAPs起细胞保护作用,对抗细胞凋亡;自噬的抑制将下调TNF-α作用下SCAPs的成骨向分化水平,提示自噬在TNF-α作用下SCAPs的成骨分化过程中具有重要作用.
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TNF-α对鼠根尖乳头干细胞增殖及多向分化能力的影响
目的 研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对鼠根尖乳头干细胞(SCAP)增殖及多向分化能力的影响.方法 采用酶消化法结合组织块法获得SCAP,将细胞分为实验组(TNF-α浓度为5、10、20、50 ng/mL)和对照组(TNF-α浓度为0 ng/mL),使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测SCAP的增殖能力;采用茜素红染色及实时定量PCR(qRT-PCR)检测TNF-α对SCAP成骨/成牙本质能力的影响;油红O染色检测TNF-α对SCAP成脂能力的影响;qRT-PCR检测TNF-α对SCAP血管相关基因表达的影响.结果 体外培养SCAP符合间充质干细胞来源的特征且具有多向分化能力.MTT结果显示:与对照组相比,各浓度组均能促进SCAP增殖(P<0.05),其中10 ng/mL TNF-α的促进作用为明显.茜素红染色结果显示:实验组随着TNF-α浓度的增加,矿化结节逐渐变小,形成数量也逐渐变少.qRT-PCR结果显示:3、7 d时,与对照组相比,实验组骨钙蛋白(OC)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)表达量降低,3 d时两组OC、DMP-1比较差异有统计学意义(P<0.05);7 d时DMP-1比较差异有统计学意义(P<0.05);14 d时,实验组OC、DMP-1表达量明显降低(P<0.05).油红O染色结果显示:与对照组相比,实验组随着TNF-α浓度的增加,脂滴形成数量逐渐减少.qRT-PCR结果显示:3、7天时,与对照组相比,血管生成素1、血管内皮生长因子A、血小板内皮细胞黏附分子-1表达量明显降低(P<0.05).结论 炎性因子TNF-α对SCAP的增殖有明显促进作用但同时不同程度抑制SCAP多向分化能力.
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两种人牙源性iPSCs的重编程效应及生物学特性比较
目的 比较两种人牙源性iPSCs的重编程效应及其生物学特性.方法 原代培养人牙髓干细胞(DPSCs)和根尖乳头干细胞(SCAP),仙台病毒重编程系统将两种细胞诱导为诱导性多潜能干细胞(iPSCs),比较两种iPSCs的形态、重编程效率及时间,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SeV及外源性转录基因的表达.结果 人DPSCs、SCAP均重编程为iPSCs,具有典型ES样克隆形态,重编程效率分别为(0.68 ± 0.02)%、(0.7 ± 0.01)%,差异无统计学意义(P> 0.05);重编程时间分别为(26.0 ± 2.1)、(27.0 ± 1.4)d,差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR结果显示,两种iPSCs无外源性病毒或转录基因序列的表达.结论 人DPSCs和SCAP可重编程为无病毒、无转录基因iPSCs,是iPSCs的理想来源.
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两种重编程系统诱导人牙源性多潜能干细胞的对比研究
目的：对比研究两种人牙源性多潜能干细胞重编程体系的特点。方法分别利用 STEMCCA 慢病毒／饲养层和仙台病毒／基质胶两种重编程系统，将人根尖乳头干细胞重编程为 iPS 细胞，比较两种方法的诱导效率、诱导工作量、iPS 细胞非整倍体核型比例、外源性基因消除难易程度等情况。结果 STEMCCA 重编程体系需要制备饲养层细胞 MEF，重编程效率约为0．1％，后期经 Cre-Loxp 酶切技术可得到无外源性转录基因的 iPS 细胞。仙台病毒重编程体系为无饲养层培养，基质胶制备方便、标准统一，重编程效率约为0．7％，明显高于 STEMCCA 系统（P ＜0．05），外源性病毒和转录基因经自然传代后逐渐消除。结论与 STEMCCA 系统相比，仙台病毒／基质胶体系更适于人牙源性 iPS 细胞的诱导。
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人牙源性多能干细胞重编程前后微小RNAs差异表达谱系分析
目的 对比研究两种人牙源性多能干细胞重编程前后微小RNAs(miRNAs)差异表达,交集分析、筛选特异性miRNAs.方法 利用仙台病毒将人牙髓干细胞(DPSCs)和根尖乳头干细胞(SCAP)重编程为诱导性多潜能干细胞(iPSCs),提取总RNA,miRNAs标记、杂交,扫描芯片、读取图像,筛选差异表达miRNAs,交集分析.结果 人DPSCs和SCAP均可重编程为iPSCs.miRNAs芯片分析结果显示人DPSCs重编程后有68个差异表达miRNAs(倍数>10),其中37个表达上调,31个表达下调;人SCAP重编程后有107个差异表达miRNAs(倍数>10),其中68个表达上调,39个表达下调.二者取交集,均上调的有miR-302e,下调的有miR-29b-3p、miR-181b-5p、miR-4328、miR-22-5p、miR-145-5p、miR-4324、let-7b-5p、miR-181a-5p、miR-27b-3p(倍数>10).结论 人DPSCs和SCAP重编程为iPSCs过程中有多种miRNAs参与,多数与细胞周期、上皮-间充质转化、转化生长因子β信号通路等相关.
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牙源性干细胞的研究进展
牙源性干细胞（dental stem cells）具有优越的干细胞特性，可以从医疗废弃物（如正畸需要拔除的牙、智齿等）中获得，日益成为组织工程和再生医学研究的干细胞来源，这些干细胞的开发研究将为组织工程和再生医学的研究拓展更为广阔的空间，具有重要的转化研究价值。本文将对几种常见的牙源性干细胞的研究背景、研究现状等进行综述，并对未来应用前景进行展望。
