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忍冬水提物对卵清蛋白致敏小鼠的疗效
目的 研究忍冬水提物对卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏小鼠的疗效.方法 建立OVA致敏小鼠模型,将OVA致敏BALB/c小鼠随机分为5组,即忍冬水提物高浓度组(H组)、中浓度组(M组)、低浓度组(L组)、模型对照组(CH组)及阴性对照组(NS组)；采用小鼠足垫肿胀试验检测迟发型超敏反应；甲苯胺蓝及HE染色观察小鼠肠系膜、空肠肥大细胞及空肠绒毛上皮细胞形态；ELISA法检测小鼠血清OVA特异性IgE及IgG1、小肠黏液总IgA及OVA特异性IgA水平.结果 OVA致敏小鼠出现急性腹泻；致敏小鼠经足垫皮内激发,出现迟发型超敏反应；致敏小鼠肠系膜及空肠肥大细胞聚集、胞质颗粒外泄及空肠绒毛炎症细胞浸润；小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显升高(P均＜0.01).经H、M组忍冬水提物灌胃后致敏小鼠的一般状态、腹泻情况及空肠炎症明显缓解；OVA介导的足垫肿胀反应明显减弱；小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显降低(P均＜0.01).结论 一定浓度忍冬水提物可有效缓解OVA致敏小鼠的速发型与迟发型超敏反应,其中高浓度金银花忍冬水提物效果较好.提示忍冬科植物中某些成分具有抗过敏作用.
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卵清蛋白国家定量参考品的建立
目的 建立卵清蛋白国家定量参考品.方法 用德国试剂盒测定不同厂家、不同级别卵清蛋白的含量,筛选与试剂盒标准卵清蛋白含量符合率高的样品作为参考品原料,并对参考品保护剂进行验证.将参考品贮存母液系列稀释后,经3个实验室协作标定,确定其标爪量.结果 选取Sigma GⅡ作为参考品原料;参考品保护剂对卵清蛋白测定结果无影响,并可显著提高参考品的稳定性;经协作标定,确定浓度为15、10、5和2.5 ng/ml系列参考品的标示量分别为(17.96±1.00)、(12.25±1.51)、(6.79±1.14)和(3.11±0.31)ng/ml.结论 已建立了含量准确,重复性和线性较好的卵清蛋白国家定量参考品.
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MenA PS-EA偶联物的制备及其在多糖抗体检测中的应用
目的 制备MenA PS-EA偶联物及以MenA PS-EA为包被抗原的A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体的ELISA检测试剂.方法 培养A群脑膜炎奈瑟菌,提取多糖(MenA PS),与卵清蛋白(EA)以还原氨基法偶联,Sepharose CL-4B纯化.制备以MenA PS-EA为包被抗原的A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体的ELISA检测试剂,考察试剂的精密性和稳定性,并与血清杀菌力试验(SBA)比较.结果 纯化的MenA PS-EA经高效液相色谱检测,纯度为81.50%;以MenA PS-EA为包被抗原的ELISA检测试剂精密性和稳定性良好;将该试剂与SBA法比较,其敏感性为96.91%.特异性为90.00%,一致性为95.83%.两种检测方法之间差异无显著意义.结论 以纯化MenA PS-EA作为包被抗原建立的A群脑膜炎奈瑟茵多糖特异性IgG抗体ELISA检测试剂可用于检测多糖IgG抗体,为进一步研究及开发细菌多糖类抗体诊断试剂提供参考.
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流感病毒裂解疫苗中鸡胚来源物质残留量分析
接种流感疫苗是预防流感发生和控制其流行的一种有效的手段,保护效率约为60％～90％,每年全球可使约3亿人免受流感病毒的侵袭,在降低高危人群的发病率、减少并发症和死亡率等方面起重要作用[1].目前普遍使用的季节性流感疫苗主要是针对H1N1、H3N2以及B型流感病毒的三价裂解疫苗,该类疫苗大多采用鸡胚生产,根据其生产工艺特点,各厂家生产的流感疫苗或多或少都残留有鸡胚来源的杂蛋白[2].
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过敏反应对动脉粥样硬化斑块面积和肥大细胞数量影响的研究
目的 探究全身过敏反应对ApoE-/-C57BL/6小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块以及肥大细胞数量的影响.方法 15只ApoE-/-C57BL/6小鼠髙脂饮食喂养后随机分成三组:对照组、10μg卵清蛋白(ovalbumin,OVA)免疫组和50μg OVA免疫组.激发过敏反应2 h后处死小鼠,取血取材.异种被动皮肤过敏(passive cutaneous anaphylaxis,PCA)实验检测免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)相对含量,小鼠主动脉HE染色观察AS斑块大小;甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞数量.结果 OVA激发使小鼠发生过敏反应,体温明显下降,且50μg剂量组体温下降程度明显大于10μg剂量组;OVA激发过敏反应组的PCA试验为阳性结果,且50μg剂量组蓝斑直径大于10ug剂量组,差异有统计学意义[(8.10±0.60)比(4.20±0.20),t=6.17,P<0.05];10μg剂量组的小鼠斑块大小基本无变化,50μg剂量组的斑块大于对照组,差异有统计学意义[(0.53±0.04)比(0.30±0.02),t=4.95,P<0.05];对照组和10μg剂量组肥大细胞的数量差别不大(P>0.05);50μg剂量组相对对照组可观察到较多数的肥大细胞,差异有统计学差异[(21.20±2.33)比(3.75±1.44),t=5.96,P<0.05].结论 不同浓度的OVA作用ApoE-/-C57BL/6小鼠时可使其产生不同程度的过敏反应,出现较重过敏症状的ApoE-/-C57BL/6小鼠动脉粥样硬化血管有较多的肥大细胞聚集.
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抗IL-6抗体治疗小鼠变应性鼻炎的作用的研究
目的:探讨IL-6抗体治疗小鼠变应性鼻炎的作用.方法:实验动物分三组:PBS组(正常对照组)、抗IL-6抗体组(以抗IL-6单克隆抗体处理)、IgG抗体对照组(以IgG对照抗体处理).应用卵清蛋白(OVA)致敏建立小鼠变应性鼻炎模型,给予抗IL-6单克隆抗体干预,计量抗原激发后小鼠搔鼻数量.应用HE染色方法检测对小鼠鼻黏膜炎症影响,应用ELISA法检测小鼠灌洗液中IL-4、IFN-γ含量.结果:治疗后抗IL-6抗体组小鼠搔鼻症状相对于抗体对照组明显减轻(P＜0.01).与PBS组比较,IgG抗体对照组小鼠鼻腔灌洗液中总炎性细胞数,淋巴细胞数及嗜酸性粒细胞数明显升高(P＜0.05);IL-6抗体治疗后,小鼠鼻腔灌洗液中总炎性细胞数,淋巴细胞数及嗜酸性粒细胞数明显降低(P＜0.05);IgG抗体对照组小鼠鼻腔灌洗液IL-4含量明显升高(P＜0.01),而IFN-γ含量不变(P＞0.05);IL-6抗体治疗后,IL-4含量较IgG抗体对照组降低(P＜0.05),IFN-γ含量不变(P＞0.05).结论:IL-6抗体可有效治疗小鼠变应性鼻炎.
关键词： 变应性鼻炎 小鼠 卵清蛋白 抗IL-6单克隆抗体 -
人促红细胞生成素基因和GFP共表达的输卵管特异性表达载体的构建
本实验从蛋鸡输卵管基因组DNA中扩增出约1.3kb的卵清蛋白5′端调控区(OV),并从质粒扩增出人促红细胞生成素(hEPO)基因组DNA.将hEPO亚克隆入pEGFP-C1载体的多克隆位点,命名为pEGFP-hEPO,然后将OV片段亚克隆入经AseⅠ和Vsp Ⅰ双酶切的切口处,替换掉CMV启动子,经测序和酶切鉴定正确,成功构建了鸡卵清蛋白5′端调控区调控人促红细胞生成素的共表达载体pOV-GFP-hEPO.并利用脂质体转染法转染鸡输卵管上皮细胞,用荧光倒置显微镜观测绿色荧光蛋白的表达,结果显示共表达载体pOV-GFP-hEPO能够在鸡输卵管上皮细胞定位表达.为制备生产人促红细胞生成素的鸡输卵管生物反应器奠定了基础.
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翘芩清肺剂对卵清蛋白致大鼠哮喘的防治作用
目的 观察翘芩清肺剂对卵清蛋白致大鼠哮喘的防治作用.方法 50只大鼠随机分为空白组(5 mL/kg生理盐水)、模型组(5 mL/kg生理盐水)、地塞米松组(0.27 mg/kg)及翘芩清肺剂高、低剂量组(26、6.5 g/kg),每组10只.4周后采血,HE染色观察肺组织病理改变,免疫组织化学法、Western blot法检测肺组织p-p38MAPK、气道组织TLR4蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测肺组织HMGB1、气道组织TLR4 mRNA表达,ELISA法检测血浆HMGB1含有量.结果 与模型组比较,翘芩清肺剂组p-p38MAPK蛋白表达、TLR4蛋白和mRNA表达、HMGB1含有量均显著降低(P＜0.05,P＜0.01),但HMGB1 mRNA表达无明显变化(P＞0.05),而且炎性细胞浸润明显减少,管壁及平滑肌厚度明显降低.结论 翘芩清肺剂对卵清蛋白致大鼠哮喘具有一定防治作用,其机制可能与调节HMGB1-TLR4-p38MAPK通路信号传导、减轻炎症通路激活程度有关.
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山柰酚对卵清蛋白诱导豚鼠过敏性鼻炎的保护作用
目的 研究山柰酚对卵清蛋白诱导的豚鼠过敏性鼻炎的保护作用.方法 将50只雄性豚鼠随机分为5组,即正常组、卵清蛋白模型组、山柰酚(5 mg/kg)组、山柰酚(20 mg/kg)组、氯雷他定(2 mg/kg)组.除正常组和卵清蛋白模型组外,其余各组在造模成功后连续7d给药.通过记录豚鼠抓鼻和打喷嚏次数,评价过敏性鼻炎的症状;ELISA试剂盒检测豚鼠血清中组胺、免疫球蛋白IgE、肿瘤坏死因子TNF-α和白细胞介素IL-4的水平;HE染色观察豚鼠鼻黏膜病理形态的改变;Western blot检测鼻黏膜组织中TNF-α和IL-4的表达量.结果 山柰酚能明显改善豚鼠过敏性鼻炎的症状(P＜0.05),降低血清中组胺、IgE、TNF-α和IL-4的水平(P＜0.05),降低鼻黏膜组织中TNF-α和IL-4的表达水平(P＜0.05).在光镜下观察,山柰酚会明显减少嗜酸性粒细胞的浸润.结论 山柰酚对卵清蛋白诱导的豚鼠过敏性鼻炎具有良好的保护作用.
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牡荆素人工抗原的合成与免疫原性的鉴定
目的 合成牡荆素的人工抗原,并对其免疫原性进行了鉴定.方法 利用高碘酸钠氧化法偶联牡荆素制备牡荆素-牛血清白蛋白的免疫抗原和牡荆素-卵清蛋白的包被原;用紫外分光光度法和薄层色谱法鉴定小分子与载体蛋白偶联反应,并用间接ELISA测定免疫抗原免疫小鼠抗体效价,间接竞争ELISA (ic-ELISA)检测抗体特异性.结果 紫外扫描和薄层色谱结果表明牡荆素与牛血清白蛋白/卵清蛋白偶联成功,小鼠经牡荆素-牛血清白蛋白免疫后,体内产生了抗牡荆素抗体,效价在1:16000以上,线性检测范围为0.028 8～18 μg/mL.结论 合成的牡荆素人工抗原和专属酶联免疫分析法可用于后续的单克隆抗体的制备.
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食管酸灌注对内脏高敏感模型大鼠中枢神经系统Fos表达的影响
目的观察在内脏高敏感状态下食管酸灌注对中枢神经系统(CNS)各部位Fos蛋白表达的影响,以初步明确CNS参与内脏高敏感性应答和调控的具体部位及中枢传导通路的变化.方法健康SD大鼠36只,随机分为5组.A组:正常对照组6只;B组:0.9%氯化钠溶液对照组7只;C组:食管酸灌注组8只;D组:卵清蛋白(OVA)致敏组7只;E组:OVA+食管酸灌注组8只.采用腹腔注射鸡OVA基础致敏联合食管酸灌注的方法建立食管内脏高敏感性大鼠模型;采用免疫组化方法和显微图像分析等技术研究在生理条件、内脏高敏状态下食管酸灌注后CNS各部位的Fos蛋白激活模式的差异.结果鸡OVA致敏联合食管酸灌注组被激活了一个复杂而广泛大脑网络,其在额顶皮质、岛叶、扣带皮质、中央杏仁核、Kol-liker Fuse核、疑核、臂旁核、下丘脑室旁核、丘脑室旁核、三叉旁核、孤束核、后区、延髓网状核等核团Fos样免疫活性(FLI)神经元的数目均显著高于其余各组(P＜0.05),但在迷走神经背核、下丘脑视上核、中脑导水管周围灰质、腹外侧眶皮层的FLI神经元数量,与食管酸灌注组比较则无明显改变(P＞0.05).且该组大鼠的中央杏仁核、臂旁核、室旁核、三叉旁核、孤束核的FLI阳性产物的平均吸光度(A)值亦较其余各组明显增高(P＜0.05).结论腹腔注射鸡OVA基础致敏对食管酸灌注诱导的CNS内Fos蛋白表达有活化作用,提示内脏高敏感状态可导致CNS不同核团神经元功能发生不同程度的障碍,CNS整合、处理食管感觉传入信息功能异常.
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金银花水提物对卵清蛋白过敏小鼠肠道菌群的影响
食物过敏(food hypersensitivity,FA)是儿童尤其婴儿临床常见的过敏性疾病.有假说认为过敏性疾病发病率的增加可能与生命早期肠道菌群的暴露减少有关[1].近年来研究发现食物过敏儿肠道的双歧杆菌、乳杆菌比例减少,而以需氧菌为主,尤其是大肠杆菌、链球菌占多数,梭菌计数增加[2].不少临床研究也显示双歧杆菌、乳杆菌有一定预防和治疗食物过敏作用[3,4].现代微生态学研究表明含有多糖类的中药多可以作为双歧因子增加体内双歧杆菌[5],调节肠道菌群.金银花水溶剂提取物含有葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖等多糖类物质[6],本研究通过观察金银花处理的对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)过敏小鼠肠道菌群的变化,从而了解金银花在体内对肠道菌群尤其双歧杆菌、乳杆菌的作用.
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双歧杆菌对卵清蛋白致敏大鼠肠道黏膜屏障的保护作用
目的 研究双歧杆菌对卵清蛋白(OVA)致敏大鼠肠道黏膜屏障的保护作用.方法 3周龄Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠36只随机分为3组,每组12只,分别为正常对照组、阳性对照组和双歧杆菌组.双歧杆菌组取双歧杆菌活菌制剂按1.5 mg/g用无菌生理盐水溶解后灌胃,正常埘照组和阳性对照组均给予生理盐水灌胃,连续3周.双歧杆菌组和阳性对照组采用卵清蛋白腹腔注射法建立食物致敏模型,于灌胃3周后开始,分别于第1大和第15天予含10μg OVA及1 mg Al(OH)3的无菌生理盐水0.5 ml腹腔注射进行基础致敏和强化致敏.在强化致敏后第5、9、13、15天以含OVA 500μg的无菌生理盐水0.5 ml灌胃对大鼠进行激发.正常对照组按以上时间使用无菌生理盐水假敛敏及假强化.留取24 h尿液检测乳果糖与甘露醇比值(L/M)以了解肠道通透性;空肠标本行HE及甲苯胺蓝染色,在光镜下观察并计算完整肥大细胞的百分率,透射电镜观察肠黏膜超微结构变化.结果 双歧杆菌组24 h尿L/M(0.068±0.008)低于阳性对照组(0.131±0.012,P<0.05),但高于正常对照组(0.027±0.004,P<0.05).HE染色和甲苯胺兰染色可见双歧杆菌组大鼠小肠绒毛上皮细胞局灶性坏死、脱落,固有层淋巴细胞及浆细胞等炎症细胞浸润、小肠肥大细胞聚集和脱颗粒现象较阳性对照组缓解.结论 双歧杆菌对卵清蛋白敛敏大鼠肠道黏膜屏障有一定的预防性保护作用.
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卵清蛋白诱导的过敏小鼠模型中多不饱和脂肪酸代谢变化
目的 观察卵清蛋白(OVA)诱导的过敏小鼠模型中多不饱和脂肪酸(PUFA)代谢的变化.方法 以缺乏n-3 PUFA饲料饲养雌鼠的仔鼠(21日龄)24只,随机分为空白组、OVA组和PBS组,各8只.实验第1 d,空白组心脏采血处死.实验第1 和15 d,OVA组腹腔注射含50 μg OVA和1.3 mg氢氧化铝凝胶的PBS 0.2 mL,PBS组腹腔注射等量PBS.实验第29~39 d,OVA组以含50 mg OVA的PBS 0.3 mL隔日灌胃,共6次;PBS组予等量PBS灌胃.实验第39 d末次灌胃后,OVA组和PBS组均心脏采血处死,取空肠组织和脾组织. OVA过敏小鼠模型成功建立的判断标准:观察灌胃后小鼠腹泻情况,对空肠组织切片进行形态学观察(HE染色)和肥大细胞计数(甲苯胺蓝染色),血清sIgE水平检测(ELISA 法),脾组织中IL-4和IFN-γ检测(ELISA法).提取各组小鼠血清中的脂肪酸,采用液相色谱法检测α-亚麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、花生四烯酸(AA)和亚油酸(LA)水平.结果 ①成功建立OVA诱导过敏小鼠模型:与PBS组比较,OVA组在灌胃后发生急性腹泻;小肠绒毛有大量炎症细胞浸润,潘氏细胞脱颗粒,固有层中肥大细胞聚集脱颗粒,肥大细胞数目增加(P<0.05);血清OVA-sIgE 水平、脾细胞培养上清中IL-4和IL-4/IFN-γ升高(P<0.05).②PBS组血清DHA、EPA和LA水平较空白组降低,AA水平升高,差异均有统计学意义,OVA组较PBS组血清DHA水平降低.结论 OVA过敏小鼠出现以DHA降低为主的脂肪酸代谢紊乱.
关键词： n-6多不饱和脂肪酸 卵清蛋白 食物过敏 -
细菌外膜囊泡包覆的载药纳米粒的制备及其小鼠鼻腔免疫效果评价
目的·制备细菌外膜囊泡(outer membrane vesicle,OMV)包覆的载卵清蛋白(ovalbumin,OVA)聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly (lactic-co-glycolic acid) copolymer,PLGA]纳米载体并用于小鼠鼻腔免疫效果评价.方法·采用超滤离心法制备OMV,采用乳化溶剂挥发法制备包载OVA的PLGA纳米粒(nanoparticle,NP),采用机械挤出法制备OMV包覆的PLGA载药NP,并对其进行表征.载OVA的OMV-PLGA NP经BALB/c小鼠鼻腔给药,用ELISA法检测鼻腔灌洗液、空肠黏膜和粪便中特异性sIgA抗体水平.结果·OMV包覆的PLGA载药NP粒径为(234.4±22.9) nm,透射电子显微镜观察其具有核壳结构.给药14d后,载OVA的OMV-PLGANP给药组在鼻腔灌洗液、空肠黏膜及粪便中sIgA抗体水平高;与OMV+OVA给药组相比,载OVA的OMV-PLGA NP给药组在鼻腔灌洗液、空肠黏膜及粪便中的OVA特异性sIgA抗体水平分别提高了1.6、2.1和1.7倍,OMV特异性sIgA抗体水平均提高了1.5倍.结论·该纳米给药系统能同时使OMV和OVA被摄取与呈递,产生较强的小鼠黏膜免疫诱导反应.
关键词： 细菌外膜囊泡 卵清蛋白 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 免疫 纳米给药系统 -
卵清蛋白经皮致敏诱发BALB/c小鼠特应性皮炎样病变的探讨
目的:研究卵清蛋白经皮肤致敏诱发BALB/c小鼠局部皮损的特点及细胞因子表达水平.方法:卵清蛋白经皮肤致敏BALB/c小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清总IgE水平,观察小鼠致敏局部组织病理改变,半定量反转录(RT)-PCR法检测BALB/c小鼠致敏局部皮肤中白介素(IL)-4、IL-5,干扰素(IFN)-γ mRNA表达水平.结果:卵清蛋白组小鼠血清总IgE水平显著升高,局部出现红斑、鳞屑等皮损.组织病理学检查示表皮增生,真皮炎性细胞浸润;皮损局部IL-4、IL-5 mRNA表达显著上调.结论:卵清蛋白经皮致敏BALB/c小鼠能诱导伴IgE升高的炎症性皮损,细胞因子表达呈Th2优势型,病变类似于特应性皮炎.
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芦荟多糖对卵清蛋白致敏小鼠的脱敏效果
目的:研究芦荟多糖对卵清蛋白(OVA)致敏小鼠的脱敏效果.方法:50只BABL/c小鼠随机分为5组,分别为正常组(A),模型组(B),小、中、高剂量组(C,D,E)组.采用OVA加Al(OH)3注射法复制小鼠OVA致敏模型,期间C,D,E组灌服不同剂量的芦荟多糖干预.24 d后检测小鼠受OVA激发后的反应、肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及嗜酸性粒细胞(EOS)数量、肺组织丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量、血清特异性IgE,BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4,IFN-γ含量.结果:芦荟多糖能够减轻致敏小鼠受OVA激发所引起的症状,能够下调BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4水平,提升IFN-γ,降低肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及EOS数量,使肺组织中与炎症相关的MDA及NO浓度降低,下调血清中特异性IgE.结论:芦荟多糖能够纠正致敏小鼠体内的免疫失衡,对致敏小鼠有一定的治疗作用.
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苍耳亭对卵清蛋白诱导大鼠过敏性鼻炎的影响
目的 研究苍耳亭对卵清蛋白诱导大鼠过敏性鼻炎的影响.方法 采用卵清蛋白诱导大鼠过敏性鼻炎模型,将48只大鼠分成6组:正常组,模型组,苍耳亭高、中、低剂量组,富马酸酮替芬组.给药1周后,记录大鼠打喷嚏和挠鼻数,检测血清中免疫球蛋白E(IgE)和白细胞介素-4(IL-4)的水平,剥取鼻中隔黏膜进行H-E染色及电镜观察.结果 苍耳亭可明显减少过敏性鼻炎模型大鼠的打喷嚏和挠鼻数,降低血清中IgE和IL-4的水平,改善鼻黏膜的病理状况.结论 苍耳亭对卵清蛋白诱导的过敏性鼻炎模型大鼠有积极的治疗作用.
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卵清蛋白致敏大鼠支气管哮喘模型的制备
目的 建立卵清蛋白特异性致敏诱导的大鼠支气管哮喘模型.方法 20只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为空白组和模型组,每组10只.第1天致敏:空白组给予生理盐水1ml腹腔注射致敏,而模型组给予1mL造模液(含V级卵清蛋白100 mg,氢氧化铝100 mg和灭活百日咳杆菌6×109个)腹腔注射致敏;第15天开始激发:将两组大鼠分别置于相同大小的雾化箱内,空白组给予生理盐水6 ml雾化激发,模型组给予5%的 V级卵清蛋白溶液6 ml雾化激发,每天激发一次,每次激发30 min,连续激发10天后处死大鼠,并采集相应标本.结果 空白组大鼠激发后没有特殊异常表现,而模型组大鼠每次激发后出现烦躁不安、呼吸加深、加快,点头呼吸,咳嗽,闻及哮鸣音,呈哮喘样、口周发绀、反应迟钝等表现;空白组大鼠肺泡灌洗液和血液中嗜酸性粒细胞数量正常,而模型组大鼠出现相应增加;病理切片显示空白组肺组织和气道壁嗜酸性粒细胞浸润较少,而模型组嗜酸性粒细胞浸润相应地增多.结论 卵清蛋白特异性致敏能成功构建大鼠支气管哮喘模型.
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变应性鼻炎对小鼠鼻黏膜核因子-кB p65和糖皮质激素受体表达的影响
目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠鼻黏膜核因子-кB(nuclear factor kappa B,NF-кB)p65和糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的表达,进一步了解NF-кB p65和GR在AR发病机制中的作用.方法清洁级C57BL6/J小鼠20只,随机分为AR组和对照组,每组10只.AR组用10%卵清蛋白(ovalbumin,OVA)200μl腹腔注射,6%OVA鼻腔局部激发建立AR模型.取鼻面骨,石蜡包埋,连续切片,行HE染色.分别运用免疫组化SABC法和SP法染色,观察鼻黏膜中NF-кB p65和GR的表达情况.结果 AR组中10只动物均建模成功,鼻部AR典型症状明显;对照组无明显变化.①形态学改变:对照组鼻黏膜无明显炎症改变;AR组黏膜则显示不同程度水肿,黏膜下嗜酸粒细胞(eosinophils,Eos)、淋巴细胞和单核细胞浸润.②黏膜NF-кB p65表达:NF-кB p65主要表达于上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆,偶见胞核.AR组中上皮细胞染色平均光密度值(0.40+0.12)强于对照组(0.23±0.05;P<0.05).③GR表达:2组中均有GR表达,主要表达于鼻黏膜上皮、腺上皮及血管内皮细胞的胞核或胞质.AR组中GR的平均光密度值(0.20±0.04)低于对照组(0.36±0.11;P<0.05).结论 NF-кBp65在AR黏膜中表达增强,而GR的表达下降,提示两者的失衡在AR的发病中发挥重要作用.
