氟比洛芬对映异构体手性拆分研究进展

手性药物氟比洛芬(flurbiprofen)是一种非甾体类抗炎药,其化学结构见图1.目前市场上销售及临床应用的是其消旋体,其两种光学异构体具有截然不同的药理活性[1-4],其中S型能更有效地抑制环氧化酶,是消炎镇痛的主要成分,R型虽无抗炎作用,但近期研究证明,R型能抑制Aβ-42的表达,并且在体内不会转化为(S)-氟比洛芬,目前已进入治疗前列腺癌和阿尔兹海默病的Ⅲ期临床研究.此外,外消旋氟比洛芬的胃肠不良反应因R对映体的存在而增加.

从甲基苯丙胺的对映体特征推断前体化学品

目的 通过分析甲基苯丙胺毒品的对映体特征,为前体化学品的管理、毒品案件的侦查提供技术支持.方法 选择北京、天津、石家庄、成都4个城市公安局缴获的114份甲基苯丙胺零包毒品进行对映异构体分析,用(s)-(+)-a-甲氧基-a-(三氟甲基)苯基乙酰氯(MTPAC1)衍生化,衍生物采用选择离子扫描形式进行GC-MS分析.结果 114个样品中纯S(+)-构型有103个(90.4%),纯R(-)-构型有4个(3.5%).结论 目前中国缴获的甲基苯丙胺主要以1R,2S(-)-麻黄素、1S,2S(+).伪麻黄素为前体化学品进行合成,同时也出现了以1R,2R(-)伪麻黄素和1S,2R(+)-麻黄素为前体化学品进行合成的甲基苯丙胺毒品.

阿替洛尔对映体的制备、活性以及手性分析方法简述

综述了近年来手性药物阿替洛尔制备合成的方法及其药理活性、临床应用方面的研究进展,介绍了阿替洛尔手性分离的主要方法.

MTX对映体耐药A549细胞株中EGFR基因mRNA的表达分析

目的 探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在氨甲喋呤(methotrexate,MTX)对映体L-(+)-MTX和D-(-)-MTX耐药A549细胞株中的表达.方法 采用RT-PCR方法测定肺癌A549敏感细胞株和15 μmol/L、35 μmol/L、55 μmol/L的L-(+)-MTX和D-(-)-MTX A549耐药细胞株中EGFR mRNA表达情况.结果 15 μmol/L、35 μmol/L、55 μmol/L L-(+)-MTX A549耐药细胞株中EGFR基因表达的mRNA相对含量分别为肺癌A549敏感细胞株的(1.55±0.26)倍、(1.86±0.13)倍、(1.20±0.05)倍.RT-PCR结果显示,A549敏感细胞株和L-(+)-MTX各浓度A549耐药株均扩增出315 bp条带,有EGFR基因表达,而3种浓度的D-(-)-MTX耐药细胞株中EGFR基因不表达.结论 MTX诱导耐药后A549细胞株中EGFR mRNA发生变化,且在3种浓度两种对映体细胞株间具有明显的手性差异,MTX可能通过改变EGFR基因启动子的甲基化状态,影响EGFR的表达.

高效液相色谱法直接拆分甲磺酸帕珠沙星对映体

目的 建立一种高效液相色谱拆分甲磺酸帕珠沙星对映体的方法.方法 使用Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以L-苯丙氨酸/硫酸铜溶液(取L-苯丙氨酸1.32g,加水适量溶解,硫酸铜1.0g,加水适量溶解,将两者混合并稀释至1000ml,用1mol/L NaOH溶液调pH至3.5)一甲醇(75:25)为流动相,流速1.0ml·min-1,柱温40℃,检测波长320nm.结果 甲磺酸帕珠沙星右旋体和左旋体色谱峰的保留时间分别为7.579min和9.998min,分离度为3.42.结论 本法拆分了甲磺酸帕珠沙星对映体,可用于测定左旋甲磺酸帕珠沙星中右旋体的含量.

莫达非尼R-和S-对映体的LC-MS/MS 定量检测以及在Caco-2单层细胞模型上的转运特性

目的 建立准确、灵敏、可靠的LC-MS/MS法,定量测定莫达非尼对映体,考察其在Caco-2细胞单层模型上的转运.方法 选用资生堂 C8 (50 mm×2.1 mm,3 μm)色谱柱及API4000液相色谱-质谱联用仪,用于定量分析的离子反应分别为m/z 274.4→165.1(莫达非尼)和m/z 391.2→265.1(CS55).结果 在本实验条件下,建立范围为1～1000 ng/ml的定量方法,批内、批间精密度<15%(n=5).结论 建立一种快速、准确、灵敏度高、专属性好,可用于莫达非尼对映体在Caco-2单层细胞模型转运研究的方法.

美国FDA批准奥美拉唑对映体依索拉唑上市

反式曲马朵和反式氧去甲基曲马朵在大鼠胆汁中排泄的立体选择性

目的研究反式曲马朵(trans T)及反式氧去甲基曲马朵(M1)在大鼠胆汁中排泄的立体选择性. 方法高效毛细管电泳法测定大鼠iv trans T或 M1后胆汁和血浆中trans T, M1和与葡糖醛酸结合M1(M1c)的对映体.结果大鼠iv trans T后,胆汁中(+)-trans T水平较(-)-trans T高,(+)/(-)-trans T较血浆中(+)/(-)-trans T的比值小.大鼠iv M1后,胆汁中(+)-M1水平较(-)-M1高,(+)-M1c较(-)-M1c低,(+)-M1与葡糖醛酸的结合率较(-)-M1低.结论 Trans T和M1在大鼠胆汁中排泄具立体选择性,(+)-trans T和(-)-M1被优先排泄.

手性和非手性联用色谱法研究尼卡地平对映异构体兔体内过程的差异性

目的研究尼卡地平(NCD)对映体在家兔体内药代动力学和组织分布的差异性。方法生物样品在碱性条件下，正己烷-醋酸乙酯(1∶1)提取，用手性和非手性联用色谱法进行分离分析。结果尼卡地平及其对映体分别在反相色谱系统及手性色谱系统中分离良好，浓度为55-550 ng*mL-1线性关系良好。对映体的平均日内、日间RSD分别为5.25%和8.97%，回收率分别为99.99%和97.10%；对映体间主要动力学参数Tmax，Cmax和AUC，S-NCD为(2.49±0.03) h，(134±2) ng*mL-1和(1082±32) ng*mL-1*h，R-NCD为(1.24±0.05) h，(109±2) ng*mL-1和(778±22) ng*mL-1*h；在主要脏器和细胞中S-NCD的浓度明显高于R-NCD。药代动力学和靶组织分布均有一定差异性。结论尼卡地平对映体兔体内过程包括代谢动力学和靶细胞浓度分布存在着立体差异性。

反式曲马多及氧去甲基曲马多对映体跨血脑屏障转运

目的研究反式曲马多(trans T)及其活性代谢物氧去甲基曲马多(M1)对映体的跨血脑屏障转运.方法大鼠ip盐酸trans T (16.7 mg*kg-1或50 mg*kg-1) 1 h后取血、脑脊液和大脑皮层,高效毛细管电泳测定血清、脑脊液和大脑皮层中trans T和M1 对映体的浓度.结果 Trans T和M1各对映体浓度以大脑皮层中高,血清中浓度居中,脑脊液中浓度低. 在血清中,(+)-trans T的浓度明显高于(-)-trans T的浓度,M1两对映体的浓度无明显区别;在脑脊液和大脑皮层中,(+)-trans T的浓度明显高于(-)-trans T的浓度,(+)-M1的浓度明显低于(-)-M1的浓度.结论 Trans T和M1的跨血脑屏障转运具有立体选择性,脑组织中分别以(+)-对映体和(-)- 对映体浓度较高.

HPLC万古霉素手性柱和手性流动相添加剂法分离酮洛芬对映体

目的以万古霉素为手性选择子,建立酮洛芬对映体以手性柱法和流动相添加剂法进行手性分析的方法.方法考察万古霉素用量、有机改性剂用量及缓冲液pH值对酮洛芬对映体手性拆分的影响,并进行了定量分析的方法验证.结果两种拆分方法都使酮洛芬对映体达到了基线分离,都适合于酮洛芬对映体的定性和定量分析.结论所建立的两种方法均可用于S-(+)-酮洛芬的光学纯度检测.

维拉帕米对映体在人体的药代动力学

目的: 考察维拉帕米(VPM)和去甲维拉帕米(NVPM)对映体的药代动力学特性. 方法: 8名汉族男性健康志愿者分别po外消旋VPM 80 mg和静滴5 mg,以三甲基-β-环糊精为手性选择剂,毛细管电泳法同时测定VPM和NVPM对映体的血浆浓度,用二房室开放模型拟合药-时曲线.结果: po VPM的R/S(AUC),R/S(CL)和R/S(Cmax)比率分别为3.66±1.86,0.3±0.053和4.82±0.58;NVPM的R/S(Cmax)和R/S(AUC)比率为2.58和2.36.iv VPM的R/S(AUC),R/S(CL)和R/S(Cmax)比率分别为1.04±0.29,1.01±0.3和1.36±0.12.R-(+)-VPM和S-(-)-VPM的绝对生物利用度为30.3±19和9.8±5.9.结论: VPM有较大的对映体特异性首过代谢,选择优对映体S-(-)-VPM为监测对象有利于临床合理使用外消旋VPM.

β阻滞剂及其对映体拮抗TNFα诱发的心肌细胞信号转导异常

目的:观察β阻滞剂及其对映异构体对TNFα诱发的心肌细胞信号转导异常的拮抗作用.方法:用体外培养的乳鼠心肌细胞进行β受体密度、G蛋白、AC活性及PKA活性测定.结果:TNFα下调β受体密度;下调Gs蛋白,上调Gi蛋白,降低Gs/Gi比值;细胞内cAMP水平升高;激活PKA,总PKA水平升高.此作用能被β阻滞剂的R(+)型对映体而不是S(-)型对映体所拮抗.结论:β阻滞剂的R(+)型对映体有较好的拮抗TNFα介导的细胞毒作用,可能有利于对心衰的治疗.

高效毛细管电泳法拆分氧氟沙星对映体的研究

用牛血清白蛋白为手性选择剂,异丙醇为修饰剂,应用毛细管电泳法拆分氧氟沙星对映体,实验时柱温为30℃,电泳电压15 kV,采用50 mg*ml-1牛血清白蛋白-5%异丙醇-磷酸盐缓冲液(pH 6.0)为电泳电解液,检测波长为293 nm,得到了良好拆分结果.左、右旋成分迁移时间及峰面积的RSD分别为1.6%,1.8%和1.1%,2.8%.应用于氧氟沙星产品研究,其左、右旋成分峰面积比值为0.995～0.998,RSD为1.8%～2.0%.并研究了pH值、牛血清白蛋白浓度、异丙醇浓度、柱温、电泳电压对对映体迁移时间及分辨率的影响,方法简便快速.

蛋白质及纤维素衍生物手性固定相分离盐酸西替利嗪对映体

目的研究盐酸西替利嗪对映体在蛋白质及纤维素衍生物固定相上的保留行为,优化分离条件.方法聚α-葡糖苷酯、α1-酸性糖蛋白及卵粘蛋白为固定相时,流动相分别为正己烷-异丙醇-乙醇-三氟乙酸(430∶45∶25∶1)、乙腈-10 mmol*L-1磷酸盐缓冲液(NaOH调至pH 7.0)(4∶96)及乙腈-20 mmol*L-1磷酸二氢钾(三乙胺调至pH 7.0)(12.7∶87.3).蛋白柱柱温25 ℃,检测波长均为230 nm.结果本法准确、灵敏、专属性好.结论两类固定相均可较好地分离盐酸西替利嗪对映体.

黄皮酰胺对映体在大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学

目的研究黄皮酰胺(clausenamide,Clau)对映体在大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学并比较其立体选择性差异.方法应用反相HPLC法测定Clau对映体在体外代谢系统中的产物,并用Eadie-Hofstee作图法分析数据、求算酶促反应动力学参数Km和Vmax以及肝代谢速率Vmax/Km.结果在体外代谢系统中,左旋黄皮酰胺主要生成7-羟-Clau、5-羟-Clau和4-羟-Clau,其优势代谢途径为7位羟化;7位羟化代谢的Vmax/Km值高于5位和4位.右旋黄皮酰胺的4位羟化反应Km小、Vmax大, 因此代谢速率高,是左旋体4位羟化的8倍;而其7-羟-Clau和5-羟-Clau 的产生量很小.结论黄皮酰胺对映体在大鼠肝微粒体中的羟化代谢存在明显的底物立体选择性差异.

反式曲马朵在大鼠小肠中吸收的立体选择性

目的研究反式曲马朵(trans T)在大鼠小肠中吸收的立体选择性.方法高效毛细管电泳法测定小肠分段灌流液中trans T对映体的浓度.结果 Trans T对映体在小肠不同部位的吸收分数基本一致;在低浓度时(+)-trans T的吸收分数明显低于(-)-trans T;在高浓度时trans T对映体的吸收分数降低,(+)-trans T与(-)-trans T的吸收分数无明显差别.结论 Trans T在大鼠小肠的不同部位均能被吸收,具立体选择性,以(-)-trans T占优.

高效毛细管电泳法同时测定维拉帕米和去甲维拉帕米对映体的血浆浓度

用高效毛细管电泳中常用的毛细管区带电泳模式,以三甲基-β-环糊精(TM-β-CD)为手性选择剂,同时测定维拉帕米和去甲维拉帕米对映体的血浆浓度.手性测定条件:手性拆分缓冲液为含60 mmol*L-1 TM-β-CD(pH 2.5),浓度60 mmol*L-1的磷酸盐缓冲液;毛细管柱为30 cm×75 μm(ID)的聚丙烯酰胺涂渍柱;选择电迁移方式进样,电压12 kV,时间7 s;运行电压14 kV; 紫外检测波长200 nm; 设柱温为20℃; 12 min内完成检测. 各对映体检测的线性范围为2.50 ng*ml-1～300.0 ng*ml-1,准确度和精密度达到生物样品分析的要求.用本法测定健康志愿者口服和静滴VPM后各对映体的血浆浓度,结果良好.

布洛芬精氨酸注射及口服给药在大鼠体内的立体选择性药代动力学

利用手性高效液相色谱法研究大鼠注射及口服布洛芬精氨酸之后布洛芬对映体的药代动力学.布洛芬精氨酸注射及口服给药后,布洛芬对映体的药代动力学呈现立体选择性,且口服给药后立体选择性程度更高.与系统前转化相比,R-布洛芬至S-布洛芬的系统转化在口服给药后立体选择性药代动力学中起更重要的作用.布洛芬精氨酸口服给药后,优势对映体S-布洛芬迅速吸收,S-布洛芬与R-布洛芬的绝对生物利用度分别为100％和80％.基于研究发现的S-布洛芬体内系统性暴露,可以推断布洛芬精氨酸注射及口服给药后的药理作用相似,仅在作用的起始阶段存在差异.

多沙唑嗪对映体在大鼠血浆中的测定及手性转化研究

建立大鼠血浆中多沙唑嗪对映体的高效液相色谱荧光测定方法,并研究多沙唑嗪对映体在体内外的手性转化情况.采用卵黏蛋白手性色谱柱,柱温30℃;荧光检测激发波长和发射波长分别为255和385 nm;乙腈-磷酸盐缓冲液(15∶85,v/v)为流动相,流速0.8 mL·min-1；内标为哌唑嗪.体外研究:将分别加入左旋多沙唑嗪、右旋多沙唑嗪的大鼠血浆于37℃水浴温育2天、5天、10天后测定；体内研究:SD大鼠连续口服左旋多沙唑嗪、右旋多沙唑嗪溶液1个月,于后一次给药8h后腹主动脉取血测定.结果表明,多沙唑嗪两种对映体检测浓度在4～2 000 ng·mL-1内线性关系良好,左旋多沙唑嗪平均回收率为99.5％,RSD为3.6％；右旋多沙唑嗪平均回收率为99.3％,RSD为4.3％.多沙唑嗪对映体与大鼠血浆的体外共同温育实验中,未观察到转化现象;大鼠连续口服左旋或右旋多沙唑嗪1个月,在血浆中也未观察到手性转化现象.该分析方法选择性强、准确度高、重现性好,适于多沙唑嗪对映体在大鼠血浆中的测定研究.体内外研究表明多沙唑嗪对映体不易发生相互转化.