Chiralcel OJ-H手性色谱柱-HPLC法同时分离4种H1受体拮抗药的对映体

目的:建立拆分盐酸西替利嗪、盐酸异丙嗪、特非那定和马来酸非尼拉敏4种H1受体拮抗药对映体的方法.方法:采用高效液相色谱法(HPLC),选择Chiralcel OJ-H手性色谱柱,检测波长为230 nm,柱温为室温,流速为1.0 mL/min,进样量为20μL;以保留时间、选择因子和分离度为指标,考察流动相中酸碱添加剂(二乙胺)、有机改性剂的种类(乙醇、异丙醇)及其占比、甲醇等对4种药物对映体分离的影响.结果:流动相考察结果为盐酸西替利嗪和盐酸异丙嗪的流动相为正己烷-乙醇(90:10,V/V);特非那定的流动相为正己烷-甲醇-乙醇-二乙胺(89:9.9:1:0.1,V/V/V/V);马来酸非尼拉敏对映体的流动相为正己烷-甲醇-乙醇-二乙胺(98:2:0.5:0.1,V/V/V/V).在此条件下,4种药物的对映体均达到完全分离,分离度分别为4.36、3.76、1.55、1.71.结论:建立的Chi-ralcel OJ-H手性色谱柱-HPLC法对这4种H1受体拮抗药的选择性良好,可用于其对映体的手性分离.

高效液相色谱法测定右旋酮洛芬氨丁三醇及其对映体的含量

目的 建立右旋酮洛芬氨丁三醇及其对映体的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法测定,以KR100-5CHI-TBB手性柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为正已烷-叔丁基甲醚-冰醋酸,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm.结果 两对映体分离良好,分离度＞2.5;方法重现性好,RSD为0.5%.结论 所建立的方法快速简便、准确可靠,可用于右旋酮洛芬氨丁三醇及其对映体的含量测定.

毛细管电色谱在分离手性化合物中的应用

毛细管电色谱(CEC)将高效毛细管电泳(HPCE)和高效液相色谱(HPLC)两者的优势有机结合起来,是一种新型的微分离技术.在此系统介绍了CEC在分离分析手性对映体上的主要分析方式,并对影响手性分离的主要因素作了介绍.

酮洛芬对映体的分离、分析方法的研究及其应用

目的:考察酮洛芬(Ketoprofen,KT)对映体在多糖衍生物手性固定相的色谱行为,建立酮洛芬对映体的分离分析方法,并用于血浆样品中酮洛芬对映异构体的测定.方法:色谱柱ChiralpakAD(250mm×4.6mm,10μm,Daicel Chemicals),流动相组成为正己烷:异丙醇:TFA(80:20:0.02),检测波长254 nm,流速1.0ml/min,柱温为25℃.结果:酮洛芬对映体在10min内实现分离,分离度大于2.0,对映体R和S分别在血药浓度0.1～10 μg/ml范围内线性关系良好R-(-)(r=0.9998),S-(+)(r=0.9996),单一对映体的低检测限为2 ng(S/N=3).结论:建立了用ChiralpakAD柱分离分析酮洛芬对映异构体的方法,可用于单一对映异构体的光学纯度检测及药理学研究.

普萘洛尔对映体在离体大鼠灌流肝脏中的药动学研究

临床上应用的普萘洛尔系外消旋体.动物试验表明,S(-)-普萘洛尔对β-受体的阻断作用比R(+)-普萘洛尔大100倍.有资料显示:普萘洛尔主要在肝脏代谢.健康志愿者口服dl-普萘洛尔(80mg)后,其S-普萘洛尔与R-普萘洛尔的AUC比值为1.38倍,但t1/2β(基本相近.蒙古犬给予40mg的普萘洛尔,S-普萘洛尔与R-普萘洛尔的AUC比值仅为0.48,前者的血浆半衰期较前者明显缩短.由于整体研究时,血液成分和神经体液因素对药物代谢和分析的影响较大,故难以反映肝脏对药物的代谢动力学过程.本文采用Miller肝灌流方法研究大鼠肝脏对普萘洛尔对映体的代谢动力学.方法:12只大鼠随机分为2组,用乌拉坦麻醉大鼠,10min内完成肝脏游离手术,并将之置于特定肝循环灌流装置中.

YM0402对映体的血浆蛋白结合率研究

目的 明确YM0402对映体与血浆蛋白结合是否存在立体选择性差异,揭示其主要结合的蛋白种类.方法 采用平衡透析法,将YM0402对映体与人血浆蛋白、人血清白蛋白(HSA)、α1-酸性糖蛋白(AGP)分别进行共孵育;分别取200 μL含药血浆、HAS、AGP加入样品室中,取350 μL缓冲液加入缓冲液室中,于37℃孵育4h后,采用手性高效液质联用法检测两侧样品的含量.色谱柱为大赛璐Chiralpak IA-3(150 mm ×2.1 mm,3μm),流动相为甲醇,流速0.25 mL· min-,柱温25℃,质谱采用正离子模式,多反应监测,离子通道分别为m/z 393→249 (YM0402)、m/z 427→235(内标).结果 0.2～ 15 μmol·L-YM0402对映体与人血浆蛋白的结合率均高于99％;在低浓度(0.2、1μmol·L-1)时,A-YM0402的结合率略高于B-YM0402.两对映体与HAS的结合常数分别为3.5×107、1.5 ×107 M-1,与AGP的结合常数分别为5.7 ×105、4.6 ×105 M-1.结论 YM0402对映体与人血浆蛋白具有高结合率,微弱的立体选择性来源于与HSA和AGP的共同作用.

手性药物的色谱分离进展

综述了近年来手性药物色谱分离的研究进展.对手性衍生化试剂法、手性流动相添加剂法和手性固定相法的分离机理、检测方法、试剂种类和应用等作了介绍.

RP-HPLC手性流动相添加剂法拆分甲磺酸帕珠沙星对映体的研究

目的建立新药甲磺酸帕珠沙星( PZLX)对映体手性流动相 HPLC拆分方法.方法通过探讨流动相 pH值、有机改性剂、手性配合剂、反相固定相对手性拆分的影响,确定甲醇-苯丙氨酸溶液( L-苯丙氨酸 1.32g与硫酸铜 1g,加水 1000ml,氢氧化钠试液调节 pH值为 3.5) (30∶70) 为手性流动相,在 ODS柱上拆分 PZLX对映体, 332nm波长检测.结果两对映体良好分离,分离度 1.9以上, S、 R异构体回归方程分别为: Y=1.38× 105X- 130.9 ( r=0.9998)和 Y=1.26× 105X- 60.6 ( r=0.9998),低检出限分别为 1.2 和 1.5ng, RSD为 0.2%以下.结论所建立的方法简便易行,克服了该类方法灵敏度及重现性不如手性固定相法( CSP)的不足,可用于新药 PZLX光学纯度的质量控制及其生物体内代谢立体选择性的研究.

去甲基左氧氟沙星对映体的手性分离

目的 建立去甲基左氧氟沙星手性分离的高效液相色谱方法.方法 色谱柱采用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂,流动相为L-异亮氨酸硫酸铜溶液-甲醇(85:15),流速为1.0mL/min;检测波长330nm,柱温:40℃.结果 在此条件下,去甲基左氧氟沙星及其对映体能够达到基线分离,分离度为2.7.结论 简单快速,重现性好,能够用于去甲基左氧氟沙星对映体的分离和纯度考察.

用于手性药物合成的催化剂--手性二苯基氨基醇

临床上使用的许多药物具有手性,有一对对映异构体,这对对映异构体除旋光方向相反外,其它物理性质如熔点、沸点、溶解度等都相同;在一定条件下,一对对映体的化学性质也几乎完全相同.故一对对映体的拆分相当困难[1].

心脏机械瓣膜置换术后早期抗凝治疗中华法林对映体浓度的监测及临床意义

目的 初步探讨心脏机械瓣膜置换术后早期抗凝治疗中华法林对映体浓度的动态变化及其临床意义.方法 选择23例心脏机械瓣膜置换手术患者,分别于给药前、给药后24 h、48 h、72 h、120 h、144 h同步测定血浆华法林总浓度(W总)、华法林S-对映体浓度(WS)、华法林R-对映体浓度(WR)、国际标准化值(INR)、凝血因子Ⅶ、Ⅱ(FⅦ、FⅡ)的动态变化,同时观察临床上出血、栓塞及死亡等事件. 结果 23例患者均无抗凝并发症发生.首次口服华法林后24 h其WS、WR即有明显增高,并于首剂量华法林后120～144 h基本达到稳态.在抗凝治疗144 h内,WS与FⅦ、FⅡ呈负相关性(P＜0.01);WS与FⅦ、FⅡ的相关性大于W总和WR(P＜0.01).服药后120 h内WS和W总均与INR值无相关(P＞0.05),服药后120 h后与INR值正相关(P＜0.01).结论 心脏机械瓣膜置换术后早期抗凝治疗中监测WS可较准确地反映华法林抗凝的强度.

正相HPLC-MS/MS测定人血浆中多奈哌齐对映体浓度

目的 建立正相高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中多奈哌齐(DN)对映体的方法,并进行方法学验证.方法 采用正己烷∶异丙醇(98∶2,V/V)作为萃取剂进行样品浓集,选用CHIRALCEL OJ-H手性柱(250 mm×4.6 mm,5μm)作分析柱,流动相为正己烷∶正丙醇∶二乙胺=60∶40∶0.1(V∶V∶V),流速为0.5 mL/min,柱温为38℃.以多反应监测(MRM)方式进行定量检测,利多卡因为内标,按内标法定量.结果 左旋DN(S-DN)、右旋DN(R-DN)对映体的保留时间分别为15.56和18.41 min.S-DN的线性范围为0.051～7.596 ng/mL,R-DN的线性范围为0.049～7.404 ng/mL,线性良好(r＞0.99).S-DN和R-DN的方法回收率分别为95.10％～103.70％、93.58％～98.00％；预处理回收率分别为58.42％～61.08％、53.24％～61.87％；日内精密度(RSD)分别为8.35％～11.28％、6.78％～11.58％；日间RSD分别为5.82 ％～9.02％、6.87％～9.19％.结论 建立的正相HPLC-MS/MS测定人血浆多奈哌齐对映体血药浓度具有快速、简便、灵敏、准确等优点,适用于多奈哌齐对映体的人体药动学研究.

手性药物消旋体拆分的研究进展

目前获取手性药物单一对映体的方法,主要以金属催化的不对称合成为主;利用天然的手性源(如糖类、萜类、氨基酸、羟基酸、生物碱等)以及有机合成中产生非天然手性源(如醇、胺、环氧化合物等)直接合成也是一个方面.但目前大多数不对称合成还存在成本太高,或收率太低,或光学纯度不够等诸多的问题.因此,对外消旋体进行拆分仍然不失为另一条重要途径.特别是在新药开发的初期阶段,为判断如何进一步开发,需要将消旋体和左、右二个单一对映体分别进行药效学、药动学和毒理学比较时,拆分法就显得尤为必要.事实上,目前大约65.0%的非天然手性纯药物是通过外消旋药物或中间体拆分制造的[1].本文就目前消旋体拆分中常用手性试剂、手性引入方法及拆分方法等作一综述.

手性固定相HPLC法拆分苏氨酸和赖氨酸对映体

目的 建立了柱前衍生结合手性固定相HPLC法拆分了苏氨酸和赖氨酸2种氨基酸对映体.方法 利用4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并噁二唑(NBD-Cl)柱前衍生,采用Sumichiral OA-2500S色谱柱,以甲醇-乙腈(60∶40,含5 mmol L-1柠檬酸)为流动相,检测波长为470 nm.结果 应用该法检查L- 氨基酸原料药中的D- 型异构体,D- 苏氨酸和D- 赖氨酸在2.0～16.0 μg mL-1质量浓度范围内线性关系良好,回收率均为101.0%,RSD分别为1.7%和0.37%.结论 在佳色谱条件下,2种氨基酸对映体均达到了基线分离.建立的对映体杂质检查方法灵敏度高,重复性好.

外翻肠囊法研究奥硝唑对映体在大鼠不同肠段的吸收特性

目的：考察奥硝唑在大鼠各肠段的吸收特性及奥硝唑两手性对映体在大鼠不同肠段吸收的差异性。方法采用大鼠外翻肠囊法，以HPLC手性色谱柱法测定奥硝唑在不同肠段的吸收量以及S‐奥硝唑及R‐奥硝唑的同一肠段肠吸收量，并分别计算吸收速率常数（Ka ）和表观渗透系数（Papp ），同法考察了P‐蛋白抑制剂（维拉帕米和环孢素A）对奥硝唑肠吸收特性的影响。结果奥硝唑在不同肠段吸收均呈线性，符合零级药物吸收速率，吸收趋势为空肠＞回肠＞结肠。在空肠段两对映体以近于1∶1的比例同时吸收，吸收速率不存在显著差异，随着供试液中奥硝唑质量浓度的上升，Ka呈线性增加（R2＞0．99），Paap基本保持不变，P‐蛋白抑制剂对奥硝唑的肠吸收没有显著性影响（P＞0．05）。结论奥硝唑在不同肠段的吸收有差异，空肠部位是吸收的佳部位（P＜0．05），S‐奥硝唑与R‐奥硝唑在肠道中吸收速率不存在显著差异，吸收以被动扩散机制为主，奥硝唑不是 P‐糖蛋白的底物。

羟丙基β环糊精毛细管电泳法测定1,2-二苯基乙二醇的对映体过量值

目的:建立毛细管电泳法(CE)测定(E)-1,2-二苯乙烯不对称二羟化反应产物1,2-二苯基乙二醇对映体过量(e.e.%)值的新方法.方法:以HP-β-CD为手性选择剂,采用毛细管区带电泳法研究背景电解质浓度、pH值、环糊精浓度、分离电压、温度等参数对1,2-二苯基乙二醇对映体分离的影响,同时对该合成样品进行光学纯度检查,并与HPLC测定结果作比较.结果:在200 mmol/L硼酸缓冲液(pH=9.8),15 mmol/L HP-β-CD,15 kV分离电压、柱温20℃的基本优化条件下,1,2-二苯基乙二醇对映体得到基线分离,Rs达到3.35.同时,该合成样品分析结果表明,4批样品的e.e.%测定值与HPLC法结果相一致.结论:该CE方法简单、准确,可用于该1,2-二苯基乙二醇的手性拆分和e.e.%值的测定.

中性环糊精毛细管电泳法手性拆分氧氟沙星对映体的对比

目的:比较在毛细管电泳中不同中性环糊精(CD)及其衍生物对氧氟沙星对映体的手性拆分能力,并提出可能的手性识别机制. 方法:分别以α-CD,β-CD,γ-CD,HP-β-CD和DM-β-CD为手性选择剂,采用毛细管电泳法研究CD种类及其浓度、分离电压、温度对氧氟沙星对映体分离的影响. 结果:在50 mmol/L磷酸缓冲液(pH 3.0),15 kV分离电压、柱温25℃的基本优化条件下,分别以25 mmol/L DM-β-CD或50 mmol/L HP-β-CD+25 mmol/L γ-CD为手性选择剂,氧氟沙星对映体得到基线分离,分离度(Rs)分别达2.0和1.7. 结论:CD空腔大小和空腔边缘作用对于手性识别有重要选择性,该毛细管电泳法操作简单方便,手性分离效果良好,可用于氧氟沙星对映体药物的分离.

高效液相色谱手性固定相拆分酒石酸美托洛尔对映体条件的优化

马来酸左旋氨氯地平治疗原发性高血压56例临床观察

马来酸左旋氨氯地平片（玄宁），是一种光学纯的手性药物，它仅含氨氯地平2个对映体中的左旋氨氯地平。本研究以苯磺酸氨氯地平片（络活喜）为对照组，观察玄宁对轻、中度原发性高血压的治疗效果和不良反应，报告如下。
　　1资料与方法
　　1.1一般资料以2008年8月~2011年10月我院收治的56例患者为研究对象，治疗前1w所有患者均禁用降压药物。所有患者在安静环境下休息不能少于5min，而后测量患者坐位血压3次后计算平均值，均满足WHO/ISH规范中对血压的要求，患有继发性高血压患者不纳入研究。

手性药物不同对映体在临床中的应用

手性药物是存在着立体选择性差异的对映体,对映体和体内大分子的亲和力具有明显的差异,各个异构体在生物环境中表现出的药效学和药代动力学存在立体选择性差异.据统计在1 200种合成药物中,至少有40%为手性药物,其中90%以外消旋体形式给药.