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裂殖壶菌产DHA摇瓶培养优化
在摇瓶条件下,利用SAS9.0.2软件中的响应面法对裂殖壶菌发酵生产DHA的培养基进行了优化.首先设计Plackett-Burman实验对影响裂殖壶菌(Schizochytrium sp.FJU-512)生产DHA的相关因素进行分析,结果表明,葡萄糖、甘油对DHA产量的影响极显著,(NH4)2SO4对DHA产量影响显著.采用Box-Behnken实验设计和响应面分析方法对Schizochytrium sp.FJU-512发酵产DHA复合碳氮源培养基进行了优化.实验优化确定佳产DHA培养基配方为(g/L):葡萄糖63.94,甘油74.90,(NH4)2SO4 0.24,酵母浸粉10.00,蛋白胨10.00,海水晶15.00,KH2PO4 3.5,MgSO43,维生素B10.005,维生素B12 0.005.在此优化条件下,Schizochytrium sp.FJU-512发酵得到DHA产量可达15.23g/L,较优化前的6.18 g/L,提高了2.46倍,由此可见,Schizochytrium sp.FJU-512具有很好的工业化潜力.实验结果证明用响应面设计方法寻求菌体积累DHA的佳培养基组分是可行的.
关键词： DHA 裂殖壶菌 Plackett-Burman设计 响应面 -
响应面法优化大别山野葛根多糖提取工艺研究
利用响应面法确定大别山野葛根多糖的佳提取工艺.在单因素实验的基础上,进行3因素3水平的Box-Behnken中心组合实验设计,利用响应面分析优化工艺条件.在优化工艺条件处理温度80.0℃、液料比15.0 mL/g、处理时间1.5h时,葛根多糖得率为24.97％,与预测值26.15％的相对误差仅4.73％.响应面法适用于对葛根多糖提取得率进行回归分析和参数优化.
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响应面法优化考马斯亮蓝G-250溶液的配制
试验研究了各组分磷酸、乙醇、考马斯亮蓝G-250在考马斯亮蓝G-250溶液中的作用及其对测定蛋白质浓度灵敏度和准确度的影响,结合全波长扫描光谱法分析了溶液配制过程中的变色机理.在此基础上,以一系列牛血清白蛋白溶液标准浓度和测定值之间的差值平方和的均方(S值)为响应值,采用单因素试验和响应面分析法优化考马斯亮蓝G-250溶液的配制条件.结果表明,乙醇是用来降低水溶液的极性环境,促进考马斯亮蓝G-250的溶解；磷酸是为考马斯亮蓝G-250表面电荷发生变化的促进剂；两者构成了影响变色灵敏度的主要因素,考马斯亮蓝G-250分子在溶液中不同的存在形式使反应体系呈现出从蓝色→绿色→棕红色等颜色变化；响应面优化配制条件为:60 mg/L考马斯亮蓝G-250、50 mL/L 95％乙醇、130 mL/L 85％磷酸时,S值小值为2.07,即在此配制条件下的牛血清白蛋白测定值与标准值接近.同时以不同标准蛋白质为试样对所配制的溶液进行准确度和灵敏度试验,结果表明对牛血红蛋白、γ-球蛋白测定准确度和灵敏度较好,对胰蛋白酶、胃蛋白酶灵敏度较差,主要原因是由于蛋白质组成差异所引起的.
关键词： 考马斯亮蓝G-250 磷酸 乙醇 响应面 优化 -
响应面法优化白背三七多糖的提取工艺
以白背三七为原料,采用微波辅助法提取白背三七多糖.在单因素实验的基础上,采用响应面法优化白背三七多糖的提取工艺.实验结果表明,影响微波辅助提取白背三七多糖的主要因素依次为:液料比、微波时间、微波功率,其中料液比对提取率的影响达到了极其显著水平.白背三七多糖提取的佳工艺参数为:液料比45∶1 (mL/g)、微波功率390 W、微波时间22 min.在此条件下,白背三七多糖的提取率为15.36％,与模型预测值接近.因此,采用响应曲面法优化得到的工艺条件具有一定的实际应用价值.
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响应面分析方法优化怀牛膝药材超声提取工艺研究
目的 优化怀牛膝药材β-蜕皮甾酮的超声提取工艺.方法 以单因素研究为基础,以怀牛膝中β-蜕皮甾酮为响应值,以三因素三水平的响应面分析法优化怀牛膝中β-蜕皮甾酮的提取工艺.结果 怀牛膝β-蜕皮甾酮的优提取工艺条件为:正丁醇45％,液料比:15∶1,提取时间1.7 h.在该条件下,怀牛膝中提取量预测值为5.17 mg/g,实际验证值为5.29 mg/g,并得出各因素对怀牛膝β-蜕皮甾酮提取量的影响大小依次为:正丁醇体积分数(A)＞液料比(B)＞提取时间(C).结论 响应面分析法优化怀牛膝β-蜕皮甾酮的提取工艺稳定可行.
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Box-Behnken响应面法优化枇杷果多酚超声提取工艺研究
目的 对枇杷果中多酚的超声提取工艺进行优化.方法 将枇杷果中多酚的提取率作为指标,在单因素试验基础上采用Box-Behnken响应面法对超声提取枇杷果多酚的乙醇浓度、料液比、超声时间等条件进行对比研究,对优化工艺进行验证试验.结果 超声提取枇杷果多酚的优提取工艺为:乙醇浓度60％,料液比1∶ 25 (g/ml),超声时间90 min,提取温度80℃.验证试验中批杷果多酚的平均提取率为6.11 mg/g(RSD=1.41,n=4).结论 采用Box-Behnken响应面法优化超声提取枇杷果多酚所得的提取工艺合理、较为可行,能为枇杷果多酚进一步开发提供理论参考.
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姜黄素包合物胃内漂浮微球的研制
目的 制备姜黄素胃内漂浮微球.方法 为增加姜黄素的水溶性,先制备了姜黄素的羟丙基-β-环糊精包合物,通过正交试验确定了优处方.以乙基纤维素(粘度45)为载体材料,采用液中干燥法制备胃内漂浮微球,在单因素考察的基础上,采用Plackett-Burman筛选显著因素,结合响应面法优化微球制备工艺.对微球的外观形态、流动性、堆密度、粒径分布、漂浮率、包封率、载药量、体外累积释药百分率等进行考察.结果 佳工艺为:EC/HP-β-CD-CUR(质量比)为7.6∶1,温度44.3℃,转速801r/min,油相和药物所在有机相体积比2∶1,乳化剂用量为0.030 g/mL,EC的浓度为0.020g/mL.结论 姜黄素微球形态圆整,大小均匀,无粘连;平均粒径为680.3μm,平均包封率与载药量分别为64.6％和4.65％,在人工胃液中有良好的漂浮性;漂浮微球体外释药符合一级动力学方程,呈现明显的缓释性.
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复凝聚法制备川芎挥发油微胶囊的工艺研究
目的 研究复凝聚法制备川芎挥发油微胶囊的佳工艺.方法 采用明胶和阿拉伯胶作为壁材制备川芎挥发油微胶囊,以包埋率为评价指标,通过响应面试验设计优化工艺条件.结果 佳工艺条件:壁材浓度为4.6%、壁材/芯材为4.9:1、复凝聚时混合液pH 4.0.结论 经优化的复凝聚法制备川芎挥发油微胶囊工艺稳定,平均包埋率达88.58%.
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Box-Benhken响应面法优化超声提取天冬中皂苷的工艺
目的 优化天冬中皂苷的超声提取工艺,为质量检测提供基础.方法 以紫外可见分光光度法测定天冬中皂苷的含量,并比较菝葜皂苷元与薯蓣皂苷元对照品与天冬样品的大吸收波长,采用单因素实验法及Box-Benhken响应面法设计天冬皂苷的超声提取实验,并对Box-Benhken响应面模型进行方差分析.结果 薯蓣皂苷元的大吸收波长与天冬样品大吸收波长相近.响应面分析的佳提取条件为:乙醇浓度为48％,液料比为50 mL/g,超声时间为61 min.天冬皂苷的含量预测值为5.10％,验证试验的天冬皂苷含量的平均值为5.07％.结论 选择薯蓣皂苷元作为对照品,可以较好地反映天冬皂苷含量水平.响应面法建立的天冬皂苷含量模型具有良好的实际指导意义,可作为进一步研究天冬的实验基础.
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响应面优化酶法提取款冬花多糖工艺研究
目的 优化款冬花多糖酶法辅助提取工艺条件.方法 通过响应面法,评价指标为多糖提取率;考察提取时间、酶药质量比和温度等因素对款冬花多糖提取的影响.结果 提取多糖的优工艺为用20倍量的水,在55℃温度下,选择酶药质量比1.30％,提取123.2 min,pH =7,水料比为20L·g-1.在该工艺条件下,款冬花多糖的得率为3.25％.结论 酶法提取款冬花多糖具有提取温度低,提取率高的优点.
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响应面法优化三叶青总黄酮的提取工艺研究
目的：优选三叶青总黄酮的提取工艺。方法以液料比、乙醇浓度、提取时间、提取温度4个单因素为考察基础，利用响应面法优化并建立了三叶青总黄酮佳的回流提取工艺。结果液料比对总黄酮提取量的影响大，提取时间次之。佳工艺条件为：液料比14.25mL· g －1，乙醇浓度：50.7％，提取时间：1.975h，提取温度：89.4℃。结论采用响应面分析法优选三叶青总黄酮的提取工艺稳定、合理、可行。
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响应面法优化青钱柳粗多糖提取工艺
目的：优选青钱柳粗多糖的提取工艺。方法：以青钱柳粗多糖为评价指标，利用响应面分析法优化青钱柳粗多糖的佳提取工艺，并对佳提取工艺进行验证试验。结果：青钱柳粗多糖的佳提取工艺为加水倍数8.5倍、提取时间2.0 h、提取次数3次。结论：在此条件下，青钱柳粗多糖的提取率可达到4.5%，与理论预测值4.7%的相对误差为2.17%。采用响应面分析法对青钱柳粗多糖提取的条件进行优化合理可行。
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响应面法优化马鞭草总黄酮超声波提取工艺研究及其抗氧化活性考察
目的 优化马鞭草总黄酮的超声波提取工艺并考察其体外抗氧化活性.方法 在单因素试验的基础上,以超声时间、液料比、乙醇体积分数为影响因素,采用响应面法优化马鞭草总黄酮的超声波提取工艺,并通过测定马鞭草总黄酮清除DPPH自由基及H2O2的能力探究其体外抗氧化活性.结果 马鞭草总黄酮的佳提取工艺为:超声时间40 min,液料比50:1,乙醇体积分数60 ％,在此条件下马鞭草总黄酮含量的预测值为3.31 ％,实测值为3.26 ％,误差为1.51 ％.马鞭草总黄酮具有较强的清除DPPH自由基及H2O2的能力.结论 超声波法提取马鞭草总黄酮具有提取效率高、操作方便、适应性广的优点;运用响应面法得到的佳提取工艺误差小,方法准确,可行性强;马鞭草总黄酮具有显著的抗氧化能力.
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星点设计-响应面法优化WGA修饰柔红霉素-粉防己碱脂质体处方
目的 采用响应面法优选出制备麦胚凝集素(WGA)修饰柔红霉素(DNR)-粉防己碱(TET)脂质体的佳处方.方法 采用薄膜分散-硫酸铵梯度法制备WGA修饰DNR-TET脂质体,以磷脂/胆固醇(EPC/Chol,摩尔比),磷脂/聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(EPC/PEG 2000-DSPE,摩尔比),磷脂/柔红霉素(EPC/DNR,摩尔比)为自变量,以DNR和TET包封率的综合评分为因变量进行二次多项拟合.结果 脂质体的优处方为EPC/Chol =1.5,EPC/PEG 2000-DSPE=20,EPC/DNR =15,脂质体中DNR和TET包封率的综合评分为94.04％.结论 星点设计-响应面法优选出了WGA修饰DNR-TET脂质体的佳处方.
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头孢菌素C发酵过程中豆油酶解条件的优化
目的 提高头孢菌素C的产量.方法 利用响应面法优化豆油的酶解条件,检测酶解后豆油对头孢菌素C产量的影响.结果 豆油的佳酶解条件为水油比0.93,酶解温度43.32℃,酶量0.18％.豆油的酶解率达高83.29％.以此条件下酶解的豆油为碳源时,头孢菌素C的终产量提高了51％.结论 以酶解后的豆油为碳源时,头孢菌素C的产量明显提高.
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响应面法优化猪脾免疫活性多肽提取工艺研究
目的 通过响应面法,优化猪脾中免疫活性多肽的提取工艺.方法 选择适当的酶水解猪脾脏,并在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计优化提取工艺,建立各因素与提取液中多肽含量的数学模型,后采用淋巴细胞转化试验初步验证其活性.结果 获得了猪脾中免疫活性多肽提取工艺∶料液比1∶2.6 g/mL,温度40℃,pH 7.0,胰蛋白酶浓度485 U/g,中性蛋白酶浓度1711U/g,每100 g含活性多肽2.930 g,与理论计算值2.929 g基本一致,活性约为对照组的1.5倍.结论 确定了猪脾免疫活性多肽佳提取工艺.
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喷雾干燥法制备南极磷虾油微囊处方和工艺研究
目的 采用喷雾干燥法制备南极磷虾油微囊并进行工艺优化.方法 以乳剂的乳化稳定性及微囊包埋率为评价指标,采用正交试验和Box-Behnken设计考察各因素对南极磷虾油乳剂的稳定性及微囊包埋率的影响,利用扫描电镜观察微囊的表面形态.结果 乳剂制备佳工艺为乳化剂用量1％、阿拉伯胶用量10％、变性淀粉用量15％、大豆分离蛋白用量15％、麦芽糊精用量60％;微囊佳制备工艺为均质压力34 Mpa、进风温度为165℃、进料速度为12.5 mL/min.结论 经优化后乳剂的乳化稳定性为0.91,微囊包埋率达82.46％.
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1株壳聚糖酶产生菌的鉴定和产酶条件优化
目的 对产壳聚糖酶菌株Y116进行菌种鉴定,并提高菌株Y116壳聚糖酶的产量.方法 对产壳聚糖酶菌株Y116进行了形态学观察、生理生化特征鉴定和16S rDNA序列同源性分析;采用单因素法和响应面法,对菌株Y116产酶的培养基成分和培养条件进行优化.结果及结论 菌株Y116归属于芽孢杆菌属(Bacil-lus sp.).单因素实验中,酶活力达到高值时各因素的数值分别为:乳糖35 g/L,豆饼粉30 g/L,Mg2+2 mmol/L,NaCl 5 g/L,初始pH 5.0,接种量5％,培养温度30℃和发酵时间96 h.利用Plackett-Burman(PB)设计对影响壳聚糖酶产量的8个主要因素进行评价,确定了豆饼粉浓度、初始pH和Mg2+浓度是影响菌株产酶量的3个主要因素;利用中心组合设计(CCD)及响应面分析,终得到3个主要因素的优值:豆饼粉浓度39.43 g/L,pH 5.94,Mg2+浓度2.05 mmol/L,酶活力比优化前提高了5倍.复使用10次后,其相对酶活仍为42.3％,说明具有良好的批次操作稳定性.该酶经过固定化后热稳定性和pH稳定性均得到了提高.
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1株产α-环糊精葡萄糖基转移酶菌株的产酶条件优化
目的 提高菌株Y112产α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)的能力.方法 采用单因素法和响应面法,对菌株Y112产酶的培养基成分和培养条件进行了优化.结果 终确定了菌株Y112产酶佳培养基成分为:玉米淀粉7.5 g/L,蛋白胨17.8 g/L,酵母浸粉9.1 g/L,Mn2+0.6 mmol/L,NaCl 50 g/L,Na2CO3 15 g·L-1(pH 9.6);佳产酶的培养条件为:27℃下发酵50 h.结论 优化后的酶活为优化前的2.8倍.
关键词： 海洋芽孢杆菌 α-环糊精葡萄糖基转移酶 产酶条件优化 响应面 -
肠膜明串珠菌发酵草鱼骨酶解液工艺条件的优化
目的 采用乳酸菌发酵的方法对鱼骨中的钙进行转化,并优化出优发酵工艺.方法 采用泡菜汤汁中分离出的肠膜明串珠菌对草鱼骨风味蛋白酶酶解液进行发酵,以发酵液游离钙含量为筛选指标,对鱼骨含量、碳源种类、碳源含量、发酵起始pH、不同无机盐种类进行单因素实验,初步确定了各因素优水平,在鱼骨含量、碳源含量、发酵起始pH单因素结果为零水平的基础上,零水平重复实验3次,进行三因素三水平响应面实验.结果与结论 响应面实验确定肠膜明串珠菌发酵草鱼骨酶解液的优工艺条件为鱼骨含量81.25 mg/mL,碳源含量7 mg/mL,发酵初始pH=5.75,预测发酵液中游离钙含量为5.56mg/g鱼骨,在优化出的条件下进行验证实验,得到的游离钙含量为5.57±0.13 mg/g鱼骨.
