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平卧菊三七茎中总黄酮提取工艺的研究
本研究采用分光光度法，以芦丁为对照品，乙醇回流提取平卧菊三七茎中总黄酮。通过对提取温度、提取时间、乙醇浓度和料液比进行单因素及正交试验。结果表明，佳提取工艺条件：提取时间3h、料液比1g：30mL、温度80℃、乙醇浓度90%，此时黄酮得率为4.243%。
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平卧菊三七的化学成分研究(Ⅰ)
目的 研究平卧菊三七Gynura procumbens全草的化学成分.方法 利用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、中压柱色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过NMR、MS等鉴定化合物结构.结果 从平卧菊三七全草的70％乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为槲皮素(1)、芹菜素(2)、木犀草素(3)、山柰酚(4)、黄芪苷(5)、山柰酚-5-O-(6"-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、7-甲醚黄芩素(7)、4-甲氧基肉桂酸(8)、苄基葡萄糖苷(9)、2-苯乙基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(11)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸乙酯(12)、3,4-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(13)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(14)、原儿茶酸(15)和丁香酚苷(16).结论 化合物7、8、12、14和16为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物3、6、9～11和13为首次从该植物中分离得到.
关键词： 平卧菊三七 黄酮 7-甲醚黄芩素 4-甲氧基肉桂酸 3 5-二咖啡酰基奎宁酸乙酯 4 5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯 -
平卧菊三七化学成分研究(Ⅱ)
目的 研究平卧菊三七Gynura proeumbens (Lour.) Merr.全草的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、反相ODS等技术进行分离纯化;通过理化性质、核磁、质谱等方法鉴定化合物结构.结果 从平卧菊三七乙醇提取物中分离得到了27个化合物,分别鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(1)、熊果酸(2)、山柰酚-3-O-p-D-葡萄糖苷(3)、5-hydroxymaltol (4)、对羟基苯甲酸(5)、4-氨基肉桂酸(6)、(E)-2-hexeny1β-D-glucoside (7)、1-(3-indolyl)-2,3-dihydroxy-propan-1-one (8)、山柰酚-7-D-β-D-葡萄糖苷(9)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、3,4,5-三咖啡酰基奎宁酸甲酯(11)、芦丁(12)、橙皮苷(13)、3,4-dihydroxyphenylacetic acid methyl ester (14)、刺梨酸(15)、委陵菜酸(16)、2-methoxy-4-(2-propenyl)-phenyl-O-β-D-glucopyranoside (17)、negletein (18)、没食子酸-3-甲基醚(19)、caesalpiniaphenol D(20)、2,5-二羟基苯甲酸(21)、原儿茶醛(22)、isohematinic acid (23)、icariside B1 (24)、dendranthemoside B(25)、4-甲氧基肉桂酸(26)、黄芩苷(27).结论 化合物4、6～9、11、13～27为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物1、2、10和12为首次从平卧菊三七中分离得到.
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HPLC-MS/MS法同时测定平卧菊三七水提物中9种主要有效成分
目的 建立一种适合同时测定平卧菊三七Gynura procumbens水提物中9种主要有效成分(芹菜素、槲皮素、芦丁、杨梅素、绿原酸、原儿茶酸、对香豆酸、咖啡酸、山柰酚)的HPLC-MS/MS方法.方法 40 mg平卧菊三七水提物经甲醇(每次4mL)超声提取2次,合并提取液并定容到10mL.色谱分离采用Shim-pack ODS C18(150 mm×2.0 mm,4.6μm)分离柱,甲醇-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min.质谱检测采用负离子多反应监测模式,并以和厚朴酚为内标.结果 所测9种主要有效成分在测定质量浓度范围内线性关系良好,r均大于0.999 5;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为91.0％～101.3％,RSD≤3.31％.结论 建立的HPLC-MS/MS方法用于同时测定平卧菊三七水提物中9种主要有效成分,灵敏度高、专属性好.
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平卧菊三七叶化学成分的分离与鉴定
目的 研究平卧菊三七叶子的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱法、反相ODS柱色谱法、Sephadex LH-20柱色谱法和HPLC法等进行分离纯化,并通过波谱分析技术鉴定其化学结构.结果 从平卧菊三七叶子中分离得到7个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇-3-O-龙胆二糖苷(β-sitosterol-3 -O-gentiobioside,1)、3-吲哚甲酸(indole-3-carboxylic acid,2)、蚱蜢酮(grasshopper ketone,3)、β-谷甾醇(β-sitosterol,4)、毒豆甲酮(drummondone A,5)、正三十二烷醇(n-dotriacontanol,6)和毒豆乙酮(drummondone B,7).结论 化合物1～3、5、7为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物4、6为首次从平卧菊三七中分离得到.
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HPLC法测定平卧菊三七中绿原酸含量
目的:建立平卧菊三七中绿原酸的HPLC测定方法.方法:采用YMC-Pack ODS-A(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸水(12:88)为流动相,流速为1mL/min,柱温为30℃,检测波长为327nm.结果:绿原酸在0.08064~1.008μg范围中具有良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为100.92%,RSD为3.2%.结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为平卧菊三七药材的质量控制方法.
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平卧菊三七各提取物抗痛风作用的实验研究
目的:研究平卧菊三七各提取物的抗痛风作用.方法:腹腔注射尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾建立小鼠高尿酸血症模型,灌胃给予平卧菊三七各提取物,用磷钨酸法检测动物血清中尿酸水平,评价平卧菊三七各提取物的降尿酸作用;腹腔注射冰醋酸,灌胃给予平卧菊三七各提取物,统计小鼠扭体次数,评价平卧菊三七各提取物的镇痛作用;直接涂抹二甲苯,致小鼠耳廓肿胀,灌胃给予平卧菊三七各提取物,计算小鼠耳肿胀度,评价平卧菊三七各提取物的抗炎作用.结果:4000 mg生药/kg的平卧菊三七醇提物能显著性降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,4000mg生药/kg的平卧菊三七水提物、醇提物和水提醇沉物以及8000mg生药/kg的平卧菊三七水提醇沉物能够显著减少冰醋酸刺激引起的扭体次数;4000mg生药/kg的平卧菊三七水提物、醇提物和水提醇沉物以及8000mg生药/kg的平卧菊三七水提醇沉物能够显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀.结论:4000mg生药/kg的平卧菊三七醇提物具有较强的抗痛风作用.
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平卧菊三七对二乙基亚硝胺诱导小鼠肝脏损伤的影响
目的:探讨平卧菊三七茎提取物(Ethanol extraction from Gynura Procumbens stem,EEGS)对二乙基亚硝胺(Diethylnirtosamine,DEN)诱导小鼠化学性肝损伤的保护作用.方法:40只昆明雄性小鼠,随机分为5组(每组8只):空白对照组、给药对照组、DEN模型组、EEGS治疗组(50 mg·kg-1和200 mg·kg-1),模型及治疗组每周经口给予165 mg·kg-1 DEN,8周后停止DEN处理,成模之后,治疗组及给药对照组每天灌胃相应剂量的EEGS,7d后处死小鼠.血清用于检测ALT、AST活性;HE、TUNEL和PAS染色分别检测组织病理学、细胞凋亡及糖原水平;RT-PCR检测肝TNF-α、AP-2等基因表达变化.结果:与模型组相比,EEGS(200 mg·kg-1)能有效降低DEN诱导的血清ALT、AST活性以及TNFα mRNA和AP-2 mRNA的升高,而对PPAR-γ、HGF mRNA的升高及IL-6 mRNA的降低无明显作用;且能有效减少凋亡细胞数量并抑制糖原增多,明显改善肝实质细胞的减少和脂肪变性等病理变化.结论:EEGS通过下调TNF-α,抑制炎症、细胞凋亡,阻止肝脏脂肪化,减轻DEN引起的化学性肝损伤.
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"一测多评"法测定平卧菊三七中绿原酸类成分
目的:分离鉴定平卧菊三七乙醇提取物所含绿原酸类成分,并用一测多评法建立其质量标准.方法:用制备型高效液相色谱法分离平卧菊三七中单体成分,利用液质联用、核磁共振法鉴定其结构.建立能准确测定其成分含量的HPLC方法,在此基础上,以绿原酸为对照,计算相对校正因子,建立"一测多评"法.结果:从平卧菊三七中分离纯化新绿原酸、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C.相对校正因子的耐用性良好,一测多评法与外标法对比结果无显著差异.结论:异绿原酸A、B和C首次从本属植物中分离,所建立的含量测定方法可用于同时测定平卧菊三七提取物中5种绿原酸类成分.
