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天冬氨酸节枝的聚乙烯亚胺作为基因疫苗载体的体外评价

马利娜;金丽丽;洪美善;全姬善

摘要: [目的]体外评价天冬氨酸节枝的聚乙烯亚胺(AEP-g-PEI)作为非典型性肺炎基因(SARSS DNA)传递载体的可行性.[方法]采用透射电子显微镜及粒径测定仪对由AEP-g-PEI和SARS S DNA形成的复合物(AEP-g-PEI/SARS S DNA)的形态及粒径进行观察和测定;采用MTT法评价AEP-g-PEI的细胞毒性;琼脂糖凝胶电泳法观察SARS S DNA疫苗的压缩及保护能力;采用Western blot法检测AEP-g-PEI与SARS S DNA在细胞内对刺突糖蛋白的表达情况.[结果]AEP-g-PEI和SARS S DNA疫苗形成较为紧密的纳米级球形粒子,可保护SARS SDNA疫苗免受DNA降解酶的降解.在相同质量浓度下,AEP-g-PEI在A549细胞和COS-7细胞中的细胞毒性均低于聚乙烯亚胺(分子质量25 ku).Western blot实验结果表明,在MCF7细胞内可检测到SARS S DNA疫苗所编码的刺突糖蛋白.[结论]高分子AEP-g-PEI作为SARS S DNA的传递载体具有可行性.

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