高效液相色谱法检测吡柔比星的血药浓度

建立一种HPLC法分离和检测人血浆中吡柔比星的分析方法学.以柔红霉素为内标,1ml血浆加0.1ml(0.4mol/L,pH=9.0)的氯化铵缓冲液碱化后以CHCl3:CH3OH(2:1)混合溶剂提取2次.在Phenomenex(C18)柱上,以0.04mol/L KH2PO4(pH=3.0):CH3CN=69:32为流动相,荧光检测波长480/550nm(Ex/Em).结果,血浆中吡柔比星的线性范围5～1000μg/L(r=0.997),方法的回收率为95.3%,日内及日间变异性RSD均小于5%.结论:本方法适用于临床吡柔比星的血药浓度监测和药代动力学研究.

小单孢菌C5308脂溶性活性成分B的分离和结构鉴别

本文以"平行菌法"结合"精原细胞法"作为筛选模型,对小单孢菌C5308发酵液脂溶部分的活性成分进行研究.分离得到C5308-B和C5308-C两个化合物.通过UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR及HMBC等光谱分析,确定C5308-B为Dynemicin H.C5308-C的结构待进一步确定.

免疫抑制剂F904的免疫抑制作用

新免疫抑制剂F904是吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)FC904产生的三烯大环内酯化合物,化学结构研究证实它与新型强效免疫抑制剂西罗莫司(sirolimus,rapamycin)同质.体外免疫学试验显示F904能抑制PHA诱导的T淋巴细胞转化,抑制作用较环孢素(CsA)强约100倍,IC50<0.1nmol/L;抑制ConA诱导的T淋巴细胞转化,抑制作用同CsA相当,IC50 1～10nmol/L;F904还能抑制LPS诱导的Ca2+不依赖的B细胞转化,IC50 1nmol/L,CsA的抑制作用则极其微弱.F904腹腔注射给药能显著抑制鼠迟发型超敏反应,ED50 2mg/kg,至少比CsA强15倍;使鼠胸腺明显萎缩ED50 0.3mg/kg,比CsA强100倍;显著抑制鼠局部移植物抗宿主反应ED50 3mg/kg,至少比CsA强10倍.结果提示F904是优于CsA的强效免疫抑制剂.

pH对β-内酰胺酶抑制剂抑酶作用的影响

选择舒巴坦(sulbactam)和克拉维酸(clavulanic acid)为研究对象,考察在不同pH条件下(6.0、7.0、8.0)两者对三种β-内酰胺酶(TEM-2、SHV-1、OXA-3)抑酶作用的变化.结果表明,克拉维酸对三种酶的抑制效力均较好,舒巴坦对OXA-3酶的抑制效力远较其它两种酶差,且舒巴坦对pH的敏感性强于克拉维酸,其在不同pH条件下的抑制效力差异较大,说明克拉维酸的抑酶效力在不同pH条件下较舒巴坦稳定.但总体上两者在低pH条件下的抑酶效力均低于高pH时.另外,从时间进程上看,舒巴坦和克拉维酸的抑制作用具有时间依赖性,酶与抑制剂预先行短时间孵育能增强抑制效力,但进一步延长孵育时间反而可使抑制效力降低.对以上酶抑制剂的pH依赖性和时间依赖性用反应旁路假说进行了分析讨论.试验结果提示在β-内酰胺酶的研究开发过程中应充分考虑其以上性质的临床意义.

国产美洛培南的体外抗菌活性

高分子聚合柱HPLC法分离四环素及有关物质

应用3种高分子聚合柱对四环素(TC)及其有关杂质进行HPLC分离测定.其中聚苯乙烯类日立3011-O柱分离效果佳.可以使四环素及其3个有关物质:4-差向四环素(ETC)、差向脱水四环素(EATC)和脱水四环素(ATC)达到良好的分离效果.各组分间分离度均符合要求.流动相由叔丁醇、水、pH9的磷酸盐缓冲液、四丁基氢氧化铵硫酸盐溶液和乙二胺四乙酸二钠溶液组成.柱温50℃,流速0.1ml/min,检测波长UV254nm,四环素在0.1～1g/L浓度范围内,溶液浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=1.0000),重现性实验RSD<0.50%(n=6).

洛伐他汀产生菌原体质体诱变育种及发酵配方优选的研究

采用紫外线-氯化锂复合诱变洛伐汀产生菌原生质体,经原生质体再生获得高产菌株BTL23、BTL56.在对菌株BTL23进行碳、氮源考察的基础上,采用均匀设计方法对培养基进行优化,使BTL23成功用于洛伐他汀生产实际.

纳滤膜在硫酸多粘菌素E浓缩与纯化中的应用

纳滤膜能在低温状态下,将硫酸多粘菌素E树脂解析液的浓缩和纯化合二为一,彻底替代了原有的真空薄膜蒸发器和树脂除杂质,既降低了能耗,又避免了产品受热分解和树脂除杂质时损失,提高了产品的收率和成品质量.

高纯度土霉素碱生产工艺研究(Ⅰ)

研究了高纯度土霉素碱的生产工艺.把粗土霉素碱用盐酸溶解后,加入黄血盐-硫酸锌进一步去除杂质,然后通过超滤去除热原及其他高分子杂质,后调pH值重结晶得到高纯度的符合注射用标准的土霉素碱产品,收率80%.

铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药性主决定因素的研究

对β-内酰胺类抗生素耐药的铜绿假单胞菌临床分离株的耐药机理进行了研究,内容包括β-内酰胺酶的表达、细胞外膜通透性、主动外排和青霉素结合蛋白的改变等,重点研究了2株对头孢他啶耐药且其MIC相似的临床分离铜绿假单胞菌P.a.18SH和P.a.143811.在这2株菌中没有发现主动外排现象引起的细菌对β-内酰胺类抗生素耐药,其中,P.a.18SH对头孢他啶的耐药性可由其低的细胞外膜通透性和高活性Class C类β-内酰胺酶的表达来解释.P.a.143811有相当高的外膜通透性,其产生的β-内酰胺酶特点与P.a.18SH相似,但表达水平及总活性比P.a.18SH酶低,与敏感菌相似.通过进一步的研究发现,P.a.143811的耐药性可能由于其具有多个PBP基因突变,导致多个PBPs对β-内酰胺抗生素的敏感性发生改变或过度表达,其中的几个低分子量PBPs可能与D,D-羧肽酶活性有关.这是第一次在耐药的铜绿假单胞菌临床分离菌中报道PBPs的过度表达.提示铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性具有多样性,在新药研制和临床使用抗菌药物时应注意这些耐药特点.

去甲金霉素提取新工艺研究

研究了去甲金霉素发酵滤液的提取新工艺,并对新萃取体系的萃取和反萃取特性进行了详细研究.新萃取剂的挥发性小,气味小,水溶性小,萃取过程产生的界面物也少,提高了萃取收率,降低了生产成本.可以直接多次复用,省去了回收溶剂和溶媒复用所消耗的大量能量.研究表明,该萃取体系有良好的萃取和反萃取特性.

阿柔比星A聚乳酸毫微粒冻干针剂的研制及体外药物释放规律的研究

研究阿柔比星A聚乳酸毫微粒(ACRB-A-PLA-NP)冻干针剂的制备,并对其体外释药进行考察.根据低共熔点测定结果,以及外观、色泽、再分散性等质量参数为指标,制备出ACRB-A-PLA-NP冻干针剂,采用动态透析法研究其体外释放规律.结果,制得的ACRB-A-PLA-NP冻干针剂色泽均匀,再分散性良好.其体外释药可用3种方式表达.提示ACRB-A-PLA-NP冻干针剂有明显的缓释特征.

茎点霉299产生的免疫抑制剂Ⅱ. SIPI-299-I、299-Y和299-AD

对真菌茎点霉299的进一步研究,又从中分离得到3个活性化合物299-I、299-Y和299-AD.经波谱分析(UV、EI-MS、1H-NMR、13C-NMR-DEPT、IR),证实它们分别与roridin A、D和H相同,也属于大环内酯trichothecenes类化合物.3个化合物均有强的免疫抑制活性.

头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南/西司他丁与头孢他啶治疗老年人肺部感染的疗效对比分析

比较头孢哌酮/舒巴坦(CPZ/SB)、亚胺培南/西司他丁(IPM/CS)与头孢他啶(CAZ)治疗老年人肺部感染的疗效及其安全性.共入选老年肺部感染患者104例,可供评价疗效者92例,其中应用CPZ/SB 30例、IPM/CS 30例、CAZ 32例;12例病例因应用时间不足3d或因在治疗过程中加用其他抗菌药物而未被列入评价分析.CPZ/SB、CAZ每次1g,每日3次,疗程4～14d;IPM/CS每次0.5g,其中18例每日2次,12例每日3次,疗程7～14d.结果CPZ/SB组有效率86.7%,IPM/CS组有效率90%,CAZ组有效率81.3%;对致病菌株的清除率分别为83%、86%和78%;不良反应发生率分别为6.7%、10%与9.3%.结论:老年人发生严重肺部感染时选择CPZ/SB、IPM/CS、CAZ治疗都是安全有效的.

白细胞介素1受体拮抗剂筛选模型研究

以链霉菌表达的重组hsIL-1RⅠ为靶位,建立了基于受体配基竞争性结合为原理、白细胞介素1受体拮抗剂筛选模型,对500株微生物发酵产物进行了筛选,复筛阳性率为4%～5%,该模型具有新颖性和实用性.

803株革兰氏阴性杆菌的来源组成及耐药性分析

分析我院1997～1999年临床分离的803株革兰氏阴性杆菌的来源组成及主要革兰氏阴性杆菌的耐药状况.用VITEK-AMS 32鉴定细菌,药敏试验采用AMS专配试验卡.结果分离率居前五位的革兰氏阴性杆菌是大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、乙酸钙不动杆菌和阴沟肠杆菌.对革兰氏阴性杆菌耐药率低的抗生素依次是亚胺培南(10%)、头孢他啶(27%)、氨曲南(30%);耐药率高的抗生素是氨苄青霉素(90%)、四环素(78%)、头孢唑林(73%).结论:大肠埃希氏菌是临床标本中常见的革兰氏阴性杆菌,亚胺培南、头孢他啶和氨曲南对革兰氏阴性杆菌的耐药率低.

头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶中高分子杂质的含量测定

以建立头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶中高分子杂质含量的快速测定方法为目的,对不同离子对试剂、洗脱剂pH、洗脱剂类型、离子对浓度、洗脱速度等因素进行了研究.所建立的测定头孢噻肟、头孢曲松中高分子杂质含量的测定方法为Sephadex G-10(粒度40～120μm)凝胶柱,内径1.5cm,柱长45cm,Vt 50ml;洗脱剂采用pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液;洗脱速度为1.8ml/min.上样量200μl;检测器:BP-9300高分子杂质分析仪.所建立的测定头孢他啶中高分子杂质含量的测定方法为Sephadex G-10(粒度40～120μm)凝胶柱,内径1.5cm,柱长45cm,Vt 50ml;洗脱剂采用pH7.0的1.0mol/L磷酸盐缓冲液;洗脱速度1.8ml/min.上样量200μl;检测器:BP-9300高分子杂质分析仪.

喹诺酮类抗感染药物的合成与有关化学

本文将喹诺酮类抗感染药物的合成与有关化学中具代表性的成果分两部分,即喹诺酮母环系的形成和取代基的引入进行了归纳、总结.

阿齐霉素的两种含量测定方法比较

采用微生物检定法及高效液相色谱法同时测定阿齐霉素含量,实验结果表明两方法均准确可行.微生物检定标准曲线法阿齐霉素在0.4～2.0mg/L的浓度范围内呈良好的线性关系,r=0.9996.高效液相色谱法阿齐霉素在150～1800mg/L浓度范围峰面积呈良好线性关系,回归方程Y=58.38X-484.96,r=0.9999.

每日1次1g头孢曲松治疗下呼吸道感染的疗效和药物经济学观察

头孢曲松是广泛使用的具有广谱抗菌活性的头孢菌素,对体内外革兰氏阳性需氧菌和革兰氏阴性菌均有效.以前的研究推荐头孢曲松的用药剂量为1～2g/d,但在治疗成人呼吸道感染方面何为适当剂量尚不十分清楚.对药物经济学而言,剂量的减少不应影响疗效,因此本文采用随机分组,对头孢曲松1g,每日1次与头孢氨噻肟1g,每日3次静脉给药前瞻性随机对照治疗74例下呼吸道感染的疗效与安全性作了比较.结果显示两组疗效相仿,临床治愈率分别为73.0%、70.3%,总有效率均为91.9%,两治疗组间在其它观察指标如临床症状或退热时间中位数、细菌清除率也无显著差异.所有患者对两种抗生素的耐受性均良好,无严重的不良反应.这一随机性的研究提示头孢曲松每日1次,1g给药的优越性可充分利用.

高效液相色谱法测定利福喷汀含量

本文应用高效液相色谱法,采用Lichrospher RP-8色谱柱,以甲醇-乙腈-0.0375mol/L磷酸二氢钾溶液(1:1:1)为流动相,254nm波长处检测,测定利福喷汀的含量.方法学验证试验结果表明:在样品浓度20～180mg/L范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,r=0.9998;样品的平均加样回收率为99.9%(n=5);精密度、重现性均可满足定量分析的要求;与现行的卫生部部标准(试行)使用的TLC-UV法比较,结果基本吻合,但更简便、快速.

康乐霉素C产生菌的诱变育种及其发酵的研究

康乐霉素C(简称K-C)是一个新的免疫抑制剂,但它在发酵液中的含量很低,仅为0.1mg/L.为了满足药效学、毒理学试验和药代动力学所需的样品,就必须提高K-C的产量.K-C的产生菌为Nocardia mediterranei var.Kanglensis 1747-64,用本所的自然突变株ST-91为出发菌株(下称出发菌株),采用紫外线诱变和自然分离纯化的方法,筛选出1株K-C的产量明显地高于出发菌株的突变株U10-S-4.对U10-S-4的生产稳定性进行了考察,其稳定性很好,可传到第四代.并对它的发酵条件,如:pH值、接种量、发酵周期等进行了研究,进而进行了500L罐上放大试验,绘制出突变菌株U10-S-4的生长代谢曲线,通过对代谢曲线分析,优化了发酵条件,进行了罐上的补料试验,确立了5吨罐上的操作条件,成功地进行了3批生产,K-C效价可以达到46.0mg/L,比出发菌株提高了460多倍.

痢疾杆菌耐药性质粒的转移与扩散的研究

为探讨痢疾杆菌耐药性的转移及扩散方式,作者在检测痢疾杆菌的耐药状况及质粒携带情况的基础上,进行了耐药质粒的接合传递和质粒DNA的转化试验.结果90.24%的痢疾杆菌具有多重耐药性,83.54%携带有质粒DNA条带.弗氏志贺氏菌的接合传递阳性率为60.78%,索氏志贺氏菌为16.7%,弗氏志贺氏菌的R质粒传递能力强于索氏志贺氏菌,接合传递过程中存在耐药标记的分离现象;质粒DNA转化率为27.5%,弗氏志贺氏菌与索氏志贺氏菌的转化率差异无显著意义.上述结果说明痢疾杆菌的耐药性主要通过接合传递扩散,质粒DNA的转化在痢疾杆菌耐药性扩散中也具有重要意义.

阿奇霉素治疗淋菌性阴道炎、淋菌性尿道炎178例临床观察

观察阿奇霉素胶囊治疗女性淋菌性阴道炎,淋菌性尿道炎的疗效.经临床确诊患者,口服阿奇霉素胶囊1g(4粒),4～7d后复诊.结果112例淋菌性阴道炎痊愈92例,治愈率82.14%;淋菌性尿道炎66例,痊愈61例,治愈率92.42%.结果表明,阿奇霉素胶囊对淋菌性阴道炎、淋菌性尿道炎有良好的治疗效果,且口服方便,方法简单,值得在临床上推广运用.

司帕沙星治疗性病性前列腺炎

目的:探讨司帕沙星治疗性病性前列腺炎的有效性和安全性.方法:75例性病性前列腺炎患者随机分为A、B两组.A组37例口服司帕沙星每天1次,每次0.2g;B组38例口服氧氟沙星每天3次,每次0.2g.两组均连用20d为一疗程,一疗程未愈者继用第二疗程,两疗程未愈者停用.结果:A组患者治愈率86.5%,总有效率91.9%;B组患者治愈率65.8%,总有效率73.7%.经统计学处理,A组治愈率高于B组(χ2=4.403,P<0.05),A组有效率亦高于B组(χ2=4.337,P<0.05).结论:司帕沙星治疗性病性前列腺炎的疗效明显优于氧氟沙星,司帕沙星是治疗性病性前列腺炎相对有效和安全的抗菌药物.