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大鼠肝细胞色素P4503A活性测定及其孵育条件的优化

任秀华;曹磊;斯陆勤;薛柯雯;裘军;李高

摘要: 目的:测定大鼠肝微粒体中细胞色素P4503A(CYP3A)的活性,并对其体外孵育条件进行优化.方法:采用1'-羟基咪哒唑仑的生成量表示肝中CYP3A的活性,高效液相色谱法测定肝微粒体中1'-羟基咪哒唑仑的浓度,用单因素试验法对其体外孵育条件进行优化,用线性Lineweaver-Burk双倒数作图法研究肝CYP3A酶促动力学.结果:1'-羟基咪哒唑仑在18.20~1 820.00 μg·L-1范围内线性关系良好;体外优化的孵育条件为5 μmol·L-1咪哒唑仑、0.102 mg肝微粒体、孵育15 min;肝CYP3A酶促动力学参数Km为1.67 μmol·L-1,Vmax为95.15 pmol·min-1·mg-1.结论:HPLC法操作简便、灵敏、快速,适用于肝微粒体中1'-羟基咪哒唑仑的浓度测定,肝CYP3A孵育条件及其酶促动力学研究为研究经CYP3A代谢的药物相互作用及其他物质对CYP3A酶的影响提供理论依据.

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