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M1和M2型巨噬细胞经ox LDL刺激后细胞内脂质含量及分泌TNF α、IL 10的浓度差别与意义

尚茹茹;张锦;袁锋;温婷;刘晓红

摘要: 目的:探讨 M1和 M2型巨噬细胞经氧化型低密度脂蛋白(ox LDL)刺激后细胞内脂质含量及分泌的细胞因子白细胞介素10(IL 10)、肿瘤坏死因子(TNF α)的浓度差别及意义。方法提取 C57BL/6小鼠的骨髓单核细胞,用巨噬细胞集落刺激因子(M CSF)诱导其向巨噬细胞分化,并辅以干扰素γ(IFN γ)和白细胞介素4(IL 4)刺激巨噬细胞向M1和M2型分化,行RT PCR检测极化后 M1型巨噬细胞的标志物一氧化氮合成酶(iNOS)及 M2型巨噬细胞的标志物精氨酸酶(Arg1)的表达。M1及 M2型巨噬细胞诱导分化成功后在40 mg/L ox LDL中培育48 h后行油红O染色观察细胞内脂质含量;行ELISA检测上清液中IL 10和TNF α的浓度。结果 RT PCR结果显示Arg1的表达在IFN γ刺激组低于IL 4刺激组,而iNOS的表达在IFN γ刺激组高于IL 4刺激组,表明 IFN γ刺激后巨噬细胞分化为 M1型而 IL 4刺激后分化为 M2型;油红 O染色示 M1和 M2型巨噬细胞内的脂质含量均高于对照组,M1型巨噬细胞内脂质含量高于 M2型巨噬细胞。ELISA检测示 M1和M2型巨噬细胞上清液中TNF α和IL 10浓度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);M1型巨噬细胞上清液中 IL 10浓度低于 M2型巨噬细胞,而 TNF α的浓度则高于 M2型巨噬细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 M1型巨噬细胞可能通过分泌 TNF α增强对胆固醇的摄入,加速动脉粥样硬化的发生发展,而 M2型巨噬细胞可能通过分泌 IL 10减少对胆固醇的吞噬,从而发挥抗 AS作用。

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