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MTS-PMS法测定脾细胞增殖及NK细胞活性的实验条件优化

马天宇;苗惠;张舒峰;俞星;韩春姬

摘要: 四唑蓝比色法(MTT法)是检测小鼠脾淋巴细胞增殖实验比较常用的方法.但采用该方法检测悬浮生长细胞增殖活性时,取出培养上清液时容易将培养的细胞一同去除,导致误差,对形成的甲瓒产物需加入二甲基亚砜(DMSO)溶解后方可测定,操作步骤不易执行,造成实验结果不稳定,实验耗时长.MTS-PMS法检测细胞生长活力是美国学者Buttke[1]于1993年建立的.MTS [3-(4,5-二甲基噻唑-2-yl)-5(3-羧甲酯基l)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑,内盐]是新合成的四唑氮衍生物,和MTT属于同类物质,其应用原理也相同.将MTS-PMS直接加入板孔的培养基中,孵育一段时间后,吸光度值可用酶标仪直接测得[纠,因而减少了实验误差,提高了数据的稳定性.本实验拟采用MTS-PMS法,以小鼠淋巴瘤细胞(YAC-1)和小鼠肝癌细胞(H22)作为靶细胞,探讨测定NK细胞活性的佳实验条件,为NK细胞活性检测提供更为稳定的实验方法.

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