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重组人心肌TnI-TnC复合物的特性及其初步应用

刘大彪;张明明;卢仁泉;郑佐娅

摘要: 目的:从含有人cTnI-TnC基因的表达菌中抽取目的蛋白,并对其进行纯化、鉴定及稳定性的初步研究.方法:取表达菌株BL21(DE3)-pET28a-cTnI-TnC,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,NTA树脂亲和层析纯化后,检测其免疫反应性和稳定性,并试验了在4种不同液体基质中cTnI-TnC复合物的稳定性.结果:cTnI-TnC表达水平高,可溶性好.免疫分析显示较高的特异免疫反应性和稳定性.筛选到了能使cTnI-TnC复合物在液态下保持稳定的基质.结论:cTnI-TnC复合物能通过基因工程手段大量获取,并具有较高的免疫反应性和稳定性.含EDTA的10% BSA磷酸缓冲液或含10%小牛血清的磷酸缓冲液是其合适的基质.初步认为cTnI-TnC复合物可以作为cTnI免疫测定用的参考标准品或质控品.

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