首页 > 文献资料
-
骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响
目的：观察骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌细胞的凋亡作用。方法采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死模型，建模成功后1h直接注射骨髓间充质干细胞，饲养6w后处死大鼠，通过原位脱氧糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果 TUNEL阳性信号为棕色颗粒，即为细胞凋亡。结论骨髓间充质干细胞移植改善大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡。
-
小鼠β-防御素-2对肿瘤细胞 SiHa 生长的抑制作用及其机制
目的：探讨小鼠β-防御素-2（beta defensin 2，BD2）对 SiHa 细胞生长的抑制作用及其机制。方法将pcDNA3．1（＋）/mBD 2、pcDNA3．1（＋）/rmBD 2质粒转染 SiHa 获得的稳定转染细胞 SiHa/M、SiHa/R 裂解，用细胞裂解上清进行 Western blot 检测 mBD2蛋白表达；同时采用细胞活力分析对转染细胞的细胞活力进行测定，采用 AnnexinⅤ、PI 流式细胞分析法和 TUNEL 法检测细胞凋亡情况，并计算细胞凋亡指数。结果 SiHa/M、SiHa/R 组在4～6 Ku 区域出现目标条带；SiHa/M、SiHa/R 组细胞在贴壁后2～3 d 细胞活性明显低于 SiHa 细胞（P ＝0．018），但随着时间推移，细胞活性开始下降，3组细胞的细胞活力差异无统计学意义（P ＝0．374）；SiHa/M、SiHa/R 及 SiHa 组 Annexin Ⅴ＋/PI＋双阳性细胞的百分率分别为2．4％、2．3％、2．3％；Annexin Ⅴ＋/PI-细胞分别为0．9％、1．2％、1．5％，3组差异无统计学意义（P ＝0．743）；SiHa/M、SiHa/R 组凋亡细胞发生率较高，分别达到40．7％、30．2％，而 SiHa 组细胞凋亡率只有7．3％，SiHa/M、SiHa/R 组细胞凋亡率明显高于 SiHa 组，差异有统计学意义（P ＝0．004）；SiHa/M 组凋亡发生率高于 SiHa/R 组，差异有统计学意义（P ＝0．003）。结论 mBD 2能够抑制 SiHa 细胞的生长和诱导细胞凋亡。
-
小肠缺血再灌注损伤导致Cajal间质细胞凋亡的实验研究
目的 探讨小肠缺血再灌注损伤对Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)的影响.方法 采用缺血60 min再灌注6 h(I60/R6h)、12 h(I60/R12h)和14 d(I60/R14d)的豚鼠小肠,通过免疫细胞化学和TUNEL法检测ICC的凋亡.结果 I60/R6h豚鼠小肠可见少量TUNEL阳性ICC.I60/R12h可见较多的凋亡ICC,同时ICC细胞数量明显减少,细胞网络不完整.I60/R14d的ICC恢复正常数量和分布.不同时间点之间Kit/TUNEL双标阳性细胞数量存在显著差别(P<0.05).结论 小肠缺血再灌注损伤导致ICC凋亡,一段时间后ICC能够恢复正常.
-
依达拉奉对脑外伤后大鼠的神经保护作用
目的 研究自由基清除剂依达拉奉对大鼠颅脑外伤的保护作用.方法 将SD大鼠分为依达拉奉组(n=32)和对照组(n=32).利用自制自由落体撞击装置,制作脑外伤模型.撞击前30 min及伤后3 h尾静脉给药.分4个时间点于外伤后6 h、24 h、3d、7 d分别处死实验组和对照组.TUNEL法检测凋亡,免疫组化法分析8-羟基-脱氧鸟苷.结果 外伤后初期依达拉奉对大鼠生理指标没有明显的影响(P＞0.05);但依达拉奉治疗后的脑外伤大鼠相对对照组神经功能评分明显减少(P＜0.05);神经元的凋亡情况也有显著的减少(P＜0.05),同时显著减少外伤后脑组织中8-羟基-脱氧鸟苷含量(P＜0.05).结论 依达拉奉对脑外伤大鼠有很好的神经保护作用,其作用机制可能与清除氧自由基,减轻脑水肿有关.
-
β-catenin在子宫内膜异位症患者在位内膜中的表达
目的:探讨β-catenin在子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜的增殖与凋亡活性的关联,及其在EMs发病中的作用.方法:共收集68例EMs患者在位内膜组织(EMs组)和70例非EMs患者子宫内膜(对照组),采用免疫组织化学技术分析子宫内膜组织β-catenin的表达情况.TUNEL检测分析子宫内膜组织的凋亡活性,Ki67免疫组织化学染色分析子宫内膜组织的增殖活性.结果:与对照组比,EMs患者在位内膜Ki67表达明显增强,TUNEL阳性细胞明显减少(P＜0.05).在位内膜腺上皮及间质β-catenin表达明显高于对照组(P＜0.05). β-catenin在胞质及胞核的表达明显高于对照组(P＜0.05).直线相关分析结果显示无论是正常内膜还是EMs患者在位内膜,β-catenin的表达与Ki67表达均呈正相关,与TUNEL结果均呈负相关.结论:EMs患者在位内膜β-catenin的异常高表达可能通过上调内膜组织的增殖活性,下调其凋亡性而参与EMs的发病.
关键词： β-catcnin 在位内膜 子宫内膜异位症(EMs) Ki67 TUNEL -
新生鼠卵巢FOXO3a表达水平与卵母细胞凋亡的相关性初步研究
目的:探讨新生大鼠卵巢中FOXO3a(forkhead box group O)转录因子表达水平与卵母细胞凋亡的相关性.方法:取出生后2 d、3 d、8 d、15 d龄大鼠的卵巢,用免疫组化方法观察FOXO3a、caspase-3在卵巢组织中的定位及表达水平,且用TUNEL技术检测卵巢内卵母细胞的凋亡变化.结果:FOXO3a在新生大鼠部分卵母细胞巢内的卵母细胞核内高表达,而在卵泡发育启动后,FOXO3a则从卵母细胞的核内逐渐转移至胞浆.而在次级和成熟卵泡的卵母细胞内,FOXO3a仅出现在胞浆内.≤8 d龄大鼠卵巢的部分卵母细胞核内或胞核、胞浆内可检测到caspase-3表达,2 d、3 d龄大鼠部分卵母细胞核内高表达.TUNEL染色与caspase-3结果相似,2 d龄大鼠卵巢的卵母细胞阳性率高.结论:生后2 d大鼠卵巢的卵母细胞存在一个凋亡高峰期;在原始卵泡形成前,FOXO3a在部分卵母细胞核内高表达,并与卵母细胞的凋亡率呈一致性.
-
慢性压迫性脊髓损伤神经细胞的变化
①目的观察在慢性压迫性脊髓损伤时 ,脊髓的一般组织病理变化及脊髓内神经元和神经胶质细胞的凋亡情况.②方法健康家兔16只,随机分为3组:A组为正常对照组;B组为手术对照组;C组为慢性压迫组.采用慢性泛影葡胺胶囊逐级压迫建立慢性脊髓压迫动物模型,造成家兔第2腰髓节段的慢性压迫.用Nissl染色法观察脊髓的一般组织病理学变化,用原位末端标记法(T UNEL)观察细胞凋亡情况.③结果 C组在Nissl染色下白质中神经胶质细胞增生,以后索明显;灰质中神经元尼氏体淡染或消失,神经元萎缩、脱失,以Ⅸ板层明显.TUNEL标记的阳性细胞为神经胶质细胞,白质中各索均有,以后索和外侧索明显.灰质中标记细胞主要存在于Ⅰ,Ⅱ板层,压迫区明显,其相邻的首尾端次之.A,B两组的表现正常.④结论慢性压迫性脊髓损伤是导致脊髓一般组织发生病理变化及神经细胞凋亡的重要原因.
-
Hoechst33342/PI双染法和TUNEL染色技术检测神经细胞凋亡的对比研究
目的：利用Hoechst33342/PI双染法和原位末端标记法(TUNEL染色检测纳米二氧化硅(nm-SiO2)对神经细胞凋亡的影响，比较两种检测方法的优缺点。方法：以体外培养的人神经母细胞瘤SK-N-SH为研究对象，15和30 nm粒径的nm-SiO2(剂量为2.5、5、10μg/mL)分别处理细胞24 h，另设1~5 m SiO2组和溶剂对照组，采用Hoechst33342/PI双染法和TUNEL染色检测各处理组对SK-N-SH细胞凋亡的影响。结果：与对照组相比，两种检测方法分析均显示了nm-SiO2处理组SK-N-SH细胞凋亡率显著增加(P<0.05)，且具有尺寸、剂量依赖性，而微米级SiO2对凋亡的影响不显著(P>0.05)。结论：nm-SiO2能诱导SK-N-SH细胞凋亡。Hoechst33342/PI双染法特异性高，简单易行；TUNEL法灵敏度高，能检测少量的细胞凋亡，但成本较高，两种方法可结合使用以便更加准确的检测神经细胞的凋亡。)μ
关键词： 纳米二氧化硅 神经细胞 凋亡 Hoechst33342/PI双染 TUNEL -
P73基因表达与乳癌细胞凋亡、激素受体的关系
背景与目的:研究 P73基因与乳腺癌发病的关系.材料与方法:应用TUNEL、RT- PCR等技术检测乳癌组织P73基因的表达及其与肿瘤细胞凋亡、激素受体的关系.结果:45例乳癌组织P73基因表达阳性者32例,高于良性乳腺肿瘤;淋巴结转移阳性者 P73基因表达高于阴性者;肿瘤细胞的凋亡率与P73基因表达无相关性;P73基因表达与雌、孕激素受体亦无相关性.结论:P73基因表达增多可能与乳腺癌发病有关.
-
乳腺癌组织Livin和PTEN的表达及与肿瘤细胞凋亡的相关性
目的 研究乳腺癌组织中凋亡抑制蛋白Livin和抑癌基因PTEN的表达与肿瘤细胞凋亡的关系,探讨两者在乳腺癌细胞凋亡、侵袭转移中的作用机制.方法 应用免疫组化Elivision法检测90例乳腺癌和30例乳腺纤维腺瘤组织中Livin和PTEN的表达,另以TUNEL法检测细胞凋亡情况,分析Livin和PTEN表达与乳腺癌细胞凋亡的关系.结果 在90例乳腺癌中Livin和PTEN的表达阳性率分别为54.4％,48.9％,凋亡指数为4.79％±1.62％,与良性对照组比较均有显著差异(P＜0.01);Livin阳性表达与乳腺癌肿瘤大小、临床分期呈正相关(P＜0.05),与凋亡指数呈负相关(P＜0.05),与年龄、病理分级、淋巴结转移未见显著相关(P＞0.05);PTEN表达与乳腺癌淋巴结转移、临床分期呈负相关(P＜0 05),与凋亡指数呈正相关(P＜0.05),与年龄、肿瘤大小、病理分级未见显著相关(P＞0.05).结论 Livin和PTEN对乳腺癌细胞凋亡分别起抑制和促进作用,Livin高表达和PTEN失表达都可通过抑制细胞凋亡促进乳腺癌的侵袭转移,调控两种基因的表达有望影响乳腺癌细胞凋亡以及乳腺癌的发生发展.
-
简易细胞块和细胞芯片的制作方法及应用价值
目的 介绍一种石蜡包埋细胞块及细胞芯片的简易制作方法及验证其应用价值.方法 收集临床送检细胞学标本,采用简易方法制作成石蜡包埋的细胞块及细胞芯片,HE染色、免疫细胞化学染色及TUNEL检测法验证其应用价值.结果 此方法能简易制作出细胞块及60个点阵左右的细胞芯片,经HE染色、免疫组化染色及TUNEL凋亡染色证实,染色效果良好,结果可靠.结论 本方法制作的石蜡包埋细胞块及细胞芯片的操作容易,设备简单,细胞形态和抗原保持良好,值得推广应用.
-
口腔扁平苔藓细胞凋亡及免疫改变的意义
目的:探讨细胞凋亡及免疫改变在口腔扁平苔藓发病中的作用.方法:收集2007年1月～2008年4月间来我院的初诊口腔扁平苔藓患者石蜡标本24例,并取同期正常口腔颊腭部黏膜组织石蜡标本15例作为对照组.采用TUNEL法进行原住细胞凋亡栓测,计算凋亡指数;免疫组化法进行CD4+、CD8+T细胞的检测,记录阳性细胞数;进行细胞凋亡指数和和阳性表达T细胞数的相关关系.结果:口腔扁平苔藓上皮层及固有层均可见凋亡细胞,上皮细胞凋亡指数明显高于正常对照组(t=13.94,P=0.000);固有层的细胞凋亡指数却低于正常对照组(t=13.84,P=0.000).正常口腔粘膜上皮内几乎不表达CD4+、CD8+T细胞,固有层内少量CD4+、CD8+T细胞表达.口腔扁平苔藓固有层CD4+、CD8+T细胞数与正常对照组相比显著增加(t=5.51.P=0.000;t=18.15,P=0.000).相关分析显示口腔扁平苔藓固有层内CD4+、CD8+T细胞的表达与淋巴细胞凋亡呈负相关(r=-0.78,t=6.43,P=0.012;r=-0.86,t=9.43,P=0.005).结论:细胞凋亡和细胞免疫紊乱在口腔扁平苔藓的发病中可能起一定的作用.口腔扁平苔藓的细胞免疫紊乱可能是CD4+、CD8+T细胞凋亡较少所致.
