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小鼠骨髓及肝血中嗜多染红细胞微核率的比较
哺乳动物骨髓微核试验已被国内外毒理学界广泛应用于致突变剂的检测.但由于骨髓对某些前致突变/致癌物活化能力有限,而且在肝脏中形成的短寿的终致突变/致癌物不能较久地滞留于血循环中,难以在骨髓内达到显示诱变效应的浓度.而肝脏是很多外来化合物代谢、转化、贮存的场所,极易受到各种化学物的作用,有一些还是肝脏的特殊致癌剂及诱变剂.因此,如果能直接用体内肝血微核试验检测化学物对染色体的损伤是很有意义的.我们对10种不同物质对小鼠骨髓及肝血嗜多染红细胞(PCE)微核诱发率作了平行观察,以便进一步扩展现有的微核检测方法.
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中药紫草的遗传毒性实验研究
目的探讨中药紫草水煎液对成年小鼠及胚胎鼠的遗传毒性.方法采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验法、小鼠胚胎肝细胞转移微核实验法.结果成年小鼠与孕鼠分别灌胃紫草水煎液剂量为1.0 g/kg,诱发小鼠骨髓和胎鼠肝嗜多染红细胞的微核率分别为(3.8±1.0)‰,(3.8±1.4)‰,与阴性对照组(2.5±1.5)‰,(2.8±1.1)‰比较,差异无显著性(t1=0.9,t2=2.1,P＞0.05),5.0 g/kg时就可诱发微核率阳性,微核率分别为(4.6±2.1)‰,5.9±1.7)‰,与阴性对照组比较,差异有显著性(t1=2.4,t2=4.3,P＜0.01);若灌胃剂量达10.0 g/kg、20.0 g/kg时,微核率分别为(7.1±1.8)‰,(8.8±2.2)‰,(9.3±1.8)‰,与阴性对照组相比差异有显著性(t1=5.8,t2=9.7,t3=8.4,P＜0.01).结论一定剂量的中药紫草水煎液对小鼠遗传物质具有潜在的遗传毒性,并呈剂量-反应关系.故在临床对于用药剂量及不同人群,特别是对育龄人群应予以重视.
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流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的研究
目的 应用流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,建立本实验室快速检测微核率的自动化实验方法.方法 将48只雄性BALB/c小鼠随机分为4个照射剂量组,分别给予60 Coγ射线一次性全身照射0、0.5、1和2Gy,于照射后24、48h取骨髓标本,每个剂量和每个时间点均为6只小鼠.采用流式细胞术检测受照小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,以传统显微镜检微核的方法作为对照.结果 流式细胞术及显微镜检方法检测的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率均呈良好的剂量依赖性及时间依赖性,并且两种方法的检测结果呈显著正相关(r=0.987,P＜0.01).流式细胞仪检测速度为人工阅片的40倍以上,且能够避免人工镜检人员阅片的主观性,检测结果更为客观.结论 采用流式细胞仪检测小鼠骨髓红细胞微核较传统的人工显微镜检测,更加简便、易行、快速,检测结果准确、可信、客观,适用于大规模核辐射伤员的高通量快速生物剂量诊断.
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西咪替丁对0.7Gy照射小鼠嗜多染红细胞微核的保护作用
目的 选择辐射敏感指标(骨髓嗜多染红细胞微核率)评价西咪替丁对单次低剂量照射小鼠的损伤防护作用.方法 健康雄性C57BL/6小鼠48只,随机分为正常对照组、模型对照组、200mg/kg WR2721组(阳性药组)及7.5、15、30mg/kg西咪替丁组(n=8).西咪替丁组于照射前2h腹腔注射给药1次,阳性药组照射前连续腹腔注射给药2d,每日1次.单次照射剂量为0.7Gy,剂量率为5.83mGy/min.照射后24h检测小鼠外周血象,血清和肝脏中的SOD活力与MDA含量,骨髓DNA含量和骨髓嗜多染红细胞微核率.结果 与正常对照组比较,照后24h小鼠外周血白细胞显著降低(P＜0.01),嗜多染红细胞微核率显著升高(P＜0.01),除15mg/kg西咪替丁组外,其余各组小鼠骨髓DNA含量显著降低(P＜0.01,P＜0.05).照后24h各组小鼠SOD活性和MDA含量无明显变化.与模型对照组比较,西咪替丁各剂量组外周血白细胞和骨髓DNA含量均无明显变化;7.5mg/kg西咪替丁组嗜多染红细胞微核率为0.027‰,明显低于模型对照组(P＜0.01),且剂量减低系数(DRF)值达到3.338.结论 西咪替丁对0.7Gy单次低剂量照射小鼠嗜多染红细胞微核有较好的保护作用.
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迷迭香酸对γ射线致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的保护作用
目的 研究迷迭香酸对γ射线致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的保护作用.方法 以骨髓嗜多染红细胞微核形成率为观测指标,C57BL/6J小鼠经60Co γ射线1～3 Gy照射24h后观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化以选择合适的照射剂量;C57BL/6J小鼠经60Coγ射线2Gy照射后不同时间观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化以选择照射后取骨髓的时间;2Gy照射前经迷迭香酸处理的C57BL/6J小鼠照后24h观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化,以确定迷迭香酸对小鼠微核保护作用的剂量效应与时间效应.结果 2Gy照射24h后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率增加比较明显,适合作为小剂量照射条件；照射后24h或48 h骨髓嗜多染红细胞微核发生率增加比其他时间明显；经迷迭香酸100 mg/kg连续7次处理后的受照射小鼠骨髓细胞中,微核发生率(6.50‰)明显低于单纯照射组(23.65‰).结论 迷迭香酸对γ射线致骨髓嗜多染红细胞微核具有保护作用.
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流式细胞仪筛选环磷酰胺诱导骨髓嗜多染红细胞微核的技术方法
目的：利用单一荧光试剂吖啶橙（ acridine orange， AO）和简单的单激光流式细胞仪（ FCM）计数骨髓嗜多染红细胞的微核率，达到了解化合物诱导微核作用的目的。方法分别以环磷酰胺（ CP）处理雄性KM小鼠和SD大鼠，采用AO荧光染色和单激光流式细胞仪检测小鼠和大鼠骨髓含微核的嗜多染红细胞（ MNPCE）及含微核的成熟红细胞（ MNNCE）的微核率，并对结果进行比较分析。结果随着CP浓度的增高，骨髓中MNPCE和MNNCE也相应增多，呈良好的量效关系。实验结果同时和手工计数比较，没有显著差异。结论 AO＿FCM 自动化检测方法完全适用于小鼠和大鼠骨髓MNPCE及MNNCE微核率的检测。
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三氯乙烯染毒小鼠骨髓微核试验观察
目的检测三氯乙烯对受试动物致突变作用.方法以不同剂量的三氯乙烯染毒实验动物,经口灌胃给予受试物,用30 h给受试物法,即两次给受试物间隙24 h,第2日给受试物后6 h处死动物,制片,观察并计数嗜多染红细胞的微核率,并与阳性对照组和阴性对照组进行比较分析.结果与阴性对照组相比,各剂量组的微核率差异无显著性(P＞0.05)结论三氯乙烯小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果阴性.
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昆明种小鼠不同取材部位嗜多染红细胞与成熟红细胞比值差异的研究
微核实验是检测细胞遗传损伤的常用实验方法之一.按微核形成的原理,只有进行分裂的细胞,在染色体断裂剂的作用下,才能产生并检测到微核,因此,剂量设计是否合理是能否检出染色体断裂剂的关键,如果剂量设计过高,受试物质抑制了骨髓细胞的增殖,则会出现假阴性.实验动物骨髓中嗜多染红细胞(PCE)/成熟红细胞(NCE)值的大小是用来判断骨髓细胞分裂是否受到抑制的指标之一,通常计数200个嗜多染红细胞,同时计数所见到的成熟红细胞数,求出PCE/NCE值.但该比值的大小是否受取材部位的影响,目前尚未见报道.本研究对正常昆明种小鼠股骨头和股骨腔两个取材部位的PCE/NCE值进行比较,以期为确定PCE/NCE的界值标准,准确判断骨髓细胞分裂是否受到抑制提供参考依据.
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维生素E拮抗油烟凝集物对小鼠微核率观察
为探讨烹调油烟凝集物对生物体的诱变作用,采用动物体内微核试验,观察维生素E(VE)对小鼠的肝脏血及末梢血的嗜多染红细胞(PCE)微核改变的拮抗作用.现报告如下.
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烹调油烟冷凝物致小鼠遗传毒性的研究
随着人们生活水平的不断提高,食用油从豆油逐渐转变为色拉油.尽管如此,烹调油烟仍然是生活环境中的重要污染物质.在肺癌的非吸烟病因研究中,家庭烹调油烟的危害已引起重视[1,2],烹调食物产生的油烟温度越高,油脂氧化分解越严重.有资料报道,色拉油冷凝物具有致突变作用.本文以色拉油的冷凝物为受试物,对小鼠进行肝脏血及末梢血的嗜多染红细胞(PCE)微核(MN)率的观察,并对2者的相关性进行分析,报告如下.
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香烟焦油对小鼠急慢性毒性实验研究
目的:观察香烟焦油对小鼠的急、慢性毒性作用.方法:提取香烟中的焦油,小鼠40只,分为染毒组,乙醇组和生理盐水组作对照,腹腔注射法(1次/d)染毒,连续4 d,观察小鼠活动情况并记录.4 d后,处死小鼠,取胸骨骨髓常规制片,观察骨髓PCE 细胞微核发生率.另取60只小白鼠,方法相同,连续观察小鼠30 d活动情况,后1 d解剖,观察小鼠内脏各器官颜色、体积等改变.结果:急性毒性实验小鼠出现活动能力下降、尿失禁等现象,而慢性毒性实验小鼠出现体重下降、皮肤松弛、活动减少、尾部溃疡等症状,解剖后可观察到染毒内脏各器官肺、肝、肾、胃肠道颜色、体积等改变.小鼠骨髓细胞微核表明,香烟焦油可诱导微核形成,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:香烟焦油对小鼠有较强的毒性作用,可能会对人体产生相应的危害.
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小鼠香烟尼古丁骨髓微核毒性实验的研究
目的:研究香烟成分尼古丁对小鼠骨髓细胞微核产生的影响.方法:建立小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验模型,将小鼠随机分为香烟尼古丁(低、中、高)实验组、顺铂对照组、乙醇对照组、生理盐水对照组,每组10只.采用腹腔注射给药,油镜下检测骨髓中嗜多红染细胞(PCE)微核情况及绘制量效关系曲线.结果:香烟尼古丁低剂量组和乙醇对照组的微核发生率分别为(5.23±0.77)%和(0.70±0.22)%,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).采用不同剂量香烟尼古丁染毒小鼠,其骨髓细胞微核率呈递增趋势.结论:香烟尼古丁在嗜多染红细胞微核实验中具有明显的毒性作用.
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香烟烟雾水溶物对小鼠的急性毒性和骨髓嗜多染红细胞微核率的影响
[目的] 探讨香烟烟雾水溶物对雄性健康小鼠的急性毒性作用及其对骨髓嗜多染红细胞微核率的影响. [方法] 以香烟烟雾水溶物为试验材料,用Horn's法测其LD50,进行小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验.[结果] 该香烟烟雾水溶物的LD50为56.2 mg/kg,95%可信区间为33.8～82.5 mg/kg,按毒性分级标准,该水溶性提取物的毒性为中等毒;其低、中、高 (1/8 LD50、1/4 LD50、1/2 LD50)剂量组的微核率分别为4.0‰、6.2‰、10.2‰,明显高于阴性对照组的1.8‰,并在一定范围内呈现明显的剂量-反应关系.[结论] 香烟烟雾水溶物对小鼠有较强的急性毒性,属于中等毒,可引起小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率增高,有一定的致突变作用.
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环磷酰胺、煤焦油对豫医无毛小鼠骨髓细胞微核的影响
目的:探讨豫医无毛小鼠(YYHL)及昆明小鼠骨髓嗜多染红细胞自发微核率及化学诱变剂对其微核形成的影响.方法:将小鼠分成6组,分别为YYHL组,昆明小鼠组,YYHL和昆明小鼠注射环磷酰胺组,及YYHL和昆明小鼠涂煤焦油组.采用骨髓嗜多染红细胞微核技术观察骨髓细胞微核率.结果:①YYHL嗜多染红细胞自发微核率与正常昆明小鼠比较差异无显著性(P＞0.05).②腹腔注射环磷酰胺及煤焦油涂颈背部皮肤后,YYHL和昆明小鼠骨髓微核率均显著升高(P＜0.05),但2组比较差异无显著性(P＞0. 05).结论:YYHL对煤焦油及环磷酰胺致突变作用的反应与昆明小鼠一致,是一种评价化学物遗传毒性的有效动物模型.
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高压氧对乙醇灌胃小鼠微核细胞率变化的影响
目的 研究高压氧(HBO)治疗对乙醇所致小鼠股骨骨髓嗜多染红细胞微核细胞率变化的影响,探讨HBO对乙醇所致小鼠遗传物质损伤的治疗作用.方法 将45只雄性小鼠分为对照组、模型组和HBO组,每组15只,对照组生理盐水灌胃,模型组乙醇灌胃,HBO组乙醇灌胃并进行HBO处理.取小鼠股骨骨髓制备嗜多染红细胞玻片,光镜观察并统计分析微核细胞率.结果 模型组与对照组间微核细胞率差异有统计学意义(P＜0.01);HBO组与对照组间微核细胞率差异有统计学意义(P＜0.05);HBO组微核细胞率虽大于对照组,但小于模型组,与模型组间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HBO治疗有降低由于乙醇作用而使小鼠嗜多染红细胞微核细胞率增加的效应,提示HBO治疗可能有减轻乙醇对小鼠遗传物质损伤的作用.
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2-乙氧基乙醇对小鼠骨髓细胞微核形成的影响
目的: 检测2-乙氧基乙醇(2-Ethoxyethanol,EE)的诱变性,评价其可能的潜在危害.方法: 以小鼠骨髓嗜多染红细胞(polychromatic erythrocyte,PCE)为观察对象,采用微核实验法,分别检测各处理组的微核细胞率(MNCF).结果: EE对小鼠PCE细胞有明显的微核效应,其MNCF同阴性对照组相比有极其显著的差异.结论: EE有较强的致突变性.
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苯和二硫化碳诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的研究
目的探讨苯和二硫化碳对雌性小鼠体细胞遗传物质的影响.方法采用静式吸入法分别用苯和二硫化碳染毒NIH成年雌性小鼠15 d(2 h/d),分析受试小鼠骨髓嗜多染红细胞微核细胞率.结果苯染毒低、中、高剂量组浓度分别为706、1 922、4 864 mg/m3,三剂量组的微核细胞率依次为7.2‰、7.3‰、8.3‰,与阴性对照组(2.1‰)比较有显著性差异(P＜0.05),二硫化碳染毒低、中、高剂量组浓度分别为199、651、1 209 mg/m3,三剂量组的微核细胞率依次为3.0‰、4.2‰、5.1‰,中剂量组和高剂量组与阴性对照组比较有显著性差异(P＜0.05),具有较好的剂量-效应关系.结论苯和二硫化碳均能诱导雌性小鼠体细胞微核增加.
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6种明胶胶囊药壳对小鼠骨髓细胞微核率的影响
目的：探讨6种明胶胶囊药壳的致突变性，为研究药用明胶空心胶囊的安全性提供实验数据。方法以小鼠为受试对象，利用微核实验技术检测6种明胶胶囊药壳在4种不同剂量下对小鼠骨髓细胞微核率的影响，并制作肝脏病理切片观察小鼠肝组织病理学改变。结果在临床成人使用剂量及临床成人使用剂量100倍条件下，6种明胶胶囊药壳未引起小鼠微核率的明显升高（ P＞0.05），仅在高于临床成人使用剂量的200、400和800倍情况下，有3种明胶胶囊药壳对小鼠微核率的影响有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01），但这6种明胶胶囊药壳对于小鼠肝脏均未造成有意义的病理改变。结论选用的6种明胶胶囊药壳在临床成人使用剂量及低剂量条件下没有诱导染色体损伤的遗传毒性，但在中、高剂量下，有3种明胶胶囊药壳具有致染色体损伤的效应，这种潜在的遗传毒理威胁应引起行业注意，选用优质的明胶胶囊药壳是关键。
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苯诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的研究
目的 探讨苯对小鼠体细胞遗传物质的影响.方法 采用静式吸入法染毒,将50只动物随机分成阴性对照组、阳性对照组及0.3、0.6、1.2g/m3 3个剂量组,剂量组每隔24h染毒1次,每次2h,共15d,取胸骨骨髓作微核计数,分析受试小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率.结果 苯染毒低、中、高3个剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),并呈现剂量-反应关系.结论 苯能诱导小鼠体细胞微核增加.
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低剂量X射线辐照小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的研究
目的 探讨嗜多染红细胞微核率(frequencies of micronucleated polychromatic erythrocytes, fMNPCE)的流式细胞术检测法能否作为1种自动化方法用于检测早期生物低剂量辐照后遭受的遗传损害.方法 每天1次按0.05、0.10、0.40 Gy 3个低剂量X射线辐照小鼠,连续4次,各剂量各时间点为一动物辐照组;每次辐照20 h后采用流式细胞术检测骨髓fMNPCE,观察各时间点和剂量点的微核率动态变化,同时以传统显微镜方法作为对照进行比较.结果 流式细胞术和显微镜方法均在第1天的0.05、0.10、0.40 Gy辐照组检测到骨髓fMNPCE显著升高(P<0.05),以后3 d的各剂量辐照组fMNPCE升高更为显著(P<0.01);2种方法检测结果显示均有较好的剂量、时间依赖性,并呈显著正相关性(r=0.984,P<0.01).结论 骨髓fMNPCE可作为低剂量辐射条件下的辐射生物计量检测指标,并可用流式细胞术自动化检测.
