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新疆产麻黄的RAPD分析
目的建立新疆产3种麻黄指纹图谱,进行遗传多样性分析.方法通过20个10碱基随机引物对新疆3种麻黄进行PCR扩增,用无药用价值的膜果麻黄作对照,通过计算遗传相似性系数,建立UPGMA聚类图.结果共扩增出189个多态位点,建立了他们的基因组DNA指纹图谱.结论物种间遗传差异明显,具有丰富的遗传多样性;膜果麻黄与其他3种药用麻黄的差异较大;药用麻黄中,木贼麻黄相对独立,中麻黄与兰麻黄遗传距离较近,且具有较为相同的遗传关系.
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浙江产香茶菜属植物8个居群的RAPD分析
目的从DNA分子水平上探讨香茶菜属植物种群变异特点.方法从70个随机引物中筛选出10个具有较高多态性检测能力的引物.用这10个随机引物对浙江境内3种香茶菜的8个居群进行了RAPD分析,对得出的RAPD结果应用SPSS10.0进行的聚类分析和应用CANOCO3.10进行的除趋势对应分析.结果共检测出144个位点,其中单态位点11个,占7.64%,多态位点133个,占92.36%.分析结果表明,浙江产香茶菜不同种、同一种的不同居群间存在明显的遗传分化,其中种间的差异要大于种内,大萼香茶菜Isodon macrocalyx居群间的差异要比香茶菜I.amethystoides 居群的小.结论香茶菜形态与化学成分的变异有一定的遗传学基础.
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正品和伪品大黄的RAPD指纹图谱鉴定研究
目的用RAPD方法对正品和伪品大黄进行指纹图谱的研究,为正品和伪品大黄的基原鉴定提供分子依据.方法对RAPD反应的实验体系进行了优化,并采用个体筛选的方法筛选121个引物,采用BSA的方法筛选了64个引物.结果分别得到了2个具有正品大黄的特征性条带的引物.结论该方法可靠、准确、快速、重现性好,达到了在分子水平上鉴定正品和伪品大黄基原的目的.此外,该实验亦表明BSA的方法筛选种的特征性条带的引物的效率比个体筛选引物的效率高.
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用RAPD技术评估苍术居群间的亲缘关系
用 RAPD 方法分析了苍术不同居群间的亲缘关系.选取10个10 碱基的随机引物对苍术的10个居群共83个个体进行扩增,获得100个DNA片断.用 RAPD ista nce 软件计算了不同居群间的 Jaccard 遗传距离,得距离矩阵,分别用单联法、全联法、类平均法作聚类图,结果表明,该10个居群可划分为3个类群:即类群1,大别山类群(Ta); 类群2,南苍术类群(Wu、Lu、Hu、Xu、Ca、Li);类群3,北苍术类群(Tt、Da、Lao).在这3 个类群中,南、北苍术之间的遗传距离相对较近,大别山类群与南、北苍术之间的距离则较远.根据本试验的结果及前人关于苍术精油成分差异的聚类结果,作者认为大别山类群比较特殊.
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RAPD法鉴定射干类中药
目的用RAPD技术对射干类药材射干Belamcandachinienisis及混淆品鸢尾属鸢尾Iris tectorum、野鸢尾I.dichotoma、蝴蝶花I.japonica、德国鸢尾I.germamca等5种药用植物进行分子水平的鉴定.方法CTAB法和DNeasyTM Plant Mini Kit法提取射干类药材5种原植物总DNA,以随机引物进行随机扩增.结果用OPD-08(5'-gtgtgcccca-3')等作随机扩增引物进行随机扩增时,可得到识别这些物种基因组DNA的多态片段.结论RAPD法能有效的鉴别射干类药材,把射干和鸢尾、野鸢尾、蝴蝶花、德国鸢尾等药用植物区分开.
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道地药材建泽泻的RAPD研究
目的为了探讨道地药材与非道地药材之间遗传变异的大小,并建立道地药材的品质鉴定方法.方法运用了随机扩增多态DNA(RAPD)技术,对福建、江西、四川产的泽泻科植物泽泻Alisma orientalis进行了研究.结果同种异地药材所形成的不同的居群,具有不同的遗传特征.结论RAPD技术可作为鉴别道地药材的参考方法.
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当归药材道地性的RAPD分析
目的从DNA分子水平上探讨当归药材道地性的生物学基础.方法对来自不同产地的18个当归样品,提取其基因组DNA,并进行RAPD分析.对筛选出的10个引物的RAPD结果进行聚类分析,得出18个当归样品的聚合树状图.结果显示地理分布距离越小,当归的遗传差异越小;反之,越大.但生态环境特别是小生境对当归遗传差异的作用亦不可忽视.结论为我们从分子生物学角度研究当归药材道地性提供了新的启示.
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RAPD技术在葛属药用植物分类和鉴定中的应用
为探讨葛属植物间的亲缘关系,并为分类和鉴定提供依据,采用 RAPD 技术对葛属6种植物进行分析,利用 RAPD(Version 4.0)及 PHYLIP(Version 3.5 C)软件包进行数据处理,UPGMA 法聚类分析得到系统树.结果发现,峨嵋葛与野葛间的遗传距离小,应归并为野葛,野葛与粉葛、山葛间的遗传距离大,粉葛、山葛应独立成种.DNA 指纹图谱可用于葛属植物间的鉴别.
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103甘肃产秦艽的DNA指纹图谱鉴别
目的 对产于我国甘肃省的中药秦艽的3种基源植物秦艽、麻花秦艽与小秦艽进行RAPD分析,建立具有鉴别意义的DNA指纹图谱.方法 采用RAPD分子标记对秦艽的基因组DNA进行PCR扩增,利用NTSYSpc 2.1和Popgene 3.2软件分析3种秦艽间的亲缘关系,构建树系图.结果 从80条RAPD引物中筛选出4条具有鉴别意义的多态性引物,在3种秦艽中共得到39个DNA条带,其中共有条带2条,多态条带37条.据此获得了能有效区别3种秦艽的多态性RAPD指纹谱.结论 甘肃产秦艽的3种基源植物遗传分化明显,RAPD方法能有效地将它们区分鉴别.
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中药材连翘道地性的分子生物学分析
道地药材概念的依据是药材的质量高低及产地特征［1］。资料显示，近年来道地药材，尤其以连翘（双黄连制剂的主要原材料）为代表的药材出现诸多质量方面问题，既严重影响中药材现代化的发展进程，又影响到中医临床用药的安全性［2］。故医界对连翘的化学成分进行深度分析，并建立了质量评价指标体系［3］。笔者用随机扩增多态DNA（ RAPD）方法研究山西安泽、长治以及平顺等3个地区种植的中药材连翘的道地性，与此同时采用高性能液体色谱（ HPLC）方法及WAGNER计算方法检测连翘中的甙含量指标。现报道如下。
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福建东南沿海某战区医院MRSA感染特点及基因多态性分型研究
目的：了解福建东南沿海某战区医院MRSA感染特点及基因多态性分型情况,为制定院内MRSA感染的防治策略提供分子生物学依据。方法采用头孢西丁试纸片法初步鉴定MRSA菌株,聚合酶链反应( PCR)技术检测MecA基因,终鉴定临床送检标本所检测出的MRSA菌株,并通过随机引物DNA扩增技术( RAPD)对所检测的MRSA菌株进行基因分型研究。结果经PCR对MecA基因检测,从临床标本及医护人员身上共分离出42株MRSA菌株。采用随机引物DNA扩增技术( RAPD)对细菌进行基因分型,根据同源性分析,42株临床菌株共可以分为12型。其中Ⅰ型共7株,Ⅱ型共2株,Ⅲ型共4株,Ⅳ型共4株,Ⅴ型共7株,Ⅵ、Ⅶ及Ⅷ各1株,Ⅸ型共8株,Ⅹ型共2株,Ⅺ型共3株,Ⅻ型共2株。结论本院MRSA菌株存在相似度大小不同的遗传距离,医院内存在交叉感染可能。
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 院内感染 PCR RAPD 聚类分析 -
RAPD标记在药用菊花种质鉴定中的应用
目的：探讨药用菊花类型间的遗传关系，为药用菊花资源合理保护利用和新品种选育提供理论依据，也为药用菊花DNA指纹图谱的构建奠定基础。方法：利用改良SDS方法提取药用菊花的基因组DNA，以RAPD分子标记技术，对6种药用菊花进行了遗传多样性和亲缘关系分析。结果：从8个随机引物中筛选出多态性频率高的2个引物。2个引物共扩增出17个DNA条带，其中多态性条带16个，多态性达94%，显示菊花品种内丰富的遗传多样性。扩增的多态性片段在300～1300bp之间。结论：聚类分析结果表明，利用RAPD标记可将全部供试材料区分开，得出了药用菊花种质资源在分子水平上确实存在较大差异。
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白色念珠菌磷脂酶活性与其毒力因子关系的研究
目的 探讨白色念珠菌磷脂酶活性与其毒力因子之间的关系以及与其遗传特征的相关性.方法 蛋黄平板法检测80株白色念珠菌磷脂酶活性,并测定磷脂酶高活性组、低活性组白色念珠菌的溶血活性、细胞表面疏水性、黏附上皮细胞能力及RAPD-PCR分析2组菌株的基因型特征.结果 磷脂酶阳性检出率为97.5%,2组PZ均值分别为0.639±0.043、0.847±0.079(P<0.05);2组的溶血活性、疏水率差异均无显著性(P>0.05),而磷脂酶高活性组菌株对上皮细胞的黏附力显著高于磷脂酶低活性组(P<0.05),磷脂酶活性与黏附力呈正相关(r=0.773,P<0.01).RAPD结果 表明磷脂酶活性与RAPD各电泳条带之间的回归系数不尽相同.结论 磷脂酶活性不能直接反应菌株其他毒力的情况,且RAPD分型也不能全面地反映磷脂酶这一单一的毒力特征,而是对菌株毒力特征的一个综合反映.
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山东平邑金银花三个品系RAPD分析及绿原酸含量分析
目的:分析山东平邑金银花3个品系的遗传信息和绿原酸含量,为金银花品系的研究开发提供科学数据.方法:运用RAPD分析技术和HPLC方法采集数据.结果:金银花3种品系的RAPD遗传距离结果是:新品种与鸡爪花的遗传距离较近,在聚类分支图上归为一类;毛花与鸡爪花的遗传距离稍远.绿原酸含量结果:毛花品系＞新品种＞鸡爪花品系.结论:山东平邑金银花的新品种从遗传距离上分析与鸡爪花品系的亲缘关系较近,与毛花品系的稍远;新品种的绿原酸含量介于毛花品系与鸡爪花品系之间.
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RAPD技术在中药狼毒鉴别中的应用
目的:为提高鉴别中药狼毒及同科植物和瑞香狼毒的准确性和可操作性,有必要建立一种科学的方法.方法:用分子生物学技术随机扩增多态性DNA(RAPD)对5个不同品种狼毒进行分析.结果与结论:提供了5种狼毒鉴别的RAPD扩增指纹图谱,具有鉴别意义.
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东北产药材龙胆的DNA提取与RAPD分析
用分子生物学技术随机扩增多态性DNA(RAPD)对三种不同品种的龙胆进行鉴别.结果与结论:提供了东北产三种龙胆的鉴别的RAPD扩增指纹图谱,有鉴别意义.
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RAPD技术在中药领域的研究进展
本文针对中药材应用与质量控制上中存在的问题,依据了RAPD(random amplified polymorphic DNA)的原理及其特点,着重讨论了该技术用于中药材物种遗传的多样性、物种分类学、物种的遗传育种及生药鉴定几方面的应用现状,并提出了存在的问题以及该项技术应用的未来发展趋势.
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应用RAPD快速鉴别中药材海风藤及其替代品
目的:建立一种鉴别海风藤及其替代品的新方法.方法:采用RAPD技术进行PCR扩增,筛选出适合鉴别的随机引物.结果:从62条随机引物中筛选出4条能够准确鉴别海风藤及其替代品,且具有良好的重复性.结论:RAPD技术能在DNA水平上鉴别海风藤及其替代品,是一种行之有效的方法.
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黑龙江省不同产地满山红遗传多样性的RAPD分析
目的:分析不同产地满山红遗传背景与遗传关系,建立中药满山红的RAPD分析方法.方法 CTAB法提取不同产地满山红的基因组DNA:琼脂糖凝胶电泳法检测PCR扩增产物,SPSS17.0软件进行聚类分析,NTSYS2.10e软件进行遗传距离计算.结论:从100条随机引物中筛选出10个随机引物,其扩增产物谱带多,特征好,共扩增出806条条带,多态性条带数710条,多态性比例为88.1％.结论:不同产地间的满山红存在丰富的遗传多样性,RAPD分析技术可用于鉴定满山红.
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异地板蓝根基因组DNA指纹图谱建立及RAPD-PCR反应体系优化
目的：采用RAPD法研究不同地区板蓝根基因组DNA遗传差异性，药材的真假。方法：利用RAPD（ random amplified polymorphic DNA）技术，在分子水平上对不同地区板蓝根基因组DNA进行了遗传差异性分析，同时优化板蓝根RAPD-PCR反应体系。结果：指纹图谱显示出不同地区板蓝根资源丰富的遗传多样性，可以辨别出药材的真假和优劣。结论：RAPD技术为鉴别中药材板蓝根真伪和优劣提供了现实意义，为临床安全和合理用药提供理论依据，并建立适合板蓝根RAPD-PCR的佳反应体系。
