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甲苯胺蓝染色在先天性巨结肠及其类缘病诊断中的应用
先天性巨结肠(hischsprun's disease,HD)是小儿外科常见的先天性消化道畸形之一,发病率为1/5000,男性稍高于女性,有一定的遗传易感性[1].HD的病理诊断主要依赖于HE、ACHE、NADPH和LDH染色,本实验通过甲苯胺蓝组织化学染色,并结合传统的冷冻切片HE染色,对先天性巨结肠进行快速诊断的研究来探讨HD术中诊断方法.
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冷冻切片技术在针吸细胞学诊断中的应用
细针穿刺为近年发展起来的一种简便、快速、准确的病理诊断方法,是诊断细胞学的一个分支,它在临床上的应用已越来越广泛.采用持续负压细针穿刺技术采集的标本[1],经常会有出血或含有微小组织块,当血液进入针管后马上凝固,给直接涂片带来一定的难度.为此,我们采用冷冻切片技术对细针穿刺标本进行切片检查.
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甲基纤维素胶在小组织冷冻切片中的应用
术中冷冻切片是保证快速病理诊断的重要技术手段,包埋剂是影响冷冻切片质量的重要因素之一[1].以前我们在冷冻切片中用德国产OCT包埋剂效果理想,但价格昂贵,为降低成本改用市售复合胶水做为冷冻包埋剂也能用,只是染色后切片边缘有未洗净的胶水污染,染色过快时会造成组织切片飞边甚至掉片现象,所以经摸索我们改用自制的甲基纤维素胶作为包埋剂用于小组织冷冻制片3年,取得较好效果.
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乳白胶在冷冻切片中的应用
恒温冷冻切片问世以来,人们就寻求一种理想的支持物-包埋剂.近10余年采用进口的OCT和国产包埋剂,经实践证明,较为理想,但OCT和国产包埋剂价格昂贵,不宜广泛使用.近5年来我科采用乳白胶(木胶)作为冷冻切片包埋剂,制片3000余例,适用于各种组织、穿刺标本和体液离心沉淀物.方法简便、快速、效果十分理想.现介绍如下.
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提高脑组织冷冻切片制作质量的体会
高质量的冷冻切片是确保术中冷冻病理诊断的正确性、可靠性的前提,可以有效降低术中冷冻病理诊断的风险,而高质量的脑组织切片更需要技术人员规范化的操作.现将我们在脑组织冷冻切片过程中所遇到的问题以及如何制作优质的冷冻切片进行探讨.1 材料与方法1.1 材料 选取上海交通大学医学院附属新华医院外科术中脑组织新鲜标本20例.95％乙醇酒精固定液,OCT包埋剂(Leica公司),其他试剂均按病理科常规工作配制.使用.Leica CM 3050S冷冻切片机(Leica公司).
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Harris苏木精染液配制改良法
Harris明矾苏木精是哈瑞于1900年发明的.迄今为止,它仍然是世界各国病理技术室常用、重要的HE染液之一,也是经典、历史悠久的染液,几乎所有的常规切片、冷冻切片、涂片等染色都使用这种染液.它有很多优点,但也有不尽如人意之处.如:使用期较短,一般2-3个月就要更换一次;氧化结晶多,常需要在染色前捞去浮在表面的结晶,否则会污染切片;其着染力逐渐减退,时间越长,着染力就越差.因此,我们于1998年对Harris染液的配制方法进行了改良.并经过切片、冷冻切片、涂片等5万余张病理片的试验,效果满意.
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已固定标本制作快速冷冻切片的处理方法
冷冻切片是一种省时快捷的制片方法,有利于临床医师在术中获取病理诊断结果,以便决定手术方案.由于此方法是直接冷冻,故不需固定,将取材后的新鲜组织冷冻后切片即可.但有时送检的标本已经固定,由于固定对冷冻有影响,会使切片质量不理想,甚至无法制片.为此,我们摸索出一套对已固定标本做快速冷冻的处理方法,现介绍如下.
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几种特殊脑室肿瘤的临床病理特征
脑室内肿瘤除常见的室管膜瘤和脉络膜肿瘤外,还有几种形态独特的肿瘤也常遇到,如中枢神经细胞瘤,透明细胞室管膜瘤,室管膜下瘤等.由于这些肿瘤只在近一、二十年才被人们所重视或认识,故有必要对它们的临床病理加以研究,以便(特别在冷冻切片时)正确诊断.
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盆腔包块行冷冻切片的价值及误诊原因探究
盆腔包块包括功能性、炎症性、肿瘤性和其他性质的包块,患者可因腹痛、自觉腹部增大或体检发现包块而就诊,尽管大部分盆腔包块为良性病变,但由于不能完全排除恶性病变,且恶性者预后普遍较差,使得临床上正确处理盆腔包块变得十分困难[1,2].
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提高乳腺及淋巴结冷冻制片质量探讨
准确快速的冷冻病理诊断为确定手术范围、缩短手术创面的暴露时间起到了至关重要的指导作用,而这一切工作基础是如何提高冷冻切片质量.近几年随着保乳手术的广泛推广,提高乳腺和淋巴结冷冻制片质量已经越来越重要,但由于二者组织结构的特殊性,制片质量常会伴有一些问题.根据本单位4年的工作实践,本研究摸索并总结出一些方法可以避免问题、提高切片质量,现介绍如下.
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冷冻时间对脑组织切片质量的影响
脑组织由于其组织成分的特殊性,冷冻制片的质量困扰着许多技术人员.作者对比了48例术中冷冻脑组织的不同冷冻时间的制片质量,以寻求脑组织冷冻制片佳的冷冻时间.1 材料与方法1.1 材料 选自广东省人民医院神经外科手术切除的脑组织标本48例,每例标本分5个冷冻时间进行实验.送检标本不经任何试剂处理,避免接触自来水,用纱布吸净组织表面液体.1.2 方法 采用Shondon冷冻切片机;包埋剂:OCT包埋剂由德国Leica生产.切片前先将恒冷切片机的箱体温度设定为-25℃,样品头温度设定为-14C.待新鲜的脑组织取材完后,先将冻头置入冷冻机.待冻头稍冷却,滴适量OCT包埋剂.出现一层白色冻结后,再平放脑组织.冷却时间分别为1.5、2.5、3.5、4.5和5.5 min,常规各切取6μm厚切片,黏附于洁净载玻片上,立即置入纯甲醇中固定1 min.切片水洗,Lili-mayer苏木精染色1 min,水洗,1％碳酸锂返蓝30 s,伊红染色10 s,梯度乙醇脱水,封片.整个冷冻切片过程需要8～ 10 min.
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冷冻切片制片质量控制浅析
冷冻切片大的用途是为外科手术中快速病理诊断提供有力的帮助[1].优良的冷冻切片是诊断的基础,为提高科室整体制片质量和技术水平,针对以往不注重冷冻切片质量,可能造成误诊、医疗差错与医疗事故等问题,本科室自2013年以来实行了标准化、制度化、规范化管理措施,严格执行国内冷冻切片质量评判标准,提出比标准更严格的要求和描述,并责任落实到位,效果明显,现介绍如下.
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环保型冷冻固定液对冷冻切片HE染色质量的影响
为适应冷冻切片的快速,制片过程要遵照快速冷冻、快速切片、快速固定的“三快原则”.其中,固定这一环节尤为重要,它是组织保持正常形态的关键.丙酮、95％乙醇都是在日常工作中常用的冷冻固定液,但是丙酮的慢性毒害作用以及乙醇浓度不易保持的缺点始终在冷冻制片固定领域表现不佳,环保型固定液的出现,有效地弥补了这两个缺点,但是其对于HE染色质量的影响未知,笔者就这一问题做了相应的研究.
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冷冻切片制作的质量控制
冷冻切片是在低温环境下将组织速冻,达到一定硬度后应用冷冻切片机进行组织切片的一种方法.因其具有操作简便、环境污染小和对组织抗原损伤小的特点,冷冻切片被广泛应用于临床和科研工作.因制作冷冻切片的时间和材料有限、标准要求较高,而切片质量与制片速度又直接影响着病理诊断的正确率[1],故要求病理技术人员熟练掌握冷冻切片技术,在短时间内制作出高质量的切片.冷冻切片在制作过程中会受到诸多因素的影响,笔者通过实践并查阅资料,现将制片过程中各个环节的质量控制、高质量冷冻切片应达到的标准及常见问题探讨如下.
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4种固定液对甲状腺冷冻切片固定效果的比较
甲状腺是外科手术中要求进行快速冷冻切片常见的器官之一,冷冻切片质量受多种因素影响,其中固定液的选取至关重要[1,2].作者通过比较4种常用固定液对甲状腺冷冻切片的固定效果,为临床准确诊断甲状腺疾病提供依据.1 材料与方法1.1 材料 选取2015-06--2015-11间武汉大学人民医院术中切除50例新鲜甲状腺活体标本.采用4种固定液分别为:①95％乙醇;②冷丙酮:放置于工作温度-25℃ ～-20C之间的Leica CM1950冷冻切片机中;③AA液:无水乙醇100ml、丙酮10 ml;④改良AFA液:无水乙醇75 ml、40％甲醛10 ml、丙酮10 ml、冰醋酸5ml.
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微波法制备冷切片的佳温度探讨
冷冻切片是术中快速病理诊断的主要方法,要求时间短、诊断准确,以便选择术中治疗方案.冷冻切片的质量对术中快速诊断的正确率有直接影响
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合理利用急冻剂和吸水纸提高冷冻切片的质量
冷冻切片的应用日趋广泛,对术中冷冻快速诊断尤其具有重要意义.人体不同组织中含有不同比例的水分,在制作冷冻快速切片时,可产生冰晶,导致组织、细胞形态发生明显的改变,尤其是脑肿瘤,含有更多的水分,给术中冷冻快速诊断带来困难.如何减少冰晶形成,是提高冰冷切片质量的关键[1].为此,我们在冷冻切片制作中,通过较长时间的摸索,发现合理使用急冻剂和吸水纸,可减少冰晶的形成,既可提高制片质量又缩短了冷冻快速制片的时间.现和同行交流如下.
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如何提高冷冻切片在保乳手术中的速度和效率
随着医学的发展,肿瘤切除术的方式方法发生了很大的变化.对乳腺癌患者,我院自1998年开始便采用保乳手术方法,每例患者术中一般要送10～20份组织做冷冻切片,以确定手术切除边缘是否还有癌细胞残留、可疑病灶有/无上皮重度不典型增生和前哨淋巴结是否有癌转移等,多时1天做冷冻切片检查的组织多达65份.
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免疫组化技术(四)
3 免疫组化方法这里有大量用于定位和验证组织抗原的免疫组化染色技术.选择合适的技术应基于各种研究标本的类型、研究的预处理的类型等参数,例如:冷冻切片、石蜡切片、树脂切片或细胞学制品以及所需敏感性的程度.
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GS固定染色套液与传统固定染色套液在冷冻切片制备中的比较
传统固定染色套液虽然制片技术性质稳定,但是,所采用的试剂不够环保.GS环保试剂套液弥补了此缺陷.冷冻报告的准确率取决于冷冻切片制备的成败,而固定和染色是制备中的两个关键步骤.本文通过GS套液与传统HE套液在冷冻切片制备过程中的效果比较,探讨GS固定染色套液在冷冻切片制备过程中的应用.
