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脱落细胞癌基因检测在肺癌诊断中的意义
目的用分子生物学检测手段寻求敏感的肺癌诊断新方法.方法应用多聚合酶链反应(PCR)及聚合酶链式反应-单链构型多态(PCR-SSCP)银染技术,检测56例肺癌和36例肺部良性疾病患者肺泡灌洗液和(或)胸水细胞的p53、p16及K-ras基因的突变情况,将检测结果与组织学、脱落细胞形态学诊断结果进行对比分析.结果肺癌患者肺泡灌洗液和(或)胸水脱落细胞形态学检测敏感性为57%,阴性预计值(NPV)为60%;p53阳性表达的敏感性为68%,NPV为61%;p16阳性表达的敏感性为46%,NPV为52%;K-ras阳性表达的敏感性为36%,NPV为83%;p53、p16及K-ras阳性表达的敏感性为82%,NPV为74%;p53、p16及K-ras分子生物学和脱落细胞形态学联合检测:敏感性提高至93%(P<0.05),NPV为87%(P<0.05).24例脱落细胞形态学假阴性标本中经分子生物学检测阳性16例(67%).在56例肺癌中,其中有22例同时收取肺泡灌洗液细胞和胸水细胞,结果为细胞病理学检测敏感性由57%提高到68%,细胞病理学检测加分子生物学检测敏感性由93%提高到95%.结论脱落细胞癌基因的分子生物学检测可增加脱落细胞形态学检测的敏感性,提高脱落细胞形态学的诊断价值.
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"耳垢"——小儿耳道的润滑剂
耳屎在医学上称之为耵聍,又称耳垢,是外耳道皮下组织内的耵聍腺分泌的黏糊状物质,它可维持耳道润滑,保持一定的湿度.耵聍在外耳道内和外耳道生长的耳毛能粘附和阻挡尘土、局部皮肤代谢产生的脱落细胞、飞虫等异物,起着保护外耳道和耳鼓膜的作用.正常外耳道内均有一薄层浅黄色的耵聍附着.一般情况下,只要小孩耳朵不痛不痒,听力良好,不必人工清除耵聍.在说话、吃东西或打喷嚏时,随着下颌的活动,耳道内的片状耵聍便会慢慢松动脱落而不知
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438例小儿肺炎呼吸道病毒抗原检测
肺炎是5岁以下儿童的主要疾病,目前证明大部分下呼吸道感染疾病是由细菌以外的病原体引起,其中病毒为常见.为探讨温州地区小儿肺炎呼吸道病毒的感染情况,对2005～2006年收治的肺炎患儿,进行鼻咽部脱落细胞呼吸道病毒抗原快速检测,现将结果报告如下.
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胃癌脱落细胞检查的临床意义
目的：分析胃癌脱落细胞的影响因素及与胃癌患者预后的关系。方法回顾分析D2胃癌根治术患者142例，术中均行腹膜腔脱落细胞学检查。结果142例患者中25例（17.6%）脱落细胞检查术前阳性，术后阴性，单因素、Logistic回归分析多因素分析显示肿瘤大小、浸润深度、区域淋巴结转移差异有统计学意义（P<0.05），但与性别、年龄、组织分化程度、脉管癌栓、HER2表达、术前CEA、CA199血清浓度等差异无统计学意义（P>0.05），生存分析提示患者预后不良，是预后的独立危险因素。结论脱落细胞阳性提示患者预后不良，为个体化治疗提供进一步指导。
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膀胱移行上皮癌尿脱落细胞端粒酶活性检测
[目的]检测尿脱落细胞端粒酶活性表达对膀胱移行上皮癌的诊断价值.[方法]应用PCR为基础的端粒重复片段扩增方法(TRAP-Hyb Kit)分别检测52例膀胱移行上皮癌患者及10例泌尿生殖系良性疾病患者尿脱落细胞端粒酶活性表达情况,并与尿脱落细胞学检查结果进行比较.[结果]52例膀胱移行上皮癌患者中有34例的自排尿标本中可检测出端粒酶活性表达(65.4%);尿脱落细胞学检查阳性例数为11例(11/30,36.7%);两者比较差异有显著性(P＜0.05).泌尿生殖系良性疾病的尿脱落细胞端粒酶的阳性率为10.0%.但端粒酶活性与肿瘤的分级无相关性.[结论]尿脱落细胞端粒酶活性检测作为无创性的检测方法,可作为膀胱移行上皮癌早期诊断、术后监测的一种有效手段.
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进展期胃癌患者手术前后脱落细胞及DNA异倍体阳性率分析
[目的]分析进展期胃癌患者手术前后腹腔灌洗液脱落细胞及DNA异倍体阳性率.[方法]选择接受治疗的进展期胃癌患者201例,分别采用腹腔镜(101例)和开腹下行胃癌D2根治术(100例),在手术前后分别取腹腔灌洗液,并对其进行腹腔灌洗液细胞学(peritoneal lavage cytology)即PLC检查,使用Feulgon染色,检测其脱落细胞及DNA异倍体阳性率.[结果]腹腔镜组术前腹腔灌洗液脱落细胞的检测阳性率为20.79％(21/101),DNA异倍体阳性率为28.71％(29/101);开腹组术前肿瘤腹腔灌洗液中脱落细胞阳性率为18.00％(18/100),DNA异倍体阳性率为28.00％(28/100),组间比较差异均无统计学意义.腹腔镜组术后腹腔灌洗液脱落细胞阳性率显示为9.90％(10/101),DNA异倍体阳性率为17.82％(18/101),开腹组腹腔灌洗液脱落细胞的阳性率9.00％(9/100),DNA异倍体阳性率为17.00％(17/100),与腹腔镜组患者相比差异均无统计学意义.腹腔镜组手术前后PLC和DNA异倍体的阳性率Ⅱ期均低于Ⅲ期,差异有统计学意义(P＜0.05);开腹组手术前后PLC和DNA异倍体阳性率Ⅱ期均低于Ⅲ期,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论] DNA异倍体的检测结果阳性率高于PLC,腹腔镜下和开腹下胃癌D2根治术的治疗效果相近.
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图像分析仪测定胸、腹水细胞DNA含量的应用
目的:探讨胸腹水脱落细胞的DNA含量对诊断良恶性胸腹水的应用价值.方法:应用计算机图像分析仪(ICM)测定32例恶性胸腹水脱落细胞(癌细胞、恶性间皮瘤细胞)和18例良性胸腹水脱落细胞(正常和增生间皮细胞)的DNA含量,以同一涂片内成熟淋巴细胞作对照进行DI测定、倍体分析、绘制DNA直方图,计算出其恶性细胞的检出率,并与常规脱落细胞学检查作比较.结果:胸腹水中恶性肿瘤细胞(癌细胞,恶性间皮瘤细胞)的DNA含量明显增高,多为异倍体(≥5C),DI值为(3.85±1.24).间皮细胞(增生和正常间皮细胞)的DNA含量多呈二倍体,DI值为(1.35±0.23),二者差别有显著性(P＜0.01).恶性肿瘤细胞DNA分布直方图在5C处形成主峰值,间皮细胞DNA分布直方图在2C、3C处形成主蜂值.根据DNA测定结果,其恶性肿瘤细胞检出率为87.5%(28/32),常规脱落细胞学检出率为71.9%(23/32),二者联合检查检出率为90.6%(29/32).结论:ICM具有经济、方便、准确等特点,应用其测定胸腹水脱落细胞学的DNA含量,并与常规脱落细胞学相结合,可提高恶性胸腹水的检出率,对诊断及鉴别诊断良恶性胸腹水具有重要临床意义.
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食管脱落细胞DNA增殖活性的研究
目的通过流式细胞术测定食管脱落细胞DNA增殖活性指标,以探讨其在食管癌中的诊断价值.方法用食管拉网法获得41例食管癌病人和21例非食管癌病人食管脱落细胞,制成单细胞悬液,作碘化丙啶荧光染色,记录和计算组方图、DNA指数(DI)、G2/G 1、S期比率(SPF)、细胞增殖活性指数(PI)等指标,同时结合肿瘤的临床病理学特征,并与脱落细胞常规细胞学检查结果进行对比.结果 DI:食管癌组1.31±0.23,对照组1.00±0.03;异倍体(An)出现率:食管癌组70.7%,对照组4.8%;G2/G1:食管癌组2.071±0.153,对照组1.996±0.099;SPF:食管癌组28.830±15.997,对照组5.804±4.771;PI:食管癌组37.010±13.794,对照组14.738±9.703.两组上述指标的差别均有显著性意义(P＜0.05或0.01).结论食管癌组食管脱落细胞的DI、An以及PI均较对照组明显升高.食管脱落细胞DNA增殖活性指标对食管癌普查及提高早期诊断率具有一定的应用价值.
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CellDetect(R)染色技术在宫颈脱落细胞诊断中的价值
目的探讨CellDetect(R)染色技术对阴道脱落细胞诊断及鉴别诊断作用.方法 采用CellDetect(R)染色对正常细胞和肿瘤细胞中颜色变化和细胞形态的相关性进行分析;并在子宫颈鳞状细胞癌(squmous cells carcinoma,SCC)和高级别上皮内瘤变(cervical intraepithelium neoplasia,CIN)的活检组织切片中比较CellDetect(R)染色和HE染色的效果.结果 (1)手工涂片和TCT涂片的CellDetect(R)染色均能较好的显示细胞的形态学特征,同时显示绝大多数正常鳞状上皮呈蓝色/绿色,子宫颈管上皮细胞呈鲜红色,不典型细胞与癌细胞呈红色.炎症细胞核呈红色,胞质大多数呈绿色/蓝色,红细胞胞质均呈绿色.(2)CIN和SCC的CellDetect(R)染色诊断结果和HE染色诊断结果一致.(3)对子宫颈活检组织的切片和涂片分别行CellDetect(R)染色,结果显示上皮原位细胞颜色反应相同,但CellDetect(R)染色在判断癌与间质的关系或癌间质反应不如HE染色清晰.结论 CellDetect(R)染色技术具有颜色和形态双重分析功能,适用于不同形式固定组织的细胞涂片染色,是子宫颈癌筛查和早期诊断的有效工具之一.
关键词： 子宫颈肿瘤 脱落细胞 CellDetect(R)染色技术 -
膀胱尿路上皮癌脱落细胞形态结构的定量分析
目的 定量揭示膀胱尿路上皮癌脱落细胞(urothelial carcinoma exfoliated cell,UCC)巴氏染色的形态结构特征,筛选对膀胱尿路上皮细胞癌有重要诊断价值的几何参数.方法 取107例尿液标本中500个UCC、439个尿路上皮结构不良脱落细胞(urothelium dysplastic exfoliated cell,UDC)和386个正常尿路上皮脱落细胞(uroepithelium normal exfoliated cell,UNC),巴氏染色后用计算机图像分析技术分别测试上述三类细胞质和细胞核的尺寸参数和形状参数,采用单因素方差和组间两两比较法(SNK法)分析各组细胞的测试结果.结果 尺寸参数(Ac、Ap、An、Rnp、dmaj,c、dmin,c、dmaj,n、dmin,n、c、n、Cc、Cn)和形状参数(PEc、ARn、RFFc、RFFn、FIIn)在各类脱落细胞之间差异均有显著性(P＜0.05).结论 尺寸参数和形状参数在UCC间差异有显著性,细胞形态、结构定量分析有助于这三类细胞的甄别.
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高危型人乳头瘤病毒感染的子宫颈非典型鳞状细胞中p16基因的缺失
目的：观察p16基因在高危型人乳头瘤病毒（ human papi11omavirus，HPV）感染的子宫颈非典型鳞状细胞（ atypi-ca1 squamous ce11s of undermined significance，ASCUS）中的缺失，探讨其作为子宫颈病变筛查的临床意义。方法收集27例高危型HPV-DNA检测为阳性、液基薄层细胞学（ thin-prep cyto1ogic test，TCT）诊断为ASCUS的脱落细胞标本。27例患者均在1个月内进行阴道镜检查并行组织学活检，根据组织学结果分组：对照组（包括炎症和HPV感染）7例；子宫颈上皮内瘤变（ cervica1 intraepithe1ia1 neop1asia，CIN ）组20例，其中CIN13例、CIN213例、CIN34例。制作细胞蜡块并切片，采用FISH技术检测ASCUS中p16基因缺失情况。结果 p16基因在对照组和CIN组中的缺失率分别为14.3%和85.0%，二者差异有统计学意义（ P<0.01）。结论采用FISH技术检测ASCUS细胞中p16基因缺失有助于从伴有ASCUS患者中筛选出子宫颈CIN患者。
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氯化铵去红细胞法在血性胸腹水脱落细胞学诊断中应用
脱落细胞学检查是诊断肿瘤的重要方法,但血性胸腹水中的红细胞会掩盖肿瘤细胞,给癌细胞查找造成一定的困难,造成癌细胞检出率低,临床易漏诊.用一些化学试剂加入血性胸腹水中,可以达到去除红细胞的目的,却易使其它细胞形态有所改变,尤其是癌细胞的结构不够清晰,给诊断造成困难.经过多次尝试,作者发现采用氯化铵红细胞裂解液破坏血性胸腹水中红细胞的方法制得涂片薄而清晰,便于观察,现介绍如下.
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尖底离心管再离心技术在清亮尿脱落细胞学制片中应用
尿送检标本,特别是清亮的尿标本,离心后沉淀很少,制片后显微镜下常常没有细胞,阳性率很低,非常容易造成漏诊.我们经过反复实验,发现用离心后,将沉淀物吸出后放入1.5 ml尖底离心管内再离心制片,可以容易地将细胞集中,提高了阳性率,现介绍如下.
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介绍一种胸腹水脱落细胞制片方法
胸腹水脱落细胞检查已成为诊断疾病的重要手段,特别是对术中病人,准确、快速的诊断对确定手术方案和临床治疗至关重要[1].为了提高胸腹水脱落细胞检测阳性率、缩短制片时间,笔者摸索出一种简便、快速的方法.
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粪便脱落细胞制片方法及免疫组化染色的改进
目前大肠癌的诊断方法很多, 但均存在着患者痛苦大、价格昂贵等问题.为此,我们参考国外文献采用粪便(以下简称便)脱落细胞学检查诊断大肠癌,达到了细胞学阳性率高,无假阳性等较好的诊断效果.本实验共收集109例便脱落细胞,其中恶性肿瘤 38例(大肠癌 37例, 淋巴瘤 1例);良性病变 21例(含炎症、息肉及腺瘤);健康者50例.便脱落细胞学采用HE染色法,免疫组织化学染色采用即用型S-P法.现将制片方法、免疫组织化学染色的改进及结果报道如下.
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UroVysion荧光原位杂交技术在尿路上皮癌细胞学检测中常见问题分析
尿路上皮癌是泌尿系统为常见的恶性肿瘤[1].近年来,尿路上皮癌的发病率呈逐年上升趋势,且易复发.尿细胞学检查及膀胱镜/输尿管镜检是诊断尿路上皮癌的常见手段.前者对低级别尿路上皮癌的敏感性偏低,且易受结石、炎症等因素的影响而出现假阳性结果;后者则为有创检查,费用昂贵且不易识别微小肿瘤[2-3].遗传学研究表明尿路上皮癌易发生染色体畸变和染色体数目异常.其中3和17号染色体的多体性、7号染色体的三体性、9p21基因的杂合性缺失与尿路上皮癌的发生及复发显著相关[4].荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是通过用荧光标记的单链核苷酸探针,按碱基互补原则和细胞核内与之同源的DNA靶序列结合,在荧光显微镜下观察是否有染色体变异的技术,具有快速、简便、结果稳定、可重复性好、敏感性高、特异性强等优点,是当前辅助诊断众多肿瘤的重要方法[5-6].目前,UroVysion FISH法已通过美国FDA批准上市用于临床检测尿液脱落细胞,是诊断尿路上皮肿瘤及评估复发的重要方法,在全国已广泛开展.
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送检时间对脱落细胞形态影响的定量研究
离体的脱落细胞,随着离体时间的增加而逐渐自溶,其细胞形态发生较大改变而影响观察,但离体时间对脱落细胞形态的影响至今缺乏科学定量分析,本实验应用CMIAS-007真彩色图象分析仪,对不同时间离体脱落细胞标本进行定量分析,以发现佳的送检时间,为临床合格地送检脱落细胞标本提供科学的依据.
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胸腔镜在渗出性胸膜炎病因诊断中的价值探讨
渗出性胸膜炎是呼吸内科常见的疾病，目前临床主要依靠胸水检查明确病因，如腺苷脱氨酶、癌胚抗原、脱落细胞、结核菌涂片等，但阳性率低。内科胸腔镜的应用，可以在直视下观察并活检胸膜［1，2］，无锡市第五人民医院2008年1月至2011年12月对222例渗出性胸膜炎患者开展了内科胸腔镜检查，探讨如下。
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COPD合并肺癌63例的临床特征分析
目的 探讨老年COPD合并肺癌的临床特点.方法 分析临床63例COPD合并肺癌的临床资料.结果 COPD和肺癌在发病机制上有相关性,两者并发时给诊断和治疗带来很大的困难.结论 COPD合并肺癌诊断重要的还是早期的胸部X摄片及纤支镜检,痰找癌脱落细胞本资料阳性率相对较低,一旦确诊以营养支持、对症治疗、提高机体免疫力、改善肺功能及生存质量为主.
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影响痰标本采集质量的因素分析及对策
痰检验的结果对呼吸系统疾病的诊断和临床用药具有重要的指导作用,痰标本的质量是培养阳性率的关键.为提高痰标本采集质量,笔者就我院呼吸内科2007年1月～2009年3月本院呼吸内科呼吸道感染患者1023例,送检的痰标本943例,送检率92.18%.取痰标本查找抗酸杆菌、真菌、细菌`培养及药物敏感试验,痰查脱落细胞.
