首页 > 文献资料
-
磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞基因表达谱的影响
目的研究磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞基因表达谱的影响,探讨环境甲状腺素干扰物的作用机制.方法指数生长期细胞经2.0μg/ml磺胺二甲嘧啶处理24h后,用TRIzol法提取RNA,用9753位点的cDNA芯片检测基因表达情况,实验组和对照组细胞分别用Cy3 dCTP和Cy5 dCTP标记,计算Cy3和Cy5的比值,找出差异表达基因.结果芯片经扫描分析后,发现表达有差异的基因共有679条占芯片上基因总数的7.0%,其中395(4.0%)条基因表达增加,284(3.0%)条基因表达下降,涉及基因表达调控、细胞周期调控、细胞免疫,细胞代谢等众多事件.结论磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞的毒性效应,其机制涉及多种基因.
-
高效液相色谱法测定鸡肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑
报道了HPLC法测定鸡肌肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑,样品中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑用乙腈-三氯甲烷混合溶剂提取,经过净化后进行HPLC分析.本方法以0.01mol/L磷酸盐缓冲液∶甲醇∶冰乙酸(75.9∶23∶1.1)为流动相,在波长270nm测定.鸡肉中加标平均回收率为:磺胺二甲嘧啶79.0%～86.4%,相对标准差3.6%～9.7%;磺胺甲噁唑74.7%～86.5%,相对标准差3.5%～7.9%.
-
围生期接触磺胺二甲嘧啶对子代大鼠甲状腺功能的影响
目的 研究围生期母体接触磺胺二甲嘧啶对子代大鼠甲状腺功能的影响.方法 受孕母鼠在受孕第7日起至哺乳期结束每天分别给予磺胺二甲嘧啶0、50、100和200mg/kg,HE染色观察20日龄子代大鼠甲状腺的组织病理学变化,并用免疫组织化学染色观察甲状腺内核增殖抗原的表达.结果 各染毒剂量组子代大鼠甲状腺滤泡细胞出现不同程度的增生表现,核增殖抗原表达阳性细胞数显著高于对照组(P<0.05).结论 磺胺二甲嘧啶可通过母体干扰子代大鼠甲状腺功能.
-
畜禽肌肉、内脏及虾中磺胺二甲嘧啶残留量的检测技术研究
为了快速、简便、灵敏地监测畜禽肌肉、内脏及虾中的磺胺二甲嘧啶残留,建立了高效液相色谱法快速检测技术.动物组织中的磺胺二甲嘧啶用二氯甲烷超声提取3次,提取液与2%硫酸钠水溶液进行液-液分配,下层有机相经脱水、浓缩后用0.02 mol/L盐酸溶解浓缩瓶中残留物,以正己烷去除脂溶性杂质,经0.45 μm滤膜过滤后供HPLC测定.结果表明本方法的线性范围为0.2～3.0 μg/mL,方法的低检出浓度为2.1 μg/kg,在50～100 μg/kg的加标水平,方法平均回收率为76.6%～93.6%,相对标准偏差为4.4%～8.4%.该方法适用范围广,回收率高,检测限低,简单易行,易于在基层推广应用.
-
磺胺二甲嘧啶间接竞争化学发光酶免疫分析法的建立及应用
目的 建立一种更加灵敏的磺胺二甲嘧啶(SM2)免疫学检测方法.方法 本研究制备抗SM2单克隆抗体(SM2-mAb),用于建立SM2间接竞争化学发光酶免疫分析法(SM2-CLEIA),并检测主要动物食品中SM2残留.结果 本研究制备的SM2-mAb为IgG2b亚类,亲和常数为0.12×107 L/mol;SM2-CLEIA曲线在0.1～1 000 μg/L之间呈现良好的线性关系,相关系数r2=0.990 4,半数抑制浓度(IC50)为4.006 μg/L,检测限为0.174 μg/L,添加回收率为94.41％～104.40％,批内和批间变异系数分别为3.07％和8.22％,与磺胺脒等药物无交叉反应,与SM2-ELISA试剂盒的阴阳性符合率为100％.结论 建立了灵敏、特异、准确、检测范围宽的SM2-CLEIA检测方法.
关键词： 磺胺二甲嘧啶 间接竞争化学发光酶免疫分析法 兽药残留 检测 -
磺胺类药物的毛细管高效液相色谱与电色谱研究
目的研究毛细管高效液相色谱(μ-HPLC)和毛细管电色谱(CEC)分离磺胺类药物,建立药物微分离分析方法.方法用ODS柱为固定相,甲醇和2 mmol*L-1磷酸缓冲液(pH 3.0～7.0)为流动相,电压为0～-15 kV,流速为10 μL*min-1,紫外检测波长254 nm.结果μ-HPLC在甲醇-2 mmol*L-1磷酸缓冲液(30∶70),pH 3.0时5种磺胺类药物实现基线分离;CEC在电压为-5 kV,甲醇-2 mmol*L-1磷酸缓冲液(30∶70),pH 5.0时5种磺胺类药物实现基线分离.结论电渗流随甲醇含量、缓冲液浓度增加而下降,随pH值、电压的增加而增加;溶质的保留值(k)随甲醇含量、缓冲液浓度、电压的增加而下降,随电压增加下降明显的是TMP,随pH值变化较复杂.在相同条件下对5种磺胺类药物的分离,μ-HPLC需67 min,CEC只需25 min,后者更适合于磺胺类药物的快速分离分析.
-
磺胺二甲嘧啶的二阶导数差示脉冲极谱法定量研究
本文研究建立了磺胺二甲嘧啶及其制剂的二阶导数差示脉冲极谱定量测定方法,磺胺二甲嘧啶在乙醇-硼酸-氯化钾缓冲液-水(70:2:28)的底液中,于-1.560V(vs Ag/AgCl)处出现良好的二阶导数差示脉冲极谱峰,在0.06-0.6mmol/L范围内磺胺二甲嘧啶浓度与其峰幅度值呈非常显著的线性关系(p＜0.01),检测限为9.2mmol/L.
关键词： 磺胺二甲嘧啶 磺胺二甲嘧啶片 二阶导数差示脉冲极谱法 含量测定 -
磺胺二甲嘧啶有机溶剂残留的GC测定
目的:建立磺胺二甲嘧啶合成中所用有机溶剂丙酮残留量的测定方法.方法:采用毛细管气相色谱法,溶液直接进样,氢火焰离子化检测器(FID),以二甲基亚砜为溶剂,色谱柱为Supelcowax-10(30 m×0.32 mm,0.5μm),进样口温度160℃.检测器温度250℃,柱温120℃,载气为氮气.结果:在该色谱条件下丙酮与二甲基亚砜能达到完全分离,测得丙酮在2.08～6.25 μg/ml范围内线性关系良好(r=0.996 8),平均同收率分别为100.40%(RSD=1.10%).结论:该法简便、灵敏,易操作,可以作为磺胺二甲嘧啶原料药中有机溶剂残留量的检测.
-
围生期接触磺胺二甲嘧啶对子代大鼠海马神经营养因子家族表达的影响
目的 了解妊娠中晚期和哺乳期接触磺胺二甲嘧啶对子代大鼠海马内神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的影响.方法清洁级SD母鼠在受孕第7日起至哺乳期结束分别每日喂饲磺胺二甲嘧啶50、100和200mg/kg,取其30日龄仔鼠的大脑进行免疫组化染色,观察海马内NGF和BDNF的表达.结果 大脑的免疫组化分析发现,50、100、200mg/kg组子代大鼠海马Cal和CA3区NGF表达的积分光密度值显著低于对照组(P＜0.05),200mg/kg剂量组BDNF表达的积分光密度值显著低于对照组(P＜0.05).结论 磺胺二甲嘧啶喂饲染毒围生期母鼠,可能通过降低大鼠体内的甲状腺素浓度使脑组织NGF、BDNF表达下调,进而影响大脑的正常发育及功能.
-
磺胺二甲嘧啶对大鼠早期身体及智力发育的影响
目的研究受孕中晚期及哺乳期母体接触磺胺二甲嘧啶对子代大鼠早期身体及智力发育的影响.方法受孕母鼠在受孕第7天起至哺乳期结束分别给予磺胺二甲嘧啶0、50、100、200mg/(kg·d),观察F1代大鼠体重及开眼时间,测定各组出生后不同天龄大鼠的血清游离T4及TSH水平,并用水迷宫实验检测各组20～30天龄大鼠的学习和记忆功能.结果实验组F1代大鼠血清游离T4水平低于对照组,同时发现实验组T1代大鼠体重降低,开眼延后,以及学习记忆功能障碍,均表现出剂量-反应关系,尤其是100、200mg/kg剂量组与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论发育期接触磺胺二甲嘧啶,可以通过干扰体内甲状腺素水平从而影响大鼠身体及智力的发育.
-
甲状腺素干扰物对甲状腺滤泡细胞分泌甲状腺球蛋白功能的影响
目的了解几种典型甲状腺素干扰物对甲状腺滤泡(FRTL-5)细胞分泌甲状腺球蛋白功能的影响,探讨其干扰甲状腺素水平的细胞学机制及建立甲状腺素干扰物甄别方法的可行性.方法将大鼠FRTL-5细胞体外培养后接种于24孔培养板,每孔细胞数2×105个,待细胞贴壁后分别加入受试物丙硫氧嘧啶、叶枯宁[N,N'-甲撑-双(2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑)]、磺胺二甲嘧啶和杀草强,各设1组溶剂对照,置CO2孵箱培养48 h后,每孔取1 ml培养液,用放射免疫法测定甲状腺球蛋白的浓度.结果4个实验组的甲状腺球蛋白浓度与对照组相比均降低,差异有显著性(P＜0.05),且可能存在剂量-效应关系.结论降低甲状腺细胞合成或分泌甲状腺球蛋白可能是这4种甲状腺素干扰物的作用机制之一.FRTL-5细胞分泌甲状腺球蛋白的功能是一个相对灵敏的指标,与其他体内体外实验结合可用于甲状腺素干扰物的一阶段甄别(初筛)方法.
-
日本动物性食品中动物用药残留量标准
日本动物性食品中动物用药残留量标准表动物用药名称残留量标准(mg/kg)抗生素类土霉素乳，鱼贝类、生食牡蛎牛、猪、羊、马、鸡、鸦、火鸡(肉、脂肪)牛、猪、羊、马、鸡、鸦、火鸡(肝)牛、猪、羊、马、鸡、鸦、火鸡(肾)鸡蛋0.100.100.300.600.20螺旋霉素乳1）、鱼贝类牛1）、鸡1）、猪2）(肉) (脂肪)牛、猪、(肝) (肾)鸡肾0.200.200.300.600.300.80青霉素G(包括普鲁卡因青霉素G)3)乳牛、猪、鸡(肉、肝、肾)0.0040.05合成抗菌剂喹喔啉-2-羧成4)(卡马氧)猪肉羊肝0.0050.030磺胺二甲嘧啶乳牛、猪、羊、马、鸡、鸦、火鸡(肉、脂肪、肝、肾)0.0250.10驱虫剂氯氨菲啶乳，牛(肉、脂肪)牛肝牛肾0.100.501.0伊维菌素5)牛脂肪猪、羊、马(脂肪)牛肝猪、羊、马(肝)0.040.0200.100.015氯氰磺柳胺牛肉、肝羊肉、肝牛(脂肪、肾)羊脂肪羊肾1.01.53.02.05.0噻苯咪唑6)乳牛、猪、羊(肉、脂肪、肝、肾)0.100.10三氯苯咪唑7)牛肉牛脂肪羊(肉、脂肪、肝、肾)牛(肝、肾)0.200.100.100.305-丙基磺酰基-1H-苯并咪唑-2-胺8)(丙硫咪唑)乳牛、猪、羊、马、鸡、鸦、火鸡(肉、脂肪)(肝、肾)0.100.105.0动物用药名称残留量标准(mg/kg)氟苯咪唑猪(肉、肼)鸡、鸦、火鸡(肉)鸡、鸦、火鸡(肝)鸡蛋0.0100.200.500.40moxidecfin牛、鹿(肉)羊肉牛、羊、鹿(脂肪)羊、鹿(肝)牛、羊、鹿(肾)0.020.050.500.100.05激素类折仑诺牛肉牛肝0.0020.01α-醋酸脱立波9)牛肝0.01β-醋酸脱立波9)牛肉0.002注：1.螺旋霉素和新螺旋霉素之和2.螺旋霉素等价(抗菌活性物)3.以青霉素G计4.卡巴氧的残留指标化合物5.以22，23-DihydroavermecTin B1a的残留值表示6.噻苯咪唑和5-羟基噻苯咪唑之和7.作为5-Chloro-6-（2′，3′-Dichlorophenoxy)-benzimidazole-2-one8.丙硫咪唑的残留指标化合物9.醋酸脱立波的残留指标化合物
-
三氯乙烯药疹样皮炎个体易感性指标的研究
目的 探索磺胺二甲嘧啶检测N-乙酰基转移酶2 (NAT2)代谢分型作为三氯乙烯(TCE)药疹样皮炎的个体易感性指标,用于TCE接触劳动者上岗前职业健康检查禁忌证的筛选,减少TCE药疹样皮炎的发生概率.方法 比较17例患者和52例健康TCE接触工人N-乙NAT2代谢型分布,并计算相对危险度;对NAT2慢代谢型劳动者进行行政干预,了解干预效果.结果 NAT2代谢型在2组间的分布差异有统计学意义(P＜0.01),且NAT2慢代谢型出现三氯乙烯药疹样皮炎的危险性比快代谢型高(OR=10.50;95％ CI =2.644 ～41.695).干预前后发病率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NAT2代谢分型可能是影响三氯乙烯药疹样皮炎个体易感性的重要原因,利用磺胺二甲嘧啶检测NAT2代谢分型可能可以用于三氯乙烯接触职业禁忌的筛查.
-
磺胺二甲嘧啶竞争抑制ELISA法检测
磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine,SM2)作为一种广谱抗生素,普遍应用于医药(抗球虫药)、畜牧(作饲料添加剂以提高畜禽抗病力)以及水产养殖中(用于鱼、虾、蟹细菌性疾病),预防和治疗细菌感染性疾病[1].短时间大剂量或长时间小剂量的作用可引起急性或慢性中毒;能够诱发人的甲状腺癌和影响机体泌尿系统、免疫系统,破坏肌肉和肾脏等组织,并具有三致作用[2],是国家农业部继克伦特罗后规定进出口检测必检项目之一.
-
磺胺二甲嘧啶完全抗原的制备及鉴定
目的 制备磺胺二甲嘧啶(Sulfadimidine,SM2)完全抗原,并进行鉴定.方法 采用重氮化偶联法制备SM2免疫抗原(SM2BSA)和检测抗原(SM2OVA),定性和定量分析偶联后的完全抗原.并制备SM2单抗.结果 经1%琼脂糖凝胶电泳和10%SDS-PAGE分析表明,完全抗原SM2-BSA和SM2-OVA偶联成功;SM2与载体蛋白BSA和OVA的分子结合比分别为23:1和17:1;SM2-BSA和SM2-OVA的蛋白浓度分别为3.24和2.29 mg/ml;完全抗原SM2-BSA能刺激小鼠产生高效、特异的抗SM2抗体;SM2单抗与OVA和BSA无交叉反应.结论 已成功制备了完全抗原SM2-BSA和SM2-OVA,为下一步建立灵敏度更高、特异性更强、操作更简便的免疫学检测方法奠定了基础.
-
磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及其鉴定
目的 制备磺胺二甲嘧(Sulfadimidine,SM2)啶单克隆抗体,并对其进行鉴定.方法 经小鼠腹腔免疫SM2-BSA抗原,采用常规技术进行细胞融合,间接竞争ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,有限稀释法进行亚克隆,硫酸铵-辛酸法纯化抗体,并鉴定其抗体效价、杂交瘤细胞染色体数量、相对分子质量、抗体亚型、亲和力和特异性.结果 筛选到1株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株3D7,细胞培养液上清和抗体效价分别为1:6.4×102和1:1.28×105;纯化后3D7抗体效价＞1:128 000,杂交瘤细胞染色体平均数为50±2对,分泌的抗体属于IgG1亚类,相对分子质量为164280,亲和常数为6.09×108M-1,与6种磺胺类药物及青霉素、庆大霉素和泰乐霉素交叉反应IC5o大于1 mg/ml,交叉反应率小于0.01%.结论 已成功制备了SM2单克隆抗体,该抗体能满足建立免疫学检测方法的需要.
-
围生期喂饲母鼠磺胺二甲嘧啶对F1代仔鼠空间辨别能力和大脑ChAT活性的影响
[目的] 了解妊娠中晚期和哺乳期母体接触磺胺二甲嘧啶对子代大鼠空间辨别能力及脑内胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的影响.[方法] SD大鼠在受孕第7天起至哺乳期结束分别每日给予磺胺二甲嘧啶0、50、100和200 mg/kg,用水迷宫实验检测各组20～30日龄仔鼠的空间辨别能力,同时取30日龄仔鼠的大脑进行免疫组化染色,观察脑内ChAT的表达.[结果] 染毒组仔鼠出现空间辨别能力障碍,尤其是100、200 mg/kg剂量组与对照组相比到达终点时间显著延长,错误次数显著增多(P<0.05).大脑的免疫组化分析发现,染毒组仔鼠大脑皮质和海马区ChAT的表达降低,尤其是100、200 mg/kg剂量组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).[结论] 给围生期母鼠喂饲磺胺二甲嘧啶可能通过降低大鼠体内的甲状腺素浓度,影响脑内ChAT的水平,终造成仔鼠对空间辨别能力的学习和记忆障碍.
-
磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞合成、分泌甲状腺球蛋白的影响
[目的]研究磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞株合成、分泌甲状腺球蛋白的影响,并探讨FRTL-5细胞株用于筛选环境甲状腺素干扰物的可能性.[方法]FRTL-5细胞分别经0.5、1.0、2.0、4.0、和8.0 μg/ml磺胺二甲嘧啶染毒处理48h后,用MTT实验检测磺胺二甲嘧啶对细胞活力的影响以确定染毒浓度;以MTT实验大无作用浓度作为高染毒浓度,另设中、低浓度共3组染毒细胞,用放射免疫法测定染毒48h后培养液中细胞分泌甲状腺球蛋白的浓度;用活细胞爬片的免疫组化染色观察高浓度处理组细胞胞质中合成甲状腺球蛋白的表达水平,并用透射电镜观察细胞的超微结构.[结果]根据MTT实验,确定染毒浓度为0.5、1.0和2.0μg/ml,随磺胺二甲嘧啶浓度的增大,FRTL-5细胞培养液中甲状腺球蛋白的浓度逐渐降低,其中1.0μg/ml浓度组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),2.0μg/ml浓度组培养液中未能检出甲状腺球蛋白;免疫组化染色可见染毒组细胞胞质中合成的甲状腺球蛋白表达显著减弱,图像分析结果显示其灰度值的差异有统计学意义(P＜0.05);细胞超微结构观察发现染毒组细胞出现粗面内质网扩张.[结论]通过损伤甲状腺滤泡细胞的粗面内质网,而影响甲状腺球蛋白的合成与分泌,这可能是磺胺二甲嘧啶干扰甲状腺功能的机制之一;FRTL-5细胞培养液中甲状腺球蛋白的浓度可以作为体外筛选环境甲状腺素干扰物的敏感指标之一.
-
HPLC法测定小儿安散中磺胺脒及磺胺二甲嘧啶的含量
以HPLC同时测定小儿安散中磺胺脒(SG)及磺胺二甲嘧啶(SM2)的含量.用C18柱,水-甲醇-冰醋酸(69:30:1)为流动相,检测波长为265 nm.该法能很好地分离被测组分,被测组分的线性关系良好,回收率满意.该法简便可靠、重现性好.
-
舟山眼镜蛇毒细胞毒素-F对人鼻咽癌细胞和乳鼠心肌细胞的抑制作用
目的观察舟山眼镜蛇毒细胞毒素-F(CTX-F)对人鼻咽癌细胞(CNE)和乳鼠心肌细胞的抑制作用,了解CTX-F对人癌细胞株的选择性抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法以磺胺邻二甲氧嘧啶法观察CTX-F 0.625,1.25,2.5,5和10 μg/mL对体外培养CNE和乳鼠心肌细胞的杀伤作用及作用的量效关系,同时观察CTX-F作用0.5,1,2,4和8 h的时效关系,并比较CTX-F对上述两种细胞作用的差异;采用透射电镜观察CTX-F对CNE细胞形态的影响.结果 CTX-F在0.625 μg/mL作用0.5 h时即可抑制CNE细胞的生长,生长抑制率约为7%,10 μg/mL作用0.5 h,生长抑制率即可达70.3%,作用存在明显的剂量依赖性,其IC50(μg/mL)为1.52.CTX-F作用0.5 h对CNE细胞的IC50为3.83,8 h为1.53,有明显的时效关系.CTX-F乳鼠心肌细胞也有破坏作用,但敏感性较低,IC50为5.92,约为CNE细胞的4倍.CNE细胞经CTX-F(0.625 μg/mL)作用0.5 h后,电镜下可见到细胞核内染色质边集或固缩成团聚集在细胞的一侧,时间延长,可见细胞死亡.结论舟山眼镜蛇毒CTX-F对CNE细胞有剂量和时间依赖性杀伤作用,其敏感性高于乳鼠心肌细胞.
