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多重荧光PCR结合Allglo探针技术检测艰难梭菌相关毒素基因
目的 采用多重荧光PCR结合Allglo探针技术,建立一种快速、特异、灵敏的鉴定艰难梭菌相关毒素基因的方法,并对浙江杭州地区腹泻患者的产毒型艰难梭菌感染现状进行调查研究.方法 应用型研究.针对艰难梭菌毒素tcdA和tcdB基因设计引物和相应的Allglo探针,优化PCR扩增体系,并评价其特异性、灵敏度、重复性.收集2012年8至12月杭州市第一人民医院的门诊腹泻患者粪便标本共180份,对粪便中携带tcdA和tcdB基因的产毒型艰难梭菌进行鉴定,同时通过对tcdA和tcdB基因直接测序进一步验证荧光PCR检测结果的可靠性.结果 本试验建立的结合Allglo探针的多重荧光PCR方法可同时、准确、特异地鉴定艰难梭菌tcdA和tcdB基因,灵敏度可达10 CFU/ml.定量检测tcdA基因的循环阈值(Ct)值变异系数分别为2.30％、0.42％、0.81％,检测tcdB基因的Ct值变异系数分别为1.91％、1.02％、1.18％,均小于5％.在180份腹泻粪便样本中,检测出26份阳性样本,阳性率为14.4％,其中tcdA和tcdB毒素基因均阳性的样本为23份(23/26,88.5％),仅tcdA毒素基因阳性的样本为2份(2/26,7.7％);仅tcdB毒素基因阳性的样本为1份(1/26,3.8％).同时,采用直接测序方法对样本进行扩增检测和序列比对,与荧光定量PCR结果完全一致.结果显示浙江杭州地区腹泻患者感染的产毒型艰难梭菌以同时携带tcdA和tcdB毒素基因的菌株为主.结论 本研究建立的Allglo探针的多重荧光PCR方法可用于临床上快速、准确地检测产毒型艰难梭菌.
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与胃十二指肠溃疡关系的病例对照研究
目的本文从流行病学角度研究西安地区幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A(CagA)阳性Hp菌株感染与胃十二指肠溃疡发病的关系.方法采用病例对照研究方法,病例组与对照组的配比比例为1:2.病例组为本院消化科自1997-10/1998-10连续住院的患者,经内镜检查及病理检查证实为活动期胃溃疡和(或)十二指肠溃疡.对照组分为两组,对照1组为同期住院的本科及其他科住院的非胃十二指肠疾病患者,对照2组为同期普查健康人群.病例组与对照组的配比因素为性别、民族、年龄(相差5岁以内).采用问卷调查,内容涉及与胃十二指肠溃疡发病可能有关的32个因素,对所有因素进行量化,应用SAS软件进行处理.CagA阳性Hp感染的检测结果分析采用X2检验.对所调查因素首先进行1:1及1:2单因素条件Logistic回归分析,有显著性意义的因素,计算近似相对危险度(odds ratio,OR)及其95%的可信区间(confidenceinterval,CI).两因素协同作用采用分层分析方法.对单因素分析时作用较大及调查结果较准确的因素,用多因素条件Logistic回归分析.血清中抗CagA抗体的检测采用斑点金免疫渗滤法(DIGFA).结果①在胃溃疡组与对照1组及对照2组的配对研究中,胃溃疡组的CagA阳性Hp感染率显著高于两个对照组,OR分别为5.0与6.5,P分别＜0.05及＜0.01.②在十二指肠溃疡组与对照1组及对照2组的配对研究中,十二指肠溃疡组的CagA阳性Hp感染率显著高于两个对照组,OR分别为9.33与11.00,P分别＜0.05及＜0.01.③1:1及1:2单因素及多因素Logistic回归分析表明,CagA阳性Hp感染、吸烟、饮酒、食酸辣食物、生活不规律、精神因素等因素与胃十二指肠溃疡发病呈正相关,而按时进餐与胃十二指肠溃疡发病呈负相关.CagA阳性Hp感染与胃溃疡及十二指肠溃疡的发生具有密切的相关性(OR=16.61-84.49).④双因素分层分析中,吸烟、饮酒、生活不规律、精神因素、食酸辣食物等因素与CagA阳性Hp感染之间作用相互独立,但在胃十二指肠溃疡病的发生中具有协同作用.结论消化性溃疡的发生是众多因素共同作用的结果,CagA阳性Hp菌株感染是引起胃溃疡及十二指肠溃疡多因素病因学中一个非常重要的、危险的因素.重视CagA阳性Hp菌株的研究,对预防和治疗消化性溃疡具有重要的临床意义和社会意义.
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幽门螺杆菌外膜泡在动脉粥样硬化形成中的作用
幽门螺杆菌感染与冠心病的发生密切相关,幽门螺杆菌分泌的细胞毒素相关基因A (cytotoxin-associated gene A,CagA)蛋白参与动脉粥样硬化的发生.作为革兰阴性杆菌内毒素的重要载体,外膜泡具有侵袭力强、携带毒素稳定性好的特性.幽门螺杆菌释放的外膜泡携带CagA蛋白突破胃黏膜上皮细胞屏障后入血,进一步作用于血管内皮细胞,通过一系列炎性反应导致血管内皮功能紊乱,促进动脉粥样硬化的形成.我们就幽门螺杆菌外膜泡在动脉粥样硬化形成中的作用及其机制作一简要综述.
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老年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者CD8+ T细胞功能的变化
目的 探讨CD8+ T细胞在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)发病中的作用.方法 选取60岁以上的老年人为观察对象,均行多导睡眠监测(PSG),按PSG结果将其分为健康对照组17例、轻度OSAHS组21例、中度OSAHS组20例和重度OSAHS组17例.于患者早晨睡醒后采外周静脉血2 ml,分离单个核细胞.流式细胞仪测定活化CD8+ T细胞的百分比、CD8+ T细胞内肿瘤坏死因子α(TNFα)及穿孔素的表达.部分中、重度OSAHS患者经持续气道正压通气(CPAP)治疗后复查上述指标.结果 (1)健康对照组与轻、中、重度OSAHS患者活化的CD8+ T细胞/CD8+ T细胞的百分比分别为7.5%±0.7%、8.3%±0.8%、12.3%±1.8%和13.4%±2.0%,轻度OSAHS患者与健康对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而中、重度OSAHS患者与健康对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);随着OSAHS患者病情的加重,活化的CD8+ T细胞/CD8+ T细胞的百分比则随之升高,各OSAHS组两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)CD8+ T细胞表达TNFα的阳性率,轻度OSAHS患者与健康对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而中度及重度OSAHS患者较健康对照组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01);且随病情的加重,CD8+ T细胞表达TNFα的阳性率更高.CD8+ T细胞表达穿孔素3组患者均较健康对照组明显增高,差异有统计学意义(均为P＜0.01),且随病情的加重,CD8+ T细胞表达穿孔素也明显增加.(3)部分中、重度OSAHS患者经CPAP治疗后,CD8+ T细胞胞内表达TNFα及穿孔素明显减少.结论 OSAHS患者活化的CD8+ T细胞数目增多,产生炎症介质及细胞毒物质增加,这些可能在OSAHS的发病过程中起作用.
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金黄色葡萄球菌侵袭性感染分离株细胞毒素与侵袭毒素基因研究
金黄色葡萄球菌不仅可致皮肤软组织感染,并可致败血症、骨髓炎、关节炎等侵袭性感染[1-4].为了解金黄色葡萄球菌细胞毒素基因和侵袭性毒素基因的状况以及与患者临床特征的关系,我们对南京医科大学附属淮安第一医院住院患者无菌部位体液分离的一组金黄色葡萄球菌,进行了10种细胞毒素基因与9种侵袭毒素基因检测,并对患者的临床资料进行了分析.
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转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞瘤苗体外诱导抗肿瘤免疫应答的研究
目的研究转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗体外诱导淋巴细胞特异性杀伤活性及刺激同系小鼠脾细胞产生细胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的能力.方法采用脂质体介导法将真核表达质粒pCDNA3.1(+)-m4-1BBL导入小鼠肝癌细胞Hepa1-6,经G418筛选后获得稳定高表达克隆,以丝裂霉素C(MMC)处理后,制成肿瘤细胞疫苗(TCV),经体外与同系小鼠脾淋巴细胞共同培养后,测定淋巴细胞特异性杀伤活性及对脾细胞产生细胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的影响.结果转染4-1BBL的Hepa1-6细胞能够高表达4-1BBL蛋白,并且经MMC处理后制成的瘤苗在培养48 h仍能表达m4-1BBL.与野生型的Hepa1-6细胞相比,上述瘤苗能诱导淋巴细胞产生针对亲本的小鼠肝癌细胞Hepa1-6的特异性杀伤作用(P<0.05),但是对于小鼠肝癌细胞H22及成纤维细胞NIH3T3无效;此瘤苗在体外能显著增强脾细胞分泌细胞因子IL-2、TNF-α和GM-CSF的能力.结论转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗能诱导有效的抗肝癌免疫反应.
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Penner 19空肠弯曲菌毒素的细胞毒性作用研究
目的探讨Penner 19空肠弯曲菌毒素(CJT)对细胞毒性的影响.方法 (1)应用CHO及Vero细胞检测CJT毒性效应,以及CJT抗血清和GM1中和/抑制作用;(2) ELISA检测CJT结合GM1、CHO细胞受体,评价CJT抗血清及GM1中和或抑制作用.结果 (1)CJT对CHO和Vero细胞均具毒性,效应低CJT量均为3.125 mg/L,细胞变形率分别为(57.3±5.6)%及(58.6±5.2)%,变形细胞中死亡率分别为(53.8±6.2)%及(37.2±6.9)%.对照组细胞变形率分别为(8.6±2.1)%及(7.3±2.4)%,显著低于CJT组(P＜0.01).(2)与GM1呈阳性反应的CJT低量为1.563 mg/L,吸光度差值(P-N)为0.24±0.01(P＞0.20).(3)CJT抗血清可中和CJT毒性效应,其1∶8及1∶1倍稀释时,细胞变形率分别＜50%和＜10%,与对照组比较差异有显著意义(P＜0.01).(4)GM1由0.01增至0.08 μg/100 μl时,CJT致细胞形变率逐渐下降,继续增加GM1剂量(0.08～0.64 μg/100 μl),细胞变形率却维持不变,且始终大于50%.(5)CJT结合CHO于作用后3 min明显.CJT抗血清及GM1均可导致CJT结合CHO细胞能力减低.CJT抗血清完全抑制;而GM1部分抑制.结论 CJT对细胞可产生形态及致死性变化,在其毒性损伤过程中,除GM1受体外,还应有其他受体参与毒性反应的启动过程.
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氧浓度与CagA+幽门螺杆菌对人胃癌SGC7901细胞系HIF-2α和Oct-4表达影响的研究
目的:通过观察常氧与低氧下CagA+幽门螺杆菌(Hp)对人胃癌SGC7901细胞系HIF-2α和Oct-4表达的影响,初步探讨Hp在胃癌发生发展中的干细胞机制,及其与肿瘤微环境低氧的协同作用.方法:内镜下采集胃黏膜标本后行Hp培养并鉴定,PCR方法鉴定CagA基因.CagA+ Hp与胃癌SGC7901细胞于常氧和低氧环境下共培养48 h(分常氧对照组、低氧对照组、常氧CagA+ Hp组、低氧CagA+ Hp组).免疫细胞化学法检测HIF-2α和Oct-4蛋白的表达,RT-PCR法检测Oct-4 mRNA的表达.结果:免疫细胞化学结果显示,常氧下胃癌SCC7901细胞HIF-2α和Oct-4蛋白呈低水平表达,表达量分别为0.263 9±0.008 0和0.317 9±0.001 3.低氧和CagA+ Hp均能显著诱导HIF-2α和Oct-4蛋白表达,与常氧对照组的相比,HIF-2α表达量为0.431 8±0.001 2和0.422 5±0.017 0,t值分别为46.410 3和18.875 6,P＜0.01；Oct-4为0.546 8±0.008 2和0.478 9±0.001 8,t值分别为61.649 1和162.139 0,P＜0.01.与低氧对照组和常氧CagA+ Hp组相比,低氧CagA+ Hp组蛋白表达量进一步升高,HIF-2α为0.507 7±0.007 0,t值分别为23.896 8和10.362 5,P＜0.01；Oct-4为0.698 7±0.005 1,t值分别为35.173 7和90.876 1,P＜0.01.相关分析显示,HIF-2α与Oct-4表达呈正相关,r=0.964 0,P＜0.05.RT-PCR检测各组Oct-4 mRNA表达结果显示与免疫细胞化学结果一致.结论:常氧下CagA+ Hp可刺激胃癌细胞HIF-2α和Oct-4表达,低氧环境下其表达进一步增加,表明CagA+ Hp和低氧对HIF-2α和Oct-4的表达有协同作用.提示CagA+ Hp和低氧可能是诱导胃癌细胞干细胞化的重要原因.
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大肠埃希菌植物毒素Gelonin核心功能区表达和纯化及抗肿瘤活性研究
目的:在大肠埃希茵中表达纯化植物毒素Gelonin核心功能区△Gel(S8-K200),并研究其抗肿瘤活性.方法:以pET30a(+)-Gelonin为模板,采用PCR方法扩增△Gel基因,克隆插入pEASY-B栽体,测序鉴定后插入pET30a(+)栽体,转化感受态细胞BL21(DE3)pLysS,诱导表达并纯化目的蛋白,并观察其抗肿瘤活性和细胞毒性.结果:△Gel(S8-K200)目的基因的大小约为600 bp,SDS-PAGE电泳显示目的蛋白的大小约为27×103,体外实验结果显示,△Gel和Gelonin对肿瘤细胞系HL-60具有明显的杀伤作用,而对正常人胚肺细胞系WI-38毒性极小.结论:Ge-lonin核心功能区△Gel保持了Gelonin毒素蛋白全部的抗肿瘤活性,具有很好的开发前景.
关键词： 细胞毒素类 抗肿瘤药 植物 植物蛋白质/治疗应用 -
放线共生放线杆菌白细胞毒素水平检测
目的 检测放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans, Aa)临床分离菌株白细胞毒素水平,区分高毒株与低毒株.方法 应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测白细胞毒素操纵子启动子区域基因序列的差异.检测临床菌株68株,其中b型17株,c型42株,a型9株.阳性对照高毒株为JP2,低毒株为ATCC43717等5株Aa国际参考菌株,阴性对照为12株异种菌国际参考菌株.结果 68株临床分离菌株扩增片段均为1 022 bp, JP2扩增片段为492 bp,ATCC43717等5株扩增片段均为1 022 bp,12株异种菌参考菌株无扩增片段出现.结论 68株临床分离菌株全部为低毒株.
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幽门螺杆菌cagA菌株感染与胃癌组织中环氧化酶-Ⅱ表达的相关性研究
目的探讨幽门螺杆菌cagA(Hp-cagA)菌株感染与胃癌组织中环氧化酶-Ⅱ(COX-2)表达之间的关系,为胃癌的早期预防提供有价值的实验和理论依据.方法采用流式细胞术定量检测及分析31例胃癌组织及相应的癌旁正常胃组织中COX-2的表达水平,并通过PCR技术对胃癌组织中cagA基因进行扩增检测. 结果 31例胃癌组织中,有26例COX-2过表达,相应的26例癌旁正常组织基本上无表达或弱表达.18例cagA阳性的胃癌组织中COX-2的表达水平明显高于13例cagA阴性的胃癌组织.结论 COX-2在胃癌组织中过度表达,cagA菌株感染可上调胃癌组织中COX-2的表达水平.可能存在cagA菌株感染之外的其他因素或机制调节COX-2的表达.因此,在根治Hp感染的同时,应用COX-2特异性抑制剂可能是一种有效预防胃癌发生、发展的新路.
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小儿肾病综合征治疗的评价
小儿肾病综合征患者大多数对强的松敏感,延长强的松使用时间可降低复发率,但副作用也逐渐增加.对激素耐药、依赖和频繁复发患儿可采用甲基强的松龙冲击以及环磷酰胺等细胞毒类药物.本文对其治疗情况做一综述.
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细胞致死性肿胀毒素及其研究进展
细胞致死性肿胀毒素是由革兰阴性细菌产生的一种蛋白,它具有细胞毒性,能通过损伤DNA和激活细胞周期检查点将细胞周期阻断在G2/M期,导致细胞肿胀、死亡.它的三种成分CdtA、CdtB和CdtC在毒化细胞中所起的作用不同,该文就其特点、功能及在临床疾病中的作用作一综述.
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CagA和IL-9在幽门螺杆菌感染伴消化性溃疡和胃息肉患者中的表达及其作用研究
背景:研究表明幽门螺杆菌(Hp)感染与消化性溃疡(PU)和胃息肉(GP)的发生相关.细胞毒素相关蛋白A(CagA)是Hp致病的重要毒力因子,而白细胞介素-9(IL-9)是具有抗炎效应的细胞因子.目的:探讨CagA、IL-9在Hp感染伴PU和GP患者中的表达及其作用.方法:纳入2013年1月-2014年3月于惠东县人民医院就诊的Hp感染伴PU(Hp+ PU组)或Hp感染伴PU和GP患者(Hp+ PU+ GP组),无Hp感染的慢性胃炎患者作为对照组.采用ELISA法检测血清CagA、IL-9水平;采用免疫组化法检测胃黏膜组织CagA、IL-9表达.结果:Hp+ PU组、Hp+PU+ GP组血清CagA水平均显著高于对照组(P＜0.01),血清IL-9水平均显著低于对照组(P＜0.01),且Hp+ PU+ GP组血清IL-9水平显著低于Hp+ PU组(P＜0.05).Hp+ PU组、Hp+ PU+ GP组CagA+患者比例均显著高于对照组(P＜0.05);三组患者中,CagA+患者血清IL-9水平均显著低于CagA-患者(P＜0.01),Hp+ PU+ GP组C舭+患者血清IL-9水平显著低于Hp+ PU组和对照组CagA+患者(P＜0.05).Hp+ PU组、Hp+ PU+ GP组胃黏膜CagA阳性面积比值显著高于对照组(P＜0.01),Hp+ PU+ GP组又显著高于Hp+ PU组(P＜0.05).Hp+ PU组、Hp+ PU+ GP组胃黏膜IL-9阳性面积比值显著低于对照组(P＜0.05),Hp+ PU+ GP组又显著低于Hp+ PU组(P＜0.01).结论:CagA+ Hp感染可能与PU和GP的发生有关.IL-9参与了Hp感染诱导的免疫应答,且可能对Hp感染所致的PU和GP具有抑制作用.
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奥美拉唑对胃癌上皮细胞株、幽门螺杆菌及空泡毒素作用的体外试验
目的:通过奥美拉唑对胃癌上皮细胞、幽门螺杆菌(Hp)菌株生长及空泡毒素(VacA)毒性的影响,探讨其临床应用价值.方法:应用不同浓度奥美拉唑和细胞、细菌及VacA共孵育方法观察细胞、细菌的生长状况及空泡毒性的变化.结果:(1)当奥美拉唑浓度>100 mg*L-1时,细胞100 %死亡;低于40 mg*L-1时,光镜下未见上皮细胞的形态学改变.(2)当奥美拉唑≥100 mg*L-1时,细菌生长完全被抑制;低于30 mg*L-1,细菌的生长不受影响.(3)低浓度奥美拉唑(10～40 mg*L-1)能部分抑制VacA毒素对SGC-7901的空泡作用,但不抑制毒素对HeLa细胞的空泡毒性作用.结论:抑制Hp生长所需的奥美拉唑浓度对胃上皮细胞也有损伤作用,对空泡毒素无显著的抑制作用,临床上只能应用低剂量奥美拉唑,通过抑制胃酸分泌治疗酸相关疾病,而非抑制Hp生长.
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海洋盐单胞菌属微生物的鉴定及生物学活性分析
对36株海洋盐单胞菌进行16S rDNA的序列测定和生物学活性的初步分析.方法 用PCR方法扩增36株细菌的16S rDNA序列,将获得的全部序列运用Clustal X1.8软件进行多序列比对并用MEGA4.1软件绘制进化树.利用MTT法测定菌株发酵液的细胞毒活性;采用DPPH和ABTS抗氧化模型检测菌株发酵液的抗氧化活性；采用人白细胞弹性蛋白酶(human leukocyte elastase,HLE)抑制剂筛选模型检测菌株发酵液对HLE的抑制率.结果 经与GenBank数据库比对,36株菌均与盐单胞菌属有很高的相似性(96%～99%).菌株发酵液有不同程度的细胞毒活性、抗氧化活性和HLE抑制活性.11株菌对HepG2细胞有抑制作用,抑制率为(4.40±1.2)%～(24.90±3.5)%；20株菌对HL-60细胞有抑制活性,抑制率为(1.70±1.1)%～(50.90±4.2)%.7株菌对ABTS自由基有清除能力,清除率为(4.49±2.1)%～(58.43±4.4)%;3株菌对DPPH自由基有清除能力,清除率为(5.68±3.7)%～(59.06±3.2)%;3株菌具有HLE抑制活性,抑制率为(12.71±1.81)%～(71.19±5.62)%.结论36株海洋盐单胞菌属微生物表现出不同程度的细胞毒活性、抗氧化活性和HLE抑制活性,部分高活性菌株具有潜在的药用研究价值.
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幽门螺杆菌感染、p53基因突变与胃癌的相关性研究
目的研究幽门螺杆菌及其毒力因子、p53基因突变与胃癌之间的关系.方法应用酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印迹法、聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,分析30例胃癌及30例胃炎患者的血清抗幽门螺杆菌IgG抗体(Hp-IgG)、幽门螺杆菌(Hp)的细胞毒素相关蛋白(CagA)和空泡细胞毒素(VacA)及胃癌病人胃黏膜p53基因第5～8外显子的突变情况.结果 p53基因突变在胃癌中的比例较高,胃癌组中Hp-IgG阳性率尤其是CagA阳性的Hp均显著高于胃炎组.结论 Hp(尤以CagA阳性者)感染增加了胃癌的发病风险,Hp可能导致p53基因突变,是胃癌发生的重要原因.
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72例胃癌幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白检测分析
[目的]探讨幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)与胃癌的相关性.[方法]采用快速尿素酶法、14C尿素呼气试验和免疫印迹法3项检查检测72例胃癌,54例慢性萎缩性胃炎患者,50例正常对照;有2项阳性者为Hp感染,均呈阴性者为无Hp感染,免疫印迹法中IgG抗体阳性作为判断CagAIgG+Hp感染的指标.[结果]胃癌组、萎缩性胃炎组的Hp感染率均显著高于正常对照组(P＜0.01),胃癌和萎缩性胃炎组CagAIgG+Hp菌株感染率均显著高于正常对照组(P＜0.05),胃癌组CagAIgG+Hp菌株感染率与萎缩性胃炎组差异无统计学意义(P＞0.05),肠型胃癌CagAIgG+Hp菌杆感染率显著高于弥漫型胃癌(P＜0.05).[结论]慢性萎缩性胃炎和胃癌的发生与CagAIgG+Hp菌株感染有关,特别是CagAIgG+Hp菌株感染与肠型胃癌关系密切,定期随访CaagIgG+Hp菌株感染患者,可能有利于胃癌的早期诊断.
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血清CagA抗体鉴定幽门螺杆菌高毒株感染的评价
目的 评价通过检测血清CagA抗体鉴定幽门螺杆菌高毒株感染的可行性.方法 采集福州地区临床门诊行胃镜检查的胃活检标本,行病理检查和幽门螺杆菌(Hp)培养;采集病人血清,PCR法检测分离所得的Hp cagA基因;EIA法测定血清CagA抗体,分析cagA基因的检出与消化性疾病的关系,比较CagA基因与CagA抗体的检测结果,评价应用CagA抗体检测Hp高毒株感染的可行性.结果 分离获得80株Hp,其中54株检出cagA基因,阳性率67.50%.各病理类型胃病患者cagA基因阳性率:浅表性胃炎77.42%,萎缩性胃炎62.86%,胃溃疡58.33%,胃癌50.00%,各组间差别无统计学意义(P＞0.05);CagA抗体阳性率55.00%,敏感度74.07%,特异度84.62%,约登指数58.69%,调整一致性77.68%.结论 检测血清CagA抗体用于诊断高毒力Hp感染存在局限性.
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眼镜蛇毒细胞毒素的体内外抗肿瘤活性及毒性比较
目的比较舟山眼镜蛇毒细胞毒素(CTX)Ⅹ～ⅩⅢ(CTX-Ⅹ～ⅩⅢ)的毒性及抗肿瘤活性,筛选低毒高效的CTX.方法以Meier法测定CTX近似半数致死量(LD50);通过描记心电图测定引起大鼠100%死亡的小剂量(MLD);以磺酰罗丹明B(SRB)法观察CTX对体外培养的Bel7404细胞和HL-60细胞的杀伤作用;观察荷U14及艾氏腹水癌(EAC)小鼠腹腔注射(ip)CTX-Ⅻ、ⅩⅢ的效果,测定肿瘤生长抑制率.结果CTX-Ⅹ～ⅩⅢ对小鼠(iv)的近似LD50值分别为(1.16±0.12),(1.80±0.21),(0.75±0.21),(1.85±0.15)mg/kg;MLD为(183±18),(310±26),(224±16),(343±28)μg/kg(P＜0.001).CTX对Bel7404细胞作用24 h的IC50分别为:(2.22±0.28),(2.97±0.10),(1.12±0.13),(2.46±0.28)μg/mL;对HL-60细胞作用24 h的IC50为:(1.97±0.06),(2.61±0.24),(1.61±0.18),(2.40±0.30)μg/mL(P＜0.01).CTX-Ⅻ和ⅩⅢ(ip)对U14实体瘤和EAC腹水癌均有剂量依赖性抑制作用.结论4种CTX中,Ⅹ、Ⅻ毒性较强,Ⅺ次之,ⅩⅢ弱.CTX对体外培养肿瘤细胞的细胞毒作用强弱顺序为:Ⅻ＞Ⅹ＞ⅩⅢ＞Ⅺ.Ⅻ和ⅩⅢ对小鼠体内接种的U14及EAC的抑制作用是ⅩⅢ＞Ⅻ.在4种CTX中,ⅩⅢ的抗肿瘤作用相对较强,毒性低.
