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畜禽肌肉、内脏及虾中氯霉素残留量的检测技术研究
目的快速、简便、灵敏地监测畜禽肌肉、内脏及虾中的氯霉素残留.方法建立了高效液相色谱法快速检测技术.动物组织中的氯霉素用乙酸乙酯在超声波振荡下提取3次,提取液经脱水、浓缩,再用0.5mol/L高氯酸溶液溶解浓缩瓶中残留物、沉淀蛋白质,以正己烷去除脂溶性杂质,经0.45μm滤膜过滤后供HPLC测定含量.结果本方法的线性范围为0.1～2.0μg/ml,肌肉的低检出浓度为1.6μg/kg,内脏为3.2μg/kg,在20～100μg/kg的加标水平时,方法平均回收率为82.1%～96.6%,相对标准偏差为4.5%～9.3%.结论该方法适用范围广,回收率高,检测限低,简单易行,易于在基层推广应用.
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涮火锅过程中肉、虾和汤中嘌呤含量变化研究
火锅一直是深受人们喜爱的一类大众饮食.但吃火锅时,大量进食嘌呤含量高的动物内脏、骨髓、牛羊肉、海鲜和虾蟹易导致痛风的发作[1-2],动物性食品中含有较高的嘌呤[3],甚至火锅汤也含有一定量的嘌呤.有研究报道,肉制品等在水煮过程中,其嘌呤含量会有所变化[4].本研究希望通过模拟涮火锅过程,找到羊肉、牛肉、青虾和汤中嘌呤含量的变化规律,为大众,特别是高尿酸血症及痛风患者提供科学的饮食指导.
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畜禽肌肉、内脏及虾中磺胺二甲嘧啶残留量的检测技术研究
为了快速、简便、灵敏地监测畜禽肌肉、内脏及虾中的磺胺二甲嘧啶残留,建立了高效液相色谱法快速检测技术.动物组织中的磺胺二甲嘧啶用二氯甲烷超声提取3次,提取液与2%硫酸钠水溶液进行液-液分配,下层有机相经脱水、浓缩后用0.02 mol/L盐酸溶解浓缩瓶中残留物,以正己烷去除脂溶性杂质,经0.45 μm滤膜过滤后供HPLC测定.结果表明本方法的线性范围为0.2～3.0 μg/mL,方法的低检出浓度为2.1 μg/kg,在50～100 μg/kg的加标水平,方法平均回收率为76.6%～93.6%,相对标准偏差为4.4%～8.4%.该方法适用范围广,回收率高,检测限低,简单易行,易于在基层推广应用.
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中国对虾肉中与虾过敏患者血清特异性IgE结合的组分分析
目的 分析与血清特异性IgE结合的虾肉中的蛋白成分.方法 常规制备虾肉蛋白提取液,用SDSPAGE技术分析提取液中的蛋白组分,以虾过敏患者血清(sIgE)作为探针,经免疫印记技术分析、鉴定与患者特异性IgE结合的蛋白成分.结果 虾肉蛋白提取液显示12种可辨认蛋白条带,其中65、50和36 kD相对含量较高;不同过敏患者血清中与蛋白结合的强度和所识别的蛋白组分存在一定差别,但所识别的蛋白主要集中在分子量＞70 kD的区域.结论 与阳性血清的反应强度与蛋白相对含量无关,提取有效组分有望提高血清特异性IgE检测的敏感度.
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某出口冻虾加工厂生产过程中的微生物检测
为保证出口产品的卫生质量,对广东某出口冻虾加工厂进行了调查.检测了出口冻虾(虾仁、去头虾)从原料到成品各工序的微生物变化,并检测了工用具、环境的细菌总数,结果表明,出口冻虾细菌总数一般都符合标准,大肠菌群数有超标现象,致病菌没有检出,工用具等细菌总数常有超标.结果表明应进一步加强出口食品加工厂的卫生管理工作.
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高效液相色谱-串联质谱法检测虾中9种磺胺类药物的残留
目的:建立虾中9种磺胺类抗生素残留的高效液相色谱-串联质谱同时测定方法.方法:样品经乙腈提取,经脱脂、净化、浓缩后,以A相为甲醇、B相0.50 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,采用HPLC-MS/MS多反应监测(MRM)正离子模式测定.结果:9种磺胺类药物在0～100 ng/ml范围内线性关系良好(r>0.999 0),加标回收率为75.3%～95.6%,相对标准偏差(RSD)为4.5%～13.5%.结论:该方法准确、可靠、灵敏度好,适用于磺胺类药物残留的检测.
关键词： 高效液相色谱-质谱法 磺胺 药物残留 虾 -
中国人的虾、蟹致敏过敏原组分分析
目的：分析鉴定中国人群的虾、蟹致敏组分，确定主要过敏原及其致敏率，为深入研究食物过敏原检测及脱敏治疗提供依据。方法：通过46份虾蟹过敏症患者血清，对刀额新对虾、罗氏沼虾和锈斑鲟的蛋白粗提液进行Western blot 分析，统计数据得出其全部过敏原组分及其致敏率，并确定主要过敏原。结果：Western blot 结果显示，虾与过敏患者血清IgE的反应强于蟹，且虾、蟹间存在很多Mr相同的过敏原；32～38 kD原肌球蛋白（ TM）、40 kD精氨酸激酶（ AK）、60～80 kD血蓝蛋白（ Hc）和21 kD肌质钙结合蛋白（ SCP）是虾的主要致敏组分，TM、AK和Hc是虾、蟹共同的主要过敏原，其中TM的致敏率高；与国外研究结果相比，AK、Hc和SCP的致敏率相对较高，且发现虾中48 kD蛋白组分（未知过敏原）也具有较高致敏率。结论：对中国人群而言，虾的致敏性强于蟹，且虾、蟹的主要致敏组分基本相同；中国人的虾蟹主要致敏组分及其致敏率与国外研究大致相同但略有差异；发现一种潜在的新型过敏原。
关键词： 食物过敏 过敏原 Western blot 虾 蟹 -
虾过敏原蛋白纯化中硫酸铵沉淀法的改进
目的 优化虾过敏原蛋白纯化的硫酸铵沉淀工艺,提高纯化效果.方法 测定不同饱和度硫酸铵溶液的体积和pH,将过敏原蛋白粉末加入固定饱和度和pH的硫酸铵溶液中沉淀,并用SDS-PAGE方法 检测不同硫酸铵浓度下蛋白质组分的变化.结果 PH7.5的30%饱和度硫酸铵溶液可有效地分离虾过敏原蛋白,进一步柱层析得到只有一条电泳带的样品.结论 通过改进硫酸铵沉淀工艺,可提高虾过敏原蛋白的纯化效果.
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两种方法测定河虾、明虾和沼虾中的镉含量对比
目的 建立石墨炉原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱法测定虾中镉的方法并进行比较.方法 样品经微波消解后,采用原子吸收光谱法和电感耦合等离子质谱法分别对河虾、明虾、沼虾的头和肌肉中镉含量进行测定,并比较两种方法的精密度和准确度.结果 沼虾虾头中的镉含量高于国家标准数倍,其它虾肌肉中镉含量低于国标;两种方法测定虾中镉时,对于低含量镉,两者结果相差不大;但对于高含量时两者相差较大.原子吸收光谱法和电感耦合等离子质谱法测定同一浓度镉的精密度分别为:10.8％、2.2％,加标回收率分别为:93.5％～121.6％、99.5％～103.7％.结论 原子吸收分光光度计测定镉时线性范围窄,测定高含量镉时要稀释多倍,造成结果不准确.质谱法具有抗干扰、线性范围宽、准确性好等优点,是测定虾中镉的佳方法.
关键词： 虾 石墨炉原子吸收光谱 电感耦合等离子体质谱 镉 -
高效液相色谱-串联质谱法同时测定鱼、虾中18种抗生素药物残留
目的 建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定鱼、虾中氯霉素、金霉素、土霉素、四环素、环丙沙星、诺氟沙星、培氟沙星、依诺沙星、氟甲喹、恶喹酸、恩诺沙星、二氟沙星、斯帕沙星、氧氟沙星、丹诺沙星、奥比沙星、沙拉沙星、氟罗沙星等18种抗生素的检测方法.方法 样品经EDTA-Mcllvaine缓冲溶液超声提取,高速离心,滤液经正己烷脱脂,HLB固相萃取柱净化,氮气吹至近干.Poroshell 120 C18柱色谱分离,流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为0.4 ml/min,进样量为5μl,柱温为40℃.电喷雾正负离子ESI(+/-)扫描;动态多反应(DMRM)质谱监测;基质匹配内标法定量.结果 18种抗生素线性良好,相关系数＞0.998;方法检出限为0.1 μg/L～2.5 μg/L,3个加标水平的回收率在70.52％～ 127.45％,相对标准偏差(RSD)在1.48％ ～ 15.93％.结论 该方法简便快速、灵敏可靠,适用于水产品中18种抗生素药物残留的同时测定.
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2012年-2015年湛江市出口虾微生物污染状况调查分析
目的 了解湛江市出口虾中微生物污染状况,并为该类产品监管提供参考依据.方法 采用GB 4789系列微生物检验方法,检测待出口虾中菌落总数、大肠菌群、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌及霍乱弧菌,并结合相应的限量标准对检验结果进行分析.结果 共检验8 406份虾产品,菌落总数超标率为0.66％;大肠菌群超标率为1.44％;未检出大肠埃希菌;金黄色葡萄球菌、沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌的检出率分别为0.29％、0.11％、0.43％、3.28％和2.00％.结论 湛江市出口虾中存在不同程度的微生物污染,致病性弧菌的污染尤为严重,应该引起重视.
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虾类原肌球蛋白的Balb/c小鼠致敏动物模型构建研究
目的 虾类主要过敏原原肌球蛋白(Tropomyosin,Tm)的Balb/c小鼠致敏动物模型的构建及Tm的低过敏性处理效果评价.方法 本研究选用Balb/c小鼠,设立常见致敏蛋白卵清蛋白(OVA)组、虾主要过敏原Tm组、经无花果蛋白酶消减处理的Tm(Tm-E)和阴性对照PBS组,将各组样品与氢氧化铝佐剂(3∶1)混合后采用腹腔注射方式以构建Tm致敏动物模型,每次注射时间间隔为1周.第4天采集小鼠血清,通过ELISA评价血清中IgE和IgG抗体的效价变化.结果 OVA和Tm刺激38 d后产生大量IgE和IgG抗体；阴性对照组在整个刺激过程中其血清中不含有IgE和IgG抗体；Tm-E组在致敏24 d、38 d时其IgE的OD值分别较Tm组低77.83％和64.06％(P＜ 0.01).结论 本研究成功构建了虾主要过敏原Tm的致敏动物模型,此外发现无花果蛋白酶解处理方式(酶活与底物比13.6 U/g,35℃酶解10 min)可有效降低Tm的过敏原性.
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虾类和蟹类的过敏原组分分析
目的:分析虾类和蟹类的过敏原组分.方法:聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot分析虾类和蟹类的主要过敏原组分.结果:不同种类的虾其主要过敏原组分相对分子质量(Mr)在36 000附近,不同种类的蟹主要过敏原组分Mr在29 000、36 000、66 000、89 000附近.结论:不同种类的虾蟹存在共同过敏原.
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虾中氯霉素的检测分析
目的:不同方法测定虾中氯霉素含量,并对69份虾样品进行分析.方法:用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS)法和酶联免疫吸附法(ELISA法)分别测定虾中的氯霉素含量.结果:2种方法测定食品中氯霉素成分的结果略有不同.结论:用UPLC-MS/MS法测定的精密度和回收率高于ELISA法,ELISA法适用于大批量样品初筛.
