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绿茶提取物与维生素C和番茄红素的协同抗氧化作用
目的 研究绿茶提取物联合维生素C和番茄红素对D-半乳糖致氧化损伤模型小鼠体内抗氧化活性的影响.方法 72只小鼠按体重随机抽取12只作为空白对照组,其余用D-半乳糖1.0 g/kg腹腔注射造模,6周后按照丙二醛(MDA)水平随机分为:模型对照组、绿茶提取物组和低、中、高3个剂量绿茶提取物+维生素C+番茄红素混合受试物组.模型对照组蒸馏水灌胃,绿茶提取物组0.87 g/kg单一绿茶提取物灌胃,低、中、高剂量混合受试物组分别按0.15、0.29、0.87 g/kg混合物灌胃.4周后用分光光度法测血清与肝脏内MDA含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、蛋白质羰基含量.结果 与氧化损伤模型对照组相比,高剂量混合物组、绿茶提取物组均能增高小鼠血清和肝组织内GSH-Px、SOD活性,降低蛋白质羰基、MDA含量(P＜0.01或P＜0.05);与绿茶提取物组比较,高剂量混合物组GSH-Px、SOD活性增高,MDA、蛋白质羰基含量降低(P＜0.01或P＜0.05).结论 绿茶提取物联合维生素C和番茄红素比单一使用绿茶提取物抗氧化效果更好,三者表现出良好的协同抗氧化能力.
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2-氨基-1-甲基-6-苯基-咪唑并[4,5-b]吡啶对大鼠不同组织的蛋白质氧化损伤作用
目的 观察杂环胺代表物2-氨基-1-甲基-6-苯基-咪唑并[4,5-b]吡啶(PhIP)对雄性Wistar大鼠不同组织蛋白质氧化损伤.方法 将20只健康成年清洁级Wistar雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(pH=4.5的55％乙醇-生理盐水)组和低(5 mg/kg)、中(10mg/kg)、高(15 mg/kg)剂量PhIP染毒组,每组5只.按5 ml/kg进行一次性灌胃染毒.染毒后24h,测定心、肺、肝、肾组织蛋白质羰基(PCO)、DNA和蛋白质交联(DPC)率.结果 与对照组比较,各剂量PhIP染毒组大鼠心组织和仅高剂量PhIP染毒组大鼠肺、肝、肾组织中PCO含量升高(P＜0.01,P＜0.05),各剂量PhIP染毒组大鼠肺组织和中、高剂量PhIP染毒组大鼠肝组织以及高剂量PhIP染毒组大鼠心、肾组织中DPC率升高(P＜0.05,P＜0.01).且PhIP染毒剂量与大鼠心、肺、肝、肾组织中的PCO含量和DPC率均呈正相关(r≥0.94,P＜0.05).PCO含量增加的次序为心＞肺＞肝和肾.结论 PhIP可引起大鼠不同组织蛋白质的氧化损伤,这种效应存在组织差异性.
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阿尔茨海默病转基因小鼠早期记忆功能障碍与氧化应激损伤关系的实验研究
目的 观察转APP/PS1基因阿尔茨海默病(AD)小鼠(APP/PS1小鼠)早期空间学习记忆功能及相关氧化应激反应指标的变化,并探讨它们之间的相关性.方法 应用Morris水迷宫评定APP/PS1小鼠及相应野生型(WT)小鼠的空间学习记忆功能,采用ELISA方法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及丙二醛(MDA)和蛋白质羰基的含量,并进行相关性分析.结果 2组小鼠的空间学习能力无明显差异(P＞0.05),而APP/PS1小鼠在目标象限(定位航行实验中平台所置第二象限)中航行时间占总时间的百分比(29.02±4.27)%较WT小鼠(47.39±6.01)%显著下降(t=0.000,P＜0.05),APP/PS1小鼠在目标象限中航行路程占总路程的百分比(28.85±3.77)%较WT小鼠(46.70±5.60)%也显著下降(t=0.000,P＜0.05),提示APP/PS1小鼠的空间记忆功能较WT小鼠显著下降.2组小鼠脑组织中的MDA含量、SOD和GSH-PX活性均无明显差异(P均＞0.05),而APP/PS1小鼠脑组织中的蛋白质羰基含量(2.67±0.19)较WT小鼠(2.38±0.15)显著增加(t=0.0088,P＜0.05).相关性分析表明:APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行时间百分比呈显著负性相关(r=-0.639,P＜0.05),APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行路程百分比呈显著负性相关(r=-0.636,P＜0.05).结论 APP/PS1小鼠早期空间记忆功能损害与脑组织中的蛋白质羰基含量升高呈负性相关,提示氧化应激导致的蛋白质羰基化在AD早期记忆损害发病过程中具有重要作用.
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二氧化硫吸入对小鼠肺和心组织DNA-蛋白质交联作用的影响
29x+1.45(R2=0.9922),同样呈现明显的剂量-效应关系.[结论]SO2吸入可致小鼠肺、心PCO含量和DPC率呈剂量依赖性升高.随着SO2浓度的增加,对肺、心蛋白质的氧化损伤加剧,DPC率升高.吸入同浓度SO2小鼠的肺、心PCO含量和DPC率结果表明,对肺的损伤远大于心.
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蝮蛇粉不同配伍方对老龄小鼠体内抗氧化的影响
目的 研究蝮蛇粉不同配伍方对老龄小鼠体内抗氧化酶活性的影响.方法 将10月龄ICR雄性小鼠按4％ 溶血液中丙二醛(MDA)水平随机分为蝮蛇粉(78 mg/kg)组、蝮蛇粉+姜黄提取物(52+15.6 mg/kg)组、蝮蛇粉+姜黄提取物+茶多酚(52+15.6+65 mg/kg)组、阴性对照组,每组10只.各组灌胃给予相应药物,阴性对照组给予相应溶剂,每天1次,连续给药30天.采用试剂盒法检测4％ 溶血液中MDA水平、全血中谷胱甘肽(GSH)含量、血清中总抗氧化能力(T-AOC)和蛋白质羰基含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力变化.结果 与阴性对照组比较,其余各组小鼠4％ 溶血液中MDA水平显著降低,全血中GSH含量增加,血清蛋白质羰基含量明显降低、T-AOC含量和SOD活力显著提升(P<0.05,P<0.01);与蝮蛇粉组比较,蝮蛇粉+姜黄提取物组小鼠4％ 溶血液中MDA水平显著降低,全血中GSH含量增加,血清蛋白质羰基含量明显降低、T-AOC含量和SOD活力显著提升(P<0.05,P<0.01);与蝮蛇粉+姜黄提取物+茶多酚组比较,蝮蛇粉+姜黄提取物组小鼠各指标变化无明显差异.结论 蝮蛇粉与姜黄提取物合用可有效改善老龄小鼠体内抗氧化能力,可起到延缓衰老作用.
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饮用水有机提取物致大鼠肝脏DNA及蛋白质氧化损伤的研究
目的 探讨饮用水有机提取物致大鼠肝脏DNA及蛋白质的氧化损伤情况.方法 采集某地管网末梢水,利用固相萃取法提取水样中有机污染物,对40只SD大鼠进行经口灌胃亚慢性染毒(12周).设立溶剂对照组(玉米油)和3个染毒组(剂量分别为5 L/kgBW·d、20 L/kgBW·d、80 L/kgBW·d).8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)采用酶联免疫法(ELISA)、蛋白质羰基(PCO)采用2,4-二硝基苯肼(DNPH)比色法、蛋白定量采用微量酶标法检测.结果 随染毒剂量的增加,大鼠血清8-OHdG含量呈上升趋势,与溶剂对照组比较,中、高剂量组的升高差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠肝组织8-OHdG含量亦在中、高剂量组明显升高(P＜0.05).随染毒剂量的增加,大鼠肝组织PCO含量呈上升趋势,与溶剂对照组比较,中、高剂量组的升高差异有统计学意义(P＜0.05).相关性分析显示,大鼠血清8-OHdG含量、肝组织8-OHdG含量及肝组织PCO含量均与有机提取物染毒剂量呈高度正相关关系(相关系数分别为0.9383,0.8631和0.9136,均P＜0.05),同时大鼠血清8-OHdG含量与肝组织8-OHdG含量亦呈高度正相关关系(相关系数为0.9843,P＜0.05).结论 饮用水有机提取物较高剂量接触可诱发大鼠肝脏DNA及蛋白质的氧化损伤,此可能为饮用水有机提取物肝脏毒性重要机制之一.
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氧化应激反应标志物在慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清中的表达及意义
目的 检测慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)稳定期患者血清氧化应激反应标志物丙二醛(MDA)、蛋白质羰基(PC)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、总抗氧化能力(TAC)水平,探讨氧化/抗氧化失衡在慢阻肺发病中的作用.方法 选取200例慢阻肺稳定期患者(慢阻肺组)和100名体检健康者(对照组).检测血清MDA、PC、8-OHdG和TAC的含量;同时对受试者进行肺功能检测,收集一般资料.慢阻肺组按是否吸烟分为吸烟亚组和未吸烟亚组,按气流受限程度分为轻-中度亚组和重-极重度亚组.结果 与对照组比较,慢阻肺组患者血清MDA、PC、8-OHdG浓度明显升高(P均＜0.O1),而血清TAC水平显著降低(P均＜0.01).吸烟亚组慢阻肺患者血清PC、8-OHdG浓度明显高于未吸烟亚组的慢阻肺患者(P均＜0.05).重-极重度亚组的慢阻肺患者血清PC的浓度明显高于轻-中度亚组的慢阻肺患者(P＜0.01).多元线性回归分析显示:慢阻肺患者血清PC、8-OHdG的浓度与FEV1％ pred存在关联,血清中PC、8-OHdG的水平均与FEV1％ pred呈负相关,且血清PC的水平对FEV1％ pred的影响比8-OHdG大(β=-0.230,-0.219,P均＜0.01).结论 吸烟引起慢阻肺患者血清PC、8-OHdG的水平异常升高,血清PC、8-OHdG的水平均与FEV1％ pred呈负相关,表明氧化应激在慢阻肺的发病过程中起了重要作用.
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不育吸烟男性精液和血液中镉、铅含量评价
测定95例男性(其中不育患者50例)精浆和精子中的丙二醛、蛋白质羰基、谷胱甘肽转硫酶和还原性谷胱甘肽含量,评价不育患者中吸烟者血液和精浆中镉和铅的浓度与精浆和精子中的氧化应激和损伤、抗氧化防御系统成分之间的关系.采用鲁米诺(5-氨基-2,3-二氢-1,4-二氮杂萘二酮)-增强化学发光法测定精子中的活性氧.结果显示,吸烟的不育患者的精子计数、活动度和正常形态精子低于生育力正常的男性和不吸烟的不育患者.在吸烟的不育患者中镉、铅、丙二醛和蛋白质羰基的浓度和活性氧水平显著高于生育力正常的男性和不吸烟的不育患者.然而,还原性谷胱甘肽含量和谷胱甘肽转移酶活性较生育力正常的男性和不吸烟的不育患者减少.这些结果提示,吸烟可能影响精液质量和人类精子中脂质和蛋白质的氧化损伤.经Pearson相关检验分析,在生育力低下的吸烟者中精浆镉浓度与蛋白质羰基之间、精浆铅浓度与精子中的活性氧水平之间呈正相关,而在生育力正常的吸烟者中血镉浓度与活性水平呈显著的正相关.血铅水平与精子和精浆中的还原性谷胱甘肽含量呈显著的负相关.这些结果提示,吸烟提高不育男性精浆和血液中镉和铅水平,并增强其精子氧化损伤程度,降低与之相关的抗氧化防御系统的成分.
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糖尿病与唾液中DNA、蛋白质和脂类氧化损伤
目的:观察糖尿病是否与唾液中氧化还原动态平衡的改变相关.方法:用ELISA方法分析148名糖尿病患者和475名对照的非刺激性唾液中氧胁迫损伤标志物8-羟基-2’-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)、蛋白质羰基(Protein carbonyls,PC)和8-异前列腺素F2α(8-epi-prostaglandin-F2α,8-epi-PGF2α)的含量.用逻辑相关分析的统计学方法分析氧胁迫损伤指标与使用胰岛素、二甲双弧和餐饮控制糖尿病患者之间的相关性.结果:(i)与对照组相比糖尿病组唾液中的Log8-OHdG、Log PC 和Log 8-epi-PGF2α明显升高;(ii)Ⅰ型糖尿病组唾液中的Log PC明显较对照组高,Ⅱ型糖尿病组Log 8-OHdG、Log PC和Log 8-epi-PGF2α均较对照组有明显升高;(iii)二甲双胍治疗组和单纯餐饮控制的糖尿病组唾液Log 8-OHdG和Log PC水平较高;(iv)单纯胰岛素治疗组和胰岛素及二甲双胍联合治疗组唾液LogPC水平高于对照组;(v)多变量分析和条件逻辑回归分析表明Log8-OHdG、Log PC、Log 8-epi-PGF2α和糖尿病间存在明显的相关性.结论:糖尿病患者唾液中氧化性DNA、脂类和蛋白质损伤产物8-OHdG、8-epi-PGF2α、PC水平均明显升高,表明存在唾液中的氧化还原动态平衡紊乱.唾液氧胁迫指标的分析有可能成为一种新的疾病监测方式,并且提示一种疾病干预的新途径.
关键词： 糖尿病 氧胁迫 8-羟基-2'-脱氧鸟苷 蛋白质羰基 8-异前列腺素F2α -
高通量与低通量血液透析对血清β-2微球蛋白、晚期氧化蛋白产物和蛋白质羰基的影响
目的 探讨高通量血液透析对慢性血液透析患者中血清β-2微球蛋白、晚期氧化蛋白产物及蛋白质羰基的影响.方法 从我院招募的慢性低通量血液透析患者20例.研究初期,所有患者改用高通量血液透析8周(A期),随后低通量血液透析2周作为洗出期;然后,患者再次进行8周的低通量血液透析期(B期).在A期(高通量前期和高通量后期)和B期(低通量前期和低通量后期)开始和结束时采集透析前血清样品.使用ELISA检测血清β-2微球蛋白,分光光度法测定晚期氧化蛋白产物和蛋白质羰基.结果 高通量血液透析后血清β-2微球蛋白和晚期氧化蛋白产物水平显著低于高通量血液透析前(分别为p=0.031和0.036),但蛋白质羰基未观察到显著变化(p=0.8).低通量血液透析后期血清β-2微球蛋白、晚期氧化蛋白产物和蛋白质羰基都显著高于低通量血液透析前水平(分别为p=0.0002、0.019和0.0002).低通量血液透析后期血清β-2微球蛋白、晚期氧化蛋白产物显著高于高通量血液透析后期(分别为p<0.0001和p=0.0005),但蛋白质羰基无显著差异(p=0.112).高通量血液透析后期蛋白质羰基与晚期氧化蛋白产物(p=0.013)和B2MG(p=0.01)呈正相关.高通量血液透析后期蛋白质羰基与β-2微球蛋白呈正相关(p=0.036).结论 高通量血液透析能降低血清β-2微球蛋白和蛋白质羰基含量,而晚期氧化蛋白产物则不受影响.另一方面,低通量血液透析可能导致三种标记物水平的增加.因此高通量血液透析相对于低通量血液透析能更好地去除尿毒症毒素.
