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4-氧和4-羟-四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物对体外鼠肝谷胱甘肽影响及铁离子的络合作用
4-氧-4-羟-四甲基呱啶氮氧自由基(4-TEMPO)是一类稳定的氮氧自由基,应用于自旋标记技术及辐射化学、低毒、无致癌及致突变作用[1].有研究发现其有抗H2O2诱导的红细胞溶血作用,对白血病细胞DNA合成具有明显的抑制作用,能抗大鼠组织脂质过氧化[1,2].本文就4-TEMPO对大鼠肝组织GSH含量影响及对Fe2+络合作用做了进一步的探讨.
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柴胡总皂苷提取物体外溶血作用
目的:考察柴胡总皂昔提取物的溶血作用和抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.方法:通过肉眼观察和分光光度法考察不同浓度柴胡皂苷的溶血作用及抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.结果:柴胡总皂苷质量浓度为在0.01,0.02 g·L-1时,其溶血曲线呈S形,溶血当量为0.01 mg,溶血指数为1∶10万,抗氧化剂与柴胡总皂苷组溶血率低于同浓度柴胡总皂苷组.结论:柴胡总皂苷具有一定的溶血作用,且溶血强度与浓度呈剂量依赖性,抗氧化剂的加入能减轻柴胡总皂苷的溶血作用.
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金银花与山银花的体外溶血作用分析
目的:研究金银花和山银花的体外溶血作用,评价其潜在溶血风险.方法:以皂苷单体化合物、金银花有效部位及金银花、山银花药材等为实验材料,采用紫外分光光度法测定各类样品在不同浓度时对兔血红细胞的溶血率,绘制溶血率-质量浓度曲线.结果:忍冬苦苷A,忍冬苦苷B,灰毡毛忍冬皂苷甲,川续断皂苷乙和川续断皂苷Ⅵ在质量浓度≤1.0 g·L-1时均未发生溶血.灰毡毛忍冬皂苷乙的溶血率随着质量浓度的升高而增大,当质量浓度≤0.6 g·L-1时未发生溶血;当质量浓度为0.8g·L-1时,溶血率上升至11.7％;当质量浓度为1.0g·L-1时,溶血率达到50.4％.金银花各有效部位溶血作用的相对强弱为金银花总皂苷部位＞总酚部位＞总环烯醚萜部位.其中,金银花总环烯醚萜部位在质量浓度为0.1～1.2g·L-1时未发生溶血;金银花总酚部位质量浓度＜1.0 g·L-1时,未发生溶血.金银花总皂苷部位在质量浓度为0.6g·L-1时开始溶血,之后随着质量浓度的升高,其溶血率急剧增大,当质量浓度为1.2 g·L-1时,溶血率55.3％.金银花野生品、栽培品与山银花的溶血率-质量浓度曲线较为相似,其溶血率急剧增大的质量浓度为2.0 ～4.0 g·L-1.结论:金银花与山银花的溶血作用无显著性差异;各种皂苷单体化合物没有溶血作用或溶血作用较弱;金银花总皂苷部位的质量浓度为0.6g·L-1(相当于生药质量浓度20 g·L-1)时具有较弱的溶血作用.尽管如此,中药注射液一般不会达到如此高的药物浓度.因此,含有皂苷类成分的金银花与山银花可应用于中药注射剂,其潜在的溶血风险较小.
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七叶一枝花和滇重楼提取物的制备、表征及其体外溶血作用分析
目的:比较七叶一枝花和滇重楼提取物体外溶血作用强弱,探讨不同结构类型重楼皂苷的溶血作用特点.方法:采用75％乙醇对七叶一枝花和滇重楼根茎进行提取,采用大孔吸附树脂对各类物质进行富集,采用快速制备色谱技术对目标组分群进行定向制备,基于对照品对照和在线紫外吸收光谱对总取物、部位和组分进行化学信息表征,采用分光光度法测定各样品的溶血率.结果:根据质量浓度-溶血率曲线计算七叶一枝花和滇重楼总提物的50％溶血浓度分别为34.97,46.52 mg·L-1.在2.5 ～ 10 mg·L-1时,七叶一枝花部位中仅有70％乙醇洗脱部位(PPC-D)显示了较强溶血作用,滇重楼部位中70％乙醇和95％乙醇洗脱部位(PPY-D和PPY-E)均显示溶血作用.5.0,10 mg·L-1时PPC-D的溶血率分别为78.00％和95.68％,PPY-D (PPY-E)的溶血率分别为31.86％和63.29％(15.82％和55.25％).在2.5 ～5.0mg·L-1时,七叶一枝花的组分呋甾皂苷和薯蓣皂苷未显示溶血作用,偏诺皂苷组分在质量浓度为2.5,5.0 mg·L-1的溶血率分别为5.89％和90.33％;滇重楼的呋甾皂苷组分同样未显示溶血作用,偏诺皂苷(薯蓣皂苷)组分在质量浓度为2.5,5.0mg·L-1的溶血率分别为0.51％和57.75％(4.29％和49.39％).结论:七叶一枝花和滇重楼均具有溶血作用,其中七叶一枝花强于滇重楼;七叶一枝花溶血成分群主要为偏诺皂苷类,滇重楼溶血成分群为偏诺皂苷和薯蓣皂苷;两者呋甾皂苷均无溶血作用;总提物溶血作用强弱主要由其中所含偏诺皂苷和薯蓣皂苷类成分的绝对含量和相对比例来决定.
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土贝母中1个活性皂苷的分离和鉴定
目的:研究中药土贝母中的生物活性成分.方法:采用稻瘟霉模型生物活性追踪方法,应用多种色谱技术进行分离,根据波谱解析和化学手段鉴定其结构.结果:分离并鉴定了1个具有诱导稻瘟霉菌丝变形活性的双糖链皂苷:3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-贝萼皂苷元-28-O-β-D-吡喃木糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖酯苷(Ⅰ).结论:Ⅰ为新天然产物,对K-562和BEL-7402肿瘤细胞显示显著的细胞毒性,但对1%兔红细胞无溶血作用.
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河豚卵巢提取物对小鼠免疫功能的影响
有关从河豚卵巢提取得到的有效成分对小鼠具有增强免疫功能的效果的研究,我们进行初步的研究和探讨,现报告如下.
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长柱重楼总皂苷体外抗肿瘤活性及毒性研究
目的 研究长柱重楼总皂苷(PCT3)体外抗肿瘤活性及毒性.方法 用改良二甲基四氮唑盐法检测PCT3、顺铂对人肺癌细胞株(A-549)和人肝癌细胞株(HEPG-2)的增殖抑制作用.小鼠一次性腹腔注射52,74,105,150mg·kg-1 PCT3,检测PCT3的半数致死量(LD50),并观察肝组织病理切片的变化,用比色法测定PCT3的溶血作用.结果 PCT3对A-549和HEPG-2细胞增殖抑制的半数抑制浓度(IC50)分别为11.71和2.36 μg·mL-1,顺铂对A-549和HEPG-2细胞增殖抑制的IC50分别为6.31和5.33 μg·mL-1.PCT3对小鼠的LD50为92.40 mg·kg-1,其对动物的整体健康状态有一定的影响,具有一定的肝毒性.PCT3的溶血率随着浓度的增加而增加,其溶血的半数有效量为4.31 μg·mL-1.结论 PCT3对人癌细胞株A-549和HEPG-2细胞的增殖均有较强的抑制作用,对HEPG-2细胞的增殖抑制作用强于A-549细胞.同时,PCT3有一定的肝毒性和溶血活性,其溶血活性与细胞毒活性有较明显的相关性.
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木糖醇与果糖抑制甘油溶血作用的比较
口服甘油溶液降低颅内压、眼压等,早已被临床所认同,但因其见效慢、用药剂量大,使其应用受到一定影响.若静脉给药,因甘油有溶血作用,易出现血尿而受到限制.基础研究发现果糖有抑制甘油的溶血作用[1],所制成的静脉输液甘油果糖注射液,已成为目前临床上一种新型有效的降低颅内压的药物[2].但由于我国果糖药源缺乏,价格较贵,其应用受到局限.为了寻找替代果糖抑制甘油溶血作用的药物,我们探索选择了药源充分、不良反应小的另一单糖--木糖醇,经安全性试验后[3],进行了木糖醇与果糖抑制甘油溶血作用的比较实验.
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鸦薏油复方乳剂对小白鼠活动性影响与安全性研究
目的 考察鸦薏油复方乳剂对小白鼠活动性影响及安全性考察.方法 本实验对小鼠静脉滴注,并观察其自主活动和爬竿实验;测量体外溶血性并用小鼠进行过敏反应试验.结果 小鼠尾静脉注射鸦薏油复方乳剂可减少其自主活动,60min 后可恢复正常,但对爬竿能力无影响.鸦薏油复方乳剂体外无溶血作用;无致敏性.结论 鸦薏油复方乳剂可使小白鼠自主活动减少,给药后1h 恢复正常.对肌肉协调能力无明显影响;无溶血和致敏作用;制剂符合注射剂安全要求.
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叶轮泵的溶血作用及离心力场中红细胞分布模拟初探
血泵对血细胞的损伤有可能通过计算机仿真研究,确定血细胞在离心力场中的分布是基础模拟.理想气体在重力场中的压力和密度分布可作为离心力场中红细胞分布的一个参考模型.基于波尔滋曼分布律的重力场中理想气体压力和密度分布方程有其局限性.作者提出改良分布公式: P(z)=P0exp(-ψmgz/kT).式中ψ为有效碰撞分子的修正系数,介于0-1之间.这一理论预测可由实验观察确定.在仿真模拟红细胞离心力场的分布方式时更实用.
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中草药黄根防治石棉肺的实验研究
黄根系一种茜草科植物,三角瓣花属,为广西地方区域性中草药.70年代国内一些单位将其用于矽肺治疗,收到一定效果[1],但未见用于石棉肺的报道.我们发现黄根具有突出的阻抑温石棉所致的溶血作用[2].本研究从体外和动物整体实验两方面探讨黄根对温石棉造成的肺泡巨噬细胞(AM)和肺组织损伤的阻抑作用,为石棉肺的防治寻找有效药物.
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清宫长春丹对小鼠游泳耐力及抗氧化酶活性的影响
长春丹(CCD)依据清宫秘方研制而成,由人参、当归、白芍、牛膝、麦冬、五味子、熟地及山药等24味中药组成.具有补肾益精、强筋壮骨、延缓衰老之功效.现代药理研究表明长春丹组方中的人参、当归等均含有多种抗氧化物质,人参具有抗应激作用,可提高小鼠耐疲劳、耐缺氧和耐高温能力以及抗脂质过氧化作用[1,2];当归有抗红细胞膜脂质过氧化作用,降低丙二醛(MDA)的含量,对抗MDA的直接溶血作用,当归中的阿魏酸钠可显著拮抗O2-和H2O2对红细胞的氧化作用,使膜脂质过氧化产物MDA减少.
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TiO2、SiO2、Fe纳米及微米粉体对红细胞毒性作用的比较
目的应用体外实验,比较纳米级二氧化钛(nm-TiO2)、二氧化硅(nm-SiO2)、铁(nm-Fe)及其微米粉体悬液与大鼠红细胞接触后其脂质过氧化和溶血作用变化情况.方法将不同浓度的nm-TiO2、nm-SiO2、nm-Fe及其微米粉体悬液与大鼠红细胞温育后,测定上清液中MDA含量和相对溶血率.结果在本实验所用浓度范围内,nm-SiO2、μm-SiO2和nm-Fe均能诱导红细胞氧化溶血,使MDA含量和相对溶血率明显升高,并呈量效关系,其中nm-SiO2的细胞毒性作用强;nm-TiO2、μm-TiO2和μm-Fe诱导红细胞MDA含量和相对溶血率虽也有剂量依赖趋势,但均低于5%的国家标准,可视为无溶血反应;浓度相同时,SiO2和Fe纳米粉体组MDA含量和相对溶血率比微米粉体组高(P＜0.05),而TiO2则是微米粉体组高于纳米粉体组(P＜0.05).结论同一材料不同粒径粉体之间和不同纳米粉体物质之间的红细胞毒性作用存在差异.
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人参皂苷溶血测定的实验条件研究
目的:确定人参皂苷溶血测定中优的实验条件.方法:用紫外分光光度法测定溶血度,分别对比了离心速度和时间、水浴时间、灭菌和非灭菌缓冲盐溶液及生理盐水溶液、不同酸碱度环境下的检测波长对实验结果的影响.结果:确定优的实验条件为:用生理盐水做溶剂;溶血测定中溶液的水浴条件为37℃水浴2h;离心条存为转速3000r/min离心10min;在575nm处用紫外分光光度计测定其吸光度,并计算溶血度.结论:该方法稳定性和重现性均较好,适用于人参皂苷的溶血测定.
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注射用氟罗沙星的质量控制标准及安全性
目的 对注射用氟罗沙星的质量控制标准和安全性进行研究.方法 采用RP HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱(200 mm×6 mm,5 μm),流动相为0.4 mol·L-1枸橼酸甲醇乙睛(体积比为10∶4∶1,用三乙胺调节pH值至4),检测波长为286 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温为室温.以溶血性及血管刺激性作为评价指标,考察制剂安全性.结果 本分析条件下,氟罗沙星与内标物分离度大于1.5,与其主要杂质分离度不低于1.5;注射用氟罗沙星质量浓度在0.04～0.2 g·L-1内无溶血现象,分别静滴质量浓度为0.2、1 g·L-1的氟罗沙星10 mL·kg-1,2组家兔耳缘处无明显刺激性.结论 注射用氟罗沙星安全、有效,且质量可控.
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紫外分光光度法测定中草药注射液的溶血度
根据红细胞破裂释放出来的血红素在57nm波长处有大吸收的原理,采用紫外分光光度法精确测定中草药注射剂的溶血程度.具有操作简便,稳定性好,能消除常规试管观察法带来的主观误差等优点,是一种值得推广的方法.
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纳米氧化硅对红细胞的毒性作用
[目的]探讨体外实验中纳米氧化硅和微米二氧化硅(SiO2)致人红细胞溶血及脂质过氧化作用的变化情况.[方法]将20nm和60nm两种粒径的纳米氧化硅及微米SiO2粒子悬液(质量浓度均分别为0、0.010、0.020、0.050、0.075、0.100、0.150、0.200、0.400、1.000、1.500、2.000g/L)与正常人红细胞悬液孵育,测定溶血率;两种粒径的纳米氧化硅(质量浓度为0.010、0.020、0.050、0.075、0.100g/L)及微米SiO2(质量浓度为0.200、0.400、1.000、1.500、2.000g/L)悬液分别与正常人红细胞悬液孵育后,测定溶血率及上清液中脂质过氧化产物丙二醛(MDA,硫代巴比妥酸法)含量.[结果]20nm和60nm氧化硅致红细胞溶血率先均随浓度增加而升高,分别在浓度均为0.100g/L时达到100.3%、97.7%的峰值后逐渐下降.微米SiO2粉尘随浓度升高,红细胞溶血率逐渐增加,达2g/L时达峰值93.6%.在0.010～1.000g/L浓度范围内,相同浓度的20nm和60nm氧化硅致红细胞溶血率较微米SiO2高(P<0.01);在一定浓度范围内,两种粒径纳米氧化硅及微米SiO2致红细胞溶血率及MDA生成量随其浓度的增加逐渐升高,呈明显剂量-反应关系(P<0.05).相同浓度的20nm氧化硅致红细胞溶血率及MDA的生成量较60nm氧化硅高(P<0.05). [结论]纳米氧化硅与微米SiO2一样,可诱导红细胞溶血,溶血可能与氧化损伤有关;两种粒径纳米氧化硅致红细胞溶血作用较微米SiO2的作用强,纳米氧化硅对红细胞的毒性作用有尺寸依赖效应.
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中药土贝母中环形双糖链皂苷活性成分的分离和鉴定
目的:研究中药土贝母中的环形双糖链皂苷活性成分.方法:采用稻瘟霉模型生物活性追踪方法,应用多种色谱技术进行分离,根据波谱解析和化学手段鉴定其结构.结果:分离并鉴定了4个具有诱导稻瘟霉菌丝变形活性的环形双糖链皂苷:tubeimoside Ⅰ(1),tubeimosideⅡ(2),tubeimosideⅢ(3)和tubeimoside Ⅴ(4).结论:化合物(4)为一种新的环形双糖链皂苷,是第4个从天然界获得的该类型皂苷,且对K-562和BEL-7402肿瘤细胞显示显著的细胞毒性,对1%兔红细胞悬液有较强溶血作用.
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油茶皂苷的体外溶血试验研究
目的 观察油茶皂苷(sasanquasaponin,SQS)的溶血作用和抗氧化剂对SQS溶血的影响.方法 通过常规体外试管法(肉眼观察法)及改进的休外溶血性试验法(分光光度法)来观察溶血作用.结果 SQS试液浓度≤0.39×10-4mg·mL-1时溶血率<5%,无溶血现象发生,SQS+VitC组各管溶血率也明显低于SQS组同浓度各管溶血率;肉眼观察法和分光光度法结果 一致.结论 SQS低浓度时无溶血作用,而大于一定浓度时则具有溶血作用.且溶血强度与浓度呈剂量依赖性.加入抗氧化剂VitC后再加入SQS,SQS的溶血百分率明显下降,不同程度地抑制SQS的溶血作用.
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表面活性剂溶血作用的研究进展
表面活性剂在制药、功能食品、日用化学品等领域发挥着非常重要的作用.然而,表面活性剂也有一定的毒性.本文综述了国内外有关表面活性剂溶血作用的相关研究进展,包括各类表面活性剂的溶血作用,溶血方法,溶血机制,抗溶血作用以及如何降低溶血等.
