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柴胡总皂苷对小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍的改善作用
目的:研究柴胡总皂苷连续给药抗抑郁作用起效时间及作用维持时间,以及柴胡总皂苷对皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及认知功能障碍的影响.方法:ICR雄性小鼠随机分为正常组(蒸馏水)、柴胡总皂苷低剂量组(12.5 mg·kg-1),柴胡总皂苷中剂量组(25 mg·kg-1),柴胡总皂苷高剂量组(50 mg·kg-1).每周称体重,给药13 d后,进行空场实验.给药14 d后1h,3d,6d观察柴胡总皂苷对强迫游泳实验不动时间的影响.C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组,皮质酮组(CORT组),西酞普兰组(10 mg·kg-1)和柴胡总皂苷(25 mg· kg-1)组.CORT组、西酞普兰组和柴胡总皂苷组饮用皮质酮.造模3周后,ig给予柴胡总皂苷,给药时间为2周,至第5周结束,西酞普兰ig,给药时间同柴胡总皂苷.给药结束后1d,进行强迫游泳实验和水迷宫实验.行为学实验结束后,各组各取3只小鼠,断头,取海马,蛋白质免疫印迹(Western blot)进行脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶B(TrkB)蛋白表达检测.结果:柴胡总皂苷连续给药14 d,与正常组比较,对体重和空场实验运动路程及速度无影响.停药后1h和3d,柴胡总皂苷各剂量组均可缩短小鼠强迫游泳不动时间(P ＜0.01,P＜0.05);停药后6d,柴胡总皂苷25,50 mg· kg-仍可缩短小鼠强迫游泳实验不动时间(P＜0.05).柴胡总皂苷25 mg·kg-连续给药14 d,可缩短皮质酮损伤小鼠强迫游泳不动时间(P＜0.01),缩短水迷宫实验寻台潜伏期(P＜0.05),提高穿台次数(P＜0.05),并增加皮质酮损伤小鼠海马BDNF和TrkB蛋白表达(P＜0.01).结论:柴胡总皂苷连续给药产生较快而持久的抗抑郁作用,逆转皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍.其作用机制可能与增加小鼠海马BDNF及TrkB表达有关.
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柴胡总皂苷提取物体外溶血作用
目的:考察柴胡总皂昔提取物的溶血作用和抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.方法:通过肉眼观察和分光光度法考察不同浓度柴胡皂苷的溶血作用及抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.结果:柴胡总皂苷质量浓度为在0.01,0.02 g·L-1时,其溶血曲线呈S形,溶血当量为0.01 mg,溶血指数为1∶10万,抗氧化剂与柴胡总皂苷组溶血率低于同浓度柴胡总皂苷组.结论:柴胡总皂苷具有一定的溶血作用,且溶血强度与浓度呈剂量依赖性,抗氧化剂的加入能减轻柴胡总皂苷的溶血作用.
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基原对柴胡急性毒性和皂苷类物质含量影响的实验研究
目的 对不同基原柴胡的皂苷类物质含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨基原对柴胡皂苷类化学成分含量与急性毒性的影响.方法 运用UV法、HPLC法、经典急毒实验法,进行南、北柴胡药材中柴胡总皂苷和皂苷a含量测定及急性毒性比较研究.结果 北柴胡药材中总皂苷含量4.61%,柴胡皂苷a的含量0.60%,南柴胡药材中总皂苷含量3.53%,柴胡皂苷a的含量0.46%.1日内给小鼠灌胃南、北柴胡药材分别为25.2g/kg、26.4g/kg(按含生药量计算),分别相当于临床70kg的成人每公斤体重日用量的196倍和205倍以上,观察14天,小鼠一般状况良好,无一死亡.结论 北柴胡药材毒性大于南柴胡药材,其毒性的大小与柴胡皂苷类物质含量有一定相关性.
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柴胡总皂苷精制品大鼠肝毒性病理学研究
目的 观察连续15d给予大鼠不同剂量的柴胡总皂苷醇洗脱精制样品导致大鼠肝毒性病理学损伤程度.方法 分别给大鼠灌胃高、中、低剂量的柴胡总皂苷醇洗脱精制样品,按柴胡总皂苷计算,高、中、低剂量组分别为300,150,50mg·kg-1,除观察一般状况外,剖杀大鼠,精密称取心、肝、脾、肺、肾脏重量,计算脏体比值；进行肝脏病理组织学检查.结果 不同剂量的柴胡总皂苷醇洗脱精制样品可导致大鼠体重下降,肝脏重量和肝体比值增大,病理学检查可见不同程度的肝组织损伤；上述变化随剂量的增加而逐渐加重,与空白组比较有明显差异.结论 柴胡对大鼠肝毒性损伤程度与柴胡用药剂量、柴胡总皂苷含量呈剂量依赖关系.柴胡总皂苷是柴胡导致肝毒性的毒效部位,柴胡总皂苷醇洗脱精制品(81.9％)在一定剂量下,连续给药15d即可导致大鼠明显的肝脏器质性病变,其细胞损伤乃至坏死是主要病理改变.
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柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的含量测定
目的 建立柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的含量测定方法,并对样品进行含量测定.方法 采用紫外分光光度法,以柴胡皂苷a为对照品,在波长545nm处对样品中的总皂苷进行含量测定;采用高效液相色谱法,以C18色谱柱(4.6mmX250mm.5μm)、甲醇-水为流动相,流速为1mL·min<'-1>,检测波长为210nm,测定样品中柴胡皂苷a的含量.结果 柴胡总皂苷在30～70μg/mL、柴胡皂苷a在50.4～252μg/mL范围内呈良好的线性关系,r分别为09956、0.9991;平均回收率:柴胡总皂苷为99.31%、柴胡皂苷a为99.22%;RSD:柴胡总皂苷为1.25%,柴胡皂苷a为1.07%.结论 本研究所建立的紫外分光光度法测定柴胡总皂苷及高效液相法测定皂苷a含量的方法,简便、易行、快速,结果准确可靠,适用于柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的含量测定,并为在安全剂量范围内正确使用柴胡提供依据.
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不同产地北柴胡中柴胡皂苷的测定
目的 测定不同产地柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的量.方法 采用可见分光光度法和高效液相色谱法.结果 不同产地北柴胡药材中的柴胡总皂苷和柴胡皂苷a的量差异较大,且两者差异不一致.但其柴胡总皂苷的量各产地药材均在1.3%～3.0%.结论 分析结果 表明,同一药材中柴胡总皂苷的量与柴胡皂苷a的量高低不一致未显示出相关性.为此.在评价药材的质量时,应以柴胡总皂苷量为主,兼顾其柴胡皂苷a的量为宜.
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不同产地柴胡中总皂苷及柴胡皂苷a含量测定
柴胡(Bupleurum Chinense DC.)为伞形科柴胡属植物北柴胡的根,为常用的中药之一,具有疏肝升阳、和解表里的功效[1].柴胡皂苷a(saikosaponin a)(化学结构式见图1)是其主要活性成分之一,而不同产地柴胡中其含量相差较大,为了评价不同产地柴胡的优劣,作者采用高效液相色谱法(HPLC)和可见分光光度法分别对柴胡皂苷a及柴胡总皂苷进行了含量测定.
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柴胡总皂苷对大鼠酒精性肝病预防作用及其机制研究
目的:研究柴胡总皂苷对大鼠酒精性肝病(ALD)的预防作用及其机制.方法:SD大鼠随机分为3组:酒精组、柴胡皂苷组、正常对照组,利用白酒灌胃辅以高脂饲料方法建立大鼠ALD模型,同时给予柴胡总皂苷保护,12周末处死大鼠,测定有关指标.结果:柴胡总皂苷明显升高肝组织活性、降低丙二醛(MDA)含量,降低血清转氨酶(ALT、AST)活性和甘油三酯(TC)含量,与模型组比较差异显著(P<0.01);并且能明显改善由酒精引起的肝组织脂肪变性和小叶灶性坏死,使肝小叶结构趋于正常.结论:柴胡总皂苷对ALD有明显防护作用,其机制可能与柴胡总皂苷清除自由基抑制脂质过氧化反应有关.
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不同产地及不同采收期北柴胡中柴胡总皂苷的含量测定
目的:测定不同产地及不同采收期北柴胡中柴胡总皂苷的含量.方法:以柴胡皂苷a为对照品,采用紫外可见分光光度法,于535nm处测定不同产地及同一产地不同采收期北柴胡样品中柴胡总皂苷的含量.结果:柴胡总皂苷在0.0306 ～0.3062 mg具有良好的线性关系(r =0.9996),加样回收率为101.44％,RSD为3.29％,不同产地北柴胡中柴胡总皂苷含量为0.98％ ～ 2.05％；生长年限为19个月(9月28号采集)的河南嵩县北柴胡柴胡总皂苷含量达到大富集值,为1.78％.结论:不同产地及同一产地不同采收期的北柴胡药材中的总皂苷含量存在明显差异,河南嵩县北柴胡的佳采收期为生长周期第二年的9月28号.
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苏郁滴丸中柴胡郁金提取液的大孔树脂分离纯化工艺
目的:优选出分离纯化柴胡总皂苷和姜黄素的佳工艺条件.方法:采用紫外分光光度法以柴胡总皂苷为指标测定柴胡皂苷的含量,优选出佳分离纯化条件.结果:DM130树脂对柴胡总皂苷和姜黄素的分离纯化优,以3BV/h吸附速率吸附,4BV 80%乙醇以4BV/h的流速进行洗脱效果佳,柴胡总皂苷以柴胡皂苷a计精制度为516.62%,纯度为18.03%.姜黄素精制度为433.33%.结论:DM130大孔吸附树脂可用于柴胡郁金提取液中总皂苷和姜黄素的精制.
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不同产地柴胡中柴胡皂苷的含量测定
目的测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a及柴胡总皂苷的含量.方法以柴胡皂苷a为指标,采用高效液相色谱法和可见分光光度法.结果柴胡皂苷a分别在0.9～7.2 μg(r=0.999 8)及0.04～0.36 g·L-1(r=0.999 9)内线性关系良好.柴胡皂苷a的平均回收率分别为98.5%(n=6,RSD=2.1%)和97.3%(n=6,RSD=1.9%).柴胡皂苷a的含量以陕西高,内蒙低;柴胡总皂苷以内蒙高而山西低.结论此方法简便、快速,便于对柴胡药材进行质量评价.
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柴胡总皂苷对酒精性肝病大鼠肝脏转化生长因子-β1和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响
目的 研究柴胡总皂苷对酒精性肝病大鼠肝脏转化生长因子(TGF)-β1和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达的影响,以探讨柴胡皂苷防治酒精性肝病的机制.方法 SD大鼠45只随机分为正常组、模型组、柴胡皂苷保护组,利用白酒灌胃辅以高脂饲料制备大鼠肝损伤模型,同时给予柴胡总皂苷(200 mg/kg)保护,每天一次,连续8w,8 w末处死全部大鼠.测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理形态学改变,检测肝组织TGF-β1和α-SMA的表达.结果 和模型组比较,柴胡皂苷能明显降低大鼠血清ALT、AST活性,减少肝细胞坏死和纤维组织增生；模型组肝组织中TGF-β1和α-SMA表达呈强阳性,给予柴胡皂苷后TGF-β1和α-SMA的表达明显降低.结论 柴胡皂苷对酒精性肝病具有一定的预防作用,其机制可能是通过抑制TGF-β1信号通路对肝星形细胞的活化,保护肝细胞的结构和功能,抑制细胞外基质在肝脏的分泌和沉积.
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青海产小叶黑柴胡中皂苷类成分的含量分析
目的 测定青海产小叶黑柴胡中总皂苷、柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量,为其质量评价和开发利用提供参考.方法 采用分光光度法测定小叶黑柴胡中总皂苷的含量；采用高效液相色谱法测定小叶黑柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量.结果 小叶黑柴胡中总皂苷含量＞2.77％,柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量分别高于0.54％和0.14％,其中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量远高于中国药典中柴胡含量项下的标准.结论 本方法简便快速,结果准确、稳定,适用于小叶黑柴胡中皂苷类成分的含量测定.青海产小叶黑柴胡具有较高的药用价值.
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竹叶柴胡不同采收期有效成份动态变化研究
目的 以鄂西北地区房县竹叶柴胡为样本,研究柴胡总皂苷,挥发油的动态变化规律,探讨竹叶柴胡的佳采收期.方法 以柴胡总皂苷的含量、挥发油的吸光度为指标,采用紫外-可见光光度法进行分析.结果 不同采收期竹叶柴胡中的柴胡总皂苷,挥发油含量均存在明显的差异.柴胡总皂苷的含量8月份高;挥发油的含量7月份高.结论 确定了鄂西北地区竹叶柴胡的佳采收期,为鄂西北地区柴胡药材的GAP种植提供了一定的科学依据.
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柴胡总皂苷纯化方法研究
目的 以柴胡皂苷A和柴胡皂苷D含量为指标,考察柴胡总皂苷佳纯化方法.方法 采用正丁醇萃取、D-101及AB-8大孔吸附树脂法分离纯化柴胡总皂苷,采用HPLC法测定不同纯化方法所得的总皂苷中柴胡皂苷A和柴胡皂苷D的含量.结果 正丁醇萃取、D-101及AB-8大孔吸附树脂法纯化柴胡总皂苷中胡皂苷A+D的含量分别为5.93 mg/g、5.04 mg/g和10.81 mg/g,胡皂苷A+D的重量分别为26.81 mg、19.22 mg和38.70 mg.结论 在本实验所用的方法中,AB-8大孔树脂法是分离精制柴胡总皂苷的佳方法,且树脂可重复利用,具有良好的应用前景.
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柴胡总皂苷对小鼠肠道首过效应和肝脏Cyp3a、Cyp2e1的影响
目的:研究柴胡总皂苷对小鼠肠道首过效应(Cyp3a,P-糖蛋白)和肝脏细胞色素氧化酶(Cyp3a,CYP2e1)的影响.方法:供试物灌胃给小鼠2次/d,连续3 d.实验当日,对乙酰氨基酚(Acetaminop]Flerl,APAP;P-gP底物)以50 mg/kg经口投予后60 min断头采血,并摘取肝脏和全段小肠.以分光光度法测定血中APAP浓度;用梯度离心法分离小鼠肝/肠微粒体;以分光光度法检测微粒体中CYP3a/Cyp2e1活性;以实时荧光定量法测定CYP3a11/CYP2e1 mRNA在小鼠肝脏中的表达.结果:血中APAP浓度测定结果和P-糖蛋白偶联的ATP酶活性测定结果显示,柴胡总皂苷各剂量组与对照组之间均无统计学差异(P>0.05);在肝脏和肠道微粒体实验中不论以氨基吡啉还是以红霉素为底物测定CYP3a,仅有柴胡总皂苷高剂量组(150 mg/kg)的CYP3a活性显著高于对照组(P<0.05);仅有柴胡总皂苷中剂量组(75 mg/kg)的Cyp2e1活性显著低于对照组(P<0.05);RT-PCR结果显示,仅有柴胡总皂苷高剂量(150 mg/kg)时能够诱导CYP3a11在肝脏中的表达.结论:柴胡总皂苷对小鼠肝脏和肠道中的CYP3a具有一定的诱导作用,对肝脏中的Cyp2el具有一定的抑制作用,对小鼠肠道P-糖蛋白的转运活性无影响.
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大孔吸附树脂-比色法测定柴胡口服液中总皂苷的含量
目的 进一步完善柴胡口服液的质量标准,建立该制剂中总皂苷的含量测定方法.方法 样品中的柴胡皂苷经大孔吸附树脂富集后,以柴胡皂苷a为对照品,采用对二甲氨基苯甲醛-磷酸法显色,于545 nm波长处测定总皂苷的含量.结果 柴胡皂苷a在18.7～66.4μg·ml-1范围内与吸光度有良好线性关系,r= 0.999 6,平均加样回收率为98.06%,RSD= 1.1%.结论 该方法稳定、准确、可靠,可作为柴胡口服液中皂苷类成分的质量控制方法.
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柴胡总皂苷提取工艺的优化
目的 考察柴胡中总皂苷的佳提取工艺.方法 以柴胡总皂苷提取率为评价指标,采用单因素实验与正交实验设计优选出柴胡中柴胡总皂苷的提取工艺.结果 柴胡总皂苷的优提取工艺为:粉碎粒径＜180 μm的柴胡粉末在80 ℃条件下以70%乙醇回流提取3次,每次1 h,每次加乙醇量为柴胡粉末量的8倍.结论 验证实验表明优选出的提取工艺稳定可行,适用于柴胡总皂苷的提取.
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鄂西北地区不同生长条件和品种柴胡中总皂苷含量比较
目的:比较鄂西北地区不同生长条件柴胡中柴胡总皂苷的含量.方法:使用可见分光光度法.结果:不同产地、不同品种柴胡中总皂苷含量有一定差异,同一区域种植和野生柴胡总皂苷含量无明显差异.结论:实行中药现代化必须大力推进规范化种植(GAP),鄂西北地区具有进行柴胡GAP种植的地理条件.
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柴胡总皂苷抗内毒素活性研究
目的:探讨柴胡总皂苷(BCS)抗内毒素活性.方法:从柴胡中提出柴胡总皂苷,用体外鲎试验法、细菌内毒素致兔热模型、细菌内毒素致卡介苗增敏小鼠毒性证实其抗内毒素活性.结果:体外鲎试验法显示将50 mg*ml-1的柴胡总皂苷溶液稀释至32倍仍有直接破坏内毒素作用;解热实验显示,BCS+LPS组、模型组(LPS)、BCS组的大升温和平均升温分别为0.05℃和0.75℃,0.01℃和-0.25℃,0.49℃和-0.37℃,BCS+LPS组与模型组相比差异显著(P＜0.01);细菌内毒素致小鼠毒性实验显示,BCS+LPS组死亡率(13.3%)大于BCS组(5.0%),但与模型组(90.0%)相比,差异显著(P＜0.01).结论:柴胡总皂苷具有抗内毒素活性.
