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063 丙型肝炎病毒RNA聚合酶核糖核苷复合物的结构分析
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应用健择治疗腺癌的临床体会
健择(Gemcitabine吉西他滨)为抗嘧啶代谢类抗肿瘤新药,是阿糖胞苷类似物和核糖核苷还原酶抑制剂,属细胞周期特异性药物 .我院1999年9月用其治疗肺腺癌患者5例,胰腺癌和乳腺癌患者各1例,现将其临床体会报告如下:1 临床资料1.1 一般资料本组7例患者中,男4例、女3例,年龄39~68岁;肺腺癌5例,胰腺癌、乳腺浸润性导管癌各1例.病期均为Ⅳ期,伴有脑转移、多发骨转移各2例.患者在使用健择前,均有使用多方案、多周期化疗史.
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人FL-FEN-1基因功能的初步研究
目的:FEN-1是一种结构特异性核酸酶,它识别特定的核酸分叉结构,并切除含有游离5'末端的单链核酸.FEN-1具有对DNA复制和修复都必需的双重功能.对酵母和体外实验的研究表明,在DNA复制过程中,FEN-1去除了冈崎片段前端RNA引物的后一个核糖核苷;在DNA修复中,FEN-1参与了损伤碱基的修复过程.方法和结果:采用反义核酸技术,从人FEN-1表达质粒hPET-FCH经双酶切得到1084 bp的hFEN-1片段,反向克隆入采用经改建的哺乳动物表达载体pMAMneoAmp ,并得到hFEN-1反义表达质粒pMAMneoAmp FNB .采用改进的磷酸钙介导的细胞转染法,将pMAMneoAmp FNB 和pMAMneoAmp 质粒分别导入FL细胞,用含400 μg/mL G418的MEM完全培养基筛选,分别得到FL-FEN 和FL-M细胞.细胞生长曲线的测定发现,FL-FEN-1 在地塞米松的诱导下,细胞生长速度明显下降,细胞倍增时间TD为3.03 d,而FL和仅含有空载体的FL-M细胞在地塞米松存在下的细胞倍增时间TD分别为2.03 d和2.22 d,不经地塞米松诱导的FL-FEN-1 细胞的TD为2.38 d.采用流式细胞仪对细胞周期的研究表明,在地塞米松诱导下,用不含精氨酸的MEM培养48 h同步化处理后,FL-FEN-1 细胞的S期百分比为9.95%,而FL和FL-M细胞分别为26.31%和23.07%.采用DEAE介导的细胞转染法将穿梭质粒pZ189分别转染经地塞米松诱导的FL、FL-M和FL-FEN-1 细胞,以Hirt's法提取质粒并转化大肠杆菌MBM7070,得到的自发突变率依次为3.91/104、7.79/104和14.4/104.结论:在哺乳动物细胞中FEN-1基因在DNA复制和细胞繁殖的过程中起着重要作用,并且可能参与维持细胞DNA遗传稳定性的过程.
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培美曲塞治疗非小细胞肺癌临床研究进展
培美曲塞(pemetrexed disodium,Alimta)是一种"多靶点抗叶酸制剂",由美国礼来公司作为抗代谢类抗癌药进行开发的.这种抗代谢药物阻断了DNA复制以及细胞分裂所需要的酶--甘氨酸核糖核苷胸苷酸合成酶(TS)、甲酰基转移酶(GARFT)、二氢叶酸还原酶(DHFR),使细胞分裂停止于S期,从而抑制肿瘤细胞的生长.它对多种肿瘤有抑制作用,是第一个治疗胸膜间皮瘤获得满意效果的药物,并于2004年2月5日获得美国食品与药品管理局(FDA)批准,用于治疗无法手术或不宜实行手术的恶性胸膜间皮瘤患者.2004年8月19日,美国FDA批准了培美曲塞的第2个适应证--复治的晚期或转移性非小细胞肺癌(NSCLC).有关培美曲塞治疗NSCLC的研究已取得了一些进展,该药很有可能成为治疗NSCLC的一线用药.