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酒精对人牙周膜细胞RANKL/OPG基因表达的影响
目的 研究酒精对人牙周膜细胞RANKL和OPG表达的影响.方法 酶消化法结合组织块法分离培养人牙周膜细胞,取4-6代细胞,在0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20 mol/L等不同浓度酒精环境下培养6、12、24、48h,RT-PCR检测RANKL、OPG mRNA的表达.采用SPSS 18.0软件包,对数据进行单因素方差分析.结果 0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20 mol/L浓度实验组RANKL mRNA表达量均高于对照组,具有统计学差异(P＜0.05),并且随着酒精浓度的升高,RANKL mRNA表达逐渐升高.0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20mol/L浓度实验组OPG mRNA表达量均低于对照组,具有统计学差异(P＜0.05),并且随着酒精浓度的升高,OPG mRNA的表达逐渐下降.结论 不同浓度的酒精可以影响人牙周膜细胞中RANL和OPG mRNA表达,在牙周炎骨吸收中起促进作用.
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Ad5-hOPG-EGFP转染对比格（Beagle）犬牙周膜细胞生物学活性的影响
目的：利用在体外进行重组后的重组腺病毒（Ad5-hOPG-EGFP）载体对犬牙周膜细胞进行转染，观察牙周膜细胞（PDLCs）的生物学活性是否受影响。方法利用在体外重组后的腺病毒载体（本身携带有hOPG基因）对犬牙周膜细胞进行转染，并利用生物形态学和生物化学技术对其细胞活性进行检测。结果转染了重组腺病毒Ad5-hOPG-EGFP的Beagle犬PDLCs在形态学上与对照组没有明显差异，仍保持了较强的增殖能力。结论腺病毒载体转染后的Beagle犬PDLCs仍保持了良好的生物学活性。
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外周血脂联素在类风湿关节炎疾病骨与关节损伤中的临床意义
目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血脂联素(AD)水平的变化及其与RA患者骨与关节损伤之间的相关性.方法 观察38例RA患者和34例健康对照组的年龄和身体质量指数(BMI),所有RA患者摄双手X线检查并进行Sharp评分.详细记录RA患者的各项临床及实验室指标,包括病程、关节肿胀数、关节压痛数、C-反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)、自评分、28个关节的疾病活动度评分(DAS28评分);采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测38例RA患者和34例正常人外周血AD水平并进行对比分析.结果 RA患者血清中AD水平高于对照组[(17.5±7.5)μg/mL vs.(13.6±5.5)μg/mL,P=0.015];AD水平与年龄呈正相关(r=0.327,P=0.045);与病程、BMI、关节肿胀数、关节压痛数、血沉、CRP、RF、抗CCP、自评分、DAS28评分均无相关性(P>0.05);血清AD水平与双手X片关节骨侵蚀评分、双手X片关节间隙狭窄评分和双手X片Sharp评分均无相关性.结论 RA患者血清中AD水平较正常人明显增高,提示血清AD水平可以做为RA患者的生物标志物,RA患者血清AD水平与疾病活动度无关,与骨和关节的损伤也无相关性.
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阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响
目的:研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨胶囊治疗骨质疏松的分子机制.方法:3月龄wistar(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照组的含药血清.将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液.培养细胞分为5组,分别加同体积药液,对照组仅加培养液,继续培养.采用MTT比色分析法、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内BGP含量,RT-PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达.结果:阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖,与对照组相比,差异显著(P＜0.05).成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清1 000 ml/L时强,与雌激素组比较无显著性差异 (P＞0.05),且明显高于对照组(P＜0.05).成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1 000 ml/L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异 (P＞0 05),且明显低于对照组(P＜0.05).结论:阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂,分子水平上调节OPG/RANKL表达而治疗骨质疏松.
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痹痛定分散片对AA模型骨组织OPG、RANKLmRNA表达的影响
目的 通过观察痹痛定分散片对BALB/C小鼠从模型骨组织中的骨保护素(OPG)、细胞核因子-kB受体活化因子配体(RANKL)mRNA相对表达水平的影响,探讨其防治类风湿关节炎骨质破坏的作用机制.方法 取BALB/C种小鼠48只,以Freund's完全佐剂致炎,复制AA模型,随机分为6组,采用半定量RT-PCR法检测骨组织OPG、RANKL mRNA表达水平的变化.结果 各治疗组均能有效降低骨组织RANKLmRNA表达水平,升高0PGmRNA表达水平,RANKL/OPGmRNA比值降低,与正常对照组比较(P＜0.01),各组与模型对照组比较(P＜0.01),且痹痛定分散片大剂量、中剂量组优于小剂量组和痹痛定胶囊组.结论 痹痛定分散片能明显增加骨组织OPG mRNA表达量,抑制骨组织RANKL mRNA表达量,降低RANKL/OPGmRNA比值,从而有效延缓类风湿关节炎骨质破坏.
关键词： 痹痛定分散片 类风湿关节炎 骨保护素 细胞核因子-kB受体活化因子配体 骨质破坏 -
续苓健骨方对骨质疏松症模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体及骨保护素基因表达的影响
目的 研究续苓健骨方对骨质疏松症模型大鼠骨密度的影响及作用机制.方法 将50只SD雌性大鼠按随机数字表法分为假手术组,模型组,续苓健骨方低、中、高剂量组,每组10只.除假手术组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除术制备骨质疏松模型.造模后30 d开始灌胃给药,续苓健骨方低、中、高剂量组分别灌胃续苓健骨方药液7.5、15、30 g/kg;假手术组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d.给药12周后取材.采用双能X射线检测左胫骨骨密度;ELISA法检测大鼠血清雌激素酮、骨钙素水平;荧光定量PCR法检测大鼠腰椎骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor κB ligand,RANKL) mRNA表达水平.结果 与模型组比较,续苓健骨方中、高剂量组骨密度[(0.215±0.010) g/cm2、(0.222±0.013) g/cm2比(0.196±0.016) g/cm2]增高(P＜0.05或P＜0.01);续苓健骨方高剂量组骨钙素[(87.0±8.9) ng/L比(100.5±16.8) ng/L]降低(P＜0.05),OPGmRNA[(0.97±0.23)比(0.78±0.17)]表达升高(P＜0.05);续苓健骨方低、中、高剂量组RNAKL mRNA[(1.12±0.17)、(0.97±0.38)、(1.04±0.29)比(1.31±0.18)]表达降低(P＜0.05).结论 续苓健骨方可提高骨质疏松模型大鼠的骨密度,可能与上调OPG mRNA、降低RANKL mRNA表达有关.
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姜黄素对佐剂性关节炎大鼠血清骨保护素和核因子κ B受体活化因子配体蛋白表达及骨密度的影响
目的：观察姜黄素对佐剂性关节炎( adjuvant arthritis,AA)大鼠血清骨保护素( osteo-protegerin,OPG)、核因子κB 受体活化因子配体( receptor activator for nuclear factor-κ B ligand, RANKL)表达以及骨密度的影响,探讨姜黄素防止类风湿关节炎( rhuematoid arthritis,RA)骨破坏的作用机制。方法取SD大鼠30只,随机分为模型组、姜黄素组及正常组,第28天腹主动脉取血,采用ELISA法来检测血清中RANKL、OPG蛋白的表达,取血后处死大鼠,剥离大鼠右侧胫骨,行骨密度检查。结果(1)与正常组比较,造模组即模型组与姜黄素组大鼠血清RANKL均显著升高( P<0．01),血清OPG显著降低(P<0．01),RANKL/OPG比值显著升高(P<0．01)；(2)与模型组比较,治疗组即姜黄素组血清RANKL显著降低( P<0．01),血清OPG均显著升高( P<0．01), RANKL/OPG比值均显著降低(P<0．01)；(3)3组大鼠胫骨整体骨密度无显著性差异(P>0．05),姜黄素组大鼠兴趣区骨密度值显著高于模型组(P<0．01)。结论姜黄素对AA大鼠具有良好的治疗作用,能够通过调节血清RANKL及OPG的表达,来调节OPG/RANKL通路,从而提高AA大鼠骨密度,抑制其骨丢失。
关键词： 姜黄素 佐剂性关节炎 骨密度 骨保护素 核因子κB受体活化因子配体 -
自拟益肾健骨汤对骨质疏松性骨折术后恢复期患者骨密度、骨代谢、骨折愈合相关指标水平的影响
目的 观察用自拟益肾健骨汤对骨质疏松性骨折术后恢复期患者骨密度、骨代谢、骨折愈合相关指标水平的影响.方法 将宝鸡市中心医院诊治的100例骨质疏松症性骨折术后恢复期患者按照随机数字表法分为对照组和观察组患者各50例.对照组患者给予常规治疗;观察组患者则在此基础上给予多年自拟益肾健骨汤内服,监测用药前后骨密度、骨代谢、骨折愈合相关指标水平变化.结果 治疗后观察组患者的股骨颈、腰椎、粗隆间、Wards三角区等部位的骨密度明显高于治疗前及对照组患者(P<0.05);骨代谢指标骨型碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BLAP)、骨钙素(osteocalcin,OC)显著高于对照组,Ⅰ型胶原羧基端肽 β 特殊序列(β-Crosslaps,β-CTX)、全甲状腺旁腺素(immunoreactive parathyroid hormone,iPTH)等骨代谢指标水平则显著低于对照组(P<0.05);血清骨折愈合相关指标胰岛素样生长因子-1(sulin-like growth factor-1,IGF-1)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)显著高于对照组,核因子 κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-kappa B ligand,RANKL)水平则显著低于对照组(P<0.05).结论 自拟益肾健骨汤联合钙剂治疗脾肾阳虚证骨质疏松性骨折术后恢复期患者疗效满意,利于提高骨密度,改善骨代谢,其机制可能与调节外周血骨折愈合相关指标IGF-1、OPG、RANKL浓度以抑制破骨细胞的生成、促进成骨细胞的增殖而调节骨代谢和骨转换有关,值得临床推广.
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六味地黄丸对糖尿病伴牙周炎大鼠牙周组织中OPG与RANKL的影响
目的 通过研究六味地黄丸对糖尿病伴牙周炎大鼠牙周组织中骨保护素(OPG)与核因子-κB受体活化子配体(RANKL)的影响,探索六味地黄丸对牙周炎治疗的作用机制.方法 选用清洁级6周龄雄性SD大鼠30只,采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型,采用钢丝结扎法建立牙周炎模型.动物模型建立后,随机分成实验组和对照组,实验组进行六味地黄丸灌胃,对照组采用蒸馏水灌胃;并于灌药后8周处死动物,解剖上颌骨,制作3 μm厚连续切片,荧光免疫组化检测牙周组织中RANKL、OPG表达.激光共聚焦显微镜(LSCM)采集图像,行灰度值分析,比较OPG和RANKL在糖尿病实验组和对照组大鼠牙周组织中的表达差异.结果 灌药后8周,实验组的OPG灰度值比对照组增加,且差异有统计学意义(P＜0.05),而实验组RANKL灰度值比对照组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 六味地黄丸对糖尿病伴牙周炎大鼠的牙周组织炎症有明显抑制作用,六味地黄丸对牙周炎治疗机制可能是通过RANKL-细胞核因子κB受体活化因子(RANK)-OPG系统来实现.
关键词： 六味地黄丸 牙周炎 糖尿病 核因子-κB受体活化子配体 骨保护素 -
正常健康人群外周血液中OPG和sRANKL浓度测定
目的:对正常健康人群外周血液中骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子kappaB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)浓度测定,明确其与年龄、性别之间是否存在一定关系.方法:收集220例正常健康人的清晨外周血液,其中男108例,女112例;年龄35～70岁,平均52.5岁.用ELISA法测血清中OPG、sRANKL浓度.结果:在35～70岁正常健康人群外周血液中的OPG、sRANKL浓度:女性,OPG 21.95～315.47 pg/ml,sRANKL 10.25～370.20pmol/L;男性,OPG 14.78～192.55 pg/ml,sRANKL9.25～300.32pmol/L.46岁后女性血液中OPG浓度与年龄存在正相关;57岁后女性血液中sRANKL浓度明显升高.结论:年龄和性别影响外周血液中OPG、sRANKL浓度.46岁后女性血液中OPG浓度随年龄增加而升高,女性血液中sRANKL浓度57岁后明显升高.
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重组人骨保护素与重组核因子κb活化因子受体蛋白对破骨前体细胞分化的影响
目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响.方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25 (OH) 2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法.研究分3组:rhRANK组:10-5 g/L；rhOPG-Fc组:10-5 g/L;空白对照组.作用9d后观察破骨细胞数目和形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数.结果:在空白对照组,小鼠成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养6d后,开始出现多核细胞,9d时可见大量成熟多核细胞,经TRAP染色证实为成熟破骨细胞,而rhRANK组及rhOPG-Fc组TRAP染色阳性多核细胞数较对照组均减少,特别是rhRANK组减少更明显.骨片吸收陷窝计数显示rhRANK组及rhOPG-Fc组较对照组也明显减少,而相对来说,rhRANK组较rhOPG-Fc组更少.结论:rhOPG-Fc与rhRANK均可以有效抑制破骨前体细胞分化成为成熟破骨细胞,且rhRANK较rhOPG-Fc抑制效果更明显.
关键词： 骨保护素 核因子κb活化因子受体蛋白 破骨前体细胞 细胞分化 -
跑台运动对去卵巢大鼠骨组织中OPG、RANKL和RUNX2 mRNA表达的影响
目的:观察去卵巢大鼠经跑台运动后其骨组织中OPG、RANKL和RUNX2 mRNA表达变化,探讨力学刺激防治绝经后骨质疏松的作用机制.方法:健康3月龄雌性SD大鼠30只,体重(270±10)g,按随机方法平均分为假手术组、去卵巢组和跑台运动组,每组10只.假手术组仅在术中牵动卵巢并不行卵巢切除,其余两组均行卵巢切除术.假手术组和去卵巢组大鼠正常饲养;跑台运动组大鼠在术后1周开始在动物跑台上运动,跑速为18m/min,每次45 min,1次/d,6d/周,共训练11周.12周后处死所有动物,取左侧股骨头,脱钙后石腊切片,用倒置相差显微镜观察其组织学变化;取右股骨头提总RNA,实时PCR法检测OPG、RANKL和RUNX2的mRNA表达情况.结果:去卵巢组骨小梁稀疏,骨细胞少,跑台运动组骨小梁粗壮增厚.去卵巢组骨组织中OPG的mRNA表达为(0.131±0.080),RNAKL的mRNA表达为(8.013±3.550),RUNX2的mRNA表达为(3.245 ±5.090).跑台运动组其骨组织中OPG的mRNA表达为(0.566±0.260),RANKL的mRNA表达为(5.232±3.670),RUNX2的mRNA表达为(2.753±3.680).和去卵巢组比较,跑台运动组的OPG的mRNA表达升高,差异有统计学意义;而RANKL和RUNX2的表达下降,差异无统计学意义.结论:力学刺激能通过促进去卵巢大鼠骨组织中OPG的表达而发挥其抗绝经后骨质疏松的效果,这对今后研究绝经后骨质疏松症的治疗提供了新的思路.
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淫羊藿苷对人成骨细胞增殖及OPG蛋白表达的实验研究
目的:建立体外培养人成骨细胞系,观察淫羊藿苷对人成骨细胞增殖的影响,以及对人成骨细胞内骨保护素(Osteoprorotegerin,OPG)蛋白表达的影响,探讨淫羊藿苷促进人成骨细胞骨形成的可能作用机制.方法:将手术中取得的人股骨头松质骨骨片,使用酶消化法进行培养,取生长良好的第3代人成骨细胞进行实验.实验分为4组,对照组给予15%NCS-DMEM-F12(1:1)培养液培养;淫羊藿苷组分别于正常培养液内添加终浓度为10-6、10-8、10-10mol/L淫羊藿苷.噻唑蓝比色法(MTT)分别在培养1、3、5、7、9 d后观察各组人成骨细胞的增殖情况,用蛋白免疫印迹方法(in-cell western blot)测定各组培养8、10、12 d后人成骨细胞内OPG蛋白的表达情况.采用重复测量的方差分析方法,比较各组间在不同时间点的作用差异.结果:MTT结果,淫羊藿苷组具有促进人成骨细胞增殖的作用,并呈明显的量效关系,即随着淫羊藿苷浓度的增高,其促人成骨细胞增殖的能力增强,以10-6mol/L淫羊藿苷组(0.402±0.033)促成骨细胞增殖的作用显著,与对照组(0.268±0.031)比较差异有统计学意义(P＜0.05).在时效关系的研究中,随着培养天数的延长,人成骨细胞的量逐渐增加,人成骨细胞于第5天时进入快速生长期,第7天进入平台期;淫羊藿苷组从第5天开始促进人成骨细胞的增殖,第7、9天仍然具有明显的促成骨细胞增殖的作用,以第9天促增殖作用强.其中,第9天10-6mol/L淫羊藿苷组(0.402±0.033)与对照组(0.268±0.031)比较有统计学意义(P＜0.01).OPG表达结果,对照组人成骨细胞培养至第8天时检测到OPG蛋白的表达,表达量为1.01±0.08,第12天达到表达高峰为1.80±0.10,两个值比较有统计学差异(P＜0.05);在观察的不同天数内,不同浓度的淫羊藿苷组人成骨细胞内OPG蛋白表达低于对照组,且随着淫羊藿苷浓度的降低,OPG蛋白的表达量逐渐降低,差异有统计学意义(P＜0.05);干预12d,10-6mol/L淫羊藿苷组OPG量(1.67±0.13)和10-8mol/L淫羊藿苷组OPG量(1.64±0.05)比较,无统计学差异(P＞0.05).结论:淫羊藿苷促人成骨细胞骨形成能力的作用途径之一,是通过提高人成骨细胞的增殖能力而实现.
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黄芪散对高糖作用下成骨细胞相关功能的影响
目的:观察黄芪散含药血清对高糖条件下成骨细胞功能的影响及与糖尿病性骨质疏松发病机制相关基因的影响,探讨黄芪散(HQS)对糖尿病性骨质疏松症的疗效机制.方法:选用健康清洁级5周龄Wistar大鼠10只,随机分为正常组和药物组.制备黄芪散含药血清和空白血清,选用健康清洁级新生大鼠乳鼠4只,体外以酶消化法分离培养新生乳鼠颅骨成骨细胞(0b),行细胞计数(CCK-8)法测定高糖条件下(25.5 mmol·L-1)5％,10％,20％,30％含药血清对细胞增殖的影响,选取增殖活性佳血清浓度,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测黄芪散对成骨功能相关基因骨桥蛋白(OPN),骨钙素(OC),碱性磷酸酶(ALP)和胰腺-骨骼相关基因骨保护素(OPG),叉头转录因子1(FoxO1)表达的影响.结果:10％和30％血清浓度组细胞增殖较空白组有明显升高(P＜0.05);20％血清浓度组较空白组有显著升高(P＜0.01).与空白组比较,5％浓度条件下,OPN,OPG mRNA表达明显下调(P＜0.05);10％浓度条件下,OC,ALP,OPNmRNA表达明显上调(P＜0.05,P＜0.01);OPG,FoxO1 mRNA较空白组表达显著下调(P＜0.01).20％浓度和10％浓度条件差异性一致,OPN,OPG,FoxO1 mRNA影响趋势较10％浓度药物血清组更明显.20％浓度血清条件下,与空白组比较,OC和OPN蛋白表达显著上调(p＜0.01),OPG蛋白表达显著下调(P＜0.01).结论:黄芪散对糖尿病性骨质疏松的疗效机制可能与其促进高糖作用下成骨细胞增殖作用有关,与下调胰腺-骨骼相关基因OPG,FoxO1表达有关.
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六味地黄汤及其“补泻”药对对绝经后骨质疏松大鼠股骨和肾脏中OPG及RANKL蛋白表达的影响
目的:观察六味地黄汤及其3个“一补一泻”药对对绝经后骨质疏松模型大鼠股骨及肾脏中骨保护素(OPG)及核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的影响.方法:将3～4月龄SD大鼠随机分为空白组(假手术组,蒸馏水10 mL·kg-1),模型组(蒸馏水10 mL·kg-1),六味地黄汤组(6.75 g·kg-1),山茱萸-牡丹皮组(1.89 g·kg-1),熟地黄-泽泻组(2.97 g·kg-1),山药-茯苓组(1.89 g·kg-1),阿仑膦酸钠组(阳性药物组,6.3 g·kg-1).除空白组外,其余各组大鼠均采用摘除双侧卵巢的方法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型.造模后第16天开始,各组按相应剂量连续灌胃给药90 d,每周观察各组大鼠体重的变化,并采用免疫组化法检测股骨成骨细胞和肾脏肾小管上皮细胞中OPG,RANKL蛋白的表达.结果:与模型组比较,六味地黄汤组能上调股骨成骨细胞及肾脏肾小管上皮细胞中的OPG的蛋白表达、下调RANKL的蛋白表达;但山茱萸-牡丹皮药对仅能降低股骨成骨细胞中OPG的灰度值(P＜0.05),升高RANKL的灰度值(P＜0.01),即山茱萸-牡丹皮药对仅能上调股骨成骨细胞中OPG的蛋白表达、下调RANKL的蛋白表达(灰度值越低,OPG,RANKL的蛋白表达越强).结论:六味地黄汤改善绝经后骨质疏松症的机制之一可能与其方中山茱萸-牡丹皮药对调节股骨中的OPG及RANKL的蛋白表达有关.
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不同治法方药对激素性股骨头坏死鸡股骨头OPG,RANKL mRNA表达的影响
目的:观察比较健脾化痰、活血通络(简称健脾)与补肾壮骨、活血通络(简称补肾)2种治法对激素性股骨头坏死鸡股骨头骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、NF-κB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)mRNA表达的影响,探讨2者防治股骨头坏死的分子机制.方法:64只来杭鸡,随机分为对照、模型、健脾和补肾组,除对照组外均胸肌注射甲基泼尼松琥珀酸钠(5.2 mg·kg(-1)),健脾及补肾组在造模同时ig给予相应中药(6,9 g·kg(-1)·d(-1)),连续16周.给药8周和16周后,分批处死动物,取双侧股骨头,原位杂交法检测股骨头内OPG,RANKL mRNA的表达情况,并计算其比值.结果:与止常组相比,模型组8周和16周时股骨头内OPG阳性细胞数显著减少,分别为(778±189),(696±108)个,RANKL分别为(717±164),(519±162)个,明显增多(P<0.01);与模型组相比,健脾方在8周就可以明显上调OPG阳性细胞数达(1 049±211)个,同时也降低RANKL阳性细胞数至(454±166)个(P<0.05或P<0.01),升高OPG/RANKL比值(P<0.05),而补肾组此时作用不明显,16周时作用比健脾组强(P<0.05).结论:健脾化痰、活血通络和补肾壮骨、活血通络2种不同治法方药均可调节股骨头内OPG和RANKL的基因表达,这叮能是其有效抑制破骨细胞分化、防治激素性股骨头坏死的作用机制之一;健脾化痰、活血通络方药起效时间相对较旱.
关键词： 股骨头坏死 骨保护素 NF-κB受体活化因子配基 -
更年春方对骨代谢相关基因表达的影响
况.结果:更年春高剂量组可上调OVX大鼠骨组织中OPG的mRNA的表达,下调M-CSF的mRNA的表达,使RANKL/OPG值下降.结论:更年春方抗绝经后骨质疏松骨丢失的分子机制可能与其调控OPG和M-CSF的表达,影响RANKL/OPG值有关.
关键词： 更年春 骨保护素 破骨细胞分化因子 巨噬细胞集落刺激因子 -
补骨防疏汤对骨质疏松症大鼠骨组织OPG表达的影响
目的:观察补骨防疏汤对骨质疏松症大鼠骨组织骨保护素(OPG)的影响.方法:Wistar大鼠分为4组,采用维甲酸70 mg· kg-1·d-1ig连续2周,制备大鼠骨质疏松模型,观察灌服中、高剂量补骨防疏汤(40,20 g·kg-1)治疗4,8,12周后大鼠骨组织OPG的变化及骨小梁形态计量学变化.结果:维甲酸ig 2周后,模型对照组大鼠骨小梁明显稀疏,骨小梁面积为(22.52±3.15)％,骨组织OPG的面积积分吸光度(IA)为0.29±0.15,均显著低于正常组(P＜0.01),说明造模成功.补骨防疏汤治疗后中、高剂量组大鼠骨小梁面积为(36.41 ±1.40)％,(37.58±1.40)％,显著高于模型对照组(P＜0.01),骨组织OPG的IA为2.41±1.40,3.07±0.40,OPG阳性表达明显增多(P＜0.01),骨组织病理变化明显改善.结论:补骨防疏汤能显著提高骨质疏松症大鼠OPG表达,改善骨质疏松的病理变化.
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补肾健脾活血方对去卵巢大鼠BMP2/Smad信号通路的影响
目的:研究补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨形态发生蛋白2(BMP2)/Smad信号通路的影响.方法:72只6月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组(24只),手术组(48只),双侧卵巢切除法造模,术后3个月两组各随机选取12只检测骨密度验证造模成功.手术组剩余的36只大鼠随机分为双侧卵巢切除模型组(OVX),补肾健脾活血方组(BSJPHX,给药剂量2.979 g·kg-1),阿仑膦酸钠维D3片(Ⅱ)组(ALN,给药剂量1.02 mg· kg-),假手术组,OVX组给与等体积生理盐水灌胃.12周后处死各组大鼠,双能X射线法检测大鼠全身骨密度,生物力学试验进行胫骨三点弯曲试验,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测BMP2,Smad1,Runt相关转录因子2(Runx2),骨保护素(OPG)基因的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BMP2,p-Smad1,Runx2,OPG蛋白的表达.结果:造模3个月后,与假手术组比较,OVX组大鼠骨密度明显降低,大载荷及刚度均降低,BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);给药3个月后,与OVX组比较,BSJPHX组,ALN组骨密度均明显增高,大载荷及刚度均增加,能显著提高BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平(P＜0.05).结论:补肾健脾活血方既能通过调控BMP2/Smad通路的信号转导,又能上调OPG的表达,这可能是补肾健脾活血方防治绝经后骨质疏松症的机制之一.
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赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清OPG/RANKL水平的影响
目的:观察赤雹根总皂苷(TSTR)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠血清骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响,探讨TSTR治疗类风湿性关节炎的机制.方法:SD大鼠,随机取10只作为空白对照,其余大鼠采用弗氏完全佐剂制备关节炎模型,将造模成功的关节炎大鼠随机分为模型对照组、TSTR 40,80,160 mg·kg-1·d-1剂量组、雷公藤多苷12 mg·(kg·d)-1阳性对照组.各组分别ig给予相应的药物,模型对照组ig等容积的水.连续ig给药21 d后处死.采用ELISA法检测血清OPG,RANKL水平.结果:TSTR各剂量组大鼠血清RANKL水平分别为(98.74 ±10.17),(87.81±17.78),(77.75±14.61) pmol·L-1,均显著低于模型组(120.80±12.14) pmol·L-1(P ＜0.05或P＜0.01)；TSTR各剂量组血清OPG水平分别为(71.67 ±2.62),(77.50 ±0.93),(91.04±7.26) pmol·L-1,均显著高于模型组(53.64 ±3.46)pmol·L-1(P＜0.05或P＜0.0l)；TSTR各剂量组OPG/RANKL比值分别为0.71 ±0.08,0.89±0.17,1.13 ±0.24,显著高于模型对照组0.43±0.06(P＜0.05或P＜0.01).结论:TSTR可能通过影响OPG/RANKL系统而对破骨细胞功能产生影响,从而防治骨破坏.
关键词： 赤雹根总皂苷 类风湿性关节炎 骨保护素 核因子-κB受体活化因子配体
