首页 > 文献资料
-
慢性间歇性缺氧对大鼠骨代谢及OPG、RANKL基因表达的影响
目的 通过建立wistar大鼠慢性间歇性缺氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)模型探讨CIH对骨代谢及骨组织骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κ B ligand,RANKL)基因表达的影响.方法 20只健康wistar大鼠随机分为正常对照组及CIH组,每组10只.对照组置于空气循环舱内,CIH组于置于间歇性缺氧舱内,每日8h,共8周.应用双能X线骨密度仪测定大鼠全身、股骨、腰椎骨密度(bone mineral density,BMD),采用ELISA法检测大鼠血清骨特异性碱性磷酸酶(bone specific alkaline phosphatase,BALP)、骨钙素(bone glaprotein,BGP)、Ⅰ型胶原N端前肽(type Ⅰ collagen N terminal peptide,PINP)、Ⅰ型胶原羧基端肽β降解产物(β-C-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,β-CTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)水平,应用Real-time PCR技术测定股骨OPG、RANKLmRNA相对表达量.结果 与对照组相比,CIH组全身和股骨BMD下降[(0.141±0.028) vs(0.122±0.027)和(0.143±0.026) vs(0.125±0.034)]、血清BGP降低[(26.42±3.71) vs (22.05±2.16)]、血清β-CTX和TRAP升高[(132.24±26.25) vs (173.82±22.16)和(20.12±2.43) vs (23.58±2.36)]、股骨组织OPG mRNA相对表达量降低[(1.031±0.125) vs(0.924±0.141)]、RANKL mRNA相对表达量升高[(0.856±0.068) vs (1.113±0.134)],差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 慢性间歇性缺氧可使骨组织OPG mRNA表达减少、RNAKL mRNA表达增加,影响骨代谢,降低骨密度,增加了骨质疏松的发生风险.
关键词： 慢性间歇缺氧 骨代谢 骨保护素 核因子κB受体活化因子配体 -
去卵巢大鼠骨代谢及骨髓细胞OPG、RANKL基因表达的实验研究
目的 观察去卵巢大鼠血清Ⅰ型原胶原C-端前肽(PICP)、骨钙素(BGP)和Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ICTP)的变化,以及骨髓细胞骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的基因表达变化.方法 取3月龄雌性SD大鼠16只,随机分2组:假手术对照组(8只)和假手术组(8只).采用双侧卵巢切除术复制骨质疏松大鼠模型.术后12周,应用双能X线吸收仪法(DXA)测骨密度,ELISA法测量血清PICP、BGP及ICTP浓度,qRT-PCR法半定量骨髓细胞OPG和RANKL mRNA表达量.结果 与假手术组比较,大鼠去卵巢12周后腰椎和股骨骨密度下降显著(P＜0.01)；血清PICP、BGP和ICTP含量显著升高(P＜0.01)；骨髓细胞RANKL的mRNA表达量增加(P＜0.05)且OPG/RANKL的比率降低(P＜0.01),而两者OPG的mRNA表达量无显著性差别(P＞0.05).结论 去卵巢12周后的大鼠表现出高骨转换率的特点.OPG/RANKL/RANK系统失衡可能在以破骨细胞功能亢进为特点的骨代谢中起重要作用.
关键词： 去卵巢大鼠 核因子κB受体活化因子配体 骨保护素 骨代谢 -
1,25双羟维生素D3和染料木素对人成骨样SaOS-2细胞的作用
目的 研究1,25双羟维生素D3[1.25-(OH)2D3]及染料木素(genistein)对人成骨样SaOS-2细胞的作用.方法 培养人成骨样SaOS-2细胞,经1,25-(OH)2D3、genistein及二者联合应用后,用硝基苯磷酸二钠法(p-nitrophenylphosphate,pNPP)测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ALP及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)mRNA水平的变化.免疫印记法测定OPG蛋白表达.结果 1,25-(OH)2D3及genistein可显著提高ALP活性,但对ALP mRNA的表达没有影响.二者联合应用有协同作用,可显著提高ALP活性及mRNA的表达(P＜0.01).1,25-(OH)2在D3组可显著降低OPG mRNA及蛋白的表达,而与genistein共用时,此抑制作用消失(P＜0.01).结论 1,25-(OH)2D3及genistein在促进人成骨样SaOS-2细胞的分化过程存在协同作用,genistein通过调控OPG基因及蛋白的表达抑制1,25-(OH)2D3对破骨细胞的促进作用,从而促进骨的形成.
-
骨保护素与糖尿病性骨质疏松的研究进展
骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)是肿瘤坏死因子受体超家族成员,是骨代谢的一个重要调节因子,具有抑制破骨细胞分化,抑制其骨吸收活性及其凋亡的作用.随糖尿病(Diabetes mellitus,DM)患病辛的逐年增加,糖尿病骨质疏松的患病率也明显增高,并成为DM患者致死、致残的重要原因,严重影响患者的生活质量,给患者家庭和社会都带来沉重的经济负担.近年来,糖尿病与骨质疏松的关系备受关注,通过对OPG的深入研究,可能为糖尿病骨质疏松的防治提供依据,对指导临床监测、治疗糖尿病骨质疏松具有重要价值.
-
OPG/OCIF:一种新发现的骨保护因子
骨是一个有生命的器官,骨形成及骨吸收所致的骨改建贯穿着生命始终.成骨细胞和破骨细胞的活动及其相互作用决定骨形成和骨吸收之间的平衡,而其作用受全身激素及局部细胞因子调节,但其具体调节机制一直不甚明了.直至近,OPG及其配体OPGL的发现才将人们对于破骨细胞分化及功能的调节机制的认识向前推进了一大步.1997年,WS Simonent等在胎鼠小肠cDNA文库中克隆出一种新的TNF受体家族成员,具有降低破骨细胞分化和增加骨密度的功能,其在转基因鼠中的肝脏表达可导致骨质硬化,故命名为OPG--骨保护素(Osteoprotegrin)[1].与此同时,E Tsuda等亦从人胚胎纤维母细胞株IMR9O的条件培养基中分离出来一种新的肝素结合蛋白,可特异性抑制破骨细胞生成,命名为OCIF--破骨细胞生成抑制因子(Osteoclastogenesis inhibitory factor)[2].随后Tan等也发现一TNF受体家族新成员,命名为TR1--TNF受体样分子1(TNF receptor1ike molecule 1)[3].DNA测序分析证明,TR1与OPG、OCIF为同一种物质[4].
-
OPG/RANKL/RANK系统在绝经后骨质疏松中的调节作用
绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)是危及老年妇女健康的一种常见病和多发病,而在近年在骨质疏松研究中发现的OPG/RANKL/RANK系统是解释骨质疏松形成机制的一个重大突破.本文对OPG/RANKL/RANK系统及其在雌激素参与下的调节作用作一综述.
-
骨形成因子及其信号传导通路述评
骨生成和骨重建是成骨细胞和破骨细胞共同作用的结果 .一方面,成骨细胞在骨形成中受多因素影响,特别是骨形态发生蛋白(BMP),它能诱导间充质细胞向软骨转化,并能在细胞和细胞间质之间进行信号传导,包括Smads路径、MAPKs路径.另一方面,破骨细胞的骨吸收作用主要受OPG、RANKL、1,25-(OH)2D3等作用,其信号传导通路主要有p38MAPK、CN/NFAT、PI3K/Akt等.通过以上两方面综述,为骨生成和骨重建提供有效的理论基础,从而为骨质疏松或运动后骨创伤的治疗和预防提供参考.
-
慢性阻塞性肺疾病相关骨质疏松及其影响因素
近年来,慢性阻塞性肺疾病患者低骨密度和脆性骨折的发病率逐年增加.目前广泛认为慢性阻塞性肺疾病可以增加骨折的风险,并且大量临床研究发现慢性阻塞性肺疾病患者易发生骨质疏松.近的文献已经证明了慢性阻塞性肺疾病患者体内维生素D的水平与骨密度之间有相关性.许多研究也报道了慢性阻塞性肺疾病患者维生素D水平低下或不足的高发生率.维生素D水平低下或不足能导致低骨密度,增加脆性骨折的发生.但目前证据表明除此之外还有其他相关影响因素,例如脂肪组织的瘦素和骨保护素.
-
强直性脊柱炎骨代谢的研究
目的 研究强直性脊柱炎(AS)患者的骨代谢特征,以及强直性脊柱炎临床相关因素和骨代谢的关系.方法 分别测定及比较AS患者和健康对照组TRAP、BGP、OPG.用BASDAI方法评价AS病情活动性,分析AS患者炎症指标(ESR、CRP、BASDAI)、性别、发病年龄、病程、HLA-B27与骨代谢指标(TRAP、BGP、OPG)的关系.结果 AS患者中OPG,TRAP水平明显高于健康对照组(P<0.05),AS组中TRAP随ESR、CRP、BASDAI、性别、病程的变化而变化,多元分析结果OR值大的是BASDAI.结论 AS患者骨代谢指标的研究表明,AS患者骨代谢表现为骨吸收增加.AS患者骨吸收受ESR、CRP、BASDAI、性别、病程的影响,影响大的是BASDAI.
-
强直性脊柱炎患者血清骨保护素、骨密度、骨代谢生化指标的研究
目的 检测强直性脊柱炎(AS)患者血清骨保护素(OPG)、骨代谢指标及骨密度并观察AS患者临床症状、体征、病情活动指标,探讨OPG与AS的关系及与AS骨代谢指标、骨密度的相关性.方法 应用酶联免疫法(ELISA)、放射免疫法检测100例AS患者及100例同期健康体检者血清OPG、骨钙素(BGP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型胶原羧基端延长肽(CICP)、Ⅰ型胶原交联C末端肽(CTX)及尿脱氧毗啶啉(DPD)水平.应用双能X线(DEXA)法检测健康对照组与AS患者腰椎、股骨颈、股骨粗隆骨密度,并评价AS患者的BATH功能指数(BASFI)、病情活动指数(BASDAI)、患者总体评价(PGA)、脊柱炎症、脊柱痛及枕墙距、指地距、颌柄距、胸廓活动度、脊柱活动度、Schober试验,对AS患者的血清OPG水平与其他骨代谢指标、骨密度、临床症状、体征指标进行相关性分析.结果 AS患者中骨质疏松者35人(35%),骨量减少者42人(42%),AS患者血清OPG、CTX及尿DPD较健康对照组显著增高(P<0.05、P<0.001、P<0.001),AS患者的腰椎、股骨颈、股骨粗隆骨密度较健康对照组显著降低(P<0.01、P<0.01、P<0.01),OPG水平与AS患者各部位的骨密度呈负相关趋势,但无统计学差异.与其他临床指标及骨代谢指标无显著相关性.结论 AS患者比健康对照组更易出现骨质疏松和骨量减少,AS患者的骨吸收增强,血清OPG水平增高,其增高原因可能是机体对抗过度骨吸收的保护性反应.
-
甲减患者治疗前后部分骨代谢指标的变化
目的 探讨甲状腺激素替代治疗前后甲减患者血清骨保护素(0PG),血清骨钙素(OCN)的变化.方法 选择健康者15例和甲减患者30例,其中临床甲减( oHT)和亚临床甲减(sHT)各15例.所有甲减患者采用左旋甲状腺素(L-T4)补充治疗至甲状腺功能在正常范围内.血清0PG、OCN采用酶联免疫法测定.结果 L-T4治疗前oHT和sHT患者血清OPG水平分别为3.60±0.38ng/ml和3.51±0.32ng/ml,明显高于对照组(2.68±0.48ng/ml,P=0.000)；血清OCN水平分别为3.36±0.87ng/ml和3.42±0.75 ng/ml,明显低于对照组(4.79±0.87ng/ml,P=0.000)；多元回归分析结果显示,oHT和sHT患者血清OPG均与TSH呈正相关(r=0.580,P=0.023；r=0.934,P=0.000),血清OCN均与TSH呈负相关(r=-0.964,P=0.000;r=-0.825,P=0.000).治疗至甲状腺功能正常后,两组血清OPG水平明显降低(分别为2.77±0.37ng/ml和2.92 +0.31ng/ml,P=0.000),接近对照组水平；血清OCN水平明显升高(分别为4.63±0.70ng/ml和4.62±0.70ng/ml,P=0.000),接近对照组水平.结论 甲减患者L-T4治疗后骨代谢紊乱可能得到改善.
-
云克治疗糖皮质激素性骨质疏松模型大鼠的实验研究
目的 探讨云克对地塞米松诱导的骨质疏松症大鼠的治疗作用.方法 12周龄的雌性Wistar大鼠30只,随机分为3组,对照组、模型组和治疗组,每组10只.模型组和治疗组给予5mg/kg地塞米松肌注,1次/周,连续注射12周,对照组肌注等剂量的生理盐水.DEXA骨密度仪检测大鼠股骨骨密度,各组均取2只处死,HE染色观察股骨结构的病理改变鉴定骨质疏松大鼠模型是否构建成功.骨质疏松模型构建成功后,治疗组大鼠尾静脉注射云克(0.05 μg/kg),对照组和模型组注射等剂量的生理盐水,1次/周,连续注射15周,治疗前后尾静脉采血,ELISA法检测血清骨碱性磷酸酶和酒石酸酸性磷酸酶水平的变化.检测各组大鼠治疗后的股骨骨密度,之后,处死各组大鼠,取股骨,免疫组化法检测大鼠股骨骨保护素的变化,HE染色观察骨结构的病理改变.结果 (1)模型组和治疗组大鼠经地塞米松处理12周后,股骨骨密度较对照组明显降低(P＜0.05)；病理改变为骨小梁稀疏、数目明显减少甚至断裂,而对照组骨小梁结构较完整.(2)与模型组相比,治疗组大鼠血清骨特异碱性磷酸酶水平明显升高(P＜0.05),而抗酒石酸酸性磷酸酶水平有所下降,但无统计学差异(P＞0.05).(3)治疗组治疗后血清骨特异碱性磷酸酶水平明显升高(P＜0.05),而抗酒石酸酸性磷酸酶水平有所下降,但无统计学差异(P＞0.05).(4)与模型组和治疗前相比,治疗组大鼠股骨骨密度无明显改变(P＞0.05).(5)与模型组相比,治疗组大鼠股骨骨保护素表达明显增加.(6)云克治疗后,治疗组大鼠股骨有新生骨小梁的广泛形成,骨小梁结构破坏较模型组明显减轻.结论 云克对糖皮质激素性骨质疏松大鼠有治疗作用.
关键词： 锝亚甲基二磷酸盐 糖皮质激素性骨质疏松 骨保护素 -
阿仑膦酸钠对糖皮质激素治疗亚急性甲状腺炎的骨保护作用
目的为了观察糖皮质激素(GC)短期治疗亚急性甲状腺炎(亚甲炎)患者前后血清骨保护素(OPG)的变化和阿仑膦酸钠(ALN)的骨保护作用.方法对确诊亚甲炎患者25例(男9女16),24～41岁,平均年龄(32.4±5.6)岁,分为A组(14例)、B组(11例),分别给与GC(首剂30 mg/d,逐渐减量,总疗程3个月)和GC(同前)+ALN(10 mg/d,qod×4周)治疗.测定治疗前后血清(OPG)、骨钙素(BGP)、甲状旁腺素(PTH)和25(OH)2D3水平以及尿脱氧吡啶啉/肌酐比值(Dpd/Cr)和尿钙/肌酐比值(Ca/Cr).结果 GC治疗后,血清OPG、BGP水平明显降低(P＜0.01),尿Ca/Cr、Dpd/Cr比值明显增高(P＜0.01);而血清PTH、Ca、P、ALP和25(OH)2D3水平无明显变化.加用ALN后,血清OPG水平仍降低(P＜0.05),但明显高于A组(P＜O.05);尿Dpd/Cr比值仍显著增高,但明显低于A组(P＜0.05);而血清BGP和尿Ca/Cr比值治疗前后无显著性变化.结论糖皮质激素短期治疗亚甲炎患者,可使其血清OPG和BGP显著降低,尿Dpd和Ca排泄显著增加,促进骨丢失;而阿仑膦酸钠可能通过增加OPG水平,抑制RANKL-RANK途径促破骨活性,而具有骨保护作用.
关键词： 亚急性甲状腺炎 骨保护素 骨钙素 糖皮质激素所致的骨质疏松 阿仑膦酸钠 -
地塞米松对成骨细胞骨保护蛋白mRNA的调节
目的研究皮质醇激素对成骨细胞OPG基因表达的调节,探讨激素通过成骨细胞影响破骨细胞骨吸收的分子机理.方法体外培养大鼠成骨细胞,分别给予不同时间、剂量地塞米松进行干预实验,提取总RNA进行半定量逆转录PCR分析,检测OPG mRNA水平的改变.结果地塞米松可以抑制OPG mRNA的表达,作用强度随时间、剂量而改变.结论激素引发的骨质疏松与其下调成骨细胞OPG基因表达,诱导破骨细胞形成,增加骨吸收有关.
-
伊贝沙坦对糖尿病大鼠骨质疏松影响的实验研究
目的 探讨伊贝沙坦对糖尿病大鼠骨质疏松的干预作用及其机制.方法 雄性SD大鼠按体重随机分为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)、伊贝沙坦治疗组(I组).糖尿病大鼠模型经单剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制成.所有大鼠均给以普通饲料喂养,I组大鼠每天以伊贝沙坦15mg·kg-1·d-1灌胃,C组和D组大鼠每天予等量生理盐水灌胃,第12周末,测体重及血糖,处死大鼠后取骨,应用显微镜观察骨组织显微结构和进行骨组织形态密度计量学分析,用双能X线骨密度测量仪(DEXA)测定大鼠股骨骨密度(BMD),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组骨组织OPG mRNA及RANKL mRNA的表达.结果 12周末,D组和I组大鼠骨组织光镜下均出现骨质疏松表现,I组骨质疏松程度比D组轻.骨组织定量分析显示,MTVT在D组及I组均显著低于C组(P<0.01),MTPS在D组及I组均显著高于C组(P<0.01).I组与D组大鼠骨组织相比,MTPT显著增加及MTPS显著降低(P<0.01).骨密度的测定结果发现,与C组大鼠比较,D组和I组大鼠骨组织BMD值显著降低(P<0.01);而I组大鼠骨组织BMD值又较D组显著增加(P<0.01).骨组织RT-PCR结果显示,与c组相比,D组和I组大鼠骨组织中OPG mRNA表达水平明显降低(P<0.01),RANKL mRNA表达水平明显升高(P<0.01);I组大鼠骨组织中OPG mRNA的表达则明显高于D组(P<0.01).而RANKL mRNA在I组和D组间差异不显著.结论 伊贝沙坦可使糖尿病大鼠骨组织降低的OPG mRNA表达水平得以部分恢复,上调OPG/RANKL比值,这可能与伊贝沙坦的改善糖尿病大鼠骨质疏松的效应有关.
关键词： 糖尿病大鼠 骨质疏松 伊贝沙坦 骨保护素 核因子-KB受体活化因子配体 -
骨折早期调节RANKL表达对骨折愈合影响的实验研究
目的 通过对大鼠股骨骨折早期局部应用重组人骨保护素Fc融合蛋白(OPG-Fc),研究调节骨保护素(OPG)和核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的表达变化对骨折早期的影响,探讨其表达调节方式及作用机制.方法 48只雌性SD大鼠随机分成实验组和对照组,每组24只.建立大鼠股骨骨折模型,于术后第7天、第14天、第21天、第28天4个时间节段分批处死模型,标本切片后通过HE染色观察骨折愈合情况,免疫组织化学染色研究破骨细胞数量变化.结果 HE染色示单纯骨折组呈典型骨折愈合过程,而骨折局部注射OPG组骨痂形成及改造提前,骨折愈合加速.免疫组织化学染色显示在第7天、第14天、第21天、第28天各个时间节段单纯骨折组破骨细胞计数值均高于骨折应用OPG组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 骨折早期调节RANKL表达,当RANKL/OPG比值减小时,骨折局部破骨细胞减少,骨痂形成增多,骨折愈合加速.
关键词： 骨折愈合 早期调节 骨保护素 核因子-κB受体活化因子配体 -
阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响
目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制.方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照组的含药血清.将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液.培养细胞被分为5组,分别加同体积药液,对照组仅加培养液,继续培养.采用MTT比色分析、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内BGP含量,RT-PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达.结果阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖,与对照组相比,差异显著(P＜0.05).成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清100ml/L时强,与雌激素组比较无显著性差异(P＞O05),且明显高于对照组(P＜O.05).成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml/L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异(P＜0 05),且明显低于对照组(P＜O.05).结论阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂,分子水平上调节OPG/RANKL表达而治疗骨质疏松.
-
硬骨素与 OPG／RANKL 在注射唑来膦酸钠治疗绝经后骨质疏松患者中浓度的早期表达
目的：探讨在运用唑来膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症（ OP）患者中硬骨素、骨保护素（ OPG）及核因子κB受体激活因子配基（ RANKL）在治疗前后浓度水平变化，从而探索唑来膦酸钠的药物作用与骨转换表达的关系，为临床联合用药提供一定的实验基础。方法收集本组60～88岁诊断为绝经后OP患者22例，测定静脉注射唑来膦酸钠第0、2、7、30天患者血清中硬骨素、RANKL、OPG、CTX（Ⅰ型胶原交联羧基端肽）及PINP（Ⅰ型前胶原氨基端原肽）的浓度，并运用Pearson′s相关性分析，分析硬骨素、RANKL、OPG与CTX、PINP的相关性。结果（1）在注射唑来膦酸钠后，骨吸收指标CTX在第2、7、30天明显降低，并与注射前比较有统计学意义（ P＜0．01）；骨形成指标PINP在第2、7、30天降低，但只在第7、30天与注射前比较有统计学意义（P＜0．01）。（2）在注射唑来膦酸钠后，硬骨素在第2、7天急剧上升并有统计学意义（P＜0．01），在第30天后慢慢下降；硬骨素的变化与CTX的变化在第2天（r＝－0．518；P＜0．05）、第7天（r＝－0．571；P＜0．01）、第30天（r＝－0．484；P＜0．05）呈负性相关并有统计学意义；与PINP变化在第2天（r＝－0．927；P＜0．01）第7天（r＝－0．562；P＜0．01）、第30天（r＝－0．451；P＜0．05）呈负相关并有统计学意义。（3）在注射唑来膦酸钠后，RANKL在第2、7天上升，在第30天后下降，但无统计学意义（ P＞0．05）；OPG呈上升趋势，但无统计学意义（ P＞0．05）。结论由实验结果可知，在运用唑来膦酸治疗绝经后OP患者中，硬骨素的浓度早期急剧升高，而硬骨素对骨的形成起负性调节作用，因而在临床治疗中，可尝试将硬骨素单克隆抗体与唑来膦酸钠联合用药，增强患者对药物抗骨质疏松的能力，减轻患者病痛，提高老年患者生活质量。
-
阿仑膦酸钠干预人骨髓基质细胞OPG/RANKL的体外实验研究
目的 观察阿仑膦酸钠对人骨髓基质细胞中骨保护素(OPG)/核因子Kappa B受体活化因子配基(RANKL)mRNA 表达的影响,探讨阿仑膦酸钠防治骨质疏松的相关机制.方法 从24名20～30岁的健康男性志愿者髂前上棘处分别抽取10 ml骨髓,分离培养骨髓基质细胞,取50%融合P2代骨髓基质细胞,混匀后随机分为4组:高、中、低剂量阿仑膦酸钠组和对照组,高、中、低剂量组在细胞培养液中,分别加入1× 10-7 mol/L、1× 10-8 mol/L、1× 10-9 mol/L阿仑膦酸钠;对照组采用普通LG-DMEM培养,不进行特殊处理.采用半定量RT-PCR和Western blot检测OPG、RANKL mRNA和蛋白表达并计算OPG/RANKL比率.结果 在RT-PCR实验中,高、中、低阿仑膦酸钠组和对照组OPG mRNA/RANKL mRNA表达比分别为(8.77±1.16)、(6.68±1.25)、(4.86±0.79)和(0.58±0.13);Western blot蛋白印迹实验显示,高、中、低阿仑膦酸钠组和对照组OPG/RANKL蛋白表达之比分别为(1.18±0.47)、(1.09±0.56)、(0.82±0.32)和(0.25±0.12).经统计学分析,在mRNA和蛋白水平,高、中、低阿仑膦酸钠组OPG/RANKL比值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),三组阿仑膦酸钠组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 防治骨质疏松药阿仑膦酸钠可以增加骨髓基质细胞中骨保护素的表达,减少核因子Kappa B受体活化因子配基表达.
关键词： 阿仑膦酸盐 骨髓 骨保护素 核因子Kappa B 受体活化因子配基 -
类风湿关节炎滑膜成纤维细胞通过高表达RANKL促进破骨细胞分化及活化
目的 探讨类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 (RA-FLS) 对破骨细胞 (Oc) 分化和活化的作用及机制.方法 活动期RA滑膜体外分离培养FLS,以骨关节炎 (OA)-FLS为对照,分别与健康人外周血单核细胞 (MNC) 共培养后,抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 染色鉴定Oc并计数、甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝情况.细胞免疫荧光染色检测FLS RANKL表达,Real-time PCR及Western blot检测RANKL和OPG mRNA、蛋白表达.结果 RA-FLS与MNC共培养7 d时TRAP+且细胞核≥3个的Oc很少,14 d时见较多的Oc,21 d甲苯胺蓝染色示清晰的骨吸收陷窝,而OA-FLS与MNC共培养后未见Oc,也未见骨吸收陷窝.细胞免疫荧光染色示RA-FLS 较OA-FLS高表达RANKL (P<0.05).RA-FLS RANKL mRNA和蛋白表达较OA-FLS明显增高,而OPG mRNA和蛋白表达则明显降低,RANKL/OPG mRNA和蛋白比率较OA-FLS明显增高 (均P<0.05).结论 RA-FLS可能通过高表达RANKL,促进外周血MNC向Oc分化,并促进Oc的骨吸收功能.
