首页 > 文献资料
-
Wnt/β-catenin信号通路和消化系肿瘤的相关性研究
Wnt/β-catenin信号通路在生物发育、细胞转运及细胞凋亡等生命过程中发挥重要的作用,其异常活化与肿瘤的发生、发展有关.现就Wnt/β-catenin信号通路与常见消化系肿瘤的相关研究作一概述,为消化系肿瘤的诊治提供依据.
关键词： Wnt/β-catenin信号通路 消化系 肿瘤 -
Wnt/β-catenin信号通路在肝癌发病机制中作用的研究
Wnt/β-catenin信号通路也称Wnt经典信号通路,参与调控细胞分化、癌变、凋亡及机体免疫、应激等多种病理生理过程.有研究表明Wnt信号通路与肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生相关.深入研究Wnt/β-catenin信号通路在肝癌发病中的作用,将有助于进一步揭示肝癌的发病机制,为肝癌的防治提供新的可能途径及干预靶点.
关键词： Wnt/β-catenin信号通路 肝癌 发病机制 -
RNAi沉默NGAL表达对胃癌细胞生物学特性的机制研究
目的 探讨RNAi沉默中性粒细胞相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)基因表达对胃癌细胞增殖凋亡的影响及机制.方法 提取胃癌组织及相应癌旁组织中的总RNA及总蛋白,RT-PCR及Western blotting检测NGAL基因的mRNA及蛋白表达;将NC-siRNA组、NGAL-siRNA转染生长至对数期的人胃癌BGC823细胞,未转染任何siRNA的作为对照组,48 h 后收集细胞,Western blotting检测NGAL、Ki67、PCNA、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 胃癌组织中NGAL基因的mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织(P＜0.01);NC-siRNA组NGAL的蛋白表达与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),NGAL-siRNA组NGAL的蛋白表达显著低于对照组(P＜0.01);与对照组及NC-siRNA组比较,NGAL-siRNA组细胞存活率及Ki67、PCNA、p-catenin、Cyclin D1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率及Cleavedcaspase3蛋白表达显著升高(P＜0.01).结论 NGAL基因在胃癌中高表达,RNA干扰其表达后可降低人胃癌BGC823细胞增殖及促进细胞凋亡,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.
-
靶向抑制胃癌细胞中TROP2基因的表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响研究
目的 探讨RNA干扰肿瘤相关钙信号传导因子2(TROP2)基凶的表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响及机制.方法 以人胃黏膜正常细胞GES-1作为对照,RT-PCR检测人胃癌SGC-7901、MNK-28、BGC-823细胞中TROP2 mRNA表达;TROP2 siRNA、Control siRNA转染SGC-7901细胞,不作任何处理的细胞作为空白对照组,48 h后Western blotting检测TROP2、Ki67、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达;CCK8实验和流式细胞仪分别检测细胞的增殖及凋亡情况.结果 TROP2 mRNA在人胃癌SGC-7901、MNK-28、BGC-823细胞表达均显著高于GES-1细胞(P＜0.01),TROP2基因在SGC-7901细胞中的表达高,选择作为后续的研究对象;转染TROP2 siRNA后TROP2蛋白表达显著降低(P＜0.01);与对照组及Control-siRNA组比较,TROP2-siRNA组细胞存活率及Ki67、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著升高(P＜0.01).结论 RNA干扰抑制TROP2基因的表达可降低胃癌细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其机制是下调Wnt/β-catenin信号通路.
关键词： 胃癌 TROP2基因 增殖 凋亡 Wnt/β-catenin信号通路 -
DEK基因在肝癌中的表达及靶向抑制其表达对肝癌细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨DEK基因在肝癌中的表达及RNA干扰抑制其表达对肝癌细胞增殖及凋亡的影响及机制.方法 以人正常肝细胞HL-7702作为对照,RT-PCR检测人肝癌HepG2、Huh-7、SMMC-7721、SNU-475细胞中DEK mRNA表达;DEK-siRNA转染HepG2细胞,同时转染阴性对照和空白对照,转染48 h后Western blotting检测各组细胞中DEK、Cleaved caspase 3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达;CCK8实验和流式细胞仪分别检测细胞的增殖及凋亡情况.结果 各个肝癌细胞中DEK mRNA表达均显著高于正常细胞,差异有统计学意义(P<0.01);DEK基因在HepG2细胞中表达高,选择作为后续研究对象;转染DEK-siRNA后DEK蛋白表达显著降低;DEK-siRNA组细胞存活率及β-catenin、Cyclin D1蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组,细胞凋亡率和Cleaved caspase 3蛋白表达显著高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 抑制肝癌HepG2细胞中DEK基因可降低癌细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其机制与Wnt/β-catenin信号通路的调控有关.
关键词： 肝癌 DEK基因 增殖 凋亡 Wnt/β-catenin信号通路 -
人参皂苷Rg3调控WNT/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞生长的实验研究
目的 探讨人参皂苷Rg3通过影响WNT/β-catenin信号通路中关键蛋白β-catenin从而阻断结肠癌细胞生长机制的研究.方法 MTT法检测不同浓度人参皂苷Rg3对人结肠癌细胞系SW480、HCT116细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度人参皂苷Rg3对SW480、HCT116细胞凋亡及磷酸化β-catenin的影响;RT-PCR和Western blot法检测HCT116细胞中β-catenin及c-myc的表达.结果 人参皂苷Rg3具有抑制SW480、HCT116细胞增殖和促进凋亡的能力.一定浓度人参皂苷Rg3能够降低β-catenin蛋白的磷酸化程度,下调β-catenin mRNA的表达,下调β-cetanin和c-myc蛋白的表达.结论 人参皂苷Rg3具有一定的抗肿瘤活性,可有效抑制HCT116和SW480细胞生长,且这种作用可能是通过下调β-catenin磷酸化来实现的.
-
Lgr5、β-catenin在卵巢上皮性癌组织中的表达及对SKOV3细胞增殖迁移的影响
目的:探讨G蛋白偶联受体家族Lgr5和β-catenin在卵巢上皮性癌中的表达及对SKOV3细胞增殖和迁移能力的影响.方法:收集卵巢正常、良性肿瘤及上皮性癌组织标本各30例,采用免疫组化法检测Lgr5和β-cate-nin蛋白的表达情况.用Lgr5 shRNA、NC shRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,同时以未转染细胞作空白对照,分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测3组细胞中lgr5、β-catenin蛋白和mRNA的表达水平,分别采用CCK-8和划痕实验检测3组细胞的增殖和迁移能力.结果:卵巢上皮性癌组织中Lgr5、β-catenin阳性表达率分别为63.3%(19/30)、83.3%(25/30),二者表达水平均较良性肿瘤、正常卵巢组织升高(P<0.05),且两者表达呈正关联(rp=0.373,P=0.028).与空白对照组、NC shRNA转染组比较,Lgr5 shRNA转染组SKOV3细胞中Lgr5、β-cate-nin蛋白和mRNA的表达均显著降低(P<0.05),细胞的增殖能力和迁移能力显著降低(P<0.05).结论:Lgr5可能通过增强Wnt/β-catenin信号通路参与卵巢癌细胞增殖、迁移能力的调控.
-
miRNA-21过表达对乳鼠星形胶质细胞凋亡及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响
目的:探讨miRNA-21(miR-21)过表达对乳鼠星形胶质细胞(AS)凋亡及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响.方法:AS分为3组,空白对照组、H2O2组(400μmol/L的H2O2处理AS 24 h)和miR-21+H2O2组(miR-21 mimics转染AS 24 h后用400μmol/L的H2 O2处理细胞24 h).采用qRT-PCR检测3组细胞miR-21的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测β-catenin、c-myc和Bax蛋白的表达.结果:与空白对照组比较,H2O2组miR-21表达降低,细胞凋亡率升高,β-catenin和c-myc表达降低,Bax表达升高(P<0.05);与H2O2组比较,miR-21+H2 O2组miR-21表达升高,细胞凋亡率降低,β-catenin和c-myc蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低(P<0.05).结论:过表达miR-21可降低AS凋亡,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关.
-
黄芪甲苷对过氧化氢诱导损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用
目的：探讨黄芪甲苷对过氧化氢诱导损伤的人脐静脉内皮细胞（ HUVECs）的保护作用，并初步探讨其作用机制。方法：实验Ⅰ中取HUVECs后分为5组，其中4组分别给予不同质量浓度的黄芪甲苷预处理后，用过氧化氢诱导建立HUVECs损伤模型，对照组不处理。实验Ⅱ中另取HUVECs分为4组，即对照组、LiCl组、黄芪甲苷组及LiCl＋黄芪甲苷组，后3组按分组处理后均同上用过氧化氢诱导。采用MTT法检测上述各组细胞存活情况，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot分析γ-H2 AX、β-catenin蛋白的表达。结果：过氧化氢可抑制HUVECs存活，诱导其凋亡，而黄芪甲苷可改善上述情况（P＜0．05）。 Wnt通路激动剂LiCl预处理后，黄芪甲苷对损伤HUVECs的保护作用减弱，同时DNA损伤标记分子γ-H2AX以及β-catenin蛋白的表达水平升高（P＜0．05）。结论：黄芪甲苷可缓解氧化应激诱导的HUVECs损伤，其机制可能与抑制Wnt／β-catenin信号通路有关。
关键词： 下肢缺血 血管内皮细胞 DNA损伤 黄芪甲苷 Wnt/β-catenin信号通路 -
肺癌组织中 SOX2和β-catenin蛋白的表达
目的：探讨SOX2及Wnt/β-catenin信号通路与肺癌发生的关系。方法：收集86例肺癌组织和20例正常肺组织标本，应用免疫组化法检测SOX2、β-catenin蛋白的表达，分析SOX2、β-catenin 蛋白在肺癌组织中表达的关联性。结果：SOX2在肺癌组织中的阳性表达率为95．4％，在正常肺组织中无表达；β-catenin在肺癌组织中的阳性表达率为75．6％，在正常肺组织中为30．0％；肺癌组织中两种蛋白的阳性表达率均高于正常肺组织（ P ＜0．001）。二者在肺癌组织中的表达无关联（rP ＝0．109，P＝0．978）。结论：SOX2和Wnt/β-catenin信号通路在肺癌的发生过程中发挥了重要作用。
关键词： 肺癌 肿瘤干细胞 SOX2 Wnt/β-catenin信号通路 -
葛根素抑制人子宫颈癌细胞株HeLa增殖和诱导凋亡作用研究
目的:探讨葛根素对人子宫颈癌细胞株HeLa的作用及其机制.方法:取对数生长期的HeLa细胞分别用不同剂量的葛根素处理(0 μmol,12.5 μmol,25 μmol,50 μmol).细胞培养48 h后,利用MTT法检测HeLa细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡水平,RT-PCR法检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA水平.Western blotting法检测Wnt、β-catenin、Bax、Bcl-2、p53和p21表达水平.结果:葛根素成剂量依赖性地抑制HeLa细胞增殖,促进细胞凋亡,促进BaxmRNA表达,减少Wnt、β-catenin、Bcl-2 mRNA、p53和p21表达.结论:葛根素可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制与减少Wnt/β-catenin信号通路活化相关.
-
EphA2在结直肠癌细胞中的生物学功能及其信号调控机制
[目的]探讨EphA2在结直肠癌细胞中的生物学功能及其信号调控机制.[方法]qRT-PCR法检测EphA2在结直肠癌细胞系中的表达情况,筛选得到表达量较高细胞株系,利用siRNA沉默该细胞系中EphA2的表达,利用MTT、Transwell、Western blot、qRT-PCR法检测细胞生物学功能变化及Wnt/β-catenin信号通路相关基因及蛋白的表达变化.[结果]在人结肠癌细胞HCT116、HT29和SW480中筛选得到EphA2高表达细胞HCT116,构建载体EphA2-siRNA并成功转染细胞HCT116.MTT、Transwell法检测结果显示,与对照组相比,EphA2-siRNA组中细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显受到抑制,差异具有统计学意义(P＜0.05).qRT-PCR和western blot分析表明,与对照组相比,EphA2-siRNA组中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白E-cadherin、TCF-4、β-catenin和p-GSK-3βSer9的表达量均呈现下降趋势,差异具有统计学意义(P＜0.05).[结论]结直肠癌细胞中EphA2的表达与结直肠癌的进展和侵袭转移密切相关,EphA2可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响结直肠癌的进展.
关键词： EphA2 Wnt/β-catenin信号通路 结直肠癌 -
干扰性小核糖核酸靶向抑制趋化因子受体4基因表达对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响
目的 探讨干扰性小核糖核酸(siRNA)靶向抑制鼻咽癌细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因表达对癌细胞增殖、侵袭的影响及机制.方法 收集新乡医学院第一附属医院2014年1月至2016年12月保存的鼻咽癌及相应的癌旁组织标本各42例,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4mRNA及蛋白表达.将人鼻咽癌细胞系CNE-2Z分为空白对照组(细胞未做任何处理)、阴性对照组(细胞转染无义siRNA序列)和CXCR4转染组(细胞转染CXCR4的靶向siRNA序列),转染48 h后采用Western blot 法检测各组细胞中CXCR4、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达;应用细胞计数试剂盒和Transwell小室分别检测细胞的增殖和侵袭能力.结果 鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4mRNA表达分别为5.526±0.143、0.953±0.091,蛋白表达分别为0.522±0.047、0.053±0.011,鼻咽癌组织中CXCR4 mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织(P＜0.05).CXCR4转染组细胞中CXCR4、MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达及细胞存活率、细胞侵袭数均显著低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05),但空白对照组和阴性对照组细胞中CXCR4、MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达及细胞存活率、细胞侵袭数比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞中CXCR4基因表达可显著降低肿瘤细胞的增殖与侵袭能力,其机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路有关.
-
高血压患者硝苯地平治疗后药物性牙龈增生患者Wnt/β-catenin信号通路的相关研究
目的 观察高血压患者硝苯地平治疗后药物性牙龈增生者牙龈组织中Wnt/β-连环蛋白( β-catenin)信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin的表达水平.方法 采用便利抽样法选择60例高血压患者为对象,根据牙龈增生病因的不同,将硝苯地平致药物性牙龈增生者设为A组(30例),非药物所致牙龈增生者设为B组(30例),另选取同期来医院行牙冠延长术的正常牙龈者设为C组(30 例).采用Western-Blot 法及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测三组牙龈组织中Wnt1、β-catenin 蛋白及mRNA的表达水平.结果 A组牙龈组织中Wnt1、β-catenin蛋白及mRNA表达水平高于B、C组(P＜0.05),B组牙龈组织中Wnt1、β-catenin蛋白及mRNA表达水平高于C组(P＜0.05).结论 高血压患者硝苯地平治疗后所致药物性牙龈增生者牙龈组织中Wnt1、β-catenin表达水平明显上升,可能与Wnt/β-catenin信号通路诱导牙龈成纤维细胞增殖与分化,引起牙龈纤维化有关.
关键词： 高血压 硝苯地平 药物性牙龈增生 Wnt/β-catenin信号通路 -
"Wnt/β-catenin-伏毒-微型癥积-肾纤维化"相关性假说
肾纤维化是各种慢性肾脏疾病进展过程中产生的共同病理变化.许多研究表明Wnt/β-catenin信号通路与肾纤维化的发生发展密切相关, 可将Wnt/β-catenin信号通路作为抗肾纤维化的靶点.Wnt/β-catenin与中医的伏毒学说极为相似, 肾纤维病理观也与中医肾微型癥积形成貌同, 它们之间可能存在关联.文章从Wnt/β-catenin信号通路与肾纤维化的关系、肾纤维化Wnt/β-catenin信号通路与伏毒关系、肾纤维化伏毒致微型癥积形成、肾纤维化及中西医病理形成过程及关系及中医药从"湿、瘀、毒"的伏毒干预Wnt/β-catenin信号通路延缓肾纤维化进展等方面进行论述"Wnt/β-catenin-伏毒-微型癥积-肾纤维化"相关性.
关键词： Wnt/β-catenin信号通路 伏毒 微型癥积 肾纤维化 -
Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞增殖分化在激素性股骨头坏死中的研究进展
激素性股骨头坏死(Steroid induced Avascular Necrosis of Femoral Head,SANFH)是由于大剂量使用糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)导致骨内循环障碍、骨代谢失衡、局部血运破坏,引起股骨头缺血坏死、塌陷、骨折的一种骨代谢性疾病[1,2].近年来,调查发现SANFH的发病率日渐增高,占非创伤性股骨头坏死的首位,起病隐袭,病情发展较快,致残性强,已成为困扰医患的重大公共难题[3-5],因此,如何有效防治SANFH是现阶段研究的新热点.本文基于Wnt/β-catenin信号通路促进成骨细胞(Osteoblast,OB)增殖、分化[6,7]论治SANFH的有效性与该信号通路的相关性,旨在为SANFH的临床精准治疗提供理论依据.
关键词： Wnt/β-catenin信号通路 激素性股骨头坏死 成骨细胞 综述 -
Wnt/β-catenin信号通路对骨关节炎软骨的影响
骨关节炎(osteoarthritis,OA)是由力学及生物学因素联合作用于软骨、软骨下骨、滑膜及关节囊,表现为慢性、进展性的滑膜炎、软骨破坏及软骨下骨重塑为特点的退行性骨关节病,终使关节软骨面纤维化、糜烂,软骨下骨硬化、边缘性骨赘形成,滑膜炎性增生,以关节疼痛、肿胀、关节僵硬、活动受限为临床表现的一种常见疾病.OA极大地影响人们生活质量,尤其是目前社会老龄化严重,退变性骨关节炎使得老年人部分丧失活动能力,进而导致老年人生理机能下降,并演化为严重的社会问题,值得关注.目前对OA的治疗仍缺乏有效的药物,因此,对OA发病机制更深入的研究及研发有效的治疗药物十分必要.
关键词： Wnt/β-catenin信号通路 骨关节炎 软骨 -
Wnt/β-catenin信号通路与软骨代谢相关性研究进展
近年有研究发现Wnt/β-catenin信号通路是维持关节完整性,调节软骨代谢的重要途径之一,对骨关节炎有重要影响[1].Wnt/β-catenin信号可正向和负向调节软骨细胞,促进或抑制软骨细胞分化.而骨关节炎(Ostcoartbritis,OA)是以关节软骨降解为主要特征的退行性关节病变,研究报道OA发病过程中主要的特点是软骨细胞的凋亡和由于软骨基质合成代谢与分解代谢之间的失衡而导致的软骨组织进行性丢失[2].近几年因其发病率逐年升高,其病因及发病机制仍不是很明确,对OA的治疗仍没有特效药,而成为骨科界目前研究的热点及难点问题.下面就Wnt/ β-catenin信号通路与软骨代谢的相关性研究进展做一综述,以期为OA的生物治疗提供靶点.
-
丹参酮ⅡA对软骨细胞Ⅱ型胶原及Wnt/β-catenin信号通路的影响
目的:探讨不同浓度丹参酮ⅡA对软骨细胞Ⅱ型胶原及Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法:提取新生SD大鼠原代软骨细胞,并通过Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光进行鉴定,取P1代细胞进行实验,共设5组,其中1组设为空白对照组,另外4组分别用6.25 μmol/L,12.5μmol/L,25 μmol/L及50 μmol/L浓度丹参酮ⅡA对其进行干预,24 h后通过蛋白印迹分析法(Western Blot)检测软骨细胞Ⅱ型胶原及β-catenin蛋白的表达情况.结果:随着丹参酮ⅡA浓度的增加,Ⅱ型胶原蛋白表达增加,12.5 μmol/L,25 μmol/L及50μmol/L丹参酮ⅡA组Ⅱ型胶原蛋白量均较对照组增高(P＜0.05),且Ⅱ型胶原蛋白量与丹参酮ⅡA浓度呈正相关(r=0.949,P＜0.001),各丹参酮ⅡA组β-catenin蛋白量均较对照组降低(P＜0.05),且β-catenin蛋白量与丹参酮ⅡA浓度呈负相关(r=-0.949,P＜0.001).结论:丹参酮ⅡA可抑制Wnt/β-catenin信号通路,促进软骨细胞Ⅱ型胶原表达,延缓软骨细胞退变.
关键词： 丹参酮ⅡA 软骨细胞 Ⅱ型胶原 Wnt/β-catenin信号通路 -
Wnt/β-catenin信号通路与狼疮肾炎的关系
目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路中的分子在狼疮肾炎(LN)患者中的表达.方法 选取2015年5月至2016年4月在兰州大学第二医院就诊的LN患者18例作为LN组,另选取年龄、性别相匹配的健康体检者19名作为对照组.给予LN组激素和(或)激素联合免疫抑制剂治疗,对照组无特殊治疗.LN组患者经过6个月的激素及免疫抑制剂的治疗后,其中治疗有效8例,治疗无效10例.ELISA法检测所有研究对象血清中Wnt1、β-catenin、DKK1的表达.实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中Wnt1、β-catenin、DKK1 mRNA的表达.结果 LN组患者与对照组Wnt1、β-catenin、DKK1及血清mRNA表达无统计学差异;LN组治疗无效患者血清中β-catenin表达高于治疗有效患者(P＜0.05).结论 Wnt/β-catenin信号通路的分子有望成为监测LN治疗无效的指标.
关键词： Wnt/β-catenin信号通路 狼疮肾炎 分子标志物
