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龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎的效果观察
目的 观察龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎的临床治疗效果.方法 选择我院收治的62例膝关节骨性关节炎患者作为研究对象,对其应用龟鹿二仙胶联合内热针方式进行治疗,观察所有患者的临床治疗效果,记录治疗总有效率.结果 62例患者中治疗显效者26例(41.9％)、有效者30例(48.4％)、无效者6例(9.7％),治疗总有效率为90.3％.与治疗前相比,所有患者的VAS评分和膝骨关节严重性指数明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎效果显著,可有效改善患者的临床症状,达到标本兼治的目的.
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补肾健脾汤对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨代谢指标的影响
目的:观察龟鹿二仙胶、补肾健脾汤等不同补肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨质疏松的影响及干预作用.方法:取3月龄SPF级雌性SD大鼠70只,随机分为假手术组、模型组、龟鹿二仙胶组、二仙汤组、补肾健脾汤组、雌二醇组和仙灵骨葆组,每组10只.对假手术组大鼠行假手术,余6组行双侧卵巢摘除术,12周后测定各组大鼠血清中Ⅰ型胶原羧基端肽(β-Crosslaps)、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP),以双能X线骨密度测定仪测定大鼠的骨密度(BMD).结果:与雌二醇组比较,龟鹿二仙胶治疗组、补肾健脾组、仙灵骨葆组BMD显著增高(P＜0.05);二仙汤组、仙灵骨葆组β-Crosslaps含量显著降低(P＜0.05),补肾健脾汤组PINP含量显著增高(P＜0.05);与二仙汤组比较,龟鹿二仙胶组、补肾健脾汤组BMD显著增高(P＜0.05);补肾健脾汤组β-Crosslaps及P1NP含量均显著增高(P＜0.05),龟鹿二仙胶组P1NP含量显著增高(P＜0.05).结论:龟鹿二仙胶、补肾健脾汤补肾中药可以促进骨形成,减缓骨吸收,能有效防止去卵巢模型大鼠骨质疏松的形成.
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龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白多糖合成的影响
目的:通过观察龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖合成的影响,探讨龟鹿二仙胶的配伍机制.方法:体外培养豚鼠膝关节软骨细胞,免疫组化染色检测龟鹿二仙胶及其拆方对软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响,Alcian Blue染色检测软骨细胞蛋白多糖合成.结果:龟鹿二仙胶促进软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达极显著(P＜0.01),龟板和鹿角均能显著提高Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达(P＜0.05),但药效显著低于龟鹿二仙胶(P＜0.05)；人参和枸杞对Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达均无明显促进作用.结论:龟鹿二仙胶可显著促进软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达,这是其保护软骨细胞,延缓软骨退变的作用机制之一.龟鹿二仙胶发挥此作用的主要药物是龟板和鹿角；人参和枸杞本身并不能促进Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达,而与龟板和鹿角配合,可明显增强龟板和鹿角的促进软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的作用.
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龟鹿二仙胶及其拆方对SD大鼠膝骨关节炎的影响
目的:通过观察龟鹿二仙胶及其拆方对SD大鼠膝关节软骨退变的影响,探讨龟鹿二仙胶的配伍机制.方法:切除SD大鼠双侧卵巢、双膝内侧副韧带和前交叉韧带、实验跑台跑步4周,制作退化膝骨关节炎模型.中药灌胃2、4、8周后放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、免疫组化检测Bax、Bcl-2、白介素1β (IL-1β)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原(Collagen-Ⅱ)的表达.结果:8周时龟鹿参组可显著提高大鼠血清E2水平,龟鹿杞组可显著抑制Bax、促进Bcl-2表达,龟鹿参组可显著地抑制软骨细胞产生IL-1 β和MMP-13、提高Collagen-Ⅱ的表达,其效果均与龟鹿二仙胶作用相同.结论:龟鹿配伍人参可提高血清E2水平、抑制关节软骨产生炎症、促进软骨细胞Collagen-Ⅱ合成;龟鹿配伍枸杞可以抑制软骨细胞凋亡.
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龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响
目的:观察龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响并探讨其机制.方法:36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雷奈酸锶组,龟鹿二仙胶高剂量组、中剂量组、低剂量组,除假手术组外,其余均切除双侧卵巢,干预12周后检测血清雌二醇(E2)、血清骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、左侧股骨骨密度(BMD)、大载荷,右股骨髁部平均骨小梁面积(％Th.Ar)、平均骨小梁宽度(Tb.Th)、平均骨小梁分离度(Tb.Sp)以及骨小梁数目(Tb.N).结果:①龟鹿二仙胶各组血清E2、BALP水平、股骨骨密度、大载荷显著高于模型组(P＜O.05,P＜0.01),中剂量组TRACP-5b水平显著降低(P＜0.05);②龟鹿二仙胶中剂量组Tb.Ar、Tb.Th显著高于模型组(P＜0.05),各剂量组Tb.Sp显著低于模型组(P＜0.05);中、高剂量组Tb.N较模型组高(P＜0.05).结论:龟鹿二仙胶能调节去卵巢大鼠激素水平,具有促进骨形成和抑制骨吸收双重作用,能显著改善去卵巢大鼠骨显微结构,提高骨密度,增强骨强度.
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龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的研究概况
骨关节炎是常见病、多发病,同时是难治性疾病.中医将本病病机归纳为“肝肾亏虚为本,气滞、血瘀、痰湿凝聚为标”,通过运用“补肝肾、强筋骨、活血、祛瘀、止痛”等中药来治疗骨关节炎,龟鹿二仙胶切中本病肝肾亏虚之本,已经在临床实践中取得肯定的疗效.文章将对龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的实验研究情况作出概述,以便为中医治疗骨关节炎临床用药提供借鉴和思路.
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龟鹿二仙胶诱导大鼠骨髓基质干细胞成骨分化作用及对Wnt通路的影响
目的 观察龟鹿二仙胶合药血清对SD大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)成骨分化的作用及其对Wnt信号通路相关因子的影响.方法 100只3月龄雌性SD大鼠经腹腔入路切除双侧卵巢,按随机数字表法分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白组,每组25只.按体表面积换算龟鹿二仙胶剂量并灌胃给药,连续7天后腹主动脉采血制备含药血清.1月龄SD大鼠全骨髓贴壁法分离BMMSCs,流式细胞法(flow cytometry,FCM)法检测F3代细胞CD45和CD90表达;不同浓度龟鹿二仙胶合药血清干预F3代BMMSCs 72 h后,FCM法检测细胞周期的影响并计算增殖指数,确定佳干预浓度.F3代细胞分为FBS组、空白组、龟鹿二仙胶组和经典诱导组,诱导培养21天后,茜素红(alizarin red staining,ARS)染色法观察BMMSCs成骨分化,RT-PCR检测成骨分化相关基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(osteocalcin,OC)mRNA的表达;RT-PCR和Westernblot检测Wnt5a、β-连环蛋白(β-catenin)、淋巴样增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,Lef-1)mRNA和蛋白的表达.结果 F3代细胞CD45阳性表达率为1.46％±0.23％,CD90阳性表达率为96.97％±3.21％;浓度为10％的龟鹿二仙胶中剂量组合药血清能显著促进BMMSCs增殖;龟鹿二仙胶组和经典诱导组ARS染色可见橘红色钙结节.与空白组及FBS组比较,龟鹿二仙胶组和经典诱导组OC和ALP mRNA表达上调(P＜0.05),Wnt5a、β-catenin mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05);与空白组、FBS组和经典诱导组比较,龟鹿二仙胶组Lef-1 mRNA和蛋白表达均升高(P＜0.05);与FBS组和空白组比较,经典诱导组Lef-1蛋白表达上调(P＜0.05).结论 龟鹿二仙胶合药血清具有促进BMMSCs增殖,诱导BMMSCs向成骨细胞分化的作用,其机制可能与调控Wnt信号通路相关因子的表达有关.
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龟鹿二仙胶加减治疗肌萎缩侧索硬化的临床观察
目的：观察运用龟鹿二仙胶加减治疗肌萎缩侧索硬化症的临床疗效。方法：将28例确诊肌萎缩侧索硬化症患者随机分为两组，试验组15例，采用力如太联合龟鹿二仙胶加减并配合中医药传统疗法治疗；对照组13例，单用力如太治疗。对于两组患者分别运用中医证候评分和ALSFRS-R量表行疗效评价，并观察不良反应。结果：治疗组中医症候临床积分下降明显，有统计学意义（P<0.05）；治疗后两组ALSFRS-R量表评分仍都在下降，但治疗组下降幅度小于对照组（P<0.05）。结论：力如太联合龟鹿二仙胶加减配合中医药传统疗法治疗肌萎缩侧索硬化安全有效，可缓解肌萎缩侧索硬化患者言语不利、流涎、吞咽困难、肢体无力等症状，并能在一定程度延缓ALS病程进展的速度，疗效优于单用西药。
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龟鹿二仙胶治疗老年增生性骨关节炎的临床观察
目的:观察龟鹿二仙胶对老年增生性骨关节炎的治疗作用,以便更好地指导临床用药.方法:随机将入院治疗的80例患者分为治疗组及对照组各40例.治疗组采用龟鹿二仙胶治疗,对照组采用仙灵骨葆胶囊治疗.对患者进行一般情况改善和局部情况改善状况观察.结果:治疗组患者显效26例,有效10例,无效4例,总有效率为90％；对照组患者显效20例,有效11例,无效9例,总有效率为77.5％.两组总有效率相比较具有显著性差异(P＜0.05).结论:龟鹿二仙胶对老年性骨关节炎患者具有较好的治疗作用,且疗效确切.
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李发枝运用龟鹿二仙胶经验
介绍李发枝运用龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症、肌萎缩侧索硬化症、进行性肌营养不良经验,认为龟鹿二仙胶具有温肾壮阳、益精填髓功效,可沟通任督二脉,峻补阴阳精血,使阴生阳长、气血充固.
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中药胶剂
中药里有一种剂型,称为胶剂,系指以动物皮、骨、甲或角等为原料,用水煎煮,取汁,浓缩成的干胶状内服制剂,有阿胶、龟板胶、鳖甲胶、鹿角胶、龟鹿二仙胶等.这些胶剂治病疗疾有悠久的历史,《神农本草经》就载有"白胶"和"阿胶",这些胶剂至今仍在广泛使用.胶剂的主要成分是动物水解胶元蛋白,煎煮浓缩后,按不同处方要求,加入一定量的糖、油脂、及黄酒等辅料而制成.胶剂多供内服,可烊化单服或兑人煎剂,主要功能为补血、止血、祛风等,用以治疗虚劳、赢瘦、吐血、衄血、崩漏、腰腿酸软及妇女经血不调等症.但每种胶的功效有所不同.
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龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制研究
目的:研究龟鹿二仙胶对成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β表达的影响,探索龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制.方法:SD大鼠随机分为对照组、龟鹿二仙胶低剂量组、中剂量组、高剂量组、骨化三醇组,每天灌胃1次,持续7d,末次给药2h后腹主动脉采血,制成含药血清作用于大鼠成骨样细胞ROS17_2.8株.用MTT法及活细胞形态观察含药血清对成骨细胞增殖及凋亡的影响.用各组合药血清条件培养基培养成骨细胞,应用West-em Blot法检测各组成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测各组成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β mRNA的表达.结果:(1)MTT结果显示:龟鹿二仙胶各组的成骨细胞无明显增殖.骨化三醇组的成骨细胞有明显增值(P＜0.05).细胞染色提示:骨化三醇组及龟鹿二仙胶组的成骨细胞无显著的凋亡.(2)RT-PCR法结果显示:骨化三醇组与龟鹿二仙胶各组COL1A1及COL1 A2mRNA的水平均有增加(P＜0.01);龟鹿二仙胶中、高剂量组COL1A1及COL1 A2mRNA水平增加较明显(P＜0.05),龟鹿二仙胶高剂量组较中剂量组COL1A1及COL1A2mRNA水平增加不明显(P＞0.05);骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2 mRNA水平无明显变化(P＞0.05);龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2mRNA水平均有增加(P＜0.01);且龟鹿二仙胶中、高剂量组TGF-β1、TGF-β2mRNA水平增加差异无统计学意义(P＞0.05).(3)Western blot结果提示:第24 h,龟鹿二仙胶高剂量组能使成骨细胞COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P＜0.05).第48 h,骨化三醇组、龟鹿二仙胶各组均能使成骨细COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P＜0.01);龟鹿二仙胶高、中剂量组之间比较差异没有统计学意义(P＞0.05);第24、48 h,骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P＞0.05);在24 h,龟鹿二仙胶高剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成有显著增强(P＜0.01),龟鹿二仙胶低剂量和中剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P ＞0.05);48 h,龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成增加(P＜0.01).龟鹿二仙胶高中剂量组之间无显著差异(P＞0.05).结论:龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症机制可能通过调节细胞因子TGF-β,促进Ⅰ型胶原的表达,为探讨中药促胶原形成治疗骨质疏松提供细胞及分子生物学依据.
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龟鹿二仙胶的实验研究及临床应用
通过检索近10年来有关龟鹿二仙胶的文献100余篇,对其实验研究和临床应用进行综述,总结此方在骨科、妇科、血液病、肿瘤辅助治疗、男科等方面的临床应用,以及目前已取得的实验研究成果.
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龟鹿二仙胶对D-半乳糖致衰老小鼠SOD、MDA影响的实验观察
目的:探讨龟鹿二仙胶对D-半乳糖所致衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响.方法:成年昆明小鼠,雌雄各半,随机分为正常对照组、模型对照组、龟鹿二仙胶组、原方去龟板胶组、原方去鹿角胶组,每组10只.除正常对照组外,其余各组腹腔注射D-半乳糖复制衰老模型,每日2次.正常对照组则腹腔注射等量生理盐水.在造模的同时,正常对照组、模型对照组灌胃等量生理盐水,其余各组灌胃相应实验药物,每日2次.边造模边给药连续进行4周,4周末于腹主动脉采血分离血清并迅速取肝、脑组织进行冰浴匀浆,检测血清及组织匀浆的SOD和MDA含量.结果:模型组小鼠血清和组织匀浆中SOD活力较对照组显著降低、MDA含量显著增高,龟鹿二仙胶组与模型组相比SOD活力升高,MDA含量降低,其它各组比较无统计意义.结论:龟鹿二仙胶对D-半乳糖所致衰老小鼠SOD具有升高作用,对MDA具有降低作用.
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龟鹿二仙胶含药血清对顺铂培养大鼠T淋巴细胞影响的实验研究
目的:体外观察龟鹿二仙胶合药血清对顺铂培养T淋巴细胞活力、凋亡及自噬的影响,探讨其对T淋巴细胞的保护机制.方法:大鼠T淋巴细胞分别使用顺铂、中药血清、顺铂+中药血清培养干预,并设立空白对照组.CCK法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,电镜技术观测细胞自噬情况自噬体.结果:干预12 h后,顺铂组细胞活力明显下降(P＜0.01),凋亡明显增多(P＜0.01),细胞内可见明显的自噬体、溶酶体;顺铂+中药血清组细胞活力较顺铂组明显上升(P＜0.01),凋亡明显减少(P＜0.01),细胞内自噬体、溶酶体减少.干预24 h后,上述结果倾向性更明显.结论:龟鹿二仙胶能够减少化疗药物作用后大鼠T淋巴细胞的凋亡,增强其活力;其作用机制可能与抑制细胞自噬过程有关.
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龟鹿二仙胶对铅鼠海马CA1区长时程增强损伤的修复作用
目的 探讨龟鹿二仙胶对发育期铅暴露大鼠海马CA1区突触可塑性的影响.方法 在出生当天将仔鼠随机分为正常组、正常+龟鹿二仙胶组、铅组及铅+龟鹿二仙胶组.仔鼠出生后饮用0.2％的醋酸铅溶液,建立铅鼠模型,采用石墨炉原子吸收光谱法测血铅,用液态等离子质谱法测定海马铅水平,在位电生理记录海马CA1区的场电位.结果 和正常组相比,铅鼠血铅、海马铅水平明显升高,长时程增强(LTP)的幅度显著下降,均有显著性差异(P＜0.01);而同期铅+龟鹿二仙胶组海马铅水平比铅组显著下降(P＜0.01),其LTP幅度明显高于铅组大鼠(P＜0.05).结论 龟鹿二仙胶对发育期慢性铅暴露大鼠LTP幅度的下降有修复作用.
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中西医结合治疗特发性血小板减少性紫癜71例临床观察
近些年来笔者采用中西医结合方法治疗特发性血小板减少性紫癜(ITP)71例,疗效较好,报告如下.1 临床资料124例特发性血小板减少性紫癜患者均为本院住院及门诊患者,均符合文献[1]中相关诊断标准.按就诊及入院的先后次序,将患者按数字法分为2组.治疗组71例:男27例,女44例;年龄8～46岁,平均年龄38.2岁:病程短3月,病程长18年.对照组53例:男20例,女33例;年龄7～45岁,平均年龄36.5岁:病程短2月,长14年.
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龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用
目的 研究龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用.方法 体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,传至第二代后分5组培养:正常组、地塞米松(10-8mol/L)组、骨化三醇含药血清组、龟鹿二仙胶含药血清低剂量组、龟鹿二仙胶含药血清高剂量组.MTT法检测骨髓间充质干细胞活力,检测细胞上清中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、炎症因子白介素-6(IL-6)、小鼠白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α).采用Western blot检测Nrf-2/HO-1/NF-κB信号通路蛋白表达.结果 龟鹿二仙胶能显著提高细胞活力,增加SOD水平、降低MDA水平、降低炎症因子水平,增加蛋白Nrf-2、HO-1蛋白表达水平,降低NF-κB信号蛋白表达.结论 龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤有保护作用,且作用与调控Nrf-2/HO-1/NF-κB信号相关.
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龟鹿二仙胶巴布剂对化疗后患者白细胞减少的干预作用
恶性肿瘤的发病率和死亡率一直居高不下，并逐年上升。据美国国际癌症研究机构（International Agency for Research on Cancer，IARC）于2012年公布的全球范围内癌症死亡率和发病率的报告，新发病例数已增长至1409万，新发病率为57%；死亡人数从760万增至820万，死亡率分别为65%。化疗已成为癌症的重要治疗手段之一[1]。但化疗在杀灭肿瘤细胞的同时，对机体的正常组织也造成损害，其常见的副作用为骨髓抑制，表现为血三系减少，尤以白细胞、粒细胞减少为常见，往往使化疗难以达到所需的剂量强度和完成正常治疗所需的疗程，这成为癌症难治及复发、转移的原因之一。笔者采用龟鹿二仙胶治疗患者化疗后白细胞减少，取得较好疗效，现报道如下。
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龟鹿二仙胶的现代运用
龟鹿二仙胶为中医传统名方，明代（1569年）王三才所著的《医便》就有详细记载，该方由鹿角胶、龟板、人参、枸杞子组成。方中龟板、鹿角胶“二仙”为主药，均归肾经。《古今名医方论·龟鹿二仙膏》云“龟得天地之阴气厚，善通任脉”，其腹甲为胶，能滋阴潜阳、补血。“鹿得天地之阳气全，善通督脉”，其角为胶，能补肾阳、生精血。人参大补元气而生津。枸杞子益精生血。《医方考·虚损劳瘵门》云人参“善于固气”而枸杞子“善于滋阴”。四药合用，生精、益气、养血，阴阳并补，且补阴而无凝滞之弊，补阳而无燥热之害，属阴阳双补之剂。《医方考》论：“精极者，梦泄遗精，瘦削少气，目视不明，此方主之”。据其方义，可作为治疗各科虚证的基本方[1]。在现代运用中，龟鹿二仙胶成为延缓衰老的效验方，并被广泛应用于慢性疲劳综合征、神经系统疾病、骨骼系统疾病、血液系统疾病及生殖系统多种疾病，另外尚有学者报道龟鹿二仙胶用于气胸[2]、绝经后妇女不稳定型心绞痛[3]的治疗，均取得较好的疗效。总结起来，主要用于治疗以下几方面。
