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XIAP、XAF1、TNF-α在子宫内膜异位症发病机制中的作用
目的:探讨X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及相关因子1(XAF1)和肿瘤坏死因子-α(TNF -α)在子宫内膜异位症(EMT)发病机制中的作用.方法:2007年6月～2008年4月行腹腔镜下子宫内膜异位囊肿剥除术患者65例(研究组),同期因输卵管因素不孕行腹腔镜手术治疗的患者55例(对照组),均刮取子宫内膜,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率；免疫组化检测在位及异位子宫内膜组织中XIAP和XAF1的表达；ELISA检测两组患者腹水中TNF-α浓度.结果:①对照组分泌期细胞凋亡率(7.38±0.76％)高于增生期(4.66±1.14％)(P＜0.05)；研究组在位和异位内膜增生期与分泌期细胞凋亡率均无周期变化,异位内膜低于在位内膜(P＜0.05),在位内膜低于正常内膜(P＜0.05).②对照组和研究组在位内膜中XIAP的表达,增生期均高于分泌期(P＜0.05),在研究组异位内膜中表达无周期变化.③XAF1的表达,对照组和研究组在位内膜组织中分泌期XAF1表达高于增生期(P＜0.05),研究组异位内膜增生期和分泌期XAF1的表达无差异(P＞0.05).④研究组和对照组增生期与分泌期腹水中TNF -α浓度无差异(P＞0.05),研究组高于对照组(P＜0.05).⑤XIAP与XAF1表达呈负相关,XAF1的表达与TNF -α水平呈正相关(P＜0.05).结论:在EMT中凋亡抑制因子表达增强,凋亡促进因子表达减弱,可能对异位内膜种植起促进作用,但TNF -α水平升高通过增强XAF1活性,在一定程度上限制了异位内膜的无限制生长,使其表现为良性疾病.
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靶向XIAP的shRNA重组质粒的构建
目的:设计以X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)为靶向的shRNA,构建携带此shRNA的重组质粒,检测其抑制XIAP表达的效应,筛选RNA干扰作用强的shRNA片段.方法:设计4对针对XIAP基因不同位点的shRNA片段,构建携带此shRNA片段的真核表达载体psiRNA-Hhneo-XIAP,通过脂质体介导的方法将重组质粒转染到肝癌细胞株HepG2细胞中.采用逆转录酶链式反应(RT-PCR)及蛋白印迹(Western blotting)方法检测XIAP的mRNA及蛋白表达情况,比较转染前后其表达差异,以判断各sbRNA的干扰效应.结果:成功构建含shRNA片段的重组质粒.经质粒测序证实,插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致.重组质粒转染HepG2细胞后,XIAP基因的mRNA水平及蛋白表达水平明显下调,其中以1号重组质粒效应强.shRNA作用48 h后,对HepG2细胞中XIAP mRNA和蛋白的抑制率与3,4号重组质粒相比,均具有显著性差异(mRNA:94.5%vs 81.5%,82.6%,均P＜0.01:蛋白:92.6% vs 80.7%,82.9%,均P＜0.01).结论:成功构建了携带以XIAP为靶向的shRNA的重组质粒,其对肝癌细胞内XIAP的表达具有显著抑制效应.
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X染色体连锁凋亡抑制蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及其与新辅助化疗耐药的关系
目的 探讨宫颈鳞癌组织中X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达水平与新辅助化疗耐药是否相关.方法 收集78例官颈鳞癌患者的癌组织及40例正常官颈及慢性官颈炎组织,其中32例官颈癌患者术前进行了新辅助化疗2个疗程,同时也收集2个疗程后的癌组织.根据疗效将32例患者分为化疗敏感组和耐药组.通过免疫组化SP法检测XIAP在官颈癌组织、癌旁组织和新辅助化疗后的癌组织中的表达情况.结果 相对于癌旁组织或正常组织中的低表达或几乎不表达,XIAP在癌组织中高表达,XIAP在癌组织中的表达与有无淋巴结转移和组织分化程度方面差异有统计学意义(P＜0.05),在临床分期及年龄方面差异无统计学意义(P＞0.05).化疗敏感组中XIAP的表达积分化疗后较化疗前显著降低(P＜0.01),而在化疗耐药组中差异无统计学意义(P＞0.05).化疗前两组患者的XIAP表达积分差异无统计学意义(P＞0.05).结论 XIAP在子宫颈癌组织中表达水平明显升高,可能与官颈癌复发及转移有关.同时XIAP表达水平的变化与新辅助化疗是否耐药密切相关,可能为开发新的化疗药物提供靶位点.
关键词： 官颈鳞癌 新辅助化疗 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 -
成年大鼠心肌缺血再灌注后X染色体连锁凋亡抑制蛋白的动态表达变化
目的 测定心肌缺血再灌注过程中X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)动态表达变化,探讨其与缺血再灌注损伤所致心肌细胞凋亡的关系.方法 将健康成年雄性SD大鼠随机分为两组,手术组和伪手术组,每组根据再灌注时间再分为6组:缺血30min,再灌注0、1、2、3、12、24 h组.采用半胱天冬酶-3(Caapaae-3)活性检测判定大鼠心肌细胞凋亡发生情况;用Western Blot和实时定量PCR技术分别检测各组心肌组织中XIAP的蛋白和基因表达水平.结果 Caspase-3活性从心肌缺血再灌注1 h开始升高,再灌注12 h活性大,再灌注24 h趋于正常.心肌缺血再灌注3 h,XIAP蛋白表达开始降低,再灌注12 h表达低;而XIAP的mRNA水平表达各组差异无统计学意义.结论 成年大鼠心肌缺血再灌注后Caspase-3活性增高可能与XIAP表达降低有关,提示XIAP表达降低可能参与了心肌缺血再灌注诱导的细胞凋亡.
关键词： 缺血再灌注 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 半胱天冬酶-3 -
Smac和XIAP在喉癌中的表达及临床意义
目的：探讨 Smac和 XIAP 在喉鳞状细胞癌（ LSCC）中的表达水平及临床意义。方法采用免疫组织化学法（ S-P 法）检测31例LSCC组织和10例正常腭帆黏膜（ NVPM）组织中Smac和XIAP的表达，并用统计学方法分析各组结果及相关性。结果 Smac在 LSCC 组的表达水平明显低于NVPM组（ P＜0.01）， XIAP 在 LSCC 中的表达水平明显高于 NVPM 组（ P＜0.01）。 Smac 和 XIAP 在 LSCC 中的表达水平呈负相关（r＝－0.65，P＜0.01）。结论 Smac在喉癌组织中的低表达、XIAP在喉癌中的高表达与LSCC的发病及恶性程度密切相关。
关键词： 胱氨酸蛋白酶激活剂 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 免疫组化 细胞凋亡 喉癌 -
环氧化酶2、X染色体连锁凋亡抑制蛋白在唾液腺恶性肿瘤中的表达及意义
目的:检测环氧化酶2(Cox-2)与X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在唾液腺腺样囊性癌(ACC)与黏液表皮样癌(MEC)中的表达,探讨两者在唾液腺恶性肿瘤发生、发展中的作用及相关性.方法:采用免疫组织化学SP法检测95例唾液腺恶性肿瘤(包括50例ACC、45例MEC)、10例多形性腺瘤及10例正常唾液腺组织中Cox-2和XIAP的表达情况,使用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学处理.结果:Cox-2、XIAP在唾液腺恶性肿瘤中高表达,在多形性腺瘤和正常唾液腺组织中不表达或低表达.Cox-2、XIAP的表达与唾液腺恶性肿瘤组织临床分期和远处转移呈正相关(P＜0.05),而与肿瘤部位无相关性(P＞0.05).结论:Cox-2和XIAP在唾液腺恶性肿瘤中高表达,可能在唾液腺恶性肿瘤发生、发展过程中具有重要作用.
关键词： 环氧化酶2 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 腺样囊性癌 黏液表皮样癌 -
As2O3对肾癌细胞增殖、凋亡的影响及意义
目的 观察As2O3对肾癌细胞株786-0增殖、凋亡及细胞内X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响,探讨其意义.方法 取对数生长期786-0,分别经0.5、1.0、2.0 μmol/L的As2O3处理后,采用MIT比色法检测细胞生长情况,流式细胞仪测算细胞凋亡率,蛋白质印迹法及RT-PCR法检测细胞中的XIAP及其mRNA.结果 0.5、1.0、2.0 μmoL/L As2O3均可抑制786-0增殖.随着作用时间的延长,细胞生长抑制率升高(P均＜0.01)；随着As2O3浓度的增加,细胞凋亡率升高(P均＜0.01)、细胞内XIAP及其mRNA表达明显下调(P均＜0.05).结论 As2O3可抑制786-0增殖,并诱导其凋亡.这一作用与As2O3抑制786-0中XIAP及其mRNA表达有关.
关键词： 肾肿瘤 肾癌 As2O3 细胞凋亡 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 -
骨肉瘤组织中XIAP mRNA、Caspase-9mRNA的表达变化及意义
目的 观察X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)mRNA和Caspase-9 mRNA在骨肉瘤中的表达变化及其与骨肉瘤临床病理指标的联系.方法 采用原位杂交技术检测51例骨肉瘤组织中XIAP mRNA和Caapase-9mRNA,并以10例骨软骨瘤(骨良性病变)组织为对照(对照组).结果 在51例骨肉瘤中XIAPmRNA和Caspase-9 mRNA的表达水平与骨肉瘤的临床病理特征无明显关系,XIAP mRNA的阳性表达率显著高于对照组(P<0.05);Caspase-9 mRNA则显著低于对照组(P<0.05);XIAP mRNA与Caspase-9 mRNA的表达呈等级负相关(r=-0.467,P<0.05).结论 XIAP、Caspase-9 mRNA可能与骨肉瘤的发生、发展有关.以XIAP和Caspase-9为靶点进行诱导骨肉瘤细胞凋亡的治疗,将可能成为临床提高保肢手术成功率及患者生活质量的新治疗思路.
关键词： 骨肿瘤 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 半胱氨酸蛋白酶-9 -
恶性骨肿瘤中XIAP 和Caspase-3 的表达及临床意义
目的 研究恶性骨肿瘤中X 染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达情况,探讨XIAP、Caspase-3 在恶性骨肿瘤发生发展中可能的作用及临床意义.方法 免疫组织化学法对35 例恶性骨肿瘤标本及15 例良性骨肿瘤标本分别检测XIAP 及Caspase-3的表达.结果 恶性骨肿瘤组织中XIAP 表达的阳性率高于良性骨肿瘤组织(χ2=4.126,P<0.05);而Caspase-3 表达的阳性率低于良性骨肿瘤组织(χ2=4.778,P<0.05).恶性骨肿瘤组织中XIAP 与Caspase-3 的表达评分呈负相关(r=-0.352,P<0.05).结论 XIAP 和Caspase-3 可能与恶性骨肿瘤的发生、发展有一定的关系,为临床提供新的诊治思路.
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靶向X染色体连锁凋亡抑制蛋白的短发夹状RNA诱导肝癌细胞凋亡
X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)是凋亡抑制蛋白家族中具有caspase抑制能力的成员,具有较强酌抗凋亡能力[1].有研究表明XIAP在肿瘤中高表达可能是肿瘤进展及导致肿瘤对化疗药物耐药的一个重要机制[2].
关键词： 癌 肝细胞 细胞凋亡 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 -
BMP-2、XIAP在细胞丰富型和基质丰富型涎腺多形性腺瘤中的表达及意义
目的 研究BMP-2、XIAP在细胞丰富型和基质丰富型涎腺多形性腺瘤中的表达及其与复发、恶变的相关性.方法 收集2004年1月至2013年1月我院92例多形性腺瘤标本,经HE染色后分为细胞丰富型(A)、基质丰富型(B)、其他型(C)3组,运用免疫组化法检测BMP-2、XIAP在各组的表达并分析各组复发及恶变情况;TUNEL染色法检测各组组织细胞凋亡情况.结果 疫组化结果:BMP-2表达在B、C、A组中依次递减,XIAP在A、B、C组中表达依次递减,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).复发病例中BMP-2显著高于未复发病例(P＜0.05),恶变病例中XIAP显著高于未恶变病例(P＜0.05).TUNEL结果显示,A组中凋亡指数显著低于其他2组(P＜0.05),而B、C2组差异间无统计学意义.结论 ①基质丰富型多形性腺瘤更容易复发,而细胞丰富型多形性腺瘤更容易恶变.②BMP-2的表达水平可能与多形性腺瘤的复发有关,而XIAP的表达水平与多形性腺瘤的恶变有关.
