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侧脑室微量注射瘦素对OEP大鼠子宫腔液蛋白表达的影响
目的:探讨瘦素通过下丘脑-垂体轴对子宫的调节作用.方法:应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离OEP大鼠侧脑室微量注射瘦素及生理盐水6 h后的子宫腔液总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对差异表达的蛋白质点进行鉴定.结果:与生理盐水对照组相比,瘦素实验组有6个差异表达蛋白质,其中5个蛋白点升高,1个蛋白点降低.经过质谱分析结合数据库检索,获得有意义的蛋白点,上调蛋白点为补体B因子、冠蛋白、肌动蛋白结合蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1、烯醇酶,下调蛋白点为补体C3.结论:这些差异表达蛋白涉及炎症反应、细胞分化、细胞迁移、细胞凋亡等功能,瘦素可能通过下丘脑-垂体轴从免疫、生殖等方面对子宫发挥调节作用.
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瘦素经POMC神经元对神经内分泌-生殖轴的影响
目的:探讨瘦素(1eptin)对神经内分泌一生殖轴的可能调节机制.方法:建立卵巢摘除补充雌激素(OEP)大鼠模型,动物随机分为leptin组、a-黑素细胞刺激素(a-MSH)组和生理盐水对照组,于侧脑室注射后lh、2h、4h和6h分别取血和脑组织.ELISA法检测血中促性腺释放激素(Gn-RH)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)浓度.Western印迹检测下丘脑组织中阿片促黑激素皮质素原(POMC)蛋白量的变化.结果:侧脑室注射leptin可促进GnRH、P3H、LH的分泌,而注射a-MSH则抑制GnRH、FSH和LH的分泌.注射.1eptin显著增加下丘脑中的POMC含量.结论:Leptin可能通过POMC神经元或与其他途径共同影响下丘脑一垂体生殖轴的分泌功能;POMC神经元发挥的调节作用可能晚于或弱于其它神经元.
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中枢肾上腺素能系统在"内关"与心脏相关联系中的作用
在急性心肌缺血模型上观察侧脑室微量注射去甲肾上腺素对心肌缺血的影响以及侧脑室注射酚妥拉明和心得安对电针"内关"心脏效应的影响.结果:去甲肾上腺素使心肌缺血恢复变慢,电针"内关"则能加快心肌缺血的恢复;酚妥拉明阻断电针"内关"的效应,而心得安不对抗电针的效应.提示中枢肾上腺素能系统参与电针"内关"的心脏效应,电针"内关"可能通过兴奋α受体、抑制β受体兴奋起作用.
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侧脑室注射EGb 761对MCAO大鼠神经细胞凋亡的影响
缺血性脑卒中缺乏有效的治疗措施,目前应用于临床的许多药物受到血脑屏障的限制,难以充分发挥疗效.EGb 761是银杏制剂的提取物,在改善心脑血管疾病方面积累了大量证据.为提高其局部血药浓度,我们采用侧脑室微量泵泵入EGb 761,并观察其对大脑中动脉缺血-再灌注(MCAO)大鼠脑区细胞凋亡的影响,探讨其作用机制及侧脑室注射途径的可行性.
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侧脑室注射nesfatin-1抑制大鼠胃酸分泌
目的 观察侧脑室注射nesfatin-1对大鼠胃黏膜泌酸功能的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 雄性SD大鼠,侧脑室置管后,每只大鼠分别给以侧脑室注射1、5和50 pmol的nesfatin-1及等体积的灭菌水(5μL/rat),于20 min及1、2、4和6h处死大鼠,收集胃液,测定其胃酸的变化.并用RT-PCR、Western blot检测胃黏膜中组胺酸脱羧酶(HDC)mRNA及蛋白的表达,ELISA法检测胃体黏膜中组胺的含量.其后选择强作用浓度进一步检测nesfatin-1在不同作用时间点对大鼠胃酸分泌的影响.结果 大鼠注射浓度为5和50 pmol的nesfatin-1后2h,大鼠胃酸分泌减少,其中50 pmol作用强(P＜0.05).同时大鼠胃黏膜中HDC mRNA及蛋白的表达受到抑制(P＜0.05).注射50 pmol的nesfatin-1在1,2h能够抑制胃体黏膜中组胺的表达,2h抑制更明显(P＜0.05).结论 侧脑室注射nesfatin-1可呈剂量和时间依赖性的抑制大鼠胃酸的分泌,组胺信号通路可能参与了上述过程.
关键词： nesfatin-1 胃酸分泌 组胺 侧脑室注射 -
侧脑室注射链脲佐菌素对大鼠海马突触相关蛋白PSD-95和Shank 1表达的影响
目的 观察侧脑室注射链脲佐菌素对大鼠脑PSD-95和Shank1表达的影响.方法 将大鼠随机分为正常对照组和模型组,模型组大鼠双侧侧脑室注射链脲佐菌素3mg/kg,第3d重复此剂量;对照组以人工脑脊液代替链脲佐菌素.21d后,取大鼠海马,用免疫组织化学和Western blotting方法观察突触相关蛋白PSD-95和Shank1的表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠海马PSD-95和Shankl阳性细胞明显减少,PSD95和Shank1蛋白表达降低.结论 侧脑室注射链脲佐菌素使海马PSD-95和Shank1表达减少,干扰了神经元突触信号传导.
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侧脑室内连续注射神经肽S对神经病理性疼痛大鼠疼痛及焦虑行为的影响
目的：研究侧脑室内连续注射神经肽S对神经病理性疼痛大鼠疼痛行为及焦虑行为的影响，探讨神经肽S对疼痛和焦虑影响的作用机制。方法40只雄性Sprague-Dawley大鼠被随机分为假手术对照组(Sham-Veh组)、假手术神经肽S组(Sham-NPS组)、慢性压迫性神经损伤组(CCI组)、神经肽S低剂量组(NPSl组，0.1 nmol/L)和神经肽S高剂量组(NPSh组，1 nmol/L)，每组8只。制备CCI动物模型，造模成功后第7天左侧侧脑室置入微透析用导针，自术后第8天起每日侧脑室注射相应药物，在术后第14天检测机械痛缩足阈值和热辐射缩足潜伏期，并通过高架十字迷宫检测焦虑行为的变化。采用免疫组织荧光技术检测左侧杏仁核区神经肽S受体(NPSR)的表达。结果与Sham-Veh组比较，CCI组大鼠术后14 d出现明显疼痛和焦虑行为(P<0.01)，NPSh组明显缓解(P<0.01)，NPSl组与CCI组比较无显著性差异(P>0.05)。免疫组织荧光结果显示，与CCI组相比，NPSh组杏仁核区NPSR表达明显增加。结论神经肽S可以剂量依赖性地逆转CCI大鼠的疼痛和焦虑行为，其机制可能与杏仁核NPSR上调有关。
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可乐定能阻断胍丁胺的中枢心血管效应
背景 咪唑啉受体是重要的抗高血压药物作用位点,以往的研究认为胍丁胺是咪唑啉受体的内源性配体,但胍丁胺的中枢心血管效应及其机制研究不清楚.目的 通过侧脑室注射的方法观察胍丁胺的中枢心血管效应及其机制,并探讨胍丁胺是否是咪唑啉受体的内源性配体.方法 雄性SD大鼠70只,腹腔注射氨基甲酸乙酯1.0 g/kg实施麻醉、气管插管、右侧股动、静脉插管,固定于立体定位仪.其中29只大鼠随机分为对照组、胍丁胺组(5、10、20μmol)和可乐定组(1.0 μmol),以人工脑脊液为对照,给药后观察大鼠血压和心率变化.其余41只大鼠随机分为:①咪唑克生(咪唑啉受体阻断剂)+胍丁胺组;②MK-801[N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂]+胍丁胺组;③可乐定+胍丁胺组;④人工脑脊液+胍丁胺组;⑤咪唑克生+可乐定组;⑥MK-801+可乐定组;⑦人工脑脊液+可乐定组.先分别侧脑室注射咪唑克生等阻断剂,10 min后待血压平稳再分别侧脑室注射胍丁胺或可乐定,观察给药后大鼠的血压和心率变化.结果 侧脑室注射胍丁胺5μmol[平均动脉压(MBP):给药前(113±5)比给药后(105±13)mmHg],10/μmol[MBP:给药前(103±7)比给药后(72±9)mmHg](均P<0.05),胍丁胺均可显著降低麻醉大鼠血压,并减慢心率;侧脑室注射1.0μmol可乐定具有相似的心血管效应[MBP:给药前(92±8)比给药后(78±19)mmHg,P<0.05].侧脑室注射等量人工脑脊液对麻醉大鼠的血压和心率不产生显著性作用.预先给予咪唑克生(1.0 μmol)、NMDA受体拮抗剂MK-801(O.5μmol)或可乐定(1.0μmol)单独给药能显著减弱侧脑室注射胍丁胺的心血管效应;同时预先给予咪唑克生(1.0μmol)、NMDA受体拮抗剂MK-801(0.5μmol)也能有效减弱侧脑室注射可乐定产生的心血管效应.结论 侧脑室注射胍丁胺产生的降低血压、减慢心率的作用可能是作用于咪唑啉受体产生,并且由NMDA受体介导的;可乐定能阻断胍丁胺的中枢心血管效应.
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BALB/c和昆明小鼠Aβ侧脑室注射建立阿尔茨海默病小鼠模型比较
目的:选择合适品系的小鼠通过侧脑室注射β-淀粉样蛋白片段25～35(Aβ_(25～35))建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)小鼠模型.方法:采用跳台、Morris水迷宫实验对比了BALB/c小鼠、昆明(KM)小鼠侧脑室注射Aβ_(25～35)后学习记忆能力的变化,筛选出用于适合制备AD动物模型的小鼠品系.结果:正常KM小鼠与BALB/c小鼠比较,被动回避反应能力无明显差异,而KM小鼠的空间学习记忆能力明显强于BALB/c小鼠.侧脑室注射Aβ_(25～35)后,雌性和雄性BALB/c小鼠和雌性KM小鼠学习记忆能力与各自正常对照组相比无明显变化;雄性KM小鼠与其正常对照组相比,在Morris水迷宫实验中逃避潜伏期明显延长、第一次穿环时间增加而穿环次数明显减少.结论:侧脑室注射Aβ_(25～35)后,雄性KM小鼠Morris水迷宫实验的学习记忆能力降低明显优于雌性KM小鼠及雌性、雄性BALB/c小鼠,是制备AD小鼠模型比较理想的动物.
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大鼠清醒无麻醉状态下的侧脑室给药方法的研究
目的:探讨大鼠清醒无麻醉状态下的侧脑室给药方法.方法:选取雌性SD大鼠15只,使用自制脑室置管系统对大鼠行侧脑室置管,置管术后大鼠自由恢复1周,每日对大鼠进行驯养5～10 min.术后8～10d在清醒无麻醉状态下每日向侧脑室注射生理盐水10 μL.术后11d侧脑室注入10 μL美蓝后麻醉大鼠,全部开胸经升主动脉插管,行甲醛心脏灌注后处死大鼠,待甲醛固定灌注完毕后取脑组织.结果:2％的美蓝溶液注入后脑室的全部内壁均染色,苏木精-伊红染色法(HE染色法)染色后脑内未见明显的出血或炎症,2只大鼠给药前,置入侧脑室的不锈钢导管未见脑脊液溢出.结论:清醒无麻醉状态下的大鼠侧脑室给药方法简单可行,成功率高.
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神经肽Y5受体反义脱氧寡核苷酸的减重降脂作用
目的:探计神经肽Y5反义脱氧寡核苷酸对高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型的拮抗作用.方法:建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,行侧脑室内插管,观察肥胖大鼠注射神经肽Y5受体反义脱氧寡核苷酸、错义脱氧寡核苷酸及生理盐水后体重和进食量的变化.结果:注射神经肽Y5受体反义脱氧寡核苷酸的肥胖大鼠,体重和进食量明显减少,与注射前比较有显著性差异(P＜0.01);注射错义脱氧寡核苷酸和生理盐水对照组这两项指标未见明显下降(P＞0.05).结论:侧脑室注射神经肽Y5受体反义寡核苷酸对营养性肥胖大鼠有明显的抑制进食和减轻体重的效应.
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侧脑室注射5-HT对兔胃运动的影响及其机制研究
目的:探讨中枢5-HT对胃运动调节的神经机制.方法:采用兔侧脑室给药,记录胃内压及胃收缩频率.结果:①侧脑室注入5-HT 25 μg,胃内压升高,胃收缩频率下降.②侧脑室注入阿托品抑制5-HT的效应,外周静脉注射阿托品仅阻断其升压作用.酚妥拉明和心得安对5-HT的作用均无明显影响.③侧脑室注射纳洛酮或苯海拉明显著抑制5-HT的降频作用,且苯海拉明能反转5-HT的升压作用.④切断双侧膈下迷走神经,侧脑室注射5-HT对胃运动无影响.结论:脑内5-HT引起胃收缩频率和胃内压变化的神经机制不同,升高胃内压的作用与中枢乙酰胆碱和组织胺有关,经迷走神经中胆碱能纤维传出;降低胃收缩频率的作用与中枢乙酰胆碱、组织胺及脑啡肽有关,经迷走神经中非胆碱能非肾上腺素能纤维传出.
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淫羊藿总黄酮对大鼠动脉血压影响及其机制的实验研究
目的:观察淫羊藿(HE)对大鼠动脉血压的影响.方法:在大鼠侧脑室注射(icv)淫羊藿总黄酮(TFE)观察其对股动脉血压(ABP)的影响.结果:淫羊藿总黄酮对正常和应激高血压(SIH)大鼠平均动脉血压(MAP)有降低作用,用荷包牡丹碱(Bic)影响TFE的降压效应.结论:TFE具有降压效应,其机制可能与GABAA受体相关.
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芹菜素对雌性大鼠生殖轴的影响
目的:探讨芹菜素在1Q<-9>mol/L浓度时对雌性大鼠生殖功能的影响.方法:应用侧脑室注射方法观察芹菜素对雌性大鼠生殖轴激素含量的影响.在侧脑室注射后第3天取血浆,采用放免技术测定血浆中促性腺激素释放激素(GnRH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E<,2>)、孕酮(P)的含量.结果:在给药后第3天血浆中促性腺激素释放激素(GnRH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的含量增加而雌二醇(E<,2>)、孕酮(P)的含量降低,差异有显著性,结论:芹菜素抑制雌二醇(E<,2>)合成中芳香化酶的活性实现对雌二醇(E<,2>)、孕酮(P)分泌的抑制.芹莱素通过影响雌激素受体而使下丘脑的促性腺激素释放激素(GnRH)和腺垂体的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)分泌增加.
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鸡ICV法的改建与NPY注射试验
目的:在参考Davis等建立的侧脑室注射(ICY)法的基础上,建立鸡ICV法.方法:利用改建的鸡ICV法研究梯度注射神经肽Y(NPY,2.5 μg/bird和5μg/bird)对鸡采食量的影响.结果:ICV套管安装手术的成功率为88％(37/42),注射成功率为64％(23/36)；NPY可显著提高注射后1～4h和24h鸡的采食量(P＜0.05),提高幅度在6.88％(5μg/bird,注射后24h) ～ 138.95％(注射后1 h)之间,注射后3h内,采食量随注射剂量增加而增加.结论:本研究建立的鸡ICV注射法是适用的,NPY是鸡重要的诱食因子之一,利用建立的ICY法,2.5 μg/bird的外源性NPY就足以使鸡产生采食反应,为今后进一步开展鸡行为学研究提供方法和依据.
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麦芽酚铝对大鼠在体海马长时程增强影响
目的 探讨急性麦芽酚铝[Al(mal)3]染毒对大鼠海马CA1区长时程增强(LTP)影响.方法 对照组及低、中、高染铝组大鼠通过侧脑室给药方式分别一次性注射生理盐水、2.43、12.15、60.75.μg Al (mal)3,给药容积为5μL,5 min内缓慢匀速注入；采用在体海马CA1区LTP记录技术,记录兴奋性突触后电位(fEPSP).结果 高剂量染铝组大鼠在给药前和给药后30 min时fEPSP分别为(109±4)％和(11l±7)％,差异无统计学意义(P＞0.05)；在高频刺激后60 min时,低、中、高染铝组fEPSP分别为(157±8)％、(140±13)％、(110±7)％,均低于对照组的(190±27)％,而相同剂量下的Al(mal)3对双脉冲易化(PPF)无影响.结论 Al(mal)3剂量依赖性抑制大鼠海马CA1区的LTP诱导和维持,其作用机制可能与突触前机制无关,而与突触后机制有关.
关键词： 麦芽酚铝[Al(mal)3] 长时程增强(LTP) 侧脑室注射 海马 在体 -
体感诱发电位指标观察孤啡肽对大鼠脑缺血的作用
目的探讨孤啡肽在脑缺血中的作用。方法在大鼠大脑中动脉栓塞动物模型上 ,侧脑室注射 (icv)不同剂量孤啡肽，以体感诱发电位 (SEP)和脑梗死体积为指标观察孤啡肽对脑缺血的作用。结果大鼠脑缺血后 SEP波幅降低，侧脑室分别注射 10、 1μ g孤啡肽 SEP进一步抑制；同时增大脑梗死灶的体积，而相同条件 icv 0.1μ g孤啡肽 SEP的波幅和脑梗死灶的体积与对照组比较无统计学差异。结论 icv孤啡肽加重大鼠脑缺血。
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侧脑室注射芹菜素对动情期雌性大鼠卵巢功能的影响
目的探讨芹菜素对卵巢内分泌功能的影响及作用机制.方法通过在体实验,给成年雌性大鼠侧脑室注射芹菜素(10-9M),观察芹菜素对卵巢雌激素和孕激素分泌的影响.结果给予芹菜素后第三天,卵巢雌激素和孕激素的分泌明显减少,该抑制可被hCG解除.给药后第五天,芹菜素的抑制作用消失,卵巢代偿性的分泌雌激素增加,而孕激素的分泌不增加.结论芹菜素(10-9M)可以抑制卵巢分泌雌激素和孕激素.
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电针对侧脑室注射L-AAA致抑郁模型大鼠行为学的影响
目的 观察侧脑室注射L-α-aminoadipic acid(L-AAA)对大鼠抑郁样行为的改变及电针的治疗效应.方法 将45只雌性SD大鼠随机分为空白组、侧脑室注射生理盐水组(侧注NS组)、侧脑室注射L-AAA组(侧注LAAA组)、针刺组、利鲁唑灌胃组(药物组),每组9只；观察侧脑室注射L-AAA后大鼠行为学的变化及电针、药物对侧脑室注射L-AAA模型大鼠抑郁样行为的改善作用.结果 侧脑室注射L-AAA后大鼠出现体重下降、新环境抑制饮食时间延长、糖水消耗率下降和运动量减少等类抑郁症状,与空白组及侧注NS组比较具有显著性差异(P＜0.01)；经电针、药物治疗后大鼠的类抑郁症状明显减轻,与侧注射LAAA组比较具有显著性差异(P＜0.01),基本恢复至正常水平(空白组、侧注NS组).结论 侧脑室注射LAAA后可以诱发大鼠的类抑郁症状,而电针可以明显改善此类症状,且疗效与利鲁唑相似.据此推测电针抗抑郁的机制可能与促进星形胶质细胞修复有关.
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侧脑室注射淫羊藿苷对正常大鼠痛觉调节的影响
目的 探讨侧脑室注射不同浓度的淫羊藿苷对大鼠痛觉调节的影响.方法 对大鼠的侧脑室分别注射浓度为0.01、0.06、0.12 nmol/L的淫羊藿苷,记录大鼠不同时间后爪缩爪反应潜伏期.结果 与注射生理盐水的对照组比较.注射淫羊藿苷以后,大鼠的后爪缩爪反应潜伏期与对照组相比明显增长(P＜0.05).结论 淫羊藿苷对中枢神经系统具有镇痛作用.
