首页 > 文献资料
-
钩藤散对AD模型大鼠海马CA1区相关指标的影响
目的:观察钩藤散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马CA1区相关指标的影响.方法:用β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)海马注射建立AD大鼠模型,然后分成钩藤散高、中、低剂量、模型、正常对照5个组,钩藤散分别用5,2.5,1.25 g·kg-1ig AD 大鼠,每天1次,连续给药15 d,14 d时迷宫法测定其行为学指标,未次给药后1h将动物麻醉、心脏灌注、取脑、制作海马CA1区病理切片,用免疫组化法测定神经细胞数,Aβ,突触后密度蛋白-95( PSD-95)阳性细胞数和平均吸光度(A).结果:行为学测试成绩:对照组、各给药组均好于模型组(P＜0.01),说明模型制作成功并提示钩藤散有益智作用；CA1区的神经细胞数、PSD-95阳性细胞数和平均A:各给药组均高于模型组(P＜0.001)；Aβ阳性细胞数和平均A:各给药组均低于模型组(P＜0.01),说明钩藤散能有效降低脑组织Aβ含量、提高PSD-95水平,保护神经细胞.结论:钩藤散对AD模型大鼠海马组织有一定保护作用.
-
金思维对老年性痴呆模型大鼠突触后致密区蛋白的影响
目的观察Aβ对突触后致密区PSD-95和Shnk-1蛋白的改变以及中药金思维对其影响.方法应用凝聚态Aβ1-42在大鼠海马内注射以建立老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型;4周后采用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆功能;采用免疫组化法和计算机图像分析技术测定海马CA1区突触后致密区PSD-95和Shnk-1蛋白阳性神经元数目及光密度值.结果Morris水迷宫实验:模型组大鼠在定位航行试验中隐匿平台平均逃避潜伏期较正常组显著延长,空间探索试验中跨越原平台位置次数明显减少(P＜0.01);金思维组大鼠平均逃避潜伏期较模型组显著缩短,跨越原平台位置次数明显增加(P＜0.01);但与多奈哌齐组和正常组比较差异无显著性(P＞0.05).免疫组化实验:模型组和正常组大鼠海马CA1区PSD-95阳性细胞数、Shnk-1阳性细胞数比较差异有显著性(P＜0.01);金思维组海马CA1区PSD-95、Shnk-1阳性细胞数与模型组比较差异有显著性(P＜0.05),但与多奈哌齐组和正常组比较差异无显著性(P＞0.05).结论金思维对Alzheimer病模型大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与促进海马神经元PSD-95、Shank-1的表达,恢复突触的结构和功能,增强突触的可塑性有关.
-
侧脑室注射链脲佐菌素对大鼠海马突触相关蛋白PSD-95和Shank 1表达的影响
目的 观察侧脑室注射链脲佐菌素对大鼠脑PSD-95和Shank1表达的影响.方法 将大鼠随机分为正常对照组和模型组,模型组大鼠双侧侧脑室注射链脲佐菌素3mg/kg,第3d重复此剂量;对照组以人工脑脊液代替链脲佐菌素.21d后,取大鼠海马,用免疫组织化学和Western blotting方法观察突触相关蛋白PSD-95和Shank1的表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠海马PSD-95和Shankl阳性细胞明显减少,PSD95和Shank1蛋白表达降低.结论 侧脑室注射链脲佐菌素使海马PSD-95和Shank1表达减少,干扰了神经元突触信号传导.
-
PSD-95与神经精神疾病
PSD-95(postsynaptic density protein 95)是在兴奋性突触后密集区中纯化鉴定出的一种脚手架蛋白.通过PDZ(1-3)、SH3和GK结构域,PSD-95募集多种信号分子,在谷氨酸受体的信号整合和转导中具有关键性作用.PSD-95的功能异常与多种神经精神疾病密切相关,是多种重大脑病防治的新的药物作用靶点.
-
PSD-95 对 NMDA受体信号转导的整合作用
PSD-95是新近在谷氨酸能突触的突触后致密物(PSD)中发现的一种特殊蛋白质,含有3个N末端的PDZ结构域、一个SH3结构域和一个C末端的GK结构域.PSD-95通过不同结构域与其它蛋白相互作用,不仅能够串集NMDA受体及其信号通路中的相关蛋白分子,组成受体-信号分子-调节分子-靶分子复合物,还可通过突触前后粘附分子的相互作用,参与突触连接的形成和维持,在介导和整合NMDA受体信号转导中具有关键性作用.
-
脑血流低灌注对大鼠突触后致密物结构及PSD-95蛋白表达的影响
目的 研究脑血流低灌注对大鼠学习记忆、脑组织突触后致密物(postsynaptic density,PSD)超微结构及PSD-95蛋白表达的影响.方法 利用双侧颈总动脉永久性结扎制备SD大鼠脑血流低灌注模型.将SD大鼠随机分为假手术组和脑血流低灌注模型组.采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆情况.采用透射电镜结合Image Pro Plus图像分析系统定量分析大鼠海马突触数量、PSD长度和厚度.采用免疫组化观察大鼠脑组织PSD-95的表达.结果 脑血流低灌注大鼠空间参考记忆及工作记忆能力减退,在第2至4天游泳训练时间段,搜寻隐藏平台路径较假手术组明显增加(P＜0.05);撤离平台后,在原平台象限游泳时间及路径较假手术组降低,准确穿越原平台所在位置次数减少(P＜0.05);当平台移动到第Ⅱ、Ⅳ象限时,搜索移动平台路径较假手术组明显延长(P＜0.05).与假手术组比较,脑血流低灌注大鼠海马突触数量明显减少,PSD长度变短,厚度变薄(P＜0.05);海马CA1区、丘脑前内侧核、颞叶皮层PSD-95积分吸光度降低(P＜0.05).结论 脑血流低灌注所致学习记忆功能减退与海马突触后致密物结构损伤、PSD-95蛋白表达下降有关.
-
关键期内反缝合治疗前后单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型外侧膝状体PSD-95的表达
目的探讨关键期内单眼形觉剥夺弱视大鼠模型反缝合治疗前后外侧膝状体突触后致密蛋白-95（PSD-95）的表达规律。方法14日龄大鼠随机为剥夺组、正常组及反缝合治疗组，经造模成功后取材，采用免疫组化和RT-PCR技术检测并分析各组大鼠外侧膝状体PSD-95蛋白和PSD-95mRNA表达水平的变化。结果同年龄段弱视组外侧膝状体PSD-95呈阳性神经元密度降低，PSD-95mRNA的表达减少（P<0.01）；同年龄段反缝合治疗组外侧膝状体较弱视组PSD-95呈阳性神经元密度增加，PSD-95mRNA的表达增多（P<0.05），但仍低于正常组（P<0.05）。结论单眼剥夺及反缝合治疗影响大鼠外侧膝状体PSD-95的表达，提示PSD-95参与了视觉发育外侧膝状体可塑性的变化过程，是弱视发病的重要分子机制之一；验证了关键期内反缝合治疗对弱视外侧膝状体神经元功能状态的恢复作用，为临床弱视遮盖治疗提供了理论依据。
-
反转缝合与丰富环境联合干预对成年弱视大鼠视皮层可塑性的再激活作用
目的：探讨反转缝合与丰富环境联合干预对单眼形觉剥夺成年弱视大鼠视皮层可塑性的再激活作用。方法将14日龄大鼠随机分为8组：1~3组为正常对照组,4~8组为单眼剥夺组。剥夺组在生后14天行右侧眼睑缝合制备单眼剥夺模型，放于实验室标准环境下饲养，1~3组、4~6组分别于生后45天、60天、90天处死；7~8组于60日龄时打开剥夺眼，缝合左侧眼睑行遮盖治疗，第7组放于标准环境中饲养30d，即反转缝合组，第8组放于丰富环境中饲养30天，即反转缝合联合丰富环境干预组，此两组至90日龄处死取材；免疫组化染色检测并分析各组大鼠视皮层PSD-95蛋白表达水平的变化。结果同年龄段弱视组视皮层PSD-95呈阳性神经元密度降低(P<0.001)；同年龄段反转缝合干预组视皮层较弱视组PSD-95呈阳性神经元密度增加(P<0.05)，但仍低于正常组(P<0.05)；同年龄段反转缝合、结合丰富环境干预组视皮层与弱视组、反转缝合组相比，PSD-95呈阳性神经元密度增加(P<0.05)，与正常组相比，其差异无统计学意义(P>0.05)。结论单眼剥夺影响了关键期后成年大鼠视皮层PSD-95的表达，提示PSD-95可能参与调节成年视皮层可塑性；反转缝合单纯干预、反转缝合联合丰富环境干预能部分重新激活剥夺性成年弱视大鼠视皮层可塑性，反转缝合与丰富环境联合干预的再激活作用更为明显。
-
高功率微波辐射后大鼠海马组织中突触后致密物-95及cAMP反应元件结合蛋白的变化
目的 观察高功率微波(HPM)辐射后大鼠海马组织中突触后致密物(PSD)-95及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的变化.方法 采用10、30和100 mW/cm2 HPM照射75只Wistar雄性大鼠,于辐射后6 h、1、7、14和28 d活杀取海马组织,采用免疫组化、凝胶阻滞实验和图像分析等技术,观察海马神经元中PSD-95及CREB的变化.结果 HPM辐射后大鼠海马神经元胞浆中PSD-95的表达有不同程度的增加;10 mW/cm2组辐射后6 h,PSD-95表达增加,于辐射后1 d达高峰,28 d基本恢复正常;100 mW/cm2组辐射后6 h,PSD-95表达增加,MOD于1 d达高峰,IOD于7 d达高峰,28 d基本恢复至正常水平;30 mW/cm2组于辐射后3 d内,海马组织CREB与DNA的结合能力进行性降低.结论 HPM辐射后大鼠海马PSD-95表达增加,CREB与DNA结合能力减弱,参与了HPM辐射后海马组织损伤及海马神经元突触可塑性改变的病理生理过程.
关键词： 高功率微波辐射 海马 PSD-95 cAMP反应元件结合蛋白 -
小鼠海马内HDAC2的表达及其与NMDA受体、PSD-95的共定位
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)在成年C57BL/6小鼠海马内的分布及其与突触后致密区(PSD)蛋白成员的共定位,为揭示HDAC2与PSD蛋白复合物之间的内在联系及在海马相关的学习记忆过程中可能起到的调控作用提供形态学依据.方法 应用免疫组化方法观察HDAC2在C57BL/6小鼠海马各区的表达分布.应用免疫荧光双标技术研究HDAC2与PSD蛋白成员N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚单位1(NR1)、PSD-95之间是否存在共定位.结果 HDAC2在小鼠海马CA1～CA3区锥体细胞和齿状回颗粒细胞均具有明显表达,而在各区的始层、辐射层、腔隙-分子层以及齿状回多形细胞层表达均较少.免疫荧光双标染色图片的重叠表明,HDAC2与NR1、PSD-95在小鼠海马CA1～CA3区锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层内均可见显著共表达现象,其他区域偶见散在分布的双染神经元.结论 HDAC2在小鼠海马锥体细胞层和颗粒细胞层表达丰富,并与PSD蛋白成员间存在共定位现象.本实验结果为探讨HDAC2对谷氨酸能突触后神经元依赖的突触可塑性的调节机制提供了形态学依据.
-
H102对APP转基因小鼠突触相关蛋白表达的影响
目的:观察H102对APP转基因小鼠脑内超微结构-突触后致密区(PSD-95)和突触素表达的影响.方法:将16只APP转基因小鼠随机分为模型组和给药组,每组8只.并设同月龄同背景C57BL/6J小鼠为正常组.给药组侧脑室注射H102生理盐水溶液,正常组和模型组侧脑室注射等体积生理盐水,3 μL/d,注射30 d后行行为学检测即水迷宫测试,然后取出并固定脑组织,利用免疫组化及Western blot方法测定小鼠脑组织突触素、PSD-95及shank1的表达.结果:定位航行实验给药组APP转基因小鼠逃避潜伏期从第2天较模型组差异有统计学意义(P<0.05),较正常组从第3天差异无统计学意义(P>0.05);空间探索实验第三象限停留时间和跨越平台次数较模型组差异有统计学意义(P<0.05),较正常组差异无统计学意义(P>0.05).模型组皮质和海马出现突触紊、PSD-95及shank1表达减少;注射H102后突触素、PSD-95及shank1表达较正常对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论:H102对阿尔茨海默病(AD)治疗有一定的应用价值.
-
远志总皂苷对AD 模型大鼠海马nAChRα4及PSD-95表达的影响
目的:通过观察中药远志总皂苷(Tenuigenin,TEN)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠烟碱型乙酰胆碱受体α4 亚基(nicotinic acetylcholine receptor subunit alpha-4,nAChRα4)和突触后致密蛋白95(postsynaptic density 95,PSD-95)表达的影响,旨在探讨TEN 对AD 干预作用的机制.方法:32 只雄性Wistar 大鼠随机分为对照组,模型组,TEN 12.5,37.5 mg·mL-1 剂量组,应用D- 半乳糖致衰老的基础上定向Meynert 基底核损毁建立AD 大鼠模型,TEN 12.5,37.5 mg·mL-1 治疗组则在造模的同时用远志总皂苷灌胃(ig)治疗,采用免疫组化方法来检测大鼠海马CA1 区nAChRα4 及PSD-95 的表达.结果:模型组大鼠海马CA1 区nAChRα4 及PSD-95 平均灰度值显著高于对照组,平均光密度值显著降低(P<0.01);TEN 12.5,37.5 mg·mL-1剂量组大鼠海马nAChRα4 及PSD-95 平均灰度值显著低于模型组,两组平均光密度值均显著增高(P<0.05);且TEN 37.5 mg·mL-1 剂量组的平均灰度值比TEN 12.5 mg·mL-1 剂量组降低显著,平均光密度值增高显著(P<0.01).结论:TEN 可显著提高AD 模型大鼠海马CA1 区nAChRα4 及PSD-95 的表达,并具有剂量依赖性,这可能是其改善认知功能的部分机制.
-
血管性痴呆大鼠PSD-95变化机制的研究
目的 研究血管性痴呆(VD)大鼠形成过程中突触后致密物质95(PSD95)的变化规律及作用机制.方法 永久性结扎双侧颈总动脉制备VD大鼠模型,用Morris水迷宫衡量大鼠的学习记忆水平,用免疫组化法检测大鼠海马PSD95的表达.结果 随术后缺血时间延长,VD大鼠的学习记忆能力下降,术后4 w后与假手术组有显著差异(P<0.01);PSD95的表达随术后时间变化,呈先升后降改变,术后2 w时表达多,与假手术组有显著差异(P<0.01),此后逐渐减少,并明显低于假手术组(P<0.01),术后16周时表达少.结论 PSD95的表达变化与VD的发生发展有关,PSD95将成为治疗VD的新的靶点
-
钙调神经磷酸酶对阿尔茨海默病大鼠模型海马区PSD-95及Homer、Shank基因各亚型表达的影响
目的 探讨钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠模型海马区PSD-95及Homer、Shank基因各亚型表达的影响及其作用机制.方法 采用Aβ1-42海马注射建立AD大鼠模型,并用他克莫司(FK506)干预,以Morrs水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,并用实时定量PCR(Real-Time PCR)检测大鼠海马区PSD-95及Homer、Shank各亚型的mRNA表达情况.结果 与对照组相比,模型组大鼠学习记忆能力明显减退(P＜0.01),PSD-95、Homer1b、Shank1、Shank3的mRNA表达均下调,而Homer1a的mR-NA表达上调(P＜0.05).FK506干预后,与模型组比较,学习记忆能力显著改善(P＜0.01),同时PSD-95、Ho-mer1b、Shank1、Shank3的mRNA表达均上调(P＜0.05),而Homer1a的mRNA表达下调(P＜0.01).Shank2的mRNA表达在三组中均未见显著性差异(P＞0.05).结论 抑制CaN激活可明显增高海马区突触相关蛋白在基因的表达水平,从而影响突触的功能和可塑性,这可能是其改善AD症状的作用机制之一.
-
脊髓损伤后注射间充质干细胞对脊髓PSD-95蛋白表达研究
目的:检测脊髓损伤后注射间充质干细胞对脊髓PSD-95蛋白表达的影响,以探寻间充质干细胞对脊髓损伤的修复机制.方法:取雄性SD大鼠,随机分为损伤组、对照组和治疗组,每组10只.制作大鼠脊髓损伤模型,于伤后3d对大鼠脊髓半切头侧和尾侧损伤临近区域的灰白质交界处移植间充质干细胞,2个月后取损伤部位脊髓组织,应用western blot检测间充质干细胞对脊髓组织中PSD-95蛋白含量的表达变化.结果:对照组脊髓组织一定量PSD-95蛋白含量,损伤组psd-95量上升(P＜0.05).间充质干细胞治疗组与损伤组比较PSD-95蛋白含量显著升高,存在显著性差异.结论:间充质干细胞可提高脊髓损伤后损伤组织中PSD-95的蛋白含量.
-
Neuroligin对SH-SY5Y细胞增殖和凋亡的影响
目的:探讨Neuroligin(NLG)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y增殖和凋亡的影响.方法:体外培养SH-SY5Y细胞24 h后,分别用浓度为50,100,200μmol/L的NLG siRNA转染SH-SY5Y细胞并共孵育24h,然后采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度NLGsiRNA对SHSY5Y细胞增殖率的影响,以及Real-time PCR法检测SH-SY5Y细胞中凋亡基因Bax、Bcl-2、Bcl-xL和caspase-9基因表达水平的变化.结果:与空白对照组及siRNA阴性对照组相比,转染NLG siRNA后SH-SY5Y细胞增殖率显著下降,细胞凋亡相关基因被激活,导致细胞凋亡.结论:NLG对神经元细胞具有保护作用,抑制神经细胞凋亡.
关键词： Neuroligin 神经元 细胞凋亡 PSD-95 Bax -
骨髓基质干细胞移植对缺血性卒中大鼠PSD-95表达的影响
目的 应用骨髓基质干细胞(BMSCs)治疗缺血性卒中大鼠,观察BMSCs的治疗效果,检测突触后密度蛋白-95(PSD-95)的表达水平,进而研究BMSCs治疗缺血性卒中的机制.方法 将40只成年雌性SD大鼠制备成大脑中动脉缺血2h再灌注24h动物模型,随机分为梗死对照组和BMSCs组,每组20只.每组再按梗死后3,7d分为2个亚组,每组10只.梗死对照组于缺血再灌注24 h后经尾静脉注射PBS液1ml,BMSCs组同时经尾静脉注射BMSCs 3×106.所有大鼠于梗死后1,3,7d分别进行神经功能评分,应用免疫组化法测定PSD-95表达水平,用TUNEL测定凋亡细胞水平.结果 (1)神经功能评分:梗死后3,7 d BMSCs组神经功能评分明显低于梗死对照组,差异有统计学意义(t分别为2.138,3.417;P＜0.05).(2) PSD-95表达:BMSCs组在梗死后3d时PSD-95表达较梗死对照组的表达有增多,但差异无统计学意义;BMSCs组在梗死后7d时PSD-95表达明显多于梗死对照组,且差异有统计学意义(t=6.013,P＜0.05).(3)TUNEL细胞凋亡染色:梗死后3d时梗死对照组大鼠缺血侧可见许多凋亡细胞,显多于BMSCs组,且差异有统计学意义(t=4.978,P＜ 0.05).结论 BMSCs移植能促进缺血性卒中大鼠的神经功能的恢复.BMSCs移植后能明显增加缺血性卒中大鼠PSD-95的表达,减少细胞的凋亡,对缺血性卒中有保护作用.
-
Aβ25-35对原代培养小鼠皮层神经元突触素和PSD-95表达的影响
目的:观察Aβ25- 35对小鼠皮层神经元突触损伤作用,观察PSD- 95和突触素的表达,进而探讨阿尔茨海默病的发病机制.方法:将小鼠(出生48h内)断头取脑,急性分离皮层神经元,在24孔培养基上培养7d,经NSE染色鉴定为神经元,将Aβ25- 35配制成浓度为5μmol/L,分别在0h、1h、2h、4h、6h致伤皮层神经元(每个时间点分别为4孔,设对照组),经免疫组化观察突触素和PSD- 95的表达情况.结果:Aβ25- 35作用1h后突触素、PSD - 95免疫反映复合物的灰度值明显下降,即二者的表达明显减少,1～6h与同期时间点对照组相比差异有显著性(P＜0.01),于6h后突触素、PSD- 95几乎未见到表达.
-
开心散对APP/PS1转基因小鼠在体LTP和PSD-95表达的影响
目的 考察开心散(远志、人参、茯苓、石菖蒲)对APP/PS1转基因小鼠海马在体长时程增强(LTP)、海马CA1区和大脑皮层突触后致密蛋白-95 (PSD-95)的表达的影响.方法 32只APP/PS1雄性小鼠(3月龄)随机均分为模型组、多奈哌齐[0.75 mg/(kg-d)]组、开心散[1.5、3 g/(kg·d)]组,另设C57/BL6小鼠为对照组,连续给药3个月.记录海马区穿通纤维通路(perforant pathway,PP)至齿状回(dentate gyrus,DG)的在体LTP,免疫组化法观察小鼠海马CA1区、大脑皮层PSD-95的表达.结果 与对照组相比,模型组小鼠场兴奋性突触后电位(fEP-SP)斜率明显下降,海马CA1区、大脑皮层中PSD-95阳性细胞的平均光密度明显减少;而多奈哌齐、开心散可明显提高模型组小鼠fEPSP斜率.多奈哌齐能增加海马CA1区PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[1.5 g/(kg·d)]可以增加海马CA1区、大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[3 g/(kg,d)]能增加大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度.结论 开心散能促进APP/PS1转基因小鼠LTP形成,增强突触可塑性,可能与调节PSD-95蛋白表达有关.
关键词： 开心散 APP/PS1转基因小鼠 LTP PSD-95 -
睾酮对青春期大鼠病理性攻击行为及前额叶皮质PSD-95和GAP-43表达的影响
目的 探讨去势后睾酮水平对青春期大鼠病理性攻击行为和前额叶皮质突触可塑性的影响.方法 将30只出生后21 d的雄性SD大鼠随机分为去势组、模型组和对照组.去势组和模型组大鼠采用国际通用应激方法建立病理性攻击模型,持续到青春期.采用居住-入侵实验检测青春期大鼠攻击行为,ELISA法检测睾酮水平,蛋白质印迹分析检测前额叶皮质突触后致密物质95(PSD-95)和生长相关蛋白43(GAP-43)表达水平.结果 居住-入侵实验结果显示,去势组攻击潜伏期显著低于模型组和对照组(P＜0.01,P＜o.01),屈服后继续攻击次数高于模型组和对照组(P＜0.01,P＜0.01).ELISA检测结果显示,去势组睾酮水平显著低于模型组和对照组(P＜0.01,P＜0.01),且睾酮水平与攻击各指标呈中-高度负相关(P＜0.01).蛋白质印迹结果显示,去势组前额叶皮质PSD-95和GAP-43表达水平均低于模型组和对照组(P＜0.01,P＜0.01).结论 低水平血清睾酮对青春期大鼠前额叶皮质结构可塑性有损伤,可能与其病理性攻击行为相关.
