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从梅兰芳护嗓说石斛
石斛为兰科多年生草本植物金钗石斛或其同种植物的茎,主产于四川、贵州、云南、湖北、广西、台湾等省,一些地区还有栽培.全年均可采收,以夏季采者品质佳.采后须去须根,冼净,晾干,然后放至铁锅内,均匀炒至柔软,趁热搓去薄膜状叶鞘,干燥后切段入药.若鲜用临时剪下,搓去膜质叶鞘,洗净剪段用.处方有金(钗)石斛、川石斛、霍山石斛(铁皮石斛)、耳坏石斛(枫斗)、鲜石斛等多种用名.
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鲜铁皮石斛冻干粉质量标准研究
铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo是我国一种传统名贵中药,具有滋阴清热,生津益胃之功效,千年以来一直和灵芝人参和冬虫夏草等被列为上品中药,并被道家养生经典《道藏》誉为中华九大仙草之首.铁皮石斛使用方法常为鲜品直接食用茶饮或制成制剂,因纤维、粘液等含量高,直接食用有粘牙粗燥口感差的特点并且不易保存.茶饮时药材中有效成分不易完全溶出.铁皮石斛干品质地坚韧,使用不方便.冻干粉碎技术是近年来国际上发展迅速的一项新技术,中粉具有一般颗粒不具有的一些特殊的理化性质,如良好的溶解性、分散性、吸附性、化学反应活性等.因此,将铁皮石斛制成冻干粉以促进有效成分溶出,提高生物利用度.
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铁皮石斛中有机磷的检测方法分析
本文研究的目的是制定一套成熟的铁皮石斛药材中有机磷农药多残留检测方法，以期为中药材中农药多残留检测方法的制定和完善提供依据。在空白铁皮石斛中加入41种有机磷标品，用水浸润样品，以丙酮和乙腈作为提取溶剂，高速均浆为提取手段，GPC和Carb-NH2柱固相萃取联用作为净化方式，用FPD-GC检测，发现各个农药的回收率在84.2%～105.8%，重复性在2.76%～6.58%，方法定量限在0.002～0.01 mg/kg，符合农药残留检测要求。
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铁皮石斛制剂免疫调节作用研究
铁皮石斛(Dendrobium officinale)为兰科石斛属多年生附生草本植物铁皮石斛的干燥茎,因表皮呈铁绿色而得名,主要分布于西南和江南各省.是《中华人民共和国药典》中被收载的5种石斛属植物之一.其具有益胃生津、滋阴清热之功效.以铁皮石斛为主(其主要有效成分为铁皮石斛多糖),以红参、麦冬、五味子为副制成水煎浓缩制剂,通过细胞免疫、体液免疫、巨噬细胞吞噬能力及NK细胞活性实验,探索其免疫调节作用机制,为铁皮石斛的进一步开发利用提供依据.
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铁皮石斛对免疫抑制小鼠的免疫调节作用和血清细胞因子的影响
目的 研究铁皮石斛对免疫抑制小鼠的免疫调节作用.方法 ICR小鼠分为空白对照组、模型对照组、铁皮石斛0.5、1.0和3.0 g/kg BW剂量组.经口灌胃给药连续30 d.实验结束前24 h,模型组和铁皮石斛组小鼠一次性腹腔注射200 mg/kgBW环磷酰胺.实验结束后测定免疫器官脏器系数、血常规、血生化指标、迟发型变态反应水平、抗体生成细胞数、血清溶血素水平、碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾NK细胞和淋巴细胞活性,以及血清中细胞因子IL-2、IL-6、IFN--γ、促肾上腺皮质激素(ACTH)、cAMP的含量.结果 铁皮石斛可以升高免疫抑制小鼠的脾脏指数、胸腺指数和白细胞总数;增加免疫抑制小鼠的足跖肿胀度、溶血空斑数、NK细胞活性、淋巴细胞增殖能力;上调免疫抑制小鼠的血清IL-2、IL-6、IFN-γ、ACTH、cAMP水平.结论 铁皮石斛对于环磷酰胺造成的细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫抑制具有明显改善作用.其免疫调节机制与其上调免疫抑制小鼠血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、ACTH、cAMP等细胞因子的表达水平有关.
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揭开"仙草"背后的黑幕
中药材铁皮石斛,很多人听到这个名字的时候,恐怕会比较陌生,但其实现在它在市场上很流行.铁皮石斛制作成干品,就叫铁皮枫斗,现在有人说它是中华九大仙草之首,是钻石补品,药用价值要远远高于人参、灵芝等名贵中药材,甚至有抑制肿瘤的作用.
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铁皮石斛护肝及抗胃溃疡作用研究
目的:考察铁皮石斛对肝脏损伤及胃溃疡动物模型的保护作用.方法:建立四氯化碳急性肝损伤模型(CCl4造模剂量 50 μL·kg-1,腹腔注射)、亚急性酒精性肝损伤模型(酒精造模剂量7.5 mL·kg-1·d-1×14 d,灌胃)、应激性胃溃疡模型(冷水浸泡法诱导)及化学性胃溃疡模型(消炎痛诱导,40 mg·kg-1,灌胃).将成功造模的小鼠随机分为4组:模型组、阳性对照组、石斛榨汁高、低剂量组(含生药2,0.5 g·kg-1),并设立正常对照组,每组12只.各给药组连续灌胃给药若干天,每天1次;正常组和模型组同时给予等容量的蒸馏水.实验结束时,肝损伤动物麻醉后眼球取血,分离血清测定谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的含量,同时剖取肝脏计算肝脏系数;胃损伤动物麻醉后,剖开腹腔取胃,观察腺胃部的胃黏膜损伤程度并采用Guth标准记分法计算溃疡指数.结果:铁皮石斛鲜榨汁液显著抑制CCl4 肝损伤小鼠血清AST,ALT(P<0.05)及亚急性酒精性肝损伤小鼠血清AST的升高(P<0.05);显著降低应激性胃溃疡模型及消炎痛诱导的化学性胃溃疡模型的溃疡指数(P<0.01).结论:铁皮石斛鲜汁具有保肝护胃的作用.
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铁皮石斛对冠心病模型家兔心功能和血管变化的影响
目的:观察铁皮石斛对冠心病模型家兔心功能和血管变化的影响.方法:清洁级健康家兔30只随机分为对照组、模型组、铁皮石斛低剂量、中剂量、高剂量组5组,每组6只.模型组、低剂量、中剂量、高剂量组采用左冠状动脉放置缩窄环方法,制备冠心病模型.低剂量、中剂量、高剂量组以铁皮石斛按10 g·kg-1、20 g·kg-1、40 g·kg-1灌胃(ig),每天1次,连续21天.对照组、模型组则给予等体积生理盐水.检测白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管细胞间粘附分子-1(VCAM-1)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)水平、actin表达及心功能指标左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力变化大上升和下降速率(±dp/dtmax)、动脉收缩压(BPs)和动脉舒张压(BPd)的变化并观察血管的形态学.结果:与对照组比较,模型组IL-8、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1水平、actin表达升高或显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);LVEDP显著升高(P<0.01),而LVSP、±dp/dtmax、BPs均降低(P<0.05或P<0.01),血管壁变厚.与模型组比较,中、高剂量组IL-8、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1水平、actin表达降低或显著降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);中、高剂量组LVEDP显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),而LVSP、±dp/dtmax、BPs均升高或显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),血管壁变厚得到改善.结论:铁皮石斛具有改善心功能作用,可能是通过改善和抑制血管病理改变、减轻血管损害而起作用.
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铁皮石斛提取物促进肌肉损伤修复作用的机理研究
目的:利用C2C12成肌细胞和大鼠骨骼肌体外实验体系,研究铁皮石斛提取物对运动性损伤修复作用的机理.方法:用不同浓度铁皮石斛水提物处理C2C12细胞,进行划痕实验以及提取细胞蛋白检测其EGFR的表达水平.通过手术取大鼠滑车上肌,用石斛水提物对其进行体外培养并检测其EGFR表达水平情况.结果:C2C12细胞划痕实验结果显示,石斛提取物处理2h后对C2C 12迁移增殖有一定促进作用,其作用效果与浓度相关.石斛提取物处理后的C2C12细胞EGFR表达有一定的增加趋势.体外培养肌肉组织结果表明,铁皮石斛水提物能显著提高肌肉组织中EGFR的表达水平.结论:实验结果表明铁皮石斛水提物通过正向调控C2C12细胞和骨骼肌组织的EGFR表达水平,起到促进骨骼肌细胞增殖的作用,可以对骨骼肌运动性损伤起到一定的修复作用.
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铁皮石斛野生转家栽规范化种植(GAP)研究与产业化基地建设
目的:建立铁皮石斛规范化、产业化生产基地.方法:(1)观察与描述原植物形态特征;(2)以优良植株的茎段为外植体,运用组织培养技术研究建立铁皮石斛无性快繁体系,并研究探讨纳米材料TiO2、SiO2及TiO2-SiO2组合对铁皮石斛离体再生培养的影响;(3)研究探讨移栽基质与移栽方法对铁皮石斛试管苗移栽的影响.结果:(1)初步将铁皮石斛归为软脚与硬脚,矮杆种与高杆种;(2)建立了铁皮石斛离体再生系统;纳米TiO2及SiO2对铁皮石斛侧芽及丛芽的诱导有较明显促进作用,但不同浓度对离体培养的作用不同.低浓度的纳米TiO2(5g·L-1)和纳米SiO2(5g·L-1)组合可显著提高侧芽及丛芽的发芽数,促进芽的生长,较适宜侧芽及丛芽诱导阶段,不同浓度组合均对试管苗壮苗生根有抑制作用,不适于壮苗生根阶段使用;(3)组培苗出瓶第2d直接移栽定植,成活率达95%以上;移栽45d分蘖长新芽率达到90%以上,18个月长度达到采收规格.结论:为铁皮石斛优质、高产栽培及产业化基地建设提供技术支撑.
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铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响
目的:考察铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂、炎症相关蛋白的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饲喂养4w构建AS小鼠模型,分别用辛伐他汀(3 mg·kg-1)、铁皮石斛(1.5,3 g·kg-1)对小鼠灌胃给药,8w后处死,酶法检测血清血脂；ELISA检测血清中TNF-α,IL-6表达；苏丹Ⅳ染色观察主动脉瓣处斑块形成情况；HE和油红0染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块；免疫组化法检测TNF-α和IL-6在主动脉壁的表达.结果:铁皮石斛可显著降低小鼠血清中TG,TCHOL,LDL-C水平,下调血清中TNF-α,IL-6表达；可明显减少ApoE-/-小鼠主动瓣处粥样斑块的面积和ApoE-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积,可明显降低TNF-α,IL-6在主动脉内表达.结论:铁皮石斛能有效降低ApoE-/-小鼠血清中有关脂质含量,降低血清和主动脉内TNF-α,iL-6的表达,降低炎症反应的发生,缓解动脉粥样硬化损伤.
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铁皮石斛对小鼠慢性酒精性肝损伤模型血清2种转氨酶及胆固醇的影响
目的:观察不同剂量铁皮石斛及铁皮枫斗对小鼠慢性酒精性肝损伤模型血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),胆固醇(TC)的影响.方法:雄性ICR小鼠,分为9组:3个鲜铁皮石斛组(3,6,9 g·kg-1),3个铁皮枫斗组(0.45,0.90,1.35 g·kg-1),设立正常对照组、模型对照组、阳性对照(联苯双酯漓丸)组.采用连续ig给予56°白酒65 d造成慢性酒精性肝损伤模型,每天给药后2 h ig酒精造模.末次给予乙醇12 h后取血,测定血清ALT,AST,TC.结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠血清ALT,AST,TC明显升高.与模型对照组相比,鲜铁皮石斛(3 g·kg-1)和铁皮枫斗(0.45 g·kg-1)能降低血清ALT.鲜铁皮石斛(3,6 g·kg-1)与铁皮枫斗(0.45 g·kg-1)能降低血清AST,TC.铁皮枫斗(0.90,1.35 g·kg-1)能降低血清AST.结论:铁皮石斛和铁皮枫斗均对慢性酒精性肝损伤小鼠的肝功能相关指标(ALT,AST,TC)有一定的改善作用.
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铁皮石斛中总酚的含量测定
目的:建立铁皮石斛总酚含量的快速测定方法.方法:以阿魏酸为对照品,采用福林酚比色法测定铁皮石斛中总酚含量.通过单因素试验筛选检测波长、显色时间和温度等显色条件;以总酚含量为指标,通过L.(34)正交试验考察乙醇体积分数、料液比、提取时间和提取次数对总酚提取工艺的影响,确定含量测定中供试品溶液的制备方法.结果:显色条件为检测波长760 nm,福林酚试剂用量3.5 mL,10％碳酸钠溶液用量7 mL,显色温度20 ～30℃,避光反应时间0.5h.铁皮石斛总酚的提取工艺为加40倍量70％乙醇提取1h.总酚含量测定的线性范围3.168 ～9.504 mg·L-1,平均加样回收率97.9％,RSD 1.53％.结论:建立的含量测定方法操作简便、快速、准确、稳定、重复性好,可用于铁皮石斛中总酚含量的测定.
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铁皮石斛中10种黄酮类成分UPLC-MS/MS测定与多糖组成含量分析
目的:建立超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定铁皮石斛中10个黄酮类成分的方法,比较不同产地铁皮石斛黄酮类成分的含量差异,并结合药典指标进行系统聚类综合分析.方法:黄酮类成分测定采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100mm,1.8 μm),以0.1％甲酸水(A)-0.1％甲酸乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.6 mL·min-1,柱温40℃,采用电喷雾离子源,负离子检测方式,得到相应的提取离子流图,以峰面积进行定量.结果:10种黄酮类成分具有良好的线性关系,r值均＞0.998 5,方法精密度、重复性和稳定性的RSD均＜3％,加样回收率在96.6％ ～ 104.7％,RSD均＜3.5％.测定结果显示不同产地铁皮石斛中黄酮类成分在组成和含量上存在较大差异;14批样品多糖、甘露糖含量均符合药典标准.结论:所建立的方法操作简便、准确、重复性好,可用于铁皮石斛药材中黄酮类成分的的定量测定,测定结果结合《中国药典》指标可为该药材质量标准的完善提供依据.
关键词： 铁皮石斛 黄酮 超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱 多糖 -
铁皮石斛中总氨基酸的含量测定及提取工艺优选
目的:优选铁皮石斛中总氨基酸提取工艺,并建立其含量测定方法.方法:以天冬氨酸为对照品,采用UV测定铁皮石斛中总氨基酸含量；在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察提取时间、提取次数及溶剂用量对铁皮石斛中总氨基酸提取工艺的影响.结果:佳提取工艺为加20倍量0.1 mol· L-1 HCl超声提取30 min,提取1次.结论:优选的提取工艺稳定可行,建立的含量测定方法简便、准确、重复性好.
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铁皮石斛超微粉碎破壁工艺的优化
目的:优选铁皮石斛的超微粉碎工艺.方法:以微粉粒度、细胞破壁率和总多糖含量为综合评价指标,采用L16 (43×26)正交试验考察入磨量、粉碎时间、入磨粒度、粉碎温度和投料水分对铁皮石斛超微粉碎破壁工艺的影响.结果:佳超微粉碎工艺为人磨粒径80目,投料水分4％ ～ 6％,入磨量250 g,粉碎温度0～10℃,粉碎时间25 min;平均得粉率96.1％(RSD 0.24％),粒径＜75 μm的平均得率96.8％(RSD 0.28％),平均细胞破壁率98.3％(RSD 0.78％),总多糖平均质量分数42.2％(RSD 2.85％).结论:该工艺合理可行、稳定性好,为铁皮石斛的临床合理应用提供实验数据.
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铁皮石斛化学成分及药理活性研究进展
铁皮石斛为我国传统药用植物,在日常保健和临床治疗中应用悠久,受到国内外学者广泛关注.作者在前人的基础上,通过查阅国内外铁皮石斛近10年的文献报道,对化学成分和药理活性相关文献进行整理、分析和归纳,系统的综述了其化学成分和药理活性的研究进展.近年来研究表明,铁皮石斛化学成类别较多,包括多糖、芪类、氨基酸、矿质元素、生物碱、挥发油等,其中以多糖及芪类成分为主;药理活性有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫力、缓解疲劳、治疗糖尿病等,以抗氧化和抗肿瘤研究为主.本文对国内外铁皮石斛化学成分及药理活性相关研究进行综述,以期为该物种的深入研究开发和新药配伍提供理论参考.
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Box-Behnken响应面法优化铁皮石斛的真空冷冻干燥工艺
目的:采用响应面法优化铁皮石斛的真空冷冻干燥工艺,为其冷冻干燥工业化生产提供理论依据.方法:在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面法,以总多糖质量分数为指标,考察升华干燥温度、升华干燥时间、真空度3个因素对铁皮石斛真空冷冻干燥工艺的影响,优化铁皮石斛的冻干工艺条件.采用HPLC建立铁皮石斛氨基酸类成分的指纹图谱,ODS-Hypersil色谱柱(0.46cm×20cm,5μm),检测波长338nm(0～37.5min)和262nm(37.5min之后),柱温35℃.通过比较工艺优化后干燥样品与鲜品铁皮石斛指纹图谱的相似度,验证真空冷冻干燥工艺的可行性.结果:铁皮石斛佳冷冻干燥工艺条件为升华干燥温度-16.4℃,升华干燥时间11.04h,真空度85Pa.在此条件下,干燥的铁皮石斛样品总多糖平均质量分数23.74％,与预测值基本一致,铁皮石斛干燥品与鲜品指纹图谱的相似度>0.90.结论:通过Box-Behnken响应面法建立的模型预测性较好,适用于铁皮石斛真空冷冻干燥工艺条件的优化.
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响应面法优选铁皮石斛总多糖脱蛋白工艺
目的:优选铁皮石斛总多糖的胰蛋白酶联合Sevage法脱蛋白工艺,为该有效部位的深度开发和综合利用提供参考.方法:以总多糖保存率和蛋白脱除率为评价指标,通过单因素试验比较Sevage法、木瓜蛋白酶法、胰蛋白酶法和胰蛋白酶联合Sevage法;以蛋白脱除率为指标,酶解时间、酶用量、酶解温度和粗多糖溶液与Sevage试剂体积比为考察因素,利用Box-Behnken响应面法优化条件.结果:胰蛋白酶联合Sevage法具有较高的总多糖保存率及蛋白脱除率;佳工艺条件为酶解时间1.5h,酶用量0.21 g·mL-1,酶解温度63.25℃,总多糖溶液-Sevage试剂(4.27∶1);蛋白脱除率(87.15±7.93)％,总多糖保存率(81.32±8.54)％.结论:不同方法对铁皮石斛总多糖的脱蛋白效果有明显差异,胰蛋白酶联用Sevage法的效果佳.
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铁皮石斛水提物对胃癌前病变作用的尿液代谢组学分析
目的:研究铁皮石斛水提物对胃癌前病变大鼠尿液内源性代谢物的影响.方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、铁皮石斛水提物(DOE)组、模型组及N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)+DOE低、中、高剂量组.DOE组和MNNG+DOE低、中、高剂量组大鼠预防性给予DOE2周后开始给予自由饮100 mg·L-1 MNNG水溶液,边给药边造模,并在前6周,每3d灌胃给予10％ NaC1 1 mL诱导.造模7个月后代谢笼收集大鼠尿液并处死大鼠取胃组织.采用UPLC-Q-TOF-MS检测大鼠尿液代谢谱的变化.结果:对比各组胃组织病理结果发现DOE能够减少肠化生,使病理程度停留在轻度至中度异型增生和轻度肠化生阶段.在正、负离子模式下分别筛选出6个和15个差异性标志化合物;代谢产物主要与卟啉代谢、色氨酸代谢、叶酸和蝶呤生物合成代谢、半乳糖代谢和花生四烯酸代谢有关,其中以卟啉代谢为相关.结论:DOE能够阻断胃癌前病变的恶化,其机制可能与卟啉代谢、色氨酸代谢、叶酸和蝶呤生物合成代谢、半乳糖代谢和花生四烯酸代谢有关.
