首页 > 文献资料
-
养阴通脑颗粒治疗中风病恢复期（气阴两虚、瘀血阻络证）30例疗效观察
目的：探讨养阴通脑颗粒治疗中风病恢复期(气阴两虚、瘀血阻络证)的临床效果。方法：收治中风病恢复期患者60例，分为高剂量组、低剂量组、阳性药对照组、安慰剂对照组，各15例。各组均连续用药28 d。结果：治疗组在改善患者半身不遂、口舌歪斜、言语蹇涩或不语、偏身麻木等方面优于对照组(P＜0.05)。结论：养阴通脑颗粒能明显改善中风病恢复期(气阴两虚、瘀血阻络证)中风患者的临床症状，其临床疗效佳，无明显不良反应。
关键词： 养阴通脑颗粒 中风病恢复期(气阴两虚 瘀血阻络证) 疗效观察 -
HPLC测定口服养阴通脑颗粒方后大鼠血清中阿魏酸含量
目的:建立HPLC法测定口服养阴通脑颗粒方后大鼠血清中阿魏酸浓度的方法.方法:健康SD大鼠ig养阴通脑颗粒水溶液后,制备含药大鼠血清.HPLC法测定大鼠含药血清中阿魏酸的含量.采用phenomenex GEMINI C18柱色谱柱,甲醇-3%乙酸(32:68,v:v)为流动相;流速1.0 mL·min-1;检测波长323 nm.结果:阿魏酸0.33～10.56 μg·mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 2),平均回收率为96.41%,RSD 2.36%(n=6);平均日内精密度RSD2.04%,平均日间精密度RSD5.04%,以信噪比S/N=3时测得的低检测限为2.6 ng,血浆中的低检测浓度为0.075μg·mL-1.结论:该方法简便,灵敏度高,稳定性及精密度较好,可用于大鼠血清中阿魏酸的含量测定.
-
养阴通脑颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA达的影响
目的:观察养阴通脑颗粒(YYTN)对缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠的保护作用及其可能的作用机制.方法:采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,缺血90min后再灌注,分假手术组、I/R模型组、YYTN高、中、低剂量组,再灌注后24h灌胃给药,连续7d.再灌注后第1、3、7天,采用Longa法进行神经功能评分;缺血后第7天,进行TUNEL神经细胞凋亡染色,并通过实时荧光定量PCR技术分析海马组织中Caspase-3、Bcl-2和Bax mRNA表达的变化,采用△△Ct法计算mRNA相对表达水平.结果:术后第3、7天,与I/R模型组相比,YYTN高、中剂量组Longa评分显著降低(P＜0.01,P＜0.05).TUNEL染色后,各组海马区均可见TUNEL阳性细胞,与I/R模型组比较,YYTN高、中、低剂量组均能显著降低凋亡细胞平均光密度值(P＜0.01,P＜0.05);YYTN高剂量组Caspase-3 mRNA相对表达明显降低(P＜0.01),YYTN高、中剂量组Bax mRNA相对表达水平明显降低(P＜0.01,P＜0.05),YYTN各剂量组Bcl-2 mRNA相对表达水平明显升高(P＜0.01,P＜0.05).结论:YYTN可明显抑制神经元凋亡,对I/R损伤具有保护作用,其作用机制可能与降低I/R损伤后大鼠海马区Caspase-3和Bax mRNA表达,促进Bcl-2mRNA表达有关.
-
HPLC与紫外-可见分光光度计对养阴通脑颗粒有效部位的质量控制
目的:利用紫外-可见分光光度计( UV-VIS)检测养阴通脑颗粒中有效部位总黄酮含量.并利用梯度洗脱,建立高效液相色谱法( HPLC)测定养阴通脑颗粒中总黄酮有效部位中葛根素、芒柄花素、毛蕊异黄酮含量的方法.方法:以芦丁为对照品UV-VIS测定养阴通脑颗粒有效部位中总黄酮含量.采用HPLC,色谱柱为Eclipse XDB-C18( 150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)和0.04％磷酸水溶液(B)梯度洗脱,流速1.00mL/min,检测波长250nm.结果:养阴通脑颗粒有效部位总黄酮含量70％以上,葛根素的线性范围为0.530-296.300mg/L(r=0.9998),平均回收率为99.80％,RSD=0.40％,毛蕊异黄酮的线性范围为0.064-44.440mg/L( r=0.9994),平均回收率为99.70％,RSD=1.10％,芒柄花素的线性范围为0.064-43.110mg/L( r=0.9994),平均回收率为99.40％,RSD=1.50％.结论:本方法操作简便,测定结果准确可靠,为养阴通脑颗粒有效部位黄酮的质量控制提供方法.
-
养阴通脑颗粒中主要有效部位在脑缺血大鼠体内的药物代谢动力学研究
目的:建立同时测定大鼠血浆中葛根素、阿魏酸和川芎嗪质量浓度的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)方法,为养阴通脑颗粒药动学研究提供准确可靠的方法.方法:制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,再灌注同时灌胃养阴通脑颗粒4个主要有效部位后眼眶取血,血样预处理后,采用HPLC-DAD检测血样中葛根素、阿魏酸和川芎嗪的含量.结果:葛根素、阿魏酸和川芎嗪的进样质量浓度分别在(0.4000-80.0000) mg/L(R2=0.9998), (1.2000-100.0000)mg/L(R2=0.9999),0.04000-20.0000mg/L(R2=0.9990)范围内呈良好的线性关系,平均回收率均在95％-110％之间,日内、日间RSD均＜10％,稳定性符合体内药物分析要求.药动学结果显示阿魏酸入血多,保留久,T1/2时间短;葛根素表达峰时间快;川芎嗪的体内分布广.结论:一所建立的HPLC-DAD测定方法专属性强,分离度好,分析时长适宜,操作简单快速,可用于MCAO大鼠体内葛根素、阿魏酸、川芎嗪含量的同时测定及其药代动力学研究.
-
养阴通脑颗粒对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及其抑制NF-κB信号通路的作用机制
目的:探讨养阴通脑颗粒(YYTN)对缺血/再灌注损伤大鼠的保护作用及其可能的作用机制.方法:采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型,缺血90min后再灌注,分假手术组、MCAO组、YYTN高、中、低剂量组,再灌注后24h灌胃给药,连续7d.在缺血再灌注后第1、3、7天,采用Longa法进行神经功能评分;术后第7天,进行TTC染色、采用免疫荧光双标检测BrdU/Nestin免疫阳性细胞、Western blot检测p-NFκB、p-p65、p-IκBα蛋白表达.结果:缺血再灌注后第3、7天,与假手术组比较,MCAO组Longa评分极显著升高(P＜0.01),梗死体积百分比明显升高(P＜0.01);与MCAO组比较,YYTN高、中剂量组Longa评分明显降低(P＜0.05,P＜0.01),且梗死体积的百分比明显减少(P＜0.01).缺血再灌注后第7天,与假手术组比较,MCAO组BrdU/Nestin免疫阳性细胞数量明显增多(P＜0.01),p-NFκB、p-p65蛋白表达明显增多(P＜0.01),p-IκB α蛋白表达显著减少(P＜0.01);与MCAO组比较,YYTN各剂量组BrdU/Nestin免疫阳性细胞数量明显增多(P＜0.01),且p-NFκB、p-p65蛋白表达明显减少(P＜0.01),p-IκB α蛋白表达显著增多(P＜0.01).结论:YYTN可促进脑缺血再灌注损伤后神经功能恢复、减少梗死体积、促进缺血周边区NSCs增殖进行神经系统自我修复,其作用机制可能与其抑制NF-κB信号通路有关.
-
基于R语言的养阴通脑颗粒总黄酮提取优化
目的:运用R语言结合BP神经网络和遗传算法优化复方养阴通脑颗粒中总黄酮提取工艺.方法:在单因素试验的基础上采用4因素3水平的正交试验设计方法,提取并测得养阴通脑颗粒中总黄酮的含量.通过R语言,建立BP神经网络模型,再利用遗传算法对网络进行目标寻优,从而得到养阴通脑颗粒总黄酮的佳提取工艺.结果:养阴通脑颗粒中总黄酮的优工艺条件为乙醇浓度55％、提取时间1.5h、提取温度80℃、液料比15∶1,模型预测值为119.04mg,而实验平均值为120.35mg,相对误差为1.09％,因此具有良好的网络预测性.结论:此数学模型可用来对养阴通脑颗粒中总黄酮的提取工艺进行分析和预测,为实现中药有效部位和成分目标寻优提供了新的参考.
-
养阴通脑颗粒有效成分在局灶性脑缺血大鼠体内药动学与药效学结合研究
目的:研究养阴通脑颗粒主要有效成分——葛根素、川芎嗪、阿魏酸在局灶性脑缺血再灌注模型大鼠体内的药动学与药效学的相应变化,建立药代动力学-药效动力学模型(PK-PD模型),为养阴通脑颗粒临床应用提供实验依据.方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、给药组(葛根素50mg/kg、川芎嗪150mg/kg、阿魏酸150mg/kg),采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型后尾静脉注射给药,于不同时间点眼眶取血,应用HPLC检测3种有效成分的血药浓度.ELISA法检测转化生长因子-β1 (TGF-β1)、缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)的含量.建立PK-PD模型,应用DAS 3.2.6进行模型拟合以及数据分析.结果:高效液相色谱-二极管阵列检测器测定葛根素、川芎嗪、阿魏酸方法稳定,3种有效成分线性回归方程分别为川芎嗪Y=0.0139X-0.0032(R2=0.9999),葛根素Y=0.0156X-0.0006(R2=0.9999),阿魏酸Y=0.0690X-0.0203(R2=0.9994),表明具有良好的线性关系.方法学考察稳定,日间、日内精密度RSD均＜10％,回收率均在90％～120％之间,稳定性符合药物体内分析要求;与模型组比较,给药组15min后TGF-β1、HIF-1α含量显著降低(P＜0.01);PK-PD拟合表明,给药组与两个药效指标拟合度良好,实测值和模型预测值相近.结论:高效液相色谱-二极管阵列分析方法专属性强,各成分分离度好,分析时长适宜,操作简单快速,总量统计矩可将川芎嗪、葛根素、阿魏酸的各项药动学参数整合.经养阴通脑颗粒有效成分治疗后,给药组TGF-β1、HIF-1α含量均有所改善,建立PK-PD模型,能够评价和预测中药多成分多效应之间的相关性.
-
统计矩法评价养阴通脑颗粒各有效部位配伍在脑缺血再灌大鼠中的药动学变化
目的:应用总量统计矩法研究中药复方养阴通脑颗粒主要有效部位的不同配伍对主要活性成分药动学参数的影响.方法:以养阴通脑颗粒中的主要有效部位和物碱、黄酮、皂苷、挥发油的量作为配伍的质量控制标准,按正交试验法设计复方主要有效部位的配伍实验,在不同时间点上检测川芎嗪和葛根素的血药浓度,分别计算川芎嗪和葛根素在各配伍条件下的零阶矩和平均滞留时间,再计算葛根素和川芎嗪的总量零阶矩和总量平均滞留时间.应用正交分析法分析配伍对其药动学参数的影响.结果:黄酮对葛根素和川芎嗪的总量零阶矩影响大,生物碱对葛根素和川芎嗪的总量平均滞留时间影响大,皂昔对2个总量统计矩参数的影响都很小,而挥发油对2个总量统计矩参数的影响都较大,提示挥发油可能促进葛根素和川芎嗪在大鼠体内的代谢.结论:总量统计矩参数可用于指导中药复方的配伍研究.
-
养阴通脑颗粒主要有效部位的转运研究
目的:研究养阴通脑颗粒主要有效部位在Caco-2细胞模型的吸收特性和转运机制.方法:利用MTT试验研究养阴通脑颗粒主要有效部位在Caco-2细胞中的安全浓度,用Caco-2细胞模型研究养阴通脑颗粒主要有效部位配伍后的转运情况,采用高效液相色谱法进行含量测定.结果:黄芪甲苷、川芎嗪和葛根素的吸收转运Papp皆＜1.0×10-6 cm·s-1,吸收转运Papp与难吸收药物阿替洛尔接近,其口服在体内的吸收从大到小的顺序为:葛根素＞川芎嗪＞黄芪甲苷.皂苷与黄酮配伍后,黄芪甲苷吸收转运Papp明显提高,促进吸收方向转运；黄酮、皂苷和生物碱的相互配伍对黄芪甲苷的外排作用明显,对川芎嗪和葛根素的吸收转运影响不明显.各有效部位代表成分的双向转运程度差异较大,Papp(B→A)明显大于Papp(A→B),提示这3个有效部位代表成分在Caco-2细胞单层模型中从BL侧到AP侧的外流转运较占优势.结论:黄芪甲苷、川芎嗪和葛根素可能为吸收不良的化合物,在其转运途径中可能受到了小肠顶侧膜的转运蛋白的外排作用.
关键词： 养阴通脑颗粒 Caco-2细胞模型 有效部位 高效液相色谱法 转运 -
养阴通脑颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠海马内质网应激的影响
目的 探讨养阴通脑颗粒减轻脑缺血再灌注损伤的可能作用机制.方法 将162只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、齐阴通脑颗粒组,每组54只.模型组和养阴通脑颗粒组通过大脑中动脉局灶性栓塞手术建立脑缺血再灌注损伤模型.养阴通脑颗粒组造模成功后每12h给予养阴通脑颗粒0.5 g/kg灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水.于造模后12、24、48、72h观察大鼠神经功能缺损评分、大脑海马葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)蛋白及mRNA表达及真核生物翻译起始因子2α(eIF2α)、内质网源性转录因子(chop)、转录激活因子4(ATF4) mRNA表达;并于造模后72h检测脑梗死体积及脑组织海马区病理变化.结果 与假手术比较,模型组大鼠各时间点神经功能缺损评分,GRP78、PERK蛋白及mRNA表达,eIF2α、chop、ATF4 mRNA表达均明显升高,脑梗死体积明显增大(P＜0.01);与模型组比较,养阴通脑颗粒组各时间点神经功能缺损评分,PERK蛋白及PERK、eIF2α、chop、ATF4 mRNA表达明显降低,GRP78蛋白和mRNA表达均显著升高,脑梗死体积明显缩小(P＜0.05或P＜0.01).结论 养阴通脑颗粒可能通过调节海马内质网相关因子表达,抑制内质网应激,从而减轻脑缺血再灌注损伤.
-
养阴通脑颗粒有效成分配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠保护作用机制的研究
目的 探究养阴通脑颗粒主要有效成分葛根素、川芎嗪、黄芪甲苷、梓醇的正交配伍组合对SD大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制,并选出较优组合.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、9个不同比例正交配伍组和阳性对照组.建立大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,以L9(34)正交表设计安排成分配伍给药,动物清醒后观察大鼠神经功能缺损症状;3d后观察海马区脑组织的病理变化;TTC染色检测脑梗死体积;免疫组织化学法来评估缺血侧脑组织NLRP3蛋白表达,RT-PCR法检测海马区脑组织ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、MMP-9 mRNA表达.采用极差分析法分析正交试验结果.结果 正交配伍各组能有效改善脑缺血再灌注损伤的神经功能缺失,降低脑梗死体积,抑制NLRP3炎性体的表达,降低ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、MMP-9基因的表达.正交试验结果分析显示,其较优组合为川芎嗪100 mg·kg-、葛根素20 mg·kg-1、黄芪甲苷80 mg·kg-、梓醇20 mg·kg-1.结论 养阴通脑颗粒主要有效成分配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠有明显的保护作用,其作用机制可能与抑制NLRP3炎性体,下调ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、MMP-9的表达有关.
-
灌胃养阴通脑颗粒大鼠血浆中川芎嗪的HPLC法测定
目的 建立HPLC测定大鼠灌胃养阴通脑颗粒有效部位组合后血浆中川芎嗪质量浓度的方法.方法 以乙腈提取处理血浆,以安眠酮为内标,甲醇-水(55:45)为流动相,ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,体积流量为1.0 mL/min,以紫外检测器在279 nm波长下测定血浆中川芎嗪.结果 川芎嗪在0.11～22μg/mL线性关系良好,平均回收率为102.98%,RSD＜10%,低检测限为0.21 ng,血浆中低检测质量浓度为0.042 μg/mL.结论 此法灵敏、可靠,可较好地用于口服养阴通脑颗粒有效部位组合后血浆中的川芎嗪的测定,为测定中药复方体内有效成分提供方法.
-
养阴通脑颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠内源性神经干细胞表达的影响
目的 观察养阴通脑颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠内源性神经干细胞表达的影响.方法 线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,缺血90 min后再灌注.大鼠随机分为假手术组、模型组、养阴通脑颗粒组(1.65 g/kg),再灌注后24h灌胃给药.给药后第1、7、14天,Longa法进行神经功能评分,同时各组随机选择6只大鼠处死,免疫荧光检测缺血侧室管膜下区(SVZ)、颗粒下层区(SGZ) BrdU、BrdU/Nestin、BrdU/NeuN、BrdU/GFAP阳性细胞数.结果 与模型组比较,给药后第7、14天养阴通脑颗粒组Longa评分显著降低(P ＜0.05,P＜0.01),BrdU/Nestin阳性细胞数显著增加(P＜0.01);第1、7、14天BrdU阳性细胞数显著增加(P＜0.01),BrdU/GFAP阳性细胞数显著减少(P＜0.01);第14天BrdU/NeuN阳性细胞数显著增加(P＜0.05).结论 养阴通脑颗粒可通过激活内源性神经干细胞来促进其增殖,并分化为成熟的神经元,同时能减轻神经胶质细胞过度增殖,促进神经发生,减轻神经功能缺损.
-
养阴通脑颗粒对脑缺血大鼠红细胞变形能力和小鼠减压缺氧耐力影响的实验研究
目的:探讨养阴通脑颗粒对脑缺血大鼠红细胞变形能力和小鼠减压缺氧耐力影响.方法:采用四血管阻断法(4V0法)制作老年大鼠脑缺血损伤模型,观察养阴通脑颗粒对血液流变学指标的影响;采用小鼠减压缺氧耐力方法观察了本品的抗缺氧能力.结果:养阴通脑颗粒具有提高红细胞变形能力、降低全血粘度的作用,延长减压缺氧小鼠存活时间.结论:养阴通脑颗粒对脑缺血性老年大鼠异常血液流变学变化具有改善作用和提高小鼠的缺氧耐受能力.
-
口服中药复方有效部位后血浆中葛根素的测定
目的:建立HPLC测定大鼠口服养阴通脑颗粒有效部位组合后血浆中葛根素浓度的方法.方法:以乙腈提取处理血浆,以对羟基苯甲酸为内标,甲醇-0.5%乙酸水(28:72,v:v)为流动相,ODSC18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,流速为1.0mL/min,以紫外检测器在248nm波长下测定血浆中葛根素的吸收.结果:葛根素在0.025～3.2μg/mL范围内线性关系良好,RSD＜10%,平均回收率为97.6%,低检测限为0.16ng,血浆中低检测浓度为0.016μg/mL.结论:此法灵敏、可靠,可较好地用于口服中药复方养阴通脑颗粒主要有效部位组合后血浆中葛根素的测定,可为中药复方体内成分分析提供方法.
-
养阴通脑颗粒中黄芪甲苷含量的HPLC-ELSD测定
目的 确定养阴通脑颗粒中黄芪甲苷含量HPLC测定方法及佳提取工艺.方法 用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量,色谱柱为Kromasil C18；乙腈-水(34∶ 66),流速1.0 ml/min,漂移管温度100℃,载气流速为2.0 L/min.采用微波辅助提取,通过正交设计考察溶媒用量、微波功率、微波时间,乙醇体积百分数对黄芪甲苷得率的影响.结果 方法学考察结果表明,在0.28 ～4.20 μg(r =0.999 4)范围内,黄芪甲苷呈良好的线性关系；精密度RSD为0.35％；加样回收率为97.43％,RSD为2.59％.佳提取条件为:微波功率70 W,溶媒用量6倍,微波时间20 min,乙醇体积百分数60％.结论该方法测定结果准确稳定,精密度高,佳提取工艺下黄芪甲苷的得率高.
-
脑缺血再灌注大鼠灌胃养阴通脑颗粒后主要成分葛根素的药动学研究
目的 采用脑-颈静脉双通道微透析法观察大鼠灌胃养阴通脑颗粒后主要成分葛根素的药动学参数.方法 采用HPLC技术建立大鼠脑和颈静脉微透析液中葛根素的含量测定方法,并考察微透析探针回收率;大鼠植入颈静脉和脑微透析探针引导管,并制作大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型.灌胃给予2.5 g/mL养阴通脑颗粒,测定脑、颈静脉微透析液葛根素的浓度变化,参数拟合分析药动学参数.结果 观察MCAO模型大鼠灌胃给予2.0g/mL养阴通脑颗粒后微透析液中葛根素的浓度,发现脑内葛根素浓度低于颈静脉,Tmax更加靠后,葛根素生物利用度在脑部明显低于血液中.结论 建立的脑-颈静脉双通道微透析技术.分析获得大鼠不同部位的药-时曲线,有助于开展中药及相关制剂的药动学数据及成分分布、生物利用度等参数.
关键词： 脑-颈静脉双通道微透析 脑缺血再灌注 养阴通脑颗粒 葛根素 药动学 -
养阴通脑颗粒和维脑路通对心脏功能的改善作用
目的:观察养阴通脑颗粒对麻醉犬心脏功能的影响.方法: 将29只犬随机分为养阴通脑颗粒组、维脑路通组和生理盐水对照组,用心脏收缩时间期(STI)评定心脏功能的变化.结果:养阴通脑颗粒和维脑路通能减小PE P/LVET比值,延长LVET和缩短PEP的作用.结论:养阴通脑颗粒和维脑路通有改善心脏功能的作用.
-
养阴通脑颗粒对麻醉犬脑血流量的影响
目的：观察养阴通脑颗粒对麻醉犬脑血流量的影响。方法：将29只犬随机分为5组，养阴通脑颗粒大剂量组(2.0 g/kg)；中剂量组(1.0 g/kg)；小剂量组(0.5 g/kg)及阳性药维脑路通组(维脑路通0.025 g/kg)，空白对照组给等量的生理盐水。结果：养阴通脑颗粒(0.5,1.0,2.0 g/kg)可增加麻醉犬的脑血流量，中剂量组在30～90 min时增加更明显，与维脑路通组比较，在30 min时，大、中剂量组的脑血流量比维脑路通组明显(P<0.05)。结论：养阴通脑颗粒扩张脑血管的疗效比小剂量的维脑路通好。
