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支气管哮喘患者血清白细胞介素-9、白细胞介素-13和免疫球蛋白E变化的研究
目的 探讨白细胞介素-9(IL-9)、白细胞介素-13(IL-13)在支气管哮喘发病机制中的作用.方法 用酶联免疫吸附法(ELISA)测定50例支气管哮喘急性发作期治疗前后患者和21例健康对照者的血清IL-9、IL-13的浓度.结果 支气管哮喘急性发作期患者的血清IL-9、IL-13浓度显著高于正常对照组.结论 IL-9、IL-13等萸性细胞因子的测定对于评价炎症程度厦疗效、指导临床治疗有重要意义.
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银杏叶提取物联合糖皮质激素治疗特发性肺纤维化疗效及对血清TGF-β1、IL-13、SOD、MDA的影响
目的 观察银杏叶提取物联合糖皮质激素治疗特发性肺纤维化(IPF)的疗效及对血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-13(IL-13)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响.方法 将86例IPF患者随机分为观察组43例及对照组43例,对照组给予糖皮质激素治疗,观察组在常规治疗基础上给予银杏叶提取物治疗,疗程12周.观察2组治疗前后血气分析、肺功能、肺纤维指标变化情况;检测2组治疗前后血清TGF-β1、IL-13、SOD、MDA水平.结果 2组治疗后p(O2)、Sa(O2)均明显升高(P均<0.05),p(CO2)、p(A-a)(O2)均明显降低(P均<0.05),且观察组p(O2)、p(A-a)(O2)改善情况均优于对照组(P均<0.05);2组治疗后FVC、FEV1/FVC、MVV、DLCO均明显升高(P均<0.05),且观察组上述指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05);2组治疗后PCⅢ、CⅣ、PICP、LN均明显降低(P均<0.05),且观察组上述指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05);2组治疗后血清TGF-β1、IL-13、MDA水平均明显降低(P均<0.05),SOD水平均明显升高(P均<0.05),且观察组上述指标改善情况均优于对照组(P均<0.05).结论 银杏叶提取物联合糖皮质激素能够显著改善IPF患者动脉血气指标及肺功能,并阻断肺纤维化进程,可能与降低血清TGF-β1、IL-13、MDA水平,提高SOD活性有关.
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原发性肾小球肾炎患者血浆白细胞介素-13水平及临床意义
目的探讨不同病理类型的原发性肾小球肾炎(PGN)患者血浆白细胞介素-13(IL-13)水平,进一步了解PGN的发病机制,为临床治疗探索一种新的方法.方法应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测55例PGN患者和15例正常人血浆IL-13水平,对比不同病理类型的PGN患者血浆IL-13水平,并与肌酐清除率(Ccr)作直线相关分析.结果不同病理类型的PGN患者血浆IL-13水平较正常对照组增高,增殖性肾小球肾炎患者血浆IL-13水平高于非增殖性肾小球肾炎, PGN患者血浆IL-13水平与Ccr呈负相关关系(r=-0.8245,P<0.001).结论 PGN患者血浆IL-13水平增高,以增殖性肾小球肾炎为重,并与肾功能密切相关.
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哮喘患儿免疫球蛋白E和白细胞介素-13检测的意义
采用ELISA法测定20例支气管哮喘患儿(观察组,其中急性发作期7例,缓解期13例)血清白细胞介素-13和IgE水平,并与体检正常20例儿童(对照组)进行对照；对哮喘发作期IL - 13与IgE水平进行相关分析.结果IL-13和IgE水平显著高于缓解期和对照组(P均＜0,05).IL-13与IgE呈正相关,分析IL-13参与支气管哮喘发病的整个过程；检测血清IL-13及IgE水平可反映支气管哮喘的炎症状态及评价治疗效果.
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自血穴位注射疗法对哮喘患者IL-13mRNA表达的影响
目的:探讨自血穴位注射疗法治疗哮喘的作用机制.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),半定量比较自血穴位注射疗法治疗前后哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-13 mRNA的表达情况.结果:自血穴位注射疗法治疗后,哮喘患者PBMC中IL-13 mRNA低于治疗前水平(P＜0.05).结论:在基因转录水平抑制IL-13的表达可能是自血穴位注射疗法治疗哮喘的重要机制之一.
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从白细胞介素-13和病理改变探讨丹芍丸对大鼠系膜增生性肾炎模型的作用
目的:探讨丹芍丸对大鼠系膜增生性肾炎(MsPGN)模型肾组织白细胞介素-13(IL-13)表达及肾脏病理改变的影响.方法:40只雄性SD大鼠随机分成4组,每组10只,设置正常对照组、模型对照组、激素对照组、丹芍丸治疗组;除正常组外,其余各组采用抗Thy-1大鼠肾炎模型.在实验的第28天处死各组大鼠取肾组织切片,通过原位杂交技术(ISH)检测肾组织IL-13 mRNA的表达;通过光镜、电镜观察大鼠肾组织形态学的改变,进行肾组织学分级及肾小球损害、肾小管间质损害积分评定,并检测各组大鼠实验前后的血尿素氮(BUN)、血肌肝(Scr)、24 h尿蛋白定量、尿红细胞计数等指标.结果:肾组织IL-13表达与大鼠MsPGN模型肾小球损害、肾小管间质损害程度呈正相关.正常对照组肾组织无明显IL-13表达,模型对照组肾组织IL-13表达较正常组明显上调(P<0.01);丹芍丸治疗组与激素对照组实验后肾组织IL-13表达较模型对照组均明显下调(P<0.01),组间比较有统计学差异(P<0.05);丹芍丸治疗组与激素对照组实验后肾组织病理半定量积分均减少明显(P<0.01),组间比较优势明显(P<0.01).丹芍丸治疗组实验后BUN、Scr、24 h尿蛋白定量、尿红细胞计数等指标均明显改善,与激素对照组实验后比较优势明显(P<0.05或P<0.01).结论:IL-13在MsPGN的发病过程起重要的调控作用,丹芍丸能改善肾小球损害、肾小管间质损害程度,经丹芍丸治疗后肾组织IL-13表达下调,肾脏炎症程度明显改善,丹芍丸可能是通过调控MsPGN肾组织IL-13的产生而起效.
关键词： 系膜增生性肾小球肾炎 丹芍丸 白细胞介素-13 肾脏病理 -
哮喘患者采用普米可令舒雾化吸入治疗前后血清IL-12、IL-13及VEGF水平变化的研究
目的:本研究旨在探讨采用普米可令舒雾化辅助治疗急性发作期哮喘患者的临床疗效以及对血液中白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-13(IL-13)以及血管内皮生长因子(VEGF)水平变化的影响.方法:选取本院2011年10月至2012年8月收治的哮喘患者134例,随机分为两组,对照组为采用常规治疗患者72例,观察组在常规治疗基础上联合使用普米克令舒(雾化吸入,6-10min/次,3次/d)治疗患者62例,疗程均为7d,比较两组患者治疗前后的血清IL-12、IL-13以及VEGF水平变化情况,并测定肺功能.结果:7d疗程结束后,观察组症状明显低于对照组,但血清中IL-12水平则高于对照组、IL-13和VEGF水平明显低于对照组,观察组血清IL-12和VEGF的变化值明显大于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01),而IL-13无明显区别(P＞0.05),急性发作期患者血清IL-12与FEV1％呈正相关;IL-13与FEV1％呈负相关;VEGF与FEV1％呈负相关,治疗后则无明显相关.结论:普米可令舒雾化吸入用于辅助治疗急性发作期哮喘患者具有明显的临床效果,并能显著的改变患者体内的炎性环境,因此,可以作为一种安全有效的治疗方法予以推广.
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白细胞介素-13及其受体在肺动脉高压发病中的作用研究进展
肺动脉高压是一种临床常见病症,其发病机制目前尚未完全清楚.众多研究表明,炎症及免疫机制在肺动脉高压的发生、发展起重要的作用.白细胞介素-13作为一种重要的细胞因子,主要由激活的Th2型细胞分泌产生.近的研究表明,白细胞介素-13可能是一种新的引起肺动脉平滑肌细胞及血管内皮细胞肥大的调节因子.该文就白细胞介素-13与肺动脉平滑细胞及血管内皮细胞相互作用参与肺动脉高压发病进行综述.
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支气管哮喘患儿合并肺炎支原体感染后IgE、CYSLTS及IL-13含量的变化及其意义
目的 探讨支气管哮喘患儿合并肺炎支原体感染后支气管肺泡灌洗液中IgE、半胱氨酰白三烯(CYSLTS)及IL-13含量的变化及其意义.方法 选取我院收治的62例支气管哮喘患儿为研究对象,其中合并有肺炎支原体感染患儿27例,未合并患儿35例,选取同期支气管异物且未合并感染和哮喘的患儿15例作为对照组,采用ELISA方法检测患儿支气管肺泡灌洗液中的IgE、CYSLTS及IL-13含量并比较.结果 合并感染组IgE、CYSLTS及IL-13水平明显高于对照组(P＜0.05),未合并组IgE、CYSLTS及IL-13水平明显高于对照组(P＜0.05),合并感染组IgE、CYSLTS及IL-13水平明显高于未合并组(P＜0.05).结论 肺炎支原体感染与支气管哮喘存在一定的相关性.肺炎支原体感染时细胞因子异常表达.总IgE、CYSLTS及IL-13水平可能与过敏的反复原刺激有关,肺炎支原体感染后,作为一类特异性过敏原刺激形成IgE,终导致哮喘加重.
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白细胞介素-13基因多态性对哮喘患儿血清白细胞介素-13及总免疫球蛋白E水平的影响
目的探讨白细胞介素-13(IL-13)基因多态性对血清IL-13及总免疫球蛋白E(IgE)水平的影响,以了解IL-13基因多态性在儿童哮喘发病机制中可能的作用.方法运用限制性内切酶片断长度多态位点法(RFLPs)检测哮喘患儿及正常对照组儿童IL-13 Intron3+1923位点C/T基因多态性,并运用ELISA法测定其血清IL-13及总IgE水平.结果哮喘患儿TT、TC基因型频率分布高于正常对照组(P<0.05),且TT、TC基因型患儿血清IL-13、总IgE水平较CC基因型明显升高(P<0.01).结论 IL-13基因多态性在儿童哮喘发病机制中可能起重要的作用.
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哮喘儿童IL-13水平和肺功能1秒钟用力呼气容积变化的研究
目的:观察哮喘急性发作期儿童经GINA方案的系统治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IL-.13和肺功能1秒钟用力呼气容积(FEV1)的变化及相互关系.方法:采用双抗体夹心ELISA法测定23例中度急性发作期哮喘患儿治疗前后、正常对照组儿童(20例)PBMC培养上清液中IL-13水平,并同时测肺功能1秒钟用力呼气容积(FEV1)占预计值的百分比.结果:哮喘息儿急性发作期PBMC培养上清液中IL-13水平(169.66±14.51)ng/L较正常对照组(92.68±13.80)ng/L为高,差别非常显著(P＜0.01).同时显示,哮喘患儿急性发作期FEV1值占预计值的百分比为(69.78±8.30),明显低于正常对照组(98.35±5.36),差别非常显著(P＜0.01).哮喘息儿治疗前、后PBMC培养上清液中IL-13测定:治疗后为(120.21±16.35)ng/L明显低于急性发作期,仍高于正常对照组,差别非常显著(P＜0.01).FEV1占预计值的百分比测定:治疗后为(82.56±10.40)明显高于急性发作期,肺功能有所改善,但仍低于正常对照组,差别非常显著(P＜0.01).直线相关分析表明,哮喘急性发作期IL-13与FEV1占预计值的百分比呈负相关(r=-0.493,P＜0.05).结论:IL-13在哮喘的急性发病中起着重要作用,其可能是构成气道慢性炎症的各类因素之一.IL-13水平及FEV1值的研究对哮喘病的诊断和疗效的评价有重要价值,且为IL-13受体拮抗剂,为新一代抗炎药物提供有利依据.
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保山市汉族儿童哮喘相关基因多态性分布特征分析
目的 分析云南省保山市汉族儿童哮喘相关基因肾上腺能受体(ADRB2)、白细胞介素-13(IL-13)、IL-4、白细胞介素-4受体(IL-4R)、IgE高亲和力受体链(MS4A2)多态性的频率特征,为哮喘儿童个体化治疗提供理论指导.方法 选取2016年2月-2017年6月在保山市隆阳区妇幼保健院确诊为哮喘的患儿64例为研究对象,采集口腔黏膜脱落细胞,获得基因组DNA,运用Taqman-MGB技术,检测ADRB2、IL-13、IL-4、IL-4R、MS4A2基因多态性.统计分析该地区汉族儿童基因多态性的分布特征.结果 保山市汉族儿童的ADRB2 Argl6Gly位点AA、AG和GG基因型频率分别为31.3％、48.4％和20.3％,IL-13 C-1112T位点CC、CT和TT基因型频率分别为73.4％、21.9％和4.7％,C1923T位点CC、CT和TT基因型频率分别为57.8％、34.4％和7.8％,A2044G位点AA、AG和GG基因型频率分别为7.8％、39.1％和53.1％.IL-4 C-589T位点CC、CT和TT基因型频率分别为67.2％、26.6％和6.3％.IL-4 R175V和Q576R位点AA、AG、GG分别为20.3％和70.3％、45.3％和29.7％、34.4％和0.0％.MS4A2 C-109T位点CC、CT和TT基因型频率分别为7.8％、53.1％和39.1％.Glu237Gly位点AA、AG和GG基因型频率分别为67.2％、31.3％和1.6％.结论 保山市汉族儿童ADRB2、IL-13、IL-4、IL-4R、MS4A2基因多态性频率具有自身特点.
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糖皮质激素对IL-13诱导的小鼠肺组织黏蛋白基因Muc5ac表达的影响
目的:研究糖皮质激素对白细胞介素(IL)-13诱导的小鼠肺组织黏蛋白基因Muc5ac表达的影响,探讨其对气道黏液分泌的作用.方法:24只清洁级BALB/c小鼠被随机分为对照组、IL-13组和地塞米松组.IL-13组于d1、d3和d5分别鼻腔滴入重组鼠IL-13 100μg/只;地塞米松组分别于小鼠首次鼻腔滴入IL-13(同上述方法)前24小时、1小时以及随后的连续4天(d0～d5,共6天)腹腔注射0.5 mg/kg地塞米松;对照组不进行任何处理.收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并计数嗜酸细胞;用RT-PCR和免疫组化法分别检测Muc5ac mRNA和蛋白在小鼠肺组织的表达.结果:IL-13处理后,Muc5ac mRNA和蛋白在肺部的表达以及BALF中的嗜酸细胞计数均显著高于对照组(均P＜0.01);经地塞米松处理后,除BALF中的嗜酸细胞计数外,Muc5ac mRNA和蛋白在肺部的表达较IL-13组无明显降低.结论:IL-13能够上调Mu5ac mRNA和蛋白在肺组织的表达,通过黏液诱导活性在气道黏液分泌中起重要作用;地塞米松可显著抑制IL-13诱导的肺组织嗜酸细胞浸润,但并不抑制黏液分泌.
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IL-13及其变异体真核表达载体的构建表达与亚细胞定位
目的:体外构建野生型人白细胞介素-13(whIL-13)及变异型人白细胞介素-13(mhIL-13)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融和蛋白真核表达载体,分析其在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位.方法:以RT-PCR方法扩增whIL-13、mhIL-13全长编码基因,构建EGFP-whIL-13、EGFP-mhIL-13融和蛋白真核表达载体,转染C0S-7细胞,以激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白的表达及其在细胞内的分布情况.结果:两种融和蛋白表达载体均构建正确,将其转染COS-7细胞后,在阳性克隆胞浆内均可见明亮的绿色荧光,胞核空虚.结论:成功构建EGFP-whIL-13、EGFP-mhIL-13融和蛋白表达载体,并在COS-7细胞中得到表达,表达的两种融和蛋白细胞内分布特征没有区别,均位于胞浆内.
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白介素-13对与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞 SDF-1和 EGF 表达影响
目的：为了探索白细胞介素-13（Interleukin-13，IL-13）在乳腺癌发展中的作用机制，我们研究了IL-13对与乳腺癌细胞共生长的成纤维细胞表达SDF-1（Stromal cell derived factor 1）和EGF（Epidermal growth factor）的影响。方法：采用体外和荷瘤裸鼠体内人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和人成纤维细胞株CCC-ESF-1（ESF）共培养的方法，用定量PCR（RT-qPCR）方法、流式细胞术和Western blot 方法检测在IL-13作用下体外共培养的成纤维细胞SDF-1和EGF 的表达，细胞增殖实验Cellcounting kit-8（CCK-8）观察IL-13对体外共培养的乳腺癌细胞增殖的影响；免疫荧光激光共聚焦显微镜观察在IL-13作用下荷瘤裸鼠体内与乳腺癌细胞共生长的成纤维细胞SDF-1和EGF 的表达，检测IL-13对荷瘤裸鼠肿瘤体积的影响。结果：IL-13上调体外与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1和EGF 的表达，并促进共培养的乳腺癌细胞的增殖；IL-13上调荷瘤裸鼠乳腺癌组织成纤维细胞SDF-1和EGF 的表达，并促进荷瘤裸鼠肿瘤生长。结论：IL-13上调与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1和EGF 的表达，IL-13对乳腺癌促进作用的分子机制涉及乳腺癌基质成纤维细胞的SDF-1和EGF。
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白细胞介素-13结合小肽的筛选及其对气道上皮细胞分泌黏蛋白5AC的影响
目的 筛选与白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)具有较强结合能力的功能小肽,并检测其对气道上皮细胞HBE16分泌黏蛋白(mucin,MUC)5AC的影响.方法 以重组人IL-13为靶蛋白,采用固相包被法对噬菌体随机展示十二肽库进行亲和筛选,并进行测序；将获得的与IL-13具有高亲和力的小肽偶联到嗜孔蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)载体上,制备KLH偶联肽K1、K3、K4,通过夹心ELISA法检测3种偶联肽对IL-13的封闭作用；通过细胞试验检测3种偶联肽对HBE16细胞分泌MUC5AC的影响.结果 经6轮亲和富集筛选,获得了3个与IL-13具有较高亲和力的噬菌体克隆,插入的十二肽编号依次为P1、P3、P4;3种偶联肽K1、K3、K4对IL-13均具有明显的封闭作用；经K1+IL-13、K3+IL-13和K4+ IL-13处理的HBE16细胞中MUC5AC基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平均明显低于IL-13对照组(P＜0.01).结论 经偶联肽封闭后,可减少IL-13刺激的气道上皮细胞HBE16中MUC5AC的分泌,为慢性气道炎症黏液高分泌的防治提供了新的思路和手段.
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抗白细胞介素-13疫苗治疗哮喘的研究进展
哮喘是仅次于癌症的世界第二大致死、致残疾病,造成的经济负担超过结核病和艾滋病的总和.严重的哮喘目前尚不能治愈,迫切需要新的有效的疾病干预手段.临床研究显示,白细胞介素-13 (inteffeukin-13,IL-13)与哮喘密切相关,动物模型研究也表明,IL-13在哮喘病理机制中处于核心位置.目前,IL-13单克隆抗体治疗哮喘在国外已处于Ⅱ期临床试验,以疫苗形式诱导持续的IL-13中和抗体,对哮喘这样的慢性疾病而言较之单抗更具应用潜能.本文对抗IL-13疫苗治疗哮喘的研究进展作一综述.
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呈现人白细胞介素-13抗原表位的病毒样颗粒疫苗的构建
目的 构建呈现人白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)抗原表位的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗,为开展IL-13主动免疫干预慢性哮喘进程的研究奠定基础.方法 通过抗原性及亲水性预测并结合三维结构分析,获得处于人IL-13分子与其受体结合部位潜在的B细胞表位;根据预测的人IL-13抗原肽,合成寡核苷酸序列,并经变性、退火形成双链DNA片段,插入表达乙肝核心抗原(HBcAg)的pThioHisA-HBcAg(NP)载体中,构建重组表达质粒,转化感受态大肠埃希菌(E.coli)DH5α,IPTG诱导表达;表达的重组蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析后,经硫酸铵沉淀、洗涤初步纯化,并经凝胶过滤层析、密度梯度离心、电镜观察检测其VLPs的存在;将纯化后的重组蛋白在不使用任何常规佐剂的情况下免疫昆明小鼠,ELISA法检测小鼠血清中IL-13特异性抗体的滴度.结果 预测分析获得了3个潜在的B细胞表位;3个重组表达质粒pThioHisA(NP)-A、B、C经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白HBcAg+A、B、C相对分子质量分别约为20 000、19 000、18 500,可被兔抗人IL-13多克隆抗体特异性识别,并以VLPs形式存在;HBcAg+A和HBcAg+B重组蛋白诱导小鼠产生了较强的抗体应答,血清中IL-13抗体滴度高可达1:64000,而HBcAg+C重组蛋白未见特异抗体应答.结论 成功构建了呈现人IL-13抗原表位的VLPs疫苗,该疫苗可有效打破B细胞免疫耐受,免疫小鼠后产生了高滴度的特异性抗体,为进一步在猴体哮喘模型和人类临床试验中开展IL-13疫苗主动免疫干预哮喘疾病进程的研究奠定了基础.
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溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠血清胰高血糖素样肽-2(GLP-2)、白细胞介素-13(IL-13)的影响
目的:观察中药复方溃结灵对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血清GLP-2、IL-13表达的影响.方法:将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只,分别为正常对照组、模型组、阳性药对照组、溃结灵组.除正常对照组外,其余三组大鼠均采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法制备UC大鼠模型.经灌胃给予药物治疗10天后,采集血液,分离血清,ELISA方法检测血清GLP-2、IL-13表达的影响.结果:与正常对照组比较,模型组血清GLP-2表达增高(P＜0.05)、IL-13表达降低(P＜0.01);与模型组比较,溃结灵组血清GLP-2、IL-13表达增高(P＜0.05,P＜0.01).结论溃结灵可上调UC大鼠血清GLP-2、IL-13表达,这可能是其抗UC的作用机理之一.
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盐酸西替利嗪联合益气养血消风汤对慢性荨麻疹患者血清IgE、IFN-γ、IL-13、IL-17的影响
目的:探讨盐酸西替利嗪联合自拟中药益气养血消风汤剂对慢性荨麻疹患者血清免疫球蛋白E(Ig-E)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-13(IL-13)、白细胞介素-17(IL-17)水平的影响.方法:选择120例慢性荨麻疹患者随机分为对照组和观察组,每组60例.对照组采用盐酸西替利嗪治疗,观察组基于对照组采用自拟中药益气养血消风汤治疗,疗程1个月.评定两组的临床疗效,治疗前后免疫分析仪检测IgE浓度,放免法检测血清IFN-γ、IL-13、IL-17水平.结果:观察组总有效率明显高于对照组(90.00％ VS 60.00％,P＜0.05).与治疗前比较,2组患者治疗后血清IgE浓度明显降低,血清IFN-γ水平明显升高,IL-13、IL-17水平明显降低;观察组效果较对照组明显,2组间治疗后比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:自拟中药益气养血消风汤可提高盐酸西替例嗪治疗慢性荨麻疹患者的疗效,降低血清IgE浓度,升高血清IFN-γ水平,降低IL-13、IL-17水平是其部分作用机制.
