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大青叶中靛玉红提取方法的研究
目的优选大青叶中靛玉红的提取方法.方法以靛玉红含量为指标,采用单因素考察法考察生药粒径、提取时间对索氏提取结果的影响,另采用正交实验,考察生药粒径、提取剂用量、提取时间、提取次数等4个因素对超声结果的影响.结果超声法优于传统索氏提取法,佳超声提取条件为过40目的生药加入60倍量甲醇超声提取3次,每次提取30 min.结论超声提取法提取靛玉红提取效率高、操作简便、省时,有独特的优越性.
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清瘟解毒口服液质量标准的研究
目的:建立清瘟解毒口服液的质量标准控制.方法:用薄层色谱法对该制剂中金银花、苦杏仁、大青叶进行了定性鉴别.结果:方法简便易行,重现性好.结论:可以作为该制剂的质量控制方法.
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靛玉红对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子含量的影响
[目的]探讨中药青黛有效成分靛玉红对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠黏膜细胞因子含量的影响.[方法]采用5％葡聚糖硫酸钠(DSS)建立UC小鼠模型,将小鼠随机分为靛玉红高、低剂量组,美沙拉嗪组,模型1、2组和正常组,每组10只.其中模型组于造模7d时处死,其余各组于第7d开始灌胃给药,连续给药7d时处死.ELISA法检测结肠组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素4(IL-4)含量.[结果]与正常组比较,模型1组结肠黏膜TNF-α含量增高,IL-4含量减少,差异有统计学意义(P＜0.05)；与模型2组比较,靛玉红高、低剂量组和美沙拉嗪组TNF-α含量减少,IL-4含量增加,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]靛玉红减少TNF-α含量、增加IL-4含量可能是其治疗UC的主要作用机制.
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反相高效液相色谱法测定胆芩注射液中3种成分含量
目的 同时测定胆芩注射液中黄芩苷、靛玉红、绿原酸的含量.方法 采用反相高效液相色谱法 ,色谱柱为Kromasil- C18(150 mm×4.6 mm ,5 μm),流动为甲醇 -乙腈-0.4%磷酸( 40:13:47),流速为 1.0 mL·min-1 ,检测波长为 277 nm,柱温20 ℃.结果 黄芩苷、靛玉红、绿原酸分别在 2.10～21.00 μg·mL-1 (r＝0.999 9); 0.45～4.50 μg·mL-1(r＝0.999 9) 和0.25～1.85 μg·mL-1(r＝0.999 9)范围内呈线性关系,加样回收率分别为 100.2% (RSD＝0.34%),99.3%( RSD＝0.68%) 和 99.9%( RSD＝0.26%).结论 该方法简便 、快速、准确、灵敏、可靠、重复性好,一次测定多组分,可作为胆芩注射液质量控制方法.
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抗感利咽糖浆中靛玉红的鉴别和含量测定
目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定抗感利咽糖浆中靛玉红的含量.方法 采用薄层色谱法鉴别抗感利咽糖浆中的板蓝根(大青叶)所含的靛玉红;采用反相高效液相色谱法测定抗感利咽糖浆中靛玉红的含量,以Dikma DiamonsilTM C18(200 mm×4.6 mm,5 μm,)为色谱柱;流动相为甲醇-0.1%醋酸铵-醋酸(70:30:1);流速1mL·min-1;检测波长289 nm;柱温40℃.结果 HPLC法测定靛玉红可达基线分离,在1.512～24.192 μg·mL-1范围内线性良好,线性方程:Y=1.900×107X-6.486×104(r=0.999 5,n=5).3次测定平均加样回收率为103.9%.RSD为1.88%.结论 该法操作简便,结果准确,重现性好,可作为该制剂的质量控制方法.
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清热解毒口服液中黄芩苷和连翘苷及靛玉红的含量测定
目的测定清热解毒口服液中黄芩苷、连翘苷及靛玉红的含量.方法采用柱切换高效液相色谱法,Kromasil C18分析柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(53 ∶47),检测波长280 nm,流速1 mL·min-1,柱温20℃.结果黄芩苷、连翘苷及靛玉红分别在2.50～25.0(r＝0.999 9);2.08～20.82(r＝0.999 9)和0.51～5.10 μg·mL-1(r＝0.999 9)范围内呈线性关系.黄芩苷、连翘苷及靛玉红的加样回收率分别为98.9%(RSD＝1.2%),99.6%(RSD＝1.1%)和103.1%(RSD＝2.2%).结论该实验方法简便,可靠,可为提高药品质量标准提供参考.
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小儿外感高热颗粒剂质量标准研究
目的:采用双波长分光光度法测定小儿外感高热颗粒剂中大青叶的有效成分靛玉红及靛蓝.方法:根据靛玉红及靛蓝的吸收特征,选取靛玉红的测定波长540 nm,参比波长634.6 nm;靛蓝的测定波长566 nm,参比波长513.8 nm.结果:靛玉红浓度在10.0～60.0 μg*mL-1范围内的回归方程为:C红＝44.614 9△A1-0.602 4,r＝0.999 8;靛蓝浓度在4.0～24.0 μg*mL-1范围内的回归方程为:C蓝＝21.739 1△A2-0.119 6,r＝0.999 6.结论:该操作方法简便,快速,结果准确,适用于该制剂质量控制.
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高效液相色谱法测定小儿咳喘灵颗粒中靛蓝与靛玉红含量
目的 建立小儿咳喘灵颗粒中靛蓝与靛玉红含量测定方法.方法采用高效液相色谱法,依利特Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(70:30);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:289 nm;柱温:30 ℃.结果 靛蓝的线性范围为0.002 4～0.047 0 μg(r＝0.999 6),平均回收率为99.53%,RSD＝0.74%(n＝6);靛玉红的线性范围为0.002 8～0.055 0 μg(r ＝ 1.000 0),平均回收率为99.16%,RSD ＝ 1.04 %(n ＝ 6).结论 该方法准确可靠、简单快速,可用于小儿咳喘灵颗粒质量控制.
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反相高效液相色谱法同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量
目的：建立反相高效液相色谱法测定大青叶药材中靛蓝和靛玉红的含量。方法采用 Agilent TC￣C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇￣水(75：25)为流动相,流速1.0 mL. min－1,柱温25℃,检测波长290 nm。结果靛蓝和靛玉红分别在0.0103~1.0320μg,0.0098~0.9840μg 范围内线性关系良好；平均回收率分别为99.73％,100.44％(n＝6)。结论河北安国产大青叶中靛蓝、靛玉红含量较高,品种质量较好。该方法简便、快速、准确重复性好,可为大青叶药材的质量控制提供实验依据。
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不同产地及不同药用部位马蓝中靛蓝和靛玉红的含量测定
目的：建立反相高效液相色谱( RP-HPLC)法同时测定不同产地、不同药用部位马蓝中靛蓝、靛玉红的含量。方法选用 Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm，5μm )，流动相为甲醇-水(75??25)，柱温25℃，流速1.0 mL??min－1，检测波长290 nm。结果靛蓝在0.0513~0.8208μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r＝0.9993)，平均回收率为99.00％，RSD为1.30％(n＝6)。靛玉红在0.0495~0.7920μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r＝0.9999)，平均回收率为98.88％，RSD为1.51％( n ＝6)。结论马蓝中靛蓝、靛玉红因产地和药用部位的不同，含量差异较大。该方法操作简便、快速、可靠，可为马蓝药材的质量控制提供实验依据。
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高效液相色谱法测定抗感利咽糖浆中靛玉红的含量
目的:建立抗感利咽糖浆中靛玉红的含量测定方法.方法:以Dikma Diamonsil TM C18(200 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱;流动相为甲醇-0.1%醋酸铵-醋酸(70:30:1);流速1 ml·min-1;检测波长289 nm;柱温40 ℃.结果:靛玉红在0.02～0.24 μg范围内线性良好,r=0.999 5.平均加样回收率为101.3%,RSD 1.1%(n=6).结论:该法操作简便,结果准确,重现性好,可作为该制剂的质量控制方法.
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大青叶配方颗粒质量标准研究
目的：：建立大青叶配方颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法鉴别配方颗粒中的靛蓝、靛玉红,采用醇溶性浸出物测定法中的热浸法测定浸出物的含量,采用高效液相色谱法测定靛玉红的含量。结果：薄层色谱斑点清晰,分离度好；浸出物的含量限度初步拟定为应不少于12.0%；含量测定中,靛玉红在0.50~8.04μg·ml-1质量浓度范围内线性关系良好( r=0.9999),平均回收率为99.41%,RSD为1.21%(n=9),并初步确定靛玉红的含量应不得少于50.0μg/袋。结论：建立的定性定量方法操作方便、结果准确、专属性强,可用于大青叶配方颗粒的质量控制。
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HPLC法同时测定青黛有效成分靛蓝和靛玉红的含量
目的:以HPLC法同时测定青黛中有效成分靛蓝和靛玉红的含量,为<中国药典)2010年版一部中关于青黛饮片质量标准的制定提供依据.方法:采用HPLC法,分别对系统适用性、准确度、重复性、专属性、线性范围、耐用性进行研究;分别考察样品制备的提取方法、提取溶媒、提取时间、溶媒用量;比较本法与<中国药典)2005年版方法.结果:本方法的系统适用性、准确度、重复性、专属性、线性范围、耐用性均符合要求;12批各地样品中靛蓝的含量为(1.70±0.04)%～(3.33±0.15)%,靛玉红的含量分别为(0.09±0.01)%～(0.30±0.01)%;本法测定的靛蓝和靛玉红的含量分别为<中国药典>2005年版方法的1.02倍和1.52倍.结论:本法科学、合理、可行;能同时测定青黛中靛蓝和靛玉红含量,符合现行药典简便、快速、准确的要求.
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复方板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红的含量测定
目的:建立复方板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红的含量测定方法.方法:采用HPLC法,色谱柱Kromasl ODS,流动相甲醇-0.5%醋酸溶液(78:22),流速1.0 ml·min-1;检测波长280 nm.结果:靛蓝、靛玉红分别在0.0502～1.004 μg和0.0486～0.972 μg范围内,进样量与各自的峰面积呈良好的线性关系.平均加样回收率为靛蓝97.7%,RSD=1.40%;靛玉红96.9%,RSD=1.43%(n=6).结论:本方法简便,快速,准确,可作为该制剂的质控方法.
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金叶败毒颗粒质量标准的实验研究
目的:建立金叶败毒颗粒的质量标准.方法:采用薄层色谱法鉴别其中绿原酸、靛玉红;采用高效液相色谱法,在YWGC18柱(4.6 mm×250 mm)上,以乙腈-水-冰醋酸(3∶46∶1)为流动相,流速1.5 ml·min-1,检测波长为328 nm,测定其中绿原酸的含量.结果:绿原酸、靛玉红的薄层色谱鉴别方法有良好的重现性、专属性;绿原酸在0.30～3.00 μg呈良好的线性关系(r=0.999 6),其含量测定方法稳定、精确,平均回收率达96.3%±1.5%.结论:制定的质量标准可以保证金叶败毒颗粒的质量.
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锡类含片的质量控制
目的:建立锡类含片的质量控制标准.方法:采用薄层色谱鉴别本制剂中的青黛、牛黄、冰片.采用高效液相色谱(HPLC)法测定本制剂中的靛玉红含量.结果:薄层色谱可鉴别出青黛,靛玉红、冰片的特征斑点.HPLC法测定的靛蓝在20～1000 ng范围内线性关系良好,r=0.9997;平均回收率为99.03%,RSD为2.14%(n=5).结论:本方法简便可靠,专属性强,重复性好,可用于该制剂的质量控制.
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槐莲胶囊水提醇沉工艺的研究
为探讨槐莲胶囊水提醇沉工艺的佳条件,通过正交试验,并采用薄层扫描法测定方中大青叶中靛玉红的含量,结果该方水提醇沉工艺的佳条件为加15倍量水煎煮1小时,醇沉浓度85%.
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靛玉红对神经胶质瘤细胞U251的增殖抑制及Bcl-2表达的影响
目的 探讨天然中药单体小分子化合物靛玉红(Indirubin)对人类神经胶质瘤的潜在治疗作用.方法 选择人类多形性胶质母细胞瘤U251细胞株作为细胞模型,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测0、5、10、20、50 μM的靛玉红对U251细胞增殖的抑制作用,并通过免疫蛋白印迹(Western blot)检测靛玉红作用后Bcl-2表达量的变化.同时构建U251细胞裸小鼠皮下异种移植肿瘤动物模型,给予小鼠腹腔注射靛玉红药物干预及溶剂对照处理,观察靛玉红对皮下肿瘤生长的影响并通过免疫组织化学染色方法分析皮下肿瘤中Bcl-2表达水平.结果 20μM靛玉红明显抑制U251的细胞增殖并剂量依赖性地降低Bcl-2的蛋白表达量;体内动物实验给药剂量为20mg/(kg·d)的靛玉红能减少皮下肿瘤中Bcl-2的阳性表达率.上述结果的各组间比较均具有统计学意义(P均＜0.01).结论 靛玉红对神经胶质瘤的抑制作用可能是通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达的分子机制而实现.
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薄层扫描法测定复方公英片中靛玉红的含量
采用双波长薄层扫描法测定复方公英片中靛玉红的含量,方法简单,结果稳定,可作为该产品的定量控制方法.
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复方黄黛片中青黛鉴别与含量测定
目的:建立复方黄黛片中青黛的薄层色谱(TLC)鉴别方法及高效液相(HPLC)法同时测定靛蓝、靛玉红含量.方法:TLC法对复方黄黛片中青黛进行定性鉴别.HPLC法对复方黄黛片中靛蓝及靛玉红的含量进行测定,色谱柱Agilent TC-18色谱柱(5μm,4.6mm×250 mm);流动相甲醇-水(75:25);流速1mL·min-1;柱温25℃;检测波长292nm.结果:TLC结果表明青黛标准药材、靛蓝、靛玉红及供试品斑点清晰,阴性空白无干扰.HPLC结果表明,靛蓝在0.208～1.04μg、靛玉红在0.088～0.44μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.95％(RSD=1.59％)和99.30(RSD=1.86).结论:TLC和HPLC试验结果表明,试验方法简便、准确,可用于复方黄黛片中青黛的鉴别及靛蓝和靛玉红含量的测定.
