Gax基因对血管平滑肌细胞生物学行为的调控作用

血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡异常是血管再狭窄发生的重要机制.血管平滑肌细胞多年来一直是再狭窄防治针对的靶点.Gax基因是一种同源异形盒基因,其编码产物是一种核转录因子,可以激活或抑制其下游基因的表达.Gax基因对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡有调控作用,提示Gax基因是一理想的再狭窄基因治疗的候选基因.

血管平滑肌细胞增殖及其调控

血管壁受损是导致血管平滑肌细胞增殖的起始原因.损伤刺激通过细胞内的信号转导可引起许多原瘤基因的表达和细胞因子生成,从而使血管平滑肌细胞增殖和凋亡的平衡被打破,导致血管平滑肌细胞过分增殖.通过干预细胞内信号转导通路或/和调节相关基因的表达以阻断血管平滑肌细胞增殖可望成为治疗此类心血管疾病的有效途径.

细胞周期基因调控策略在血管成形术后再狭窄防治中的应用

血管成形术后再狭窄的主要病理特征是血管平滑肌细胞过度增殖.血管平滑肌细胞增殖有其自身调控机制,应用细胞周期调控基因预防血管成形术后再狭窄是近年研究的新思路和热点,本文综述了该领域的新进展.

他汀类药物对血管平滑肌细胞的直接作用及其意义

新近研究发现,HMG-CoA还原酶抑制剂不仅是强力调血脂药物,同时还具有广泛的非调脂作用(如直接改善内皮功能、抑制血小板聚集、抗炎症反应等),其抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移、影响其凋亡及胶原合成的作用,在他汀类药物抗动脉粥样硬化中占有重要地位.

茶与心血管疾病关系的研究进展

本文描述了茶叶与心血管疾病的关系,茶叶预防动脉粥样硬化的效果,并对茶叶中有效成分的作用机制作了简要综述.

活性氧的氧化还原机制在介入性损伤后血管平滑肌细胞增殖中的作用

介入性动脉损伤后,局部血管平滑肌细胞和成纤维细胞均可通过NADH/NADPH氧化酶途径产生活性氧.而活性氧作为第二信使可改变细胞内氧化还原平衡状态,直接或间接地激活细胞内多种信号蛋白激酶和转录因子,促进血管平滑肌细胞增殖,终导致血管再狭窄.

凝血酶对大鼠血管平滑肌细胞血小板源生长因子受体基因表达的影响

为了研究凝血酶对血管平滑肌细胞血小板源生长因子受体基因表达的影响，探讨凝血酶刺激血管平滑肌细胞增殖的机制，通过培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，用斑点杂交检测凝血酶对血管平滑肌细胞血小板源生长因子受体mRNA的表达。结果发现培养的血管平滑肌细胞在基础状态下可表达血小板源生长因子α受体和β受体mRNA，凝血酶在作用于血管平滑肌细胞2～12 h抑制了血管平滑肌细胞血小板源生长因子α受体β受体mRNA的表达，24～48 h后血管平滑肌细胞血小板源生长因子α受体β受体mRNA的表达恢复到基础状态。提示凝血酶对血管平滑肌细胞具有较强的促增殖作用；凝血酶显著降低了血管平滑肌细胞血小板源生长因子α受体β受体mRNA的表达。

Ⅱ型胶原酶/弹性蛋白酶消化法培养大鼠血管平滑肌细胞

为快速、成功培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,在无菌条件下分离大鼠胸主动脉,并剥离外膜及内皮,然后用Ⅱ型胶原酶/弹性蛋白酶消化血管中层.2 h左右完全消化成单个细胞时,离心收集细胞,然后重悬、接种细胞.24 h后便可见细胞贴壁,4～5天便可传代.传至第3代时,用台盼蓝检查细胞存活率为96%,光镜和免疫组织化学鉴定培养细胞,培养细胞纯度为97%.与国内报道的贴块法及消化法相比,用酶解法培养血管平滑肌细胞的培养周期缩短4～5天,能更好的保护细胞,维持细胞形状.

不同程度氧化修饰的低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞增殖的影响

沥水调脂胶囊对弱氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1及血管内皮细胞P选择素表达的影响

肾上皮样血管平滑肌脂肪瘤的临床诊治分析

目的 探讨肾上皮样血管平滑肌脂肪瘤(AML)的临床特点及诊治经验.方法 回顾性分析4例肾上皮样AML的临床及病理特征.肾上皮样血管平滑肌脂肪瘤患者4例.肿瘤单发3例,多发1例.肿瘤直径4.5～ 12cm.CT检查发现肿瘤内含脂肪组织(CT值-80～ 30HU)2例,术前诊断为肾癌2例,肾血管平滑肌脂肪瘤2例.2例术前诊断为AML者采用保留肾单位手术,术前诊断为肾癌者2例行根治性肾切除.结果 病理检查报告:肿瘤有不完整假包膜3例,切面棕褐色或灰白色;1例肾根治性切除者肿瘤无包膜,呈浸润性生长,累及肾门血管周围脂肪组织,肿瘤中心有出血坏死灶;2例肿瘤内缺乏脂肪组织,可见多少不等的异常厚壁血管和平滑肌,上皮样肿瘤细胞围绕血管壁呈片状或腺泡状分布.免疫组化染色结果:黑色素细胞标记物(HMB45)和平滑肌标志物(SAM)阳性,上皮细胞标记(CK、EMA)阴性.结论 肾上皮样血管平滑肌脂肪瘤是较为罕见的具有恶性潜能的肿瘤,多为良性,部分缺乏脂肪组织,诊断中需要注意与肾细胞癌鉴别,手术为主要治疗方法.

白细胞介素6刺激人近端肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白的表达

目的 观察重组人白细胞介素6(rIL-6)在体外对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 浓度为25 ng/mL的IL-6刺激HK-2细胞,在0 h、24 h、48h、72 h不同时间点,分别应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光技术检测HK-2细胞中α-SMA mRNA及蛋白的表达.结果 与刺激前比较,IL-6以时间依赖方式上调HK-2细胞α-SMA mRNA的表达、α-SMA蛋白表达逐渐增强.结论 IL-6可诱导体外培养的肾小管上皮细胞表达α-SMA.

阴茎海绵体平滑肌细胞培养进展

阐述阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)培养对目前研究勃起功能障碍的重要性.比较CCSM与其他平滑肌细胞培养的差异,同时比较两种不同的CCSM培养方法结果的异同,为研究勃起功能障碍培养CCSM方法的选择提供参考.

膀胱出口梗阻平滑肌细胞分子蛋白变化的研究进展

良性前列腺增生症(BPH)是老年男性常见病,BPH共同的病理生理基础是膀胱流出道梗阻(BOO),BOO引起膀胱逼尿肌功能的异常.而结构改变是功能变化的基础,本文对膀胱出口梗阻平滑肌细胞分子蛋白变化的研究进展进行综述,以期加深理解膀胱功能变化的分子结构基础.

血管平滑肌细胞参与慢性肾脏病血管钙化的研究进展

血管钙化(vascular calcification,VC)是终末期肾衰患者心脑血管事件发生的主要原因,血管钙化是指羟磷灰石矿物质沉积于血管系统的病理过程,多种机制参与了血管钙化的发生,包括血管平滑肌细胞的凋亡与表型转化,血管钙化抑制因素和促进因素的不平衡等.近研究认为血管平滑肌细胞在慢性肾脏病患者血管钙化发生起重要作用,本文对血管平滑肌细胞参与慢性肾脏病血管钙化的研究进展进行综述,为揭示慢性肾脏病血管钙化的发病机制和防治提供理论依据.

ROCKⅠ/Ⅱ基因下调对TGF-β1诱导的人主动脉平滑肌细胞迁移及增殖的影响

目的:探讨Rho激酶Ⅰ/Ⅱ(ROCK Ⅰ/Ⅱ)对转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导的人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMCs)迁移及增殖的影响.方法:比较转染ROCK Ⅰ siRNA、ROCK Ⅱ siRNA、TGF-β1单独处理、转染ROCK Ⅰ siRNA或ROCKⅡsiRNA 后加TGF-β 1处理的HA-VSMCs中ROCK Ⅰ和ROCK Ⅱ蛋白表达;比较TGF-β1单独处理、转染ROCKⅠsiRNA或ROCKⅡsiRNA后加TGF-β 1处理以及用ROCK Ⅰ抑制剂Y-27632后加TGF-β1处理的HA-VSMCs的迁移与增殖能力.实验均以无处理的HA-VSMCs为空白对照.结果:与空白对照HA-VSMCs比较,TGF-β1单独处理后HA-VSMCs的ROCKⅠ蛋白表达明显升高(P＜0.05),而ROCK Ⅱ蛋白表达无明显变化(P＞0.05);ROCKⅠsiRNA或ROCKⅡsiRNA转染后HA-VSMCs中各自靶蛋白表达明显降低(均P＜0.05),TGF-β 1诱导的ROCKⅠ蛋白表达升高被ROCKⅠsiRNA转染明显抑制(P＜0.05).与空白对照HA-VSMCs比较,TGF-β 1单独处理后HA-VSMCs细胞迁移数明显增加(P＜0.05),该作用被ROCKⅠsiRNA转染及Y-27632处理明显抑制(均P＜0.05),而不被ROCKⅡsiRNA转染影响(P＜0.05);TGF-β1单独处理后HA-VSMCs增殖明显增强(P＜0.05),而无论ROCKⅠsiRNA、ROCKⅡsiRNA转染或Y-27632处理均对TGF-β1的增殖诱导作用无明显影响(均P＞0.05).结论:ROCK Ⅰ可能在TGF-β1诱导的HA-VSMCs迁移中起主要作用,而ROCK Ⅰ和ROCKⅡ可能均不参与TGF-β1诱导的HA-VSMCs增殖.

曲张大隐静脉源性血管平滑肌细胞表型与功能的变化

目的:探讨曲张大隐静脉源性血管平滑肌细胞(VSMCs)表型与功能的变化.方法:收集13例曲张大隐静脉(曲张组)与15例正常大隐静脉(正常组)标本,分离和培养两组标本中的VSMCs.检测两组VSMCs的增殖、迁移、黏附、衰老与骨架蛋白表达,以及凋亡相关因子与细胞外基质代谢相关因子的表达.结果:与正常组VSMCs比较,曲张组VSMCs骨架蛋白F-actin表达增加;增殖能力与迁移、黏附、衰老细胞数均明显增加(均P＜0.05):促凋亡因子Bas与凋亡执行因子caspase-3的mRNA、蛋白表达明显降低,而凋亡抑制因子Bcl-2的mRNA、蛋白表达明显升高(均P＜0.05);基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)与基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1、TIMP-1)的mRNA、蛋白表达均明显升高(均P＜0.05).结论:曲张大隐静脉源性VSMCs有明显去分化现象,其增殖和合成能力增强,VSMCs表型和功能的异常可能是静脉曲张发病机制之一.

HMGB1促进血管平滑肌细胞增殖与迁移的机制研究

目的:探讨高迁移率蛋白B1(HMGB1)促进血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与迁移的机制.方法:检测人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)与HMGB1孵育后增殖与迁移的活性、晚期糖基化终产物受体(RAGE)与P38MAPK表达改变,以及RAGE抗体、P38MAPK抑制剂SB203580预处理的影响.结果:HMGB1孵育后,HA-VSMC增殖与迁移活性、RAGE和P38MAPK的表达均明显增加(均P＜0.05),且均呈一定的浓度依赖性.用RAGE抗体和SB203580预处理后,HMGB1促进HA-VSMC增殖及迁移的作用均被明显抑制(均P＜0.05),RAGE抗体预处理后,HMGB1对P38MAPK表达的诱导作用明显抑制(p＜0.05).结论:HMGB1可能通过与细胞表面RAGE受体结合,激活P38MAPK表达进而促进VSMC的增殖及迁移.

人大隐静脉平滑肌细胞体外培养及其生长特性分析

目的:探讨人血管平滑肌细胞(VSMC)体外培养方法及其生长的特性.方法:采用组织块贴壁结合酶消化法培养人大隐静脉VSMC并传代,以形态学观察、免疫荧光染色法、考马斯亮蓝染色法鉴定细胞；以台盼蓝染色法、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、绘制生长曲线、划痕法测定细胞成活率、增殖及迁移能力.结果:原代培养5～7 d细胞从组织块爬出,传代细胞呈“峰-谷”样生长；胞质内α-平滑肌肌动蛋白免疫荧光染色阳性；考马斯亮蓝染色可见VSMC细胞骨架呈致密束状；传代细胞成活率为97％；生长曲线呈类“S”形；细胞生长3～6 d内光密度值变化明显；无血清培养的VSMC在24 h内划痕宽度变化显著.结论:体外培养的VSMC纯度高,结构、功能良好,为收缩表型,细胞生长第3～6天增殖活力较强,24 h内迁移能力强.

let-7a对血管平滑肌细胞迁移、增殖功能调控作用的体外研究

目的:观察let-7a对体外培养血管平滑肌细胞(VSMC)迁移和增殖能力的影响.方法:分离大鼠胸腹主动脉VSMC,并传代培养.将培养的VSMC通过慢病毒表达载体分别转染let-7a模拟物(实验组)及其阴性对照物(阴性对照组),或不做转染处理(空白对照组).通过绿色荧光蛋白的表达估计转染效率；用real-time PCR检测各组细胞let-7a的表达水平；用细胞划痕试验和CCK-8法分别检测各组细胞的迁移能力及增殖情况.结果:荧光显微镜观察显示,96 h后细胞的转染效率达85％以上；real-time PCR结果显示,实验组VSMC的let-7a表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组(均P＜0.01)；细胞划痕试验与增殖检测结果显示,实验组的细胞迁移数及增殖率明显低于阴性对照组和空白对照组(均P＜0.01).阴性对照组与空白对照组间上述项目无明显差异(均P＞0.05).结论:let-7a对体外培养的VSMC迁移与增殖有抑制作用.