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抗乙型肝炎病毒β-L-(-)型核苷类似物的研究
早在上世纪50年代,人们就发现通过抑制细菌核酸合成可以达到抑制细菌生长的作用,并相继有许多抗菌素的问世.此后,又发现核酸合成抑制剂具有较强的抗病毒作用.20世纪80年代以来,核苷衍生物作为嘌呤核苷和嘧啶核苷在核酸合成过程中的抑制剂,已经逐步成为抗病毒药物的研究热点,特别在抗艾滋病病毒(HIV)和乙型肝炎病毒(HBV)等方面.随着新的核苷类似物不断出现,关于其体内外抗病毒作用、代谢、毒性等方面的研究也不断深入.本文就核苷类似物在抗HBV方面的研究状况进行简要综述.
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炎琥宁氯化钠注射液与复方氨基酸存在配伍反应
炎琥宁是一种新型抗病毒药物,系穿心莲提取物经酯化、脱水、成盐精制而成.其化学名称是14-脱羟-11、12-二脱氢穿心莲内酯-3,19-二琥珀酸半酯钾钠盐.炎琥宁氯化钠﹙炎琥宁0.2g 氯化钠0.9g﹚注射液为微黄绿色至淡黄绿色的澄清液体,具有清热解毒及抗病毒作用,主要用于病毒性肺炎和病毒性上呼吸道感染.复方氨基酸(18AA)是有18种氨基酸与山梨醇配制而成的灭菌水溶液,为无色澄清的液体,呈酸性,用于蛋白质摄入不足、吸收障碍等氨基酸不能满足机体代谢需要的患者.亦用于改善手术后病人的营养状况.
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甘露消毒丹的来源与现代应用概况
近年来,甘露消毒丹在临床和实验中应用很多,甘露消毒丹在抗病毒方面的实验研究颇多,主要集中在抗感染性疾病方面.本文就甘露消毒丹的来源与现代临床和实验研究作一综述.1来源甘露消毒丹究竟来源何处,近年来,医家对甘露消毒丹的出处众说纷纭.现在主要有两种说法:一是甘露消毒丹出于《续名医类案》,二是甘露消毒丹出于《医效秘传》.查阅《续名医类案·卷五·疫证》[1]:“雍正癸丑,疫气流行,抚吴使者,嘱叶天士制方救之.叶曰:时毒疠气,后天太阳寒水湿寒合德,挟中运之火流行,气交阳光不治,疫气大行,故凡人之脾胃虚者,乃应其疠气……湿犹在气分,甘露消毒丹治之.”《续名医类案·卷五·疫证》中提到了甘露消毒丹,这本书为清代魏之琇所著,成书于清乾隆三十五年(1770年).
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甘露消毒丹抗病毒作用研究概况
甘露消毒丹又称普济消毒饮,出自于《续名医类案》,是治疗湿温时疫的良方,具有利湿化浊、清热解毒的功效.笔者通过整理分析近10年来有关该方在抗病毒方面疗效的文献,揭示该方无论是在临床还是在动物实验,在体内还是体外都表现出明显地抑制病毒的作用.现将文献综述如下.
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藤梨根抗病毒活性部位的初步筛选
目的 通过体外药效实验筛选藤梨根的抗病毒活性部位,初步确定其活性部位的大致成分,为进一步开发利用藤梨根奠定基础.方法 通过MTT实验及对HBsAg和HBeAg的检测,筛选抗乙肝病毒的活性部位.结果 乙醇提取部分(A1)、乙酸乙酯提取部分(Y)对HBeAg和HBsAg的抑制率TI>2,提示对两者抑制作角较强,对试验细胞无明显毒性.结论 根据结果初步认为A1是藤梨根抗肝炎病毒的活性部位,在体外有较强抗肝炎病毒活性,对正常细胞的影响较小.
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穿心莲水提取物的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒作用
目的 观察穿心莲水提取物体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)的作用.方法 以无环鸟苷(ACV)为阳性对照,将不同稀释浓度的穿心莲水提取物在兔肾细胞上进行治疗、预防及中和实验,通过观察细胞病变(CPE),观察穿心莲水提取物抗HSV-Ⅰ的作用效果.结果 穿心莲水提取物半数毒性浓度(TC50)为2.50g/L,有效抑制浓度为0.63 g/L,对Ⅰ型疱疹病毒的感染有抑制病毒生长和对病毒颗粒有直接杀伤作用.结论 穿心莲水提取物体外有明显的抗Ⅰ型疱疹病毒的作用.
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槲皮素和穿心莲内酯的体外抗病毒作用
目的:研究槲皮素和穿心莲内酯的体外抗甲型流感病毒(H1N1)、登革病毒2型(DV2)、柯萨奇B病毒(CVB3)以及呼吸道合胞病毒(RSV-A)的作用.方法:用MTT法,检测槲皮素和穿心莲内酯抗H1N1、DV2、CVB3以及RSV-A病毒的大无毒浓度、小有效浓度和治疗指数.结果:槲皮素对16HBE、C6/36、HeLa、Hep-2细胞的大无毒浓度分别为200、100、100、100 μ.g/mL,对H1N1、DV2、CVB3、RSV-A的小有效浓度分别为12.5、3.125、100、12.5 ug/mL,治疗指数分别为16、32、1、8；穿心莲内酯对16HBE、C6/36、HeLa、Hep-2细胞的大无毒浓度分别为50、100、100、50 μg/mL,对H1N1、DV2、CVB3、RSV-A的小有效浓度分别为25、6.25、100、6.25 μg/mL,治疗指数分别为2、16、1、8.结论:槲皮素和穿心莲内酯对H1N1、DV2、CVB3以及RSV-A均有一定的抗病毒作用.
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痰咳净不同剂型体外抗甲型流感病毒的实验研究
目的:探讨痰咳净不同剂型(溶液剂、粉雾剂、散剂)体外抗甲型流感病毒作用,以及剂型与作用的关系.方法:以利巴韦林作阳性对照药物,采用存留细胞结晶紫染色法测定痰咳净提取液(溶液剂)不同给药方式对甲型人流感病毒H3N2的体外抑制作用,确定具体作用方式;并以有效的给药方式对比研究痰咳净不同剂型的抗病毒作用;再运用血清药效学方法比较痰咳净不同剂型的大鼠血清样本的体外抗病毒作用.结果:痰咳净溶液剂有一定的抗甲型人流感病毒的作用,包括综合抑制作用和抑制病毒吸附后的复制增殖作用,其高抗病毒有效率为利巴韦林注射液的66.40%.溶液剂、粉雾剂和散剂在质量浓度为0.062 g/mL时的抗流感病毒的有效率分别为43.50%、41.50%和37.36%.血清药效学研究结果表明药物溶出较快的剂型药物吸收较多,血清抗病毒药效较好.结论:痰咳净不同剂型均有一定的体外抗甲型人流感病毒作用,粉雾剂效果优于散剂.
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热毒清口服液抑制呼吸道合胞病毒的体外实验研究
目的:评价热毒清口服液体外抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的效果.方法:采用MTT法及细胞病变抑制实验,以病毒唑为阳性对照,测定热毒清口服液在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用.结果:热毒清口服液的半数中毒浓度(TC50)为9182.4 mg/L,抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为559.8 mg/L,治疗指数(TI)为16.4.结论:热毒清口服液在体外实验中对呼吸道合胞病毒有显著抑制作用.
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中药复方有效部位的体外抗流感病毒作用
目的:研究中药复方有效部位(TCM-ES)的体外抗流感病毒FMI株(IFV-FM1)的作用.方法:采用微量细胞病变抑制法、中性红染色法、空斑抑制法,从TCM-ES的大无毒浓度开始,按Reed-Muench法计算药物对FM1感染狗肾传代细胞(MDCK)的半数有效浓度(EC50),小有效浓度(MTC),治疗指数(TI).进行空斑计数(PFU),计算其半数抑制浓度(IC50).结果:微量细胞病变抑制法表明,TCM-ES抗FMI的EC50为(300±18.3)mg/L,MTC为(75 ± 6.8)mg/L,TI为(7.1 ± 0.7);而利巴韦林的3项指标分别为(52.3 ± 10.1)mg/L、(25±4.1)mg/L和(20.8±5.1).中性红染色法显示,两药物的IC50分别为(285.0±19.2)ms/L和(45.3±4.9)mg/L,TI分别为(7.2 ±0.6)和(21.2 ± 3.1).两种方法测定的TCM-ES和利巴韦林的TI值无统计学差异(P＞0.05).通过PFU计数,TCM-ES的半数抑制浓度(IC50)为300 mg/L,利巴韦林的IC50为50 mg/L,与前述结果亦无统计学差异(P＞0.05).结论:TCM-ES体外具有一定的抗流感病毒作用,可作用于细胞内病毒,但其效果略差于利巴韦林,具有进一步研究和开发的价值.
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秋梨润肺浸膏对小鼠免疫功能及流感病毒的作用研究
目的:研究秋梨润肺浸膏对小鼠免疫功能的影响及对流感病毒鼠肺适应株(FMI)的体内防治作用.方法:小鼠舌下给予秋梨润肺浸膏,检测其体重、脾重及T、B细胞刺激指数等免疫指标;建立小鼠、鸡胚的流感病毒感染模型,观察药物对流感病毒增殖的抑制作用.结果:秋梨润肺浸膏使小鼠体重、脾指数及T、B细胞刺激指数增加;并有效阻止流感病毒对鸡胚的感染,降低了小鼠的死亡率.结论:秋梨润肺浸膏能增强小鼠免疫功能并具有一定的抗流感病毒作用.
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败酱草多糖提取、纯化、鉴定及其体外抗RSV作用研究
目的:提取、分离、纯化和鉴定败酱草多糖(AP4),并研究其对呼吸道合胞病毒的体外抑制作用.方法:经水提取、乙醇沉淀、离心、大孔吸附树脂两次层析、Sevag法脱蛋白得到败酱草多糖(AP4);用茚三酮法和紫外光谱分析鉴定该多糖,并用纸层析法对AP4组成成分进行确定.通过细胞培养法检测AP4对呼吸道合胞病毒增殖的抑制作用.结果:紫外光谱分析未见核酸和蛋白质的特征吸收峰,AP4是由葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、木糖等7种单糖成分组成的多糖.AP4半数中毒浓度(TC50)为10.89 mg/ml,抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.0801 mg/ml,治疗指数(TI)为135.95.结论:AP4是由7种单糖成分组成的多糖,其在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用.
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甘草抗病毒有效部位(GD4)体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究
目的:观察甘草抗病毒有效部位(GD4)抑制呼吸道合胞病毒(RSV)作用.方法:采用煎煮法、二氯甲烷萃取法和柱层析法提取分离得到甘草抗病毒有效部位(GD4).采用细胞病变抑制实验,观察GD4在Hela细胞中对RSV的抑制作用.结果:GD4半数中毒浓度(TC50)为0.23 mg/ml,抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为28.73μg/ml,治疗指数(TI)为8.0;GD4对RSV的抑制作用存在量效关系;在感染后至少12 h以内给药,GD4能够有效地抑制RSV的复制.GD4不含有甘草酸.结论:甘草抗病毒有效部位(GD4)在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用.
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大黄醇提液对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用
目的:研究大黄醇提液的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用.方法:分别以大黄醇提液及大黄蒽醌类衍生物作用于体外培养的2.2.15细胞,观察其对2.2.15细胞HBsAg与HBeAg分泌的影响,评价其抗HBV作用.结果:药物作用于2.2.15细胞11d,大黄醇提液对2.2.15细胞的半数毒性浓度为36.69g/L,大黄蒽醌类衍生物(大黄素、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄)对2.2.15细胞的半数毒性浓度分别为1.57g/L、57.30g/L、3.06g/L、＞63g/L.大黄醇提液对HBsAg、HBeAg的半数抑制浓度分别为3.29g/L、2.34g/L,治疗指数分别为12.06、16.96;大黄蒽醌类衍生物(大黄素、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄)对HBsAg(HBeAg)的半数抑制浓度分别为1.26(1.74)、3.94(61.16)、0.57(3.54)、1.12(＞63),治疗指数分别为1.24(0.90)、14.54(0.94)、5.37(0.86)、＞52.07(1).结论:大黄醇提液在体外细胞培养中对两抗原的分泌有较好的抑制作用,其作用优于大黄蒽醌类衍生物.
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甘草体外抑制呼吸道合胞病毒作用研究
目的:开发安全有效的抗呼吸道合胞病毒的新药.方法:采用细胞病变抑制实验观察甘草在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用.结果:甘草半数中毒浓度(TC50)为3.43g/L;抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.2535g/L,治疗指数(TI)为13.53;甘草对呼吸道合胞病毒的抑制作用存在量效反应关系;在感染后0 h、2 h、4 h、6 h、8 h,甘草均有抑制呼吸道合胞病毒的作用.结论:甘草在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用,其作用机制是多途径的.
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莪术油喷雾剂的研制及抗病毒作用的实验研究
目的:研制莪术油喷雾剂,并对其抗病毒作用进行实验研究.方法:对莪术油葡萄糖注射液进行剂型改革,确定莪术油喷雾剂的处方和制备工艺,用HPLC法测定莪术醇和牻牛儿酮的含量,同时进行了莪术油喷雾剂体内外抗病毒实验.结果:制备的莪术油喷雾剂质量可控,对流感病毒,副流感病毒Ⅰ、Ⅲ,呼吸道合胞病毒,3、7型腺病毒有轻微抑抑制作用,对副流感Ⅱ型病毒有较强的抑制作用.结论:本莪术油喷雾剂制备简单易行,给药方便,具有一定的抗病毒作用.
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红背叶根体外抑制HCV亚基因复制子RNA表达活性部位筛选研究
目的:筛选红背叶根体外抑制丙型肝炎病毒(HCV)复制的活性部位.方法:以HCV亚基因复制子体外培养体系CBRH7919(Jneo3-5 B)为HCV复制模型,选用干扰素α联合利巴韦林为阳性对照药物,观察不同浓度红背叶根总提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位的抗HCV作用.采用荧光定量PCR检测HCV亚基因复制子RNA拷贝数,通过Western blot检测HCV功能蛋白NS3的表达,采用CCK-8法观察药物对细胞生长的影响.结果:红背叶根4种提取物中,乙酸乙酯部位对HCV RNA复制的抑制活性强,对NS3蛋白表达有明显干预作用,对HCV RNA表达表现出剂量依赖的抑制作用(P＜0.05).其比活较初始总提取物提高5.71倍,对HCV RNA半数抑制浓度为14.60 mg/L,对CBRH7919 (Jneo3-5B)细胞半数细胞毒性浓度为40.30 mg/L,治疗指数为2.76.结论:红背叶根乙酸乙酯部位可抑制HCV的复制,为抗HCV RNA表达的活性部位,在抗HCV方面有着潜在的用途.
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喹诺酮类药物研究新趋势
由于喹诺酮类物具有广谱抗菌活性且可口服给药,因此,开发的品种越来越多,临床应用也日趋广泛.尽管如此,由于其某些G+菌、厌氧菌的抗菌效果并不现想,中枢神经系统毒性及光毒性和耐药性等问题,抗癌及抗病毒作用的新发现,喹诺酮类药物研究呈现新趋势.
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具有抗病毒作用的中草药应用研究
无论是去年SARS病毒的流行还是今年禽流感病毒的传播,现代社会文明人深感病毒及其变异品种对人类和社会的危害.对付这种原始的或与人类起源以来就与之共生存的微生物,化学药物却略显无能为力.但传统药物学所提供的线索,例如,利用鸡胚培养、组织培养等体外方法,已经筛选出一批对流感病毒有效的中草药.
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清开灵注射液体对H1N1、H5N1和H7N9流感病毒的作用研究
目的 研究清开灵注射液体外抗H1N1、H5N1、H7N9流感病毒的作用.方法 以利巴韦林注射液作为阳性对照药物,通过测定细胞培养液上清血凝滴度(HA)和半数组织培养感染剂量(TCID50),评价清开灵注射液不同给药方式对H1N1、H5N1和H7N9流感病毒的抑制作用,并且通过MTT法测定清开灵注射液不同给药方式体外抗H1N1流感病毒作用.结果 清开灵注射液半数中毒浓度(TC50)为62.5 μL· mL-1;清开灵注射液有明显抑制流感病毒增殖的作用,以中和、治疗、预防的给药方式能显著降低H1N1、H5N1流感病毒的HA和TCID50,且以中和与治疗的给药方式作用强,以治疗的给药方式能显著降低H7N9流感病毒的HA和TCID50;清开灵注射液以中和与治疗的给药方式体外抑制H1N1流感病毒的半数有效浓度(EC50)分别为4.07 μL· mL-1和2.90 μL· mL-1,治疗指数(TI)分别为15.36、21.55.结论 清开灵注射液具有明显的体外抗H1N1、H5N1、H7N9流感病毒作用.
