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茶多酚的解毒作用研究进展
茶叶具有清头目、除烦渴、化痰、消食、利尿、解毒功能.茶多酚(Tea polyphenols,TP)是从茶叶中提取的一种多酚类化合物,其主要成分为儿茶素.已有研究发现,TP作为天然的自由基清除剂及抗氧化剂,具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、抗菌消炎、抗病毒作用及防治心血管疾病等多种药理作用[1].本文着重对其解毒作用进行如下综述.
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阿德福韦治疗慢性乙型肝炎的研究进展
长期应用核苷类似物后 HBV- DNA容易产生突变,从而产生耐药性,严重影响抗病毒治疗的效果 [1].阿德福韦( Adefovir, ADV)是近年新合成的核苷类似物,具有抗逆转录病毒、嗜肝病毒和疮疹病毒的广谱抗病毒作用. Adefovir dipivoxil( ADV- dpv)是 ADV的口服制剂,现已进入Ⅱ期临床试验阶段. ADV治疗以后,可出现血清 ALT水平升高,且患者有 HBcAg特异性 Th细胞增殖应答反应,提示 ADV不仅有抗病毒作用,还有免疫调节作用. ADV的优势就是对拉米夫定( LAM)等核苷类似物耐药的病毒株仍然具有抑制作用,可望成为解决核苷类似物耐药病毒株抗病毒治疗的有效办法 [2].
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通窍止咳液体外抗甲型人流感病毒作用研究
目的:研究通窍止咳液体外抗甲型人流感病毒的作用.方法:以利巴韦林作阳性对照药物.采用存留细胞结晶紫染色法测定通窍止咳液不同加药方式对甲型人流感病毒H3N2的体外抑制作用及其时效关系.结果:通窍止咳液对甲型人流感病毒具有良好的综合抑制作用及抑制病毒吸附后的复制增殖作用;通窍止咳液对病毒吸附的预防作用弱,无直接杀伤病毒的作用;随药物作用时间延长,通窍止咳液在低浓度时的抗病毒有效率呈降低趋势,在高浓度时的抗病毒能力基本不变.结论:通窍止咳液具有较好的体外抗甲型人流感病毒的作用.
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重组人干扰素α-2b脂质体凝胶的皮肤刺激性及抗病毒作用研究
目的 考察干扰素α-2b脂质体凝胶外用对皮肤的刺激性及抗病毒作用.方法 用健康家兔进行皮肤刺激性试验,用皮肤感染单纯疱疹病毒的豚鼠进行抗病毒试验.结果 干扰素α-2b脂质体凝胶对完整皮肤和破损皮肤均无刺激性,对疱疹病毒的皮肤感染具有缩短病程、促进结痂及痊愈的效果.结论 干扰素α-2b脂质体凝胶是一种安全有效的外用抗疱疹病毒药物.
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CRISPR-Cas9系统抑制乙型肝炎病毒复制相关研究
目的:探讨成簇的、规律间隔的短回文重复序列-相关核酸酶9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats associated protein-9 nuclease,CRISPR-Cas9)技术的抗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)作用.方法:通过生物信息学筛选,获得12条靶向HBV基因组不同区域的sgRNA (single-guide RNA,sgRNA)并分别构建pspCas9-sgRNA质粒,与HBV1.3倍体复制质粒共转染至HepG2细胞,通过荧光定量PCR筛选能够有效抑制HBV复制的sgRNA,并使用Southern blot验证获得的sgRNA功能;使用新报道的重组共价闭合环状DNA(recombinant covalently closed circular DNA,rcccDNA)模型评估CRISPR-Cas9对HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的抑制水平,并通过克隆测序检测rcccDNA的突变状况;对C57小鼠进行尾静脉高压水动力注射(hydrodynamic injection,HDI)rcccDNA质粒与pspCas9-sgRNA,检测不同时间点外周血中乙型肝炎病毒s抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)及e抗原(hepatitis B virus eantigen,HBeAg)水平,通过免疫组化技术观察CRISPR-Cas9处理后肝脏中乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)水平,在动物水平评估CRISPR-Cas9对HBV复制的抑制作用.结果:所筛选的靶向乙型肝炎病毒基因组聚合酶编码区以及衣壳蛋白编码区的sgRNA5及sgRNA9能有效抑制细胞中HBV复制,分别使细胞复制模型中rcDNA降低至对照组的(43.64±4.66)％(P=0.000)和(44.86±2.25)％(P=0.000);在rCCCDNA细胞模型中证实2组sgRNA分别使cccDNA降低至对照组的(29.39±3.18)％(P=0.000)及(26.83±1.76)％(P=0.000);CRISPR-Cas9系统主要使rcccDNA的靶点区域发生以短片段缺失为主的突变,突变率位50％～60％.CRISPR-Cas9系统能够有效降低HBV水动力小鼠模型血清HBsAg(sgRNA5:P=0.000;sgRNA9:P=0.001)及HBeAg浓度(sgRNA5:P=0.000;sgRNA9:P=0.000);小鼠血清HBV DNA水平与对照组相比降低约1个lg值(sgRNA5:P=0.000;sgRNA9:P=0.001),肝脏免疫组化结果显示CRISPR-Cas9系统能够降低组织HBcAg表达.结论:CRISPR-Cas9系统作为一种基因编辑技术,能够在细胞水平及动物模型中发挥抗HBV作用,可以作为一种新型的抗病毒策略并为HBV感染的治疗提供了一个新的方向.
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人乳头瘤病毒假病毒体外感染模型的建立及人α防御素5抗病毒作用
目的 建立用人乳头瘤病毒16亚型假病毒(HPV-16 Psv)感染官颈癌细胞模型,并研究3种不同构型人α防御素5(HD-5)抗HPV的作用.方法 将表达HPV-16假病毒衣壳蛋白的重组质粒p16L1L2和含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的质粒Pfwb共转染293FT细胞,分离、纯化病毒颗粒后感染官颈癌细胞株C-33a,同时分别给予20 μg/ml的HD-5/N(天然构型)、HD-5/Acm(半胱氨酸被Acm修饰)或HD-5/Abu(半胱氨酸被Abu替换)处理,培养48 h后荧光显微镜观察和流式细胞分析病毒感染率.结果 Pfwb与P16L1L2成功转染293FT细胞并获得滴度达2.5×108TU/ml的HPV-16假病毒液,镜检和流式细胞术检测显示官颈癌细胞C-33a能够被假病毒感染并表达GFP.HD-5/N、HD-5/Acm和HD-5/Abu对HPV-16感染C-33a细胞的抑制率分别为(96.48±5.67)％、(69.02±7.88)％和(2.71±1.53)％.与HD-5/N相比,HD-5/Acm和HD-5/Abu的抗病毒作用显著降低(P＜0.01).结论 建立了基于流式细胞分析的HPV-16假病毒感染模型并将其用于抗病毒药物活性检测.发现HD-5的空间结构和分子中半胱氨酸对其抗HPV感染的活性有重要作用.
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氧化苦参碱通过调节T淋巴细胞亚群抑制HBV转基因小鼠的病毒复制
目的 观察氧化苦参碱对HBV转基因小鼠病毒复制的作用,并探讨其是否与调节T淋巴细胞亚群有关.方法 选取SPF级HBV转基因雄性小鼠36只,按随机数字表法分为模型组、氧化苦参碱组及拉米夫定组,每组12只,另取12只非转基因BALB/c雄性小鼠作为对照组.各组分别给予相应的药物治疗.观察各组小鼠肝脏组织病理变化,并检测血清及肝脏乙肝表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒HBV-DNA水平、血液T淋巴细胞亚群水平以及血清细胞因子水平.结果 治疗后,与模型组比较,氧化苦参碱组与拉米夫定组血清及肝组织HBsAg、HBV-DNA水平较低(P＜0.05),而氧化苦参碱组与拉米夫定组血清及肝组织HBsAg、HBV-DNA水平差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组比较,氧化苦参碱组与拉米夫定组血液CD3+、CD4+T淋巴细胞、CD4+/CD8+水平较高,且氧化苦参碱组＞拉米夫定组;CD8+T淋巴细胞水平较低,且氧化苦参碱组＜拉米夫定组(P＜0.05);氧化苦参碱组与拉米夫定组血清干扰素-y(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平较高,且氧化苦参碱组＞拉米夫定组;白细胞介素-4(IL-4)水平较低,且氧化苦参碱组＜拉米夫定组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 氧化苦参碱能有效抑制HBV转基因小鼠血清及肝组织HBsAg、HBV-DNA水平,该作用可能与调节T淋巴细胞亚群水平及Th1/Th2细胞因子水平、改善免疫功能有关.
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静脉滴注痰热清注射液致严重过敏性休克1例
痰热清注射液是中国第一个按指纹图谱检测生产的中药注射液（国药准字 Z20030054），其退热祛痰、抗菌、抗病毒作用，以及安全性、稳定性都取得中药注射液的历史性突破。临床上主要用于风温肺热病属痰热阻肺证［1］，其临床表现为：发热、咳嗽、咯痰不爽、口渴、舌红、苔黄等。该药可用于肺炎早期、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作及上呼吸道感染的治疗。经过多年的临床使用，疗效确切，安全性高［2］。随着痰热清注射液应用的日益广泛，该药的不良反应也逐渐增多，作者通过介绍本科1例因静脉输注痰热清注射液导致严重过敏性休克的病例，希望受到临床医师的高度重视。
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胸腺素α1联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床观察
慢性乙型肝炎感染仍是当今世界公认的治疗难题.目前对慢性乙型肝炎的治疗多采用综合治疗方法.鉴于病毒持续感染是导致乙型肝炎慢性化、肝硬变和原发性肝癌的重要因素[1],抗病毒治疗是其中的主要治疗措施之一.拉米夫定(LAM)可有效地抑制乙肝DNA的复制,改善患者肝功能和肝组织学,但HBeAg转阴率低,易出现耐药,停药后多病毒"反跳".胸腺素α1(Tα1)的抗病毒作用与干扰素类似,但因细胞免疫的滞后性,使起效时间慢.我们在临床中研究了拉米夫定与胸腺素α1联合治疗慢性乙型肝炎患者,并取得了良好的疗效.
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干扰素治疗乙型肝炎不良反应的护理
干扰素用于慢性乙肝患者的抗病毒治疗被证实有一定疗效,已较广泛用于临床.干扰素生物学作用机制在于通过激活细胞内基因,导致一系列蛋白质的合成,其中部分蛋白质具有抗病毒作用.
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可耐与天晴复欣序贯治疗慢性乙型肝炎疗效观察
可耐为非核苷类似物,具有广谱抗病毒作用,基础及临床研究表明,可耐抑制乙型肝炎病毒复制快而强,天晴复欣(氧化苦参素)注射液及其胶囊有类干扰素样的作用,对慢性乙型肝炎治疗持久而安全.为探索可耐与天晴复欣序贯治疗对慢性乙型肝炎的抗病毒疗效.对30例慢性乙肝报道如下:
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盐酸小檗碱体外抗单纯疱疹病毒1型的作用及机制研究
目的:探讨盐酸小檗碱体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用及作用机制.方法:MTT法检测盐酸小檗碱对Vero细胞的毒性作用,观察HSV-1感染Vero细胞后所致的细胞病变效应(Cytopathologic effects,CPE),实时荧光定量PCR法检测盐酸小檗碱对病毒蛋白gD的mRNA表达水平,免疫印迹(Western blot)法检测盐酸小檗碱对病毒蛋白ICP27和ICP8表达的影响.结果:盐酸小檗碱半数中毒浓度(TC.)为392.5 μmol/L,病毒半数抑制浓度(IC50)为66.49 μmol/L,选择性指数(SI)为5.9.实时荧光定量PCR结果显示盐酸小檗碱可降低HSV-1 gD的mRNA表达水平.Western blot显示盐酸小檗碱可明显抑制病毒蛋白ICP27和ICP8的表达.结论:盐酸小檗碱具有抗HSV-1的作用,可能与抑制病毒蛋白ICP27的表达进而影响ICP8和gD的表达有关.
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蒿蓝感冒颗粒抗甲型流感病毒作用的研究
目的:研究蒿蓝感冒颗粒在体内外抗甲型流感病毒的作用.方法:在体外用MTr法检测蒿蓝感冒颗粒对Hep-2细胞的毒性浓度,用CPE法观察蒿蓝感冒颗粒对甲型流感病毒致细胞病变的影响;在体内建立流感病毒感染小鼠模型,观察小鼠的死亡率、生命延长率及肺指数.结果:蒿蓝感冒颗粒在体外对流感病毒所致的Hep-2细胞病变有一定的抑制作用,其IC50为6.94 mg,/ml,TI为19.87;蒿兰感冒颗粒2.9、5.8、11.6g/kg三个剂量在体内均能明显降低流感病毒感染小鼠的死亡率,延长其存活时间,并能降低肺指数.结论:蒿蓝感冒颗粒具有明显的抗甲型流感病毒作用.
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朱砂七抗Ⅱ型单纯疱疹病毒的体外研究
目的:研究朱砂七粗提物和总蒽醌体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用.方法:运用单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ),以非洲绿猴肾细胞(Vero)作为宿主细胞,通过三种给药方式观察感染病毒后的细胞变性反应(CPE)和MTT比色法,检测不同浓度朱砂七粗提物和总蒽醌对Ⅱ型单纯疱疹病毒的直接杀灭、预防和阻止复制作用.结果:朱砂七粗提物和总蒽醌能抑制HSV-Ⅱ病毒的复制,但无预防和直接杀灭作用,朱砂七粗提物抑制HSV-Ⅱ病毒复制IC50为0.1008 mg/ml,治疗指数(TI)为6.2;总蒽醌抑制HSV-Ⅱ病毒复制IC50为0.0067mg/ml,治疗指数(TI)为11.66.结论:朱砂七粗提物和总蒽醌在体外具有明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅱ病毒复制的作用.
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熊胆贝母止咳胶囊体内抗病毒作用研究
目的:观察熊胆贝母止咳胶囊的抗病毒作用. 方法:流感病毒A1型(H1N1)鼠肺适应株FM1滴鼻感染前2天每天熊胆贝母止咳胶囊灌服1次,病毒感染后每天给药2次,连续6天,病毒感染后连续10天观察记录小鼠死亡情况,对存活小鼠处死,测定肺指数,计算肺指数抑制率. 结果:FM1鼠流感病毒液的血凝效价1/640,FM1鼠流感病毒液的LD50为10-3.5,熊胆贝母止咳胶囊三个剂量组的小鼠死亡抑制率分别为44.4%、33.3%和33.3%;而肺指数分别为1.57±0.1、1.76±0.23、1.80±0.25,与病毒对照组比较有显著差异. 结论:熊胆贝母止咳胶囊能降低感染流感病毒小鼠的死亡率,并能显著降低染毒小鼠的肺指数,表明其具有显著的体内抗病毒作用.
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莪术油软胶囊抗病毒作用研究
目的:研究莪术油软胶囊的抗病毒作用.方法:用MDCK和Hela细胞分别测定流感病毒A3及腺病毒7型毒力(TCID50)以及药物对各细胞的毒性;采用细胞病变(CPE)抑制法来测定药物对病毒的抑制作用.结果:莪术油对流行性感冒病毒A3及腺病毒7型半数有效浓度(IC50)分别为0.0008ml/ml和0.0004ml/ml;治疗指数(TI)分别为15和30.莪术油软胶囊160、80和40mg/kg灌胃,对流感病毒鼠肺适应株(FM1株)和合胞病毒(RSV)引起的小鼠肺炎,能明显降低肺指数,降低死亡率.结论:莪术油对流行性感冒病毒A3及腺病毒7型有一定的抑制作用.
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清热药抗病毒作用的文献再评价
目的:用文献再评价方法,对《中药药理学》教材中收载有抗病毒作用的12味清热药进行再评价,以确定每味药抗病毒作用的确切性.方法:对《中药药理学》教材中收载具有抗病毒作用的12味清热药,通过检索、整理和分析2016年以前公开发表的备味清热药抗病毒作用的原始研究文献,根据重复和综合评价等原则,自拟中药抗病毒作用的评价标准,进行文献再评价,以确定其抗病毒作用的确切性.结果:板蓝根、黄芩、鱼腥草、金银花、苦参和大青叶6味清热药抗病毒作用确切,连翘、知母、栀子、黄连和青蒿5味清热药抗病毒实验依据不足.北豆根未查到抗病毒的有关实验研究文献.
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中药皂苷抗病毒作用研究概况
病毒性感染如病毒性肝炎,流感、脑炎、肺炎、疱疹、爱滋病以及近几年引起世界恐慌的SARS和禽流感等,至今仍缺少效果确切的防治药物,进一步寻找和开发抗病毒有效成分意义重大.近年来国内外有关抗病毒中药的研究日益增多,从中筛选其有效成分已成为当前抗病毒新药研发的一个热点.
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cGAS——一种胞质DNA感应器的研究进展
机体天然免疫领域的新研究发现了一系列具有感应胞内核酸作用的蛋白质,其中受到广泛关注且已经得到确认的是一种被称为cGAS的蛋白质.cGAS全称Cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate synthase,即环磷酸鸟苷-腺苷合成酶.大量的研究已经发现cGAS能感应入侵宿主细胞的病毒性或细菌性DNA,通过重要分子cGAMP、STING的相关作用,产生大量的干扰素以及其他种类的细胞因子,进而发挥重要的抗病毒作用.本文就cGAS-DNA感应通路以及cGAS与抗病毒免疫反应及自身免疫性疾病的研究进展进行综述,以期为其功能研究提供良好的理论基础.
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抗解浸膏抗菌、抗病毒作用的观察
体外抗菌试验表明,抗解浸膏对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、甲及乙型溶血链球菌等革兰氏阳性细菌的MIC为1.56～56.0mg(生药)/ml,对大肠杆菌、克氏肺炎杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌和嗜血流感杆菌的MIC50为3.12～50.0mg(生药)/ml,对绿脓杆菌、产气杆菌的抑菌活性较低,MIC50和MIC90分别为50.0～200.0mg(生药)/ml,抗解浸膏还有一定的杀菌作用,MBC多数是MIC的2～4倍.抗解浸膏1∶40的浓度对流感病毒A3型在体外具有明显的抑制作用.
