首页 > 文献资料
-
轮状病毒肠炎患儿体液免疫和血锌水平变化及其相关性分析
目的 探讨轮状病毒(RV)肠炎患儿体液免疫和血锌水平变化及其相关性.方法 对68例RV肠炎患儿及126例同龄健康儿童的血清免疫球蛋白及锌水平进行比较,并分析血清锌及免疫球蛋白水平的变化在疾病组中的相关性.结果 RV肠炎患儿血清锌及IgA、IgG明显低于对照组,同时疾病组中血锌与IgA、IgG水平之间存在相关性.结论 RV肠炎患儿免疫功能的降低与血清锌水平的下降存在一定的相关性.
-
血友病A患者产生抗体3例
1病例报告例1:男,11岁.在本中心确诊为血友病A,FVⅢ:C 2.7%,vWF 132%.2002-01反复出现自发性血尿,在当地医院输注冷沉淀治疗8 d,效果不佳,怀疑产生FVⅢ抗体,来我中心进行FVⅢ抗体检测,抗体筛选实验显示:时间依赖性抗体阳性,即刻反应性抗体阴性;FVⅢ抗体定量实验为4 BU/ml血浆.给予冷沉淀800～1 000 IU/次,每12 h一次,连续输注2 d后,尿色变浅,并给予强的松500 mg,1次/d.第3天因经济原因患者家属要求减少FVⅢ用量,随后患者出现视物不清.CT显示颅内出血,家属放弃治疗,患者因颅内出血死亡.
-
GCIP-27多克隆抗体的制备及鉴定
目的:制备GCIP-27多克隆抗体,为GCIP-27的作用机制研究以及进一步的GCIP特异性免疫药物的研发提供重要的实验材料.方法:以含GCIP-27的融合蛋白凝胶为抗原免疫兔子,ELISA和Western blot分别检测多克隆抗体的效价和特异性.结果:3只动物中1只产生了高效价的抗血清,另2只产生的效价较低.GCIP-27多克隆抗体效价为1∶10 240,能与GCIP-27特异性结合.结论:用含GCIP-27的融合蛋白凝胶免疫兔子可有效地诱导免疫动物产生GCIP-27特异性抗体,为GCIP-27深入研究奠定了基础.
关键词： GTP结合蛋白质α亚单位/免疫学 抗体生成 -
儿童阻塞性睡眠呼吸暂停综合征外周血CD19+B淋巴细胞检测及其临床意义
目的探讨儿童阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)外周血CD19+ B淋巴细胞与睡眠呼吸障碍相关参数的关系.方法 OSAS患儿45例,根据呼吸暂停低通气指数(AHI)分为轻、中、重度病例组各15例,对照组为非OSAS儿童15例.采用流式细胞仪检测外周血CD19+ B淋巴细胞,并将结果进行统计学处理,分析该指标的变化情况及其与氧减指数(ODI)的关系.结果 OSAS组和对照组的CD19+ B淋巴细胞百分率分别为(18.38±5.42)%和(14.07±2.76)%,差异有统计学意义(t=2.94,P=0.0047).轻、中、重度病例组的CD19+ B淋巴细胞百分率分别为(15.47±3.09)%、(16.87±5.36)%和(22.80±4.65)%,与对照组比较差异有统计学意义(F=13.12,P=0.000).进一步两两比较显示,重度病例组的CD19+ B淋巴细胞百分率明显高于轻度病例组(q=8.73,P=0.000)、中度病例组(q=5.93,P=0.000)和对照组(q=7.93,P=0.000),而轻、中度病例组与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05).CD19+ B淋巴细胞百分率与ODI呈正相关(r=0.507,P=0.000).结论 重度OSAS患儿外周血CD19+ B淋巴细胞数目增加,提示体液免疫可能因缺氧而代偿性增强.
-
体液和细胞免疫检测对脓毒症的诊断评估价值
目的 观察细胞免疫和体液免疫检测指标对脓毒症患者的诊断和预后评估价值.方法 采用回顾性研究,选取144例脓毒症入院患者,根据脓毒症严重程度和不同预后分组,收集患者体液免疫和细胞免疫检查结果,比较体液免疫和细胞免疫各个指标对脓毒症的临床诊断评估价值.对于非正态分布的计量资料进行对数转换.结果 严重脓毒症组患者C3、C4、α2球蛋白水平均明显低于脓毒症组患者[(1.91±0.22)mg/dl vs.(2.02±1.02) mg/dl; (1.25±0.27) mg/dl vs.(1.40±0.31)mg/dl;( 11.75±3.66) mg/dl vs.(14.06±3.07) mg/dl,P均＜0.05].严重脓毒症β2微球蛋白水平高于脓毒症患者(0.86±0.70 vs.0.34±0.15,P＜0.05).死亡组C3水平明显低于生存组患者[(1.90±0.19)mg/dl vs.(1.98±0.18) mg/dl,P＜0.05]；β2微球蛋白水平高于生存组患者(-0.18±0.38 vs.-0.40±0.28,P ＜0.05).Logistic回归分析显示β2微球蛋白是脓毒症死亡的独立危险因子.然而,对于细胞免疫的各个指标,以不同严重程度和不同预后的脓毒症患者分组,结果均未发现有统计学意义.结论 C3、C4、α2球蛋白和β2微球蛋白有可能提示脓毒症病情严重程度,C3和β2微球蛋白具有评价脓毒症预后的潜在价值.
-
心胸创伤出血回输对机体体液免疫影响的研究
目的了解心胸创伤出血回输对机体体液免疫的影响情况,从体液免疫的角度论证术中和术后自体血回输的可行性和安全性.方法通过对免疫球蛋白、循环免疫复合物等项目的检测考察自体血回输对机体体液免疫的影响情况,并和创伤后不输血组以及创伤后输库血组进行比较.结果心胸创伤出血回输患者体内体液免疫指标的变化情况与创伤后不输血患者一致(P>0.05),与回输血量没有明显相关关系(大相关系数r=0.594,小相关系数r=-0.004).结论心胸创伤出血回输对机体的体液免疫没有不良影响.
-
嗜酒对乙型肝炎体液免疫影响的临床观察
长期以来,人们就认识到嗜酒对人体很多脏器都有不良影响,但迄今为止,嗜酒对疫苗接种后抗体生成的影响报告很少,对乙肝疫苗接种后,抗-HBs 生成的影响还未见报道.我们于2000年及2004 年两次对这一问题进行了临床观察.
-
危重患儿胃肠外营养指征与方法
危重患儿的机体各系统在创伤和严重感染等应激状态下,迅速出现应激分解代谢,机体这一应激反应的目的在于通过改变代谢途径,为不同细胞、组织提供所需营养物质,其结果是耗氧量增加,血糖升高,肌肉、内脏蛋白质分解,终导致血浆蛋白降低,抗体生成减少,特异性和非特异性免疫功能低下,严重影响疾病痊愈和生长发育.在早产儿甚至可影响脑细胞发育,导致不良后果,因此,危重患儿的营养支持尤为重要.
-
大剂量免疫球蛋白对免疫性周围神经病治疗机理的实验研究
目的探讨静脉注射免疫球蛋白 (IVIg) 对空肠弯曲菌脂多糖(CJ LPS)诱导的免疫性周围神经病的治疗机理.方法 (1) 在CJ LPS免疫大鼠后的不同时间,按400 mg/(kg*d)注射IVIg.第35天取坐骨神经进行病理学检查,ELISA方法检测血清中抗CJ LPS抗体滴度,免疫组化及原位杂交技术检测神经上特异性IgG及TNF-α mRNA表达;(2)在CJ LPS刺激下体外培养外周血单核细胞(PBMC),并分别在培养液中加入1、2.5、5、10 mg/ml IVIg.将上清分别注入同种大鼠的神经外膜下,7 d后进行病理学检查;采用原位杂交技术检测培养PBMC的TNF-αmRNA表达.结果 (1)IVIg干预下,经CJ LPS免疫大鼠神经原纤维病变率仅为1.0%,未干预者达15.0%,差异有显著性(P＜0.01).未干预组血清中抗CJ LPS特异性IgG滴度比干预组高9倍.IVIg干预组神经上无明显特异性IgG及TNF-α mRNA表达,而未用IVIg者表达强阳性;(2)CJ LPS免疫的大鼠PBMC的TNF-α mRNA,IVIg干预组(1.0%)比IVIg未干预免疫组 (9.5%)减少;(3)CJ LPS刺激下健康鼠PBMC体外培养,5 mg/ml和10 mg/ml大剂量IVIg干预组的TNF-αmRNA 阳性表达率(3%和2%), 较2.5 mg/ml和1 mg/ml小剂量组阳性率(13%和11.5%)为低(P＜0.01).其上清液神经外膜下注射后,大剂量干预组原纤维病变率(9.8%和8.5%)较小剂量IVIg组(50.0%和41.0%),以及未用IVIg的对照组(50.8%)为低(均P＜0.01).结论 IVIg通过对特异性体液免疫和细胞免疫的同时抑制,达到对CJ LPS诱导的周围神经病治疗作用.
-
多发性硬化免疫相关基因表达谱的基因芯片研究
目的用免疫相关基因芯片寻找多发性硬化表达差异的免疫相关基因.方法将484条免疫相关基因的double(双点) cDNA产物按微矩阵排列点样于玻片上.例1患者及其对照为第1组,例2患者及其对照为第2组,例3患者及其对照为第3组.取各组外周血,分离淋巴细胞,提取总RNA,用RT-PCR逆转录成cDNA.标记cDNA探针,分别用cy3-dUTP、cy5-dUTP标记正常人和多发性硬化患者cDNA.将基因芯片和杂交探针变性后杂交、洗干.用Scan Array 4000扫描芯片,GenePix Pro 3.0软件分析cy3 、cy5两种荧光信号的强度和比值.结果 1组中筛选出差异表达的基因22项,2组中出现差异表达的基因27项,3组中出现差异表达的基因72项.具有同一GeneID号的一对Double基因,其中 1组6对,2组9对,3组30对.结论试验结果显示正常人与MS患者免疫相关基因的表达有显著差异;不同发病阶段免疫相关基因表达有差异;以细胞免疫相关基因变化为主,体液免疫相关基因亦有异常表达.
-
角膜不同组织免疫原性分析
目的了解角膜3层组织的免疫原性相对值.方法 (1)细胞免疫:将C57BL-6小鼠脊部皮下组织分离成囊袋,分别异位植入异种角膜3层组织,于术后12 d用流式细胞仪检测鼠血清中抗CD25和抗CD71mAb标记活化的T淋巴细胞.(2)体液免疫:分别用异种角膜上皮细胞和全角膜匀浆免疫动物获取抗血清,以酶联免疫吸附法测定含细胞的3层角膜组织的免疫原性.结果 (1)细胞免疫:按等组织厚度计算,角膜内皮、上皮及基质组织各占角膜总免疫原性的比率分别为70.75%、27.63%及1.62%.(2)体液免疫:角膜内皮的免疫原性强,角膜上皮次之,角膜基质弱,分别约占整个角膜免疫原性的62.11%、31.77%及6.12%.结论 3层角膜组织中角膜内皮免疫原性强,基质免疫原性弱.
-
移植肾组织中C4d沉积与B细胞聚集性浸润的相关性分析
目的 检测切除的移植肾组织中C4d和CD20的表达,分析二者的相关性,探讨B细胞及体液免疫机制在移植肾丢失中的作用.方法 选择40例因排斥反应致移植肾失功行移植肾切除的病例,移植肾组织经石蜡包埋、切片后行免疫组化染色,检测组织中C4d沉积与CD20群聚性表达的情况,分析二者间及其与移植肾丢失的相关性;同时统计移植肾的存活时间,分析二者表达对存活时间的影响.结果 40例切除的移植肾组织中,C4d单阳性10例(25.0%),CD20单阳性12例(30.0%),C4d、CD20双阳性7例(17.5%),C4d、CD20双阴性11例(27.5%).Spearman等级相关分析表明,C4d沉积与CD20群聚性表达不存在相关性(P＞0.05).Log-Rank生存分析表明,C4d沉积与CD20群聚性表达同时存在的移植肾存活时间明显低于只有C4d沉积的移植肾(P＜0.05).结论 同时存在C4d沉积和CD20群聚性表达的移植肾存活时间明显减低,预示着移植物预后较差.C4d沉积与CD20群聚性表达不存在相关性,提示移植肾中浸润的CD20阳性B细胞可能不参与移植排斥的体液免疫机制.
-
急性放射病异基因外周血造血干细胞移植后的免疫重建
目的 观察急性放射病患者异基因造血干细胞移植前后免疫功能的变化规律.方法 动态观察山东"10·21"辐射事故2例患者(分别为诊断极重度骨髓型和肠型急性放射病,于受照后7天分别进行了单倍体及HLA相合异基因外周血造血干细胞移植)移植前后淋巴细胞数、T细胞亚群、免疫球蛋白、NK细胞、中性粒细胞数等的变化情况.结果 大剂量照射后免疫球蛋白呈下降趋势,移植后早期未观察到恢复趋势;照射后淋巴细胞数快速下降,移植后虽然有部分恢复,但仍然保持在较低水平(＜0.5×109/L);照射后中性粒细胞有一过性升高,后迅速下降,移植后快速恢复;照射后NK细胞明显下降,移植后快速恢复,并基本保持在明显高于正常的水平.照射后早期CD4/CD8比值有一过性升高,后迅速下降,移植后有逐渐升高趋势,但未恢复正常.结论 大剂量照射后免疫球蛋白、淋巴细胞数、NK细胞数、CD4/CD8比值等总体呈下降趋势提示,照射后细胞及体液免疫功能均快速受损.异基因造血干细胞移植后中性粒细胞数、NK细胞数等快速恢复,淋巴细胞数、CD4/CD8比值等有恢复趋势但恢复缓慢,免疫球蛋白未观察到恢复趋势,提示非特异性细胞免疫功能恢复快,但体液免疫功能及特异性细胞免疫功能恢复缓慢.
-
山茱萸体液免疫抑制活性成分的药理学导向评价分离
目的以药理学评价为导向,分离山茱萸(Cornus officinals)中具有免疫抑制作用的活性成分.方法以绵羊红细胞(SRBC)诱导的脾细胞抗体生成反应为活性导向评价指标.结果除山茱萸总苷外,山茱萸中的鞣质成分F-1C也具有较强的免疫抑制活性,而且其活性比山茱萸总苷强.结论山茱萸中具有免疫抑制作用的活性成分主要为F-1C和山茱萸总苷.
-
黄芩苷的豚鼠致敏作用及其可能的作用机制
目的：探讨黄芩苷的致敏作用机制。方法采用活性酯法制备黄芩苷全抗原，建立黄芩苷致豚鼠过敏性休克模型；采用被动皮肤过敏反应( PCA)实验分析豚鼠特异性抗体产生的规律性以及lgE和lgG抗体效价，采用ELlSA测定豚鼠血清中黄芩苷特异性lgG抗体。结果成功合成黄芩苷全抗原，黄芩苷与牛血清蛋白( BSA)和人血清白蛋白( HSA)的偶联效率分别为9∶1和5∶1。成功建立黄芩苷致敏的豚鼠休克模型，并显示典型的速发型过敏反应特征。致敏豚鼠第一次致敏后第19天开始用PCA实验检测出抗黄芩苷抗体，第31天达高峰，之后逐渐降低。致敏豚鼠体内同时存在lgE和lgG型特异性抗体，且两抗体之间无明显相关性。致敏豚鼠血清中黄芩苷特异性lgG抗体的阳性率为84％，致敏组肥大细胞脱颗粒率为(72.6±11.4)％，显著高于阴性对照组(26.8±6.9)％。致敏豚鼠离体回肠经黄芩苷-HSA激发后收缩明显。结论黄芩苷能够导致豚鼠出现过敏反应，并与特异性lgE和lgG抗体有关。
-
板蓝根α-葡聚糖佐剂提高H1 N1流感疫苗免疫小鼠体液免疫和细胞免疫功能
目的：研究板蓝根α-葡聚糖对H1N1流感疫苗免疫小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响。方法100μg α-葡聚糖按＋H1N1流感病毒裂解液3μg给每只小鼠一次性肌内注射。分别在免疫后3,5,8,10,12和14 d采血,ELlSA法检测小鼠血清特异性抗体和亚类抗体滴度；MTT法测定小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞增殖反应；ELlSA法测定细胞培养上清干扰素γ( lFN-γ)、白细胞介素4( lL-4)、lL-12和肿瘤坏死因子-α( TNF-α)含量；流式细胞术测定脾细胞中CD3＋, CD19＋, CD4＋, CD8＋T细胞亚群百分率。结果板蓝根α-葡聚糖对人用H1N1流感疫苗抗原显示优良的佐剂作用,初次免疫后5 d即能促进特异性抗体的生成,抗体亚型主要为lgM。免疫后5~14 d,总抗体及亚类lgG1, lgG2a和lgG2b滴度持续升高,lgG3在免疫8 d达峰,之后无明显变化。 lgA滴度水平低,且随时间无明显变化。α-葡聚糖显著促进H1N1流感疫苗免疫小鼠脾T 细胞和B 细胞增殖(增殖率分别为44.2％和37.8％),促进脾细胞分泌 lFN-γ( P<0.01)和lL-12( P<0.05),刺激胸腺细胞分泌lL-4( P<0.01)；与单独抗原组相比,联用α-葡聚糖明显提高免疫小鼠脾 CD3＋细胞百分率(P<0.01)及 CD3＋/CD19＋比值(P<0.01),提高 CD8＋T 细胞百分率,降低CD4＋/CD8＋比值( P<0.01)。α-葡聚糖能激活巨噬细胞,促进TNF-α的分泌。结论板蓝根α-葡聚糖能显著提高免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫功能。
-
卵巢癌抗独特型单链抗体诱导特异性体液免疫应答的动物实验研究
目的:用卵巢癌抗独特型单链抗体6B11 scFv代替肿瘤抗原免疫动物,观察是否诱导动物产生特异性体液免疫反应.方法:将6B11 scFv交联钥孔虫戚虫血蓝素,辅以弗氏佐剂反复免疫BALB/c小鼠,制备抗血清.采用间接法ELISA,竞争抑制ELISA及免疫流式细胞法分析抗血清特性.结果:经ELISA检测显示,由6B11 scFv刺激产生的抗-抗独特型单链抗体(Ab3)能与6B11 scFv和卵巢癌组织抗原OC166-9特异性结合.竞争抑制ELISA表明,Ab3能有效抑制卵巢癌单抗COC166-9(Ab1)与OC166-9的特异性结合.免疫流式分析结果可见, Ab3能与表达卵巢癌抗原的人卵巢癌细胞系OV1细胞表面结合而不能与无卵巢癌抗原表达的人宫颈癌细胞系HeLa细胞表面结合.从以上结果可以证明Ab3与Ab1的抗原结合特性相同.结论:6B11 scFv能代替卵巢癌抗原诱导动物产生特异性体液免疫反应,具有模拟抗原的作用,为6B11 scFv作为卵巢癌抗独特型单链抗体疫苗的实际应用提供依据.
-
KIAA0649多克隆抗体的制备及其细胞内定位
目的:制备抗KIAA0649多克隆抗体并鉴定抗体的特异性,同时初步鉴定KIAA0649蛋白在细胞内的定位及其功能结构域.方法:通过TMHMM和DNAstar等软件对KIAA0649的蛋白质序列进行分析,选取了3段序列合成多肽,将3段多肽混合后对新西兰兔进行免疫,通过酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno-sorbnent assay,ELISA)测定血清中抗多肽的滴度,当抗血清的滴度达到1:10~5(体积比)时取血清,通过免疫亲和层析柱对抗体进行纯化.在U2OS细胞中表达Flag-KIAA0649或通过小于扰RNA沉默内源的KIAA0649,提取细胞蛋白,电泳后转膜,通过Western blot分析上述制备的多克隆抗体的特异性;将表达Flag-KIAA0649的细胞在玻片上固定,用抗Flag抗体和抗KIAA0649抗体进行双色免疫荧光分析,通过免疫荧光对KIAA0649抗体进行鉴定.利用PCR克隆构建Flag-KIAA0649全长表达质粒和系列Flag-KIAA0649缺失突变体,转染细胞后通过免疫荧光对KIAA0649在细胞内的定位进行研究.结果:得到的纯化KIAA0649多克隆抗体特异性地识别内源及外源KIAA0649蛋白,可用于免疫荧光和Western blot分析;全长KIAA0649蛋白在细胞核内显示特定的分布方式;KIAA0649的缺失突变体中,含有PENF motif的突变体与全长KIAA0649蛋白在细胞核内的分布形式一致,推测该结构域可能为KIAA0649的功能结构域.结论:通过上述方法制备的KIAA0649多克隆抗体具有较高的特异性,可应用于KIAA0649的功能研究,KIAA0649在细胞内定位的研究对于阐明KIAA0649的功能机制具有重要意义.
-
基因免疫诱导小鼠产生抗丙型肝炎病毒E2糖蛋白抗体
目的:通过基因免疫诱导BALB/c小鼠产生抗Ⅲ型中国株HCV来源E2糖蛋白的体液免疫应答.方法:质粒p3W14在NIH 3T3细胞中能够表达E2糖蛋白,纯化该质粒并用于BALB/c小鼠直接肌注,于加强注射后不同时相采血,以重组的E2糖蛋白检测特异性抗E2抗体.结果:接种p3W14质粒的小鼠中可检出抗E2抗体(5/6),抗体滴度1∶15～1∶120.结论:采用含E2/NS1基因的质粒DNA免疫,成功地诱导小鼠产生抗Ⅲ型株来源的E2抗体.
关键词： 肝炎病毒 丙型/免疫学 病毒包膜蛋白质类/生物合成 抗体生成 -
新型有机硒化合物双硒唑烷-1的动物体内免疫调节作用
目的:检测新型有机硒化合物双硒唑烷-1(Ethaselen-1, Eb1)的动物体内免疫调节作用.方法:建立Lewis肺癌(Lewis lung cancer, LLC)皮下移植瘤C57/BL鼠动物模型,选取25.0 mg/kg 和12.5 mg/kg两个剂量的Eb1作为实验药物,以左旋咪唑(levamisole,LMS) 2.0 mg/kg作为阳性对照,以溶剂5 g/L羧甲基纤维素钠溶液为阴性对照,于接种肿瘤后第2天开始向C57/BL鼠腹腔连续注射7 d药物,探讨Eb1对正常及肿瘤鼠的相对脾重、脾淋巴细胞转化活性、自然杀伤(natural killer, NK)细胞活性、淋巴因子-激活杀伤(lymphokine-activated killer,LAK)细胞活性及淋巴细胞CD4+,CD8+亚群阳性细胞百分数的影响.结果:高剂量Eb1能够使正常鼠和肿瘤鼠的相对脾重增加150.59%和122.55%,脾淋巴细胞转化活性增加162.25%和561.98%,NK细胞活性增加78.60%和219.42%,脾淋巴细胞CD4-CD8+亚群阳性细胞百分含量增加104.72%和105.87%,高剂量Eb1亦能使肿瘤鼠的LAK细胞活性增加195.11%,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:新型有机硒化合物Eb1在C57/BL小鼠体内具有明显的免疫调节作用.
