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应用实时荧光定量RT-PCR检测宫颈癌及其外周血中VEGF表达的研究
目的:研究血管内皮生长因子在宫颈癌患者癌和癌旁组织及外周血循环细胞中的表达情况,分析其在肿瘤生长与转移中的作用.方法:采用基于TaqMan探针技术的实时荧光定量RT-PCR法检测了50例宫颈癌患者癌及癌旁组织和40例正常宫颈组织标本中VEGF mRNA的表达情况及其对应的外周血中的VEGF mRNA表达,分析其与临床病理参数之间的关系.结果:宫颈癌组织及癌旁组织中VEGF mRNA的表达水平无明显差异,但均与正常宫颈组织的表达水平差异有显著性;宫颈癌组织中VEGF mRNA的表达与肿瘤的组织学类型无明显的相关性;而与肿瘤的临床病理分期、病理分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径、深肌层浸润间均呈显著的正相关.宫颈癌患者外周血中VEGF的表达明显高于对照组水平,与淋巴结是否转移密切相关,但与其他临床病理参数无关.结论:实时荧光定量RT-PCR可以敏感且特异性的检测出宫颈癌组织及外周血中VEGF mRNA的表达,且方法准确可靠,操作方便,在肿瘤的微转移的诊断监测方面有一定的应用价值.VEGF有可能成为治疗恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点.
关键词： 实时荧光定量RT-PCR 血管内皮生长因子 宫颈肿瘤 -
实时荧光定量RT-PCR检测鼻咽癌Survivin mRNA基因表达
目的 建立实时荧光定量RT-PCR方法检测鼻咽癌组织中Survivin mRNA的表达.方法 用Trizol方法提取鼻咽癌CNE-2细胞株和鼻咽癌组织总RNA后,将其逆转录为cDNA,建立实时荧光定量RT-PCR方法,检测人鼻咽癌Survivin mRNA的表达,以慢性鼻咽炎患者鼻咽部组织作为对照.结果 鼻咽癌细胞株、鼻咽癌组和慢性鼻咽炎组患者鼻咽部组织均可检测到Survivin基因mRNA的表达,Survivin mRNA在鼻咽癌组织中的表达较慢性鼻咽炎患者鼻咽部组织高,两者差异有显著性意义(P＜0.01).Ⅲ+Ⅳ期和Ⅰ+Ⅱ期鼻咽癌患者均检测到Survivin基因mRNA的表达,但相对表达量无统计学意义.Survivin mRNA表达与鼻咽癌患者的年龄、性别无相关性.结论 实时荧光定量RT-PCR方法是一种快速有效灵敏度高的鼻咽癌Survivin mRNA表达的定量检测方法,Survivin mRNA的过度表达可能在鼻咽癌发生、发展过程中起一定作用.
关键词： 鼻咽癌 实时荧光定量RT-PCR 基因表达 凋亡基因Survivin -
类肝素酶在人类早期复发性自然流产中的作用研究
本研究探讨类肝素酶(heparanase,HPSE)与人类早期复发性自然流产的关系,进一步研究HPSE在自然流产发生过程中的作用机制.本研究收集非意愿性正常妊娠者和早期复发性自然流产者绒毛组织标本,采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组织化学法检测其HPSE mRNA和蛋白的表达情况.实验结果显示:正常妊娠组的HPSE mRNA和蛋白表达率均明显高于复发性自然流产组,差异有统计学意义(P＜0.05).以上结果提示:在正常妊娠过程中HPSE表达增高,可以促进正常胚泡的植入过程,而复发性自然流产中HPSE表达降低会影响胚泡的植入,导致自然流产的发生.
关键词： 复发性自然流产 HPSE 实时荧光定量RT-PCR 免疫组化 -
乳腺癌组织中ERα mRNA和PR mRNA检测方法的建立和应用
建立测定雌激素受体α (ERα)mRNA和孕激素受体(PR)mRNA的实时荧光定量RT-PCR,探讨两者在乳腺癌组织及良性乳腺肿瘤组织中的表达水平.分别以pMD18-ERα和pMD18-PR质粒为定量模板,用循环阈值(Ct)定量起始模板,在荧光TaqMan方法的基础上建立了测定ERα mRNA和PR mRNA的实时荧光定量RT-PCR,并分别测定48例乳腺癌组织及28例良性乳腺肿瘤组织中ERα mRNA和PR mRNA的表达水平.ERα mRNA和PR mRNA测定的线性范围为103～108copy/ μg RNA；ERα mRNA和PR mRNA高值和低值的批内和批间变异系数(CV)在5.07％～ 11.28％之间.ER mRNA在乳腺癌组织中的表达量为6.76×105 copy/μg RNA(4.17×10 5,9.34×105),良性乳腺肿瘤组织中的含量为1.54×105copy/μgRNA (1.02×105,2.06×105),乳腺癌组织的表达量高于良性组织(P＜0.05)；PR mRNA在乳腺癌组织中的表达量为1.02×106 copy/μg RNA (6.81×105,1.36×106),良性乳腺肿瘤组织中的含量为4.93×105 copy/ μg RNA (3.21×105,6.65×105),两者表达无明显差异(P＞0.05).ERα mRNA和PR mRNA在乳腺癌和良性乳腺肿瘤组织中的表达存在相关性.我们建立的测定ERα mRNA和PR mRNA的实时荧光定量RT-PCR灵敏、稳定、重复性好,可供临床检测和研究.ERα mRNA和PR mRNA基因表达水平可作为预测治疗效果及判断预后的重要指标.
关键词： 雌激素受体α 孕激素受体 乳腺癌 实时荧光定量RT-PCR -
实时荧光定量RT-PCR法检测手足口病患儿大便标本中肠道病毒71型
目的 了解2008年手足口病流行期间住院手足口病患儿是否存在EV71病毒感染,并探讨实时荧光定量RT-PCR法对手足口病患儿大便标本中EV71病毒载进行定量检测的可行性.方法 采用RT-PCR荧光探针体外扩增法对47例住院的手足口病患儿大便标本中抽提的RNA进行抽样检测.结果 22例(46.81%)手足口病患儿大便标本中EV71的病毒载量大于103 copies/ml,高者达1.03 × 107copies/ml.实时荧光定量RT-PCR法其标准曲线显示,Ct值与病毒拷贝数的对数(log10)之间的相关系数为1.000,相关性较好.结论 2008年手足口病流行期间入住儿科医院的手足口病患儿近半数为EV71病毒感染.实时荧光定量RT-PCR法对大便标本中的EV71 RNA定量检测较方便快捷,结果直观,为进一步研究病毒载量与临床表现之间的关系打下了基础.
关键词： 于足口病 肠道病毒71型 实时荧光定量RT-PCR 病毒载量 -
肺特异性X蛋白与细胞角蛋白19在非小细胞肺癌中的表达及意义
背景与目的: 常规细胞学诊断肺癌患者淋巴结中的癌细胞具有重要的应用价值,然而对淋巴结和癌旁组织内微转移的诊断有限.本研究探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA的表达及其在NSCLC发生、转移和预后中的意义.方法:采用实时定量反转录(real-timeRT-PCR)方法检测20例经病理诊断为非小细胞肺癌(NSCLC)组织及42枚区域性淋巴结中LUNX mRNA和CK19 mRNA的表达情况并进行定量分析.以9例肺良性病变患者标本及6枚淋巴结作为对照组.对所有淋巴结进行常规病理切片并行HE染色,观察转移情况.结果: ①癌组织中LUNX mRNA水平显著高于对照组,但与患者淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期无关.②癌旁组织中LUNX mRNA水平明显高于对照组,与淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期有关.③淋巴结组织中CK19 mRNA水平接近对照组,与淋巴结转移及TNM分期有关,但与患者肿瘤大小无关.④淋巴结组织中LUNX mRNA水平接近对照组,但与患者淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期无关.⑤LUNX mRNA和CK19 mRNA均与患者年龄、性别、组织学分型无关.⑥real-time RT-PCR法和常规病理方法检测肺癌淋巴结转移的差异有显著性. 结论: LUNX mRNA与CK19 mRNA均可作为real-time RT-PCR检测NSCLC患者癌旁组织、区域性淋巴结微转移的分子标志物,但前者在特异性和敏感性上优于后者.本方法的建立可能有利于提高肺癌淋巴转移的检出率,从而指导临床分期和治疗.
关键词： 非小细胞肺癌 肿瘤转移 实时荧光定量RT-PCR 肺特异X蛋白 细胞角蛋白19 -
STAT3基因在乳腺癌组织中的表达及意义
背景与目的:STAT3是近期研究较多的一类癌基因,在多种实体瘤如乳腺癌、头颈部癌、胃癌等中均有异常表达和活性增强.本实验研究乳腺肿瘤组织中癌基因STAT3mRNA丰度及其蛋白的表达阳性率,探讨其与组织类型、淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及癌胚表达抗原(CerbB-2)表达的关系.方法:采用实时荧光定量RT-PCR技术检测32例乳腺癌和10例乳腺良性病变中STAT3 mRNA的丰度表达,EnVision免疫组化法检测45例乳腺癌和12例癌旁乳腺组织标本中p-STAT3蛋白的表达阳性率,并进行相关统计分析.结果:EnVision免疫组化法检测45例乳腺癌和12例癌旁乳腺组织标本中,pSTAT3在癌旁组织和癌组织中的阳性表达率分别为16.7%(2/12)和60%(27/45),两者相比统计学差异有显著性(P＜0.05);在无淋巴结转移和有淋巴结转移乳腺癌组织中分别为48.1%(13/27)和77.8%(14/18),两者相比统计学差异有显著性(P＜0.05);在孕激素阴性和孕激素阳性乳腺癌组织中分别为37.5%(6/16)和72.3%(21/29), 两者相比统计学差异有显著性(P＜0.05).实时荧光定量RT-PCR技术检测32例乳腺癌和10例乳腺良性病变中, STAT3 mRNA的相对丰度在乳腺良性病变和乳腺癌中的分别为:6×10-3±3×10-3和34×10-3±17×10-3, 两者相比统计学差异有显著性(P＜0.05);在无淋巴结转移和有淋巴结转移乳腺癌组织中分别为26×10-3±13×10-3和39×10-3±18×10-3, 两者相比统计学差异有显著性(P＜0.05);在孕激素阴性和孕激素阳性乳腺癌组织中分别为28×10-3±10×10-3和39×10-3±19×10-3, 两者相比统计学差异有显著性(P＜0.05).pSTAT3蛋白阳性率和mRNA的丰度均与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小及ER、CerbB-2阳性与阴性组未见相关性(P ＞0.05).结论:STAT3基因表达增强可能与乳腺癌淋巴结转移以及孕激素有关.
关键词： 乳腺癌 实时荧光定量RT-PCR 免疫组织化学 癌基因 STAT3 -
同源异型盒基因HOXD10在乳腺癌组织中的表达及其临床病理意义
背景与目的:乳腺癌是威胁女性健康常见的恶性肿瘤之一,从分子水平深入研究其癌变机制,对寻找新的标志基因具有重要意义.本研究探讨同源异型盒基因HOXD10基因在乳腺癌发生、发展进程中的可能作用.方法:以18s rRNA基因作为参照,采用荧光实时定量RT-PCR技术,以相对定量方法检测44例乳腺癌组织及16例乳腺良性病变组织中HOXD10 mRNA表达情况.结果:HOXD10在乳腺癌中的表达显著低于乳腺良性病变组织.组织学分级为Ⅲ级的乳腺癌标本中H0XD10 mRNA的表达显著低于组织学Ⅰ、Ⅱ级标本.H0XD10 mRNA的表达与淋巴结转移、肿瘤大小、TNM分期之间相关性不显著.结论:HOXD10基因在乳腺癌中呈低表达甚至表达缺失,由于这种基因可能为乳腺癌发生发展的抑制因素,因此对其我们应给予更多关注.
关键词： 乳腺癌 基因表达 HOXD10基因 同源异型盒 实时荧光定量RT-PCR -
实时荧光定量RT-PCR检测胃癌患者外周血hTERT mRNA表达水平
目的:检测胃癌患者外周血中端粒酶催化亚基hTRT mRNA的表达水平,探讨其作为胃癌早诊标志物的可行性.方法:应用实时荧光定量RT-PCR技术检测108例原发性胃癌、100例良性胃溃疡和120例健康献血员血清hTRT mRNA表达水平.结果:胃癌组hTRT mRNA表达水平(13.48±0.83 copies/ml)显著高于良性胃溃疡组(0.91±0.21 copies/ml,P<0.05)和健康对照组(0.24±0.15 copies/ml,P<0.05).hTERT表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤生长方式、肿瘤分化程度、淋巴管侵犯及静脉侵犯均无显著相关性(P>0.05),而分别与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、pTNM分期及CEA有显著相关性(P<0.05).结论:实时荧光定量RT-PCR分析外周血hTERT mRNA转录水平可用于胃癌早期诊断.
关键词： 胃癌 hTERT mRNA 肿瘤标志物 实时荧光定量RT-PCR -
实时荧光定量RT-PCR检测原发性肝细胞癌中Dicer mRNA的表达
目的:建立Dicer mRNA 表达量检测的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)系统,检测肝癌细胞系与20例原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma,PHC)组织中Dicer mRNA的表达水平.方法:根据Dicer mRNA的全序列设计特异性引物,结合荧光染料SYBR Green Ⅰ,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度, 进行熔解曲线分析排除非特异性扩增,根据标准品绘制标准曲线,由软件自动计算出待测样品Dicer mRNA的准确含量,并以Dicer mRNA和18S rRNA含量的比值作为Dicer表达水平的指标.结果:该方法检测的线性范围为5×102～5×109 copies/μl,样本的批内变异系数与批间变异系数为4.13%～19.72%和6.25%～18.76%.Dicer mRNA在HBV阳性肝癌细胞系HepG2.2.15和HBV阴性肝癌细胞系HepG2的表达水平明显低于正常肝细胞系WRL-68(P＜0.05);在PHC组织的表达水平明显低于癌旁配对组织(P＜0.05).结论:该方法具有较好的灵敏度、特异性和重复性.Dicer mRNA 表达量在肝癌细胞系和PHC组织中的检测为以后更好的研究PHC的发病机制奠定了理论基础.
关键词： Dicer 癌 肝细胞 实时荧光定量RT-PCR -
运用实时荧光定量RT-PCR法检测乳腺癌组织中ERα、PR和Her2 mRNA表达
目的 评价实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)在测定乳腺癌组织中雌激素受体α(ERα)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(Her2)基因表达的临床价值.方法 选择2010年3月至10月在我院接受手术治疗的乳腺癌患者48例和乳腺良性病变患者28例,用免疫组化染色(IHC)法检测乳腺癌组织中ERα、PR、Her2蛋白的表达,用实时qRT-PCR法检测乳腺癌组织及良性乳腺肿瘤组织中ERα、PR、Her2 mRNA的表达,并评价这两种检测方法在乳腺癌诊断中的价值.结果 用实时qRT-PCR测得的ERα、Her2 mRNA在乳腺癌组织中的表达均高于对照组织(P＜0.05,P＜0.01),而PR mRNA的表达在乳腺癌组织与对照组织之间差异无统计学意义.乳腺癌组织中ERα、PR、Her2的蛋白表达与临床TNM分期有关,ERα和PR的阳性表达率随临床TNM分期的升高而下降(P＜0.05),Her2的阳性表达率随临床TNM分期的升高而升高(P＜0.05).乳腺癌淋巴结转移组乳腺组织中ERα、Her2 mRNA表达均高于无淋巴结转移组(P＜0.05),而PR mRNA表达与无淋巴结转移组比较差异无统计学意义.实时qRT-PCR检测ERα、PR、Her2 mRNA在评价乳腺癌对内分泌治疗的敏感性、特异性以及病理学诊断的符合率均与IHC相符.结论 ERα、PR和Her2是预测乳腺癌内分泌治疗或靶向治疗的重要基因,本研究建立的实时qRT-PCR检测方法可用于ERα、PR和Her2 mRNA表达的临床检测和研究.
关键词： 乳腺肿瘤 雌激素受体α 孕激素受体 人表皮生长因子受体2 实时荧光定量RT-PCR 预后 -
去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)在喉癌组织中的表达和临床意义
目的 研究去整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloprotease 10,ADAM10)在喉癌中的表达及其临床意义.方法 采用实时荧光定量RT-PCR法(n=21)与组织芯片免疫组化法(n=62)检测ADAM10在喉癌组织与正常黏膜组织中的表达情况,并分析其差异.结果 实时荧光定量RT-PCR结果显示喉癌组织中ADAM10表达显著高于正常黏膜组织中的表达(P＜0.001),其倍数为2.691±1.568.组织芯片结果显示ADAM10在喉癌组织中阳性面积百分比为15.243±7.824,在正常黏膜组织中则为1.887±1.918,喉癌组织中ADAM10的表达量高于正常黏膜组织(P＜0.001).ADAM10的表达与组织学分级相关,与其他临床参数无关.结论 ADAM10在喉癌组织中有高表达,其表达与肿瘤组织学分级相关.
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肺癌患者外周血单个核细胞CD28/B7家族共刺激分子mRNA表达的初步研究
目的 探讨肺癌患者外周血单个核细胞中CD28/B7家族共刺激分子mRNA的表达水平.方法 收集50例(鳞癌24例,腺癌26例)肺癌患者作为疾病组,50例体检健康者作为健康对照组,提取外周血单个核细胞,用Taqman探针实时荧光定量RT-PCR检测各组CD28、CD80、CD86、CTLA-4 mRNA的表达情况.结果 肺癌患者CD28、CD80、CD86、CTLA-4 mRNA表达水平均低于健康对照组(P均＜0.05)；鳞癌组CD28、CD80、CTLA-4 mRNA表达水平低于腺癌组(P＜0.05),CD86稍高于腺癌组(P＞0.05),但均低于健康对照组(P均＜0.05).结论 肺癌患者CD28/B7家族共刺激分子表达降低,且与组织学类型有关,可能导致免疫系统发生紊乱.
关键词： CD28/B7分子 肺癌 实时荧光定量RT-PCR -
耐亚胺培南铜绿假单胞菌IMP-1基因mRNA的表达及其与耐药性的关系
目的 从IMP-1型金属酶基因mRNA表达的角度,对铜绿假单胞菌产金属酶情况和细菌对亚胺培南耐药性之间的关系进行分析.方法 选取前期课题实验中IMP-1基因阳性的耐亚胺培南铜绿假单胞菌12株,用微量肉汤稀释法检测其对亚胺培南的小抑菌浓度(MIC),用实时荧光定量RT-PCR法检测IMP-1基因的mRNA表达量,分析其表达量与细菌对亚胺培南MIC之间的关系.结果 低MIC组和高MIC组的MIC范围分别为16～64 μg/mL和256～2 048 μg/mL；低MIC组的IMP-1基因mRNA相对表达量显著低于高MIC组(P＜0.05).结论 耐亚胺培南铜绿假单胞菌中IMP-1基因mRNA的表达水平与细菌对亚胺培南MIC值的高低有关.
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荧光实时定量RT-PCR检测DD3 mRNA方法的建立
目的 建立荧光实时定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)检测前列腺癌(Pca)特异基因DD3 mRNA的方法.方法 在DD3基因的外显子1和3之间设计一对引物和一条TaqMan-MGB探针,优化反应体系,建立DD3 mRNA的FQ-RT-PCR方法,并进行方法学评价.将PCR扩增产物经凝胶电泳纯化后与pBluescriptⅡSK载体连接,再将重组质粒转化感受态细胞进行克隆;提取重组质粒在紫外分光光度计上定量,作为定量检测的标准品.结果 重组质粒经PCR扩增及序列测定,表明pBluescriptⅡSK-DD3cDNA克隆成功.PCR扩增产物经测序分析证实为DD3 mRNA特异性片段.本法灵敏度为6拷贝/反应,线性范围为6～6×108拷贝/反应,相关系数为0.9985,批内、批间变异系数分别为1.0%～2.0%和1.3%～6.6%.结论 成功建立了FQ-RT-PCR检测DD3 mRNA的方法.为DD3 mRNA作为前列腺癌的诊断指标提供了方法学依据,也为其他肿瘤基因的检测提供了方法学启示.
关键词： DD3基因 mRNA 实时荧光定量RT-PCR 前列腺癌 -
TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测外周血单个核细胞TRAIL-mRNA
目的 建立TaqMan实时荧光定量RT-PCR(rQ-RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA含量的方法,探讨PBMC中TRAIL mRNA的检测价值.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,用RT-PCR扩增目的片段,实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,软件自动计算出待测样本中TRAIL mRNA含量,以TRAIL mRNA和β2M mRNA含量的对数比值进行TRAIL mRNA表达水平评价.结果 TRAIL mRNA含量线性范围为(2.9×103～2.9×109)copies/ml,批内和批间变异系数分别为9.5%和16.7%.30例健康献血员和58例慢性乙肝患者TRAIL mRNA与β2M mRNA浓度的对数比值的(x)±s分别为0.528±0.014和0.775±0.038,两组差异显著,P＜0.001.结论 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA水平具有较好的灵敏度和重复性,适用于临床研究.
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DNMT3 B基因异常表达与肝癌发生的相关性研究
目的 探讨DNMT3B和肝癌发生的关系.方法 用实时荧光定量RT-PCR方法分析正常肝细胞系、肝癌癌旁细胞系及肝癌癌细胞系中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达谱,以及DNMT3B表达抑制后在肝癌细胞系SMMC-7721中出现表达上调的与肿瘤发生相关的基因PDCD4和MBD3的表达.结果 DNMT1,DNMT3A,DNMT3B在肝癌细胞系中存在高表达的趋势,表达水平一致性的明显高于肝癌癌旁和正常肝细胞系,提示这些酶与肝癌的发生相关.结论 DNMT3B表达抑制后肝癌细胞系SMMC-7721中与肝癌发生相关的MBD3和PDCD4基因表达水平上调,表明DNMT3B沉默后,诱导了下游肿瘤抑制基因的过表达,推测DNMT3B在肝癌发生中通过某种机制调控下游肿瘤抑制基因的表达.
关键词： DNA甲基转移酶3b 肝癌 实时荧光定量RT-PCR -
实时荧光定量RT-PCR内参基因的选择
实时荧光定量RT-PCR(real-time fluorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,FQ RT-PCR)是检测低丰度mRNA的敏感方法,为了去除不同标本在RNA的产量、质量以及逆转录效率上可能存在的差别而获得目标基因特异性表达的真正差异,通常选择一定的内参基因进行校正和标准化.内参基因扩增中的变化可以反映RNA产量、质量和/或cDNA合成效率的变化.选择适当的内参基因以减少检测标本间的差异是必须的.本文就FQ RT-PCR内参基因的选择作一简要综述.
关键词： 实时荧光定量RT-PCR 内参基因 -
嗜人按蚊溴氰菊酯抗性分子机理研究Ⅲ嗜人按蚊P450基因mRNA荧光半定量RT-PCR分析
目的探讨嗜人按蚊CYP6、CYP4基因与溴氰菊酯抗性的关系.方法采用荧光定量RT-PCR方法,对嗜人按蚊体内CYP6和CYP4基因的mRNA进行半定量检测分析.结果嗜人按蚊抗性品系中CYP6基因mRNA的含量约为敏感品系的1.39倍.抗性品系中CYP4基因mRNA的含量约为敏感品系的3.63倍.结论嗜人按蚊抗性品系体内的CYP6和CYP4的mRNA量高于其敏感品系,提示嗜人按蚊溴氰菊酯产生抗性机理可能与其细胞色素P450表达量增高有关.
关键词： 嗜人按蚊 溴氰菊酯 抗性 实时荧光定量RT-PCR -
DD3 mRNA在前列腺癌组织中定量表达分析
目的:探讨DD3基因在前列腺组织中表达的临床意义.方法:用荧光定量RT-PCR方法对21例前列腺癌(PCa)组织、27例非前列腺部位的肿瘤组织、39例良性前列腺增生(BPH)组织和15例正常前列腺组织中的DD3的表达进行了定量分析,用ROC曲线对DD3 mRNA诊断PCa的性能进行了分析.结果:27例非前列腺组织中均未检测到DD3基因的表达.DD3在PCa组、BPH组和正常前列腺组表达量的中位数分别为7.2×106、2.5×104、1.5×104 拷贝/mg 组织.PCa组较BPH组和正常前列腺组DD3的表达量显著增高(P＜0.01),而BPH组和正常前列腺组间则差异无显著性(P＞0.05).DD3表达量与临床分期和分化程度之间均无明显相关性.DD3 mRNA曲线下面积(AUC-ROC)为0.937(95%CI:0.879～0.995).当临界值为1.4×105拷贝/mg组织时,灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性拟然比(+LR)、阴性拟然比(-LR)分别为90.5%、85.0%、86.7%、76.0%、94.3%、6.03和0.11.结论:DD3 mRNA的表达仅限于前列腺组织,具有良好的组织特异性.DD3 mRNA表达在PCa组织中显著升高,在正常前列腺和BPH组织中差异无显著性.DD3 mRNA可作为PCa诊断的良好标志物,在PCa早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面也具有潜在的应用价值.
关键词： 前列腺癌 DD3基因 实时荧光定量RT-PCR 前列腺组织
