首页 > 文献资料
-
荧光定量RT-PCR检测诺如病毒基因Ⅱ型方法的建立和评估
目的 建立灵敏、特异的诺如病毒基因Ⅱ型的荧光定量RT-PCR方法,用于临床腹泻粪便样本病毒的定量检测.方法 构建质粒DNA,并转录合成RNA作为标准品,建立和优化诺如病毒基因Ⅱ型荧光定量RT-PCR方法和反应体系,评价该方法的灵敏度、特异性、重复性,并进行临床粪便样本的检测.结果 此方法低可以检出102拷贝数/μl,能特异地检出诺如病毒基因Ⅱ型,与诺如病毒基因Ⅰ型无交叉反应,与柯萨奇病毒B组、脊髓灰质炎病毒、肠道病毒、星状病毒、甲肝病毒、埃可病毒和轮状病毒无交叉反应.针对标准品,2次批内试验的荧光信号循阈值(Ct值)变异系数(CV)分别为1.60％、0.70％,2次批间试验的变异系数(CV)分别为0.40％、0.40％,均在5％以下.结论 本研究建立的实时定量RT-PCR检测诺如病毒基因Ⅱ型的方法,其灵敏度、特异性和重复性良好,可用于该病毒的快速检测.
关键词： 诺如病毒 基因Ⅱ型 逆转录PCR 实时荧光定量RT-PCR -
一起老人护理院诺如病毒急性胃肠炎暴发的调查
目的 调查分析1起某老人护理院诺如病毒急性胃肠炎暴发的原因,为今后老年人此类疾病的防控提供参考依据.方法 采用个案调查收集病例资料,采集部分病例和工作人员肛拭子标本,运用实时荧光定量RT-PCR进行诺如病毒核酸检测.结果 21份肛拭子样本中,19份诺如病毒GⅡ犁核酸阳性,其中11份阳性为发病老人肛拭子样本,8份为工作人员肛拭子样本.结论 该疫情是一起由GⅡ型诺如病毒引起感染性腹泻暴发疫情,密切生活接触及未能及时消毒是疫情暴发的主要原因.
关键词： 诺如病毒 实时荧光定量RT-PCR 急性胃肠炎 暴发 -
2013年崇左市流行性感冒实验室检测结果分析
目的 对崇左市2013年流行性感冒(流感)实验室控检测结果进行分析,了解2013年崇左市流感病原学特征,为实验室诊断流感提供参考.方法 采集2013年崇左市人民医院及各地送检的流感样病例咽拭子标本912份,应用实时反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)技术检测样本中的AM、BNS、H1HA、H3HA、SWH1 HA、H5HA、H9HA、H7HA、N9NA基因.结果 912份标本中,检测到乙型流感病毒核酸阳性19份,季节性流感病毒H1亚型核酸阳性0份,季节性流感病毒H3亚型阳性4份,甲型H1N1病毒特异性基因片段阳性58份,季性性H3和甲型H1N1流感病毒核酸同时阳性1份,均未检测到人感染高致病性禽流感中的H5HA、H9HA、H7HA、N9NA基因.甲型H1N1的检出率较高为6.36％(58/912),阳性构成比为70.73％.乙型流感病毒核酸阳性率为2.08％(19/912),季节性H1流感病毒阳性率为0.00％(0/912),季节性H3流感病毒阳性率为0.44％(4/912),季性性H3和甲型H1N1流感病毒核酸同时阳性率为0.11％(1/912).均未检测出入感染H5,H9,H7N9禽流感病毒.结论 甲型H1N1仍是2013年崇左市流感的主要毒株类型,流行趋势以散发为主,较2009年大暴发流行有所下降.
-
非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义
目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性.方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达.结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376).结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗.
-
条件培养液体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究
[目的]观察乳鼠心室肌成纤维细胞条件培养液干预体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的作用及其机制.[方法]分离培养及鉴定大鼠MSCs,对其进行分组诱导:单纯条件培养液组(TJ)、条件培养液1组(TJ-ZY)、条件培养液2(TJ-XFK),诱导,24h后继续培养4周,免疫细胞化学法鉴定心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)的表达,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌早期基因NKX2.5、GATA-4、Desmin和α-actin mRNA的表达.[结果]免疫细胞化学结果显示单纯条件培养液诱导后的MSCs不表达心肌特异性蛋白cTnT,心复康参与组则表达.实时荧光定量(RT-PCR)结果显示各组均表达心肌分化早期基因,心复康参与组诱导后的MSCs的心肌分化早期基因表达明显高于单纯条件培养液组.[结论]微环境在MSCs向心肌样细胞的分化过程中起了重要作用,心复康能够提高MSCs向心肌样细胞的分化和特化作用.
关键词： 条件培养液 心复康 骨髓间充质干细胞 免疫细胞化学 实时荧光定量RT-PCR -
支气管哮喘不同发作状态时人类白细胞抗原DPB1基因mRNA表达量的变化研究
目的应用实时荧光定量RT-PCR方法检测支气管哮喘急性发作期患者和缓解期患者人类白细胞抗原-DPB1(human leukocyte antigen-DPB1,HLA-DPB1)基因mRNA定量表达情况,探讨HLA-DPB1基因的表达量与支气管哮喘发作状态之间的相关性.方法抽取43例支气管哮喘急性发作期患者、17例支气管哮喘缓解期患者以及34例健康对照者外周血各2ml,Trizol试剂提取外周血白细胞总RNA,利用随机引物逆转录总RNA成cDNA,根据HLA-DPB1第二外显子序列设计序列特异性引物,实时荧光定量PCR检测其mRNA的定量表达情况,以人磷酸甘油醛脱氢酶(g1ucera1dehyde phosphatedehydrogenase,GAPDH)基因为内对照,统计分析三组间差异,P＜0.05(双侧)表示差异有显著性.结果HLA-DPB1基因mRNA在支气管哮喘急性发作期、支气管哮喘缓解期以及健康对照组定量表达的情况经过单因素方差分析,其模板cDNA量对数值在支气管哮喘急性发作期患者组为4.243±0.957,支气管哮喘缓解期患者组为2.709±0.629,健康对照组为2.295±0.698.支气管哮喘急性发作期患者组HLA-DPB1基因mRNA表达明显高于健康对照组和支气管哮喘缓解期患者组(P ＜0.01);支气管哮喘缓解期患者组表达量与健康对照组比较无显著性差异(P＞0.05).结论HLA-DPB1基因在支气管哮喘急性发作期患者中表达明显增高,与支气管哮喘患病状态有相关性.
-
RegⅣmRNA在结直肠癌的表达及临床意义
目的:分析RegⅣmRNA在新鲜结直肠癌患者的表达及其与性别、淋巴结转移、临床分期之间的关系.方法:收集长治医学院附属和平医院和南方医科大学附属南方医院结直肠癌患者新鲜结直肠癌组织30例和正常结直肠组织30例,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测结直肠癌组织及正常组织中RegⅣmRNA表达水平.结果:RegⅣmRNA在结直肠癌组的表达量是正常结直肠组表达量的8.73倍(t=3.721,P<0.05),RegⅣmRNA在结直肠癌的表达和患者的性别无关(t=0.074,P>0.05),与淋巴结转移呈正相关(t=4.369,P<0.05),与临床分期无关(F=0.398,P>0.05).结论:RegⅣmRNA在结直肠癌高表达,RegⅣmRNA的表达可能与结直肠癌患者的淋巴结转移密切相关.
关键词： RegⅣ 实时荧光定量RT-PCR 结直肠癌 淋巴结转移 -
中药对镍暴露氧化损伤抑制作用
目的 研究灌服中药扶正解毒汤(FJD)后兔血清对硫酸镍(NiSO4)暴露的人支气管上皮细胞(16HBE)自由基含量及8-羟基-2-脱氧鸟苷三磷酸酶(8-oxo-dGTPase)表达的影响.方法 体外培养的16HBE细胞分别经NiSO4暴露及NiSO4加扶正解毒汤含药血清共同处理后,采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)及实时荧光定量RT-PCR检测自由基含量及8-oxo-dGTPase表达的变化.结果 NiSO4(800 μmol/L)暴露的16HBE细胞,其自由基含量及8-oxo-dGTPase表达水平均高于NiSO4与扶正解毒汤(10%)共处理组细胞,P＜0.05～0.01,相对标准偏差(RSD)＞2%.结论 8-oxo-dGTPase可作为镍暴露氧化应激的标记物;中药扶正解毒汤通过清除自由基,下调8-oxo-dGTPase的表达,对镍暴露氧化损伤具有显著的抑制作用.
-
PBDE-47和PCB153染毒致大鼠神经毒性作用
目的 探讨2,2',4,4'-四溴联苯醚(PBDE-47)和2,2',4,4',5,5'-六氯联苯(PCB153)单独或联合染毒对SD大鼠的神经毒性作用及其机制.方法 出生第10 d的SD大鼠经一次性PBDE-47[1,5,10 mg/(kg·bw)]和/或PCB153[5 mg/(kg·bw)]染毒,用Morris水迷宫试验观察2月龄大鼠空间学习、记忆能力;用实时荧光定量RT-PCR检测海马组织死亡相关蛋白激酶(DAPK)、X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)、含半胱氨酸的天冬氨酸酶-12(Caspase-12)、含半胱氨酸的天冬氨酸酶-3(Caspase-3)以及细胞色素(cytochrome C)等钙信号通路相关基因mRNA的表达水平.结果 随PBDE-47染毒剂量的增加,大鼠学习、记忆能力呈现减退的趋势,且所有染毒剂量组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).PCB153可增加PBDE-47的神经毒性作用.与对照组比较,10 mg/(kg·bw)染毒组PBDE-47可导致雌雄大鼠XIAP基因mRNA表达水平显著下调(P<0.05),同时使雌雄大鼠Caspase-12、Caspase-13、Cytochrome C以及雄性大鼠DAPK基因mRNA表达水平显著上调(P<0.05).除雌雄大鼠DAPK以及雌性大鼠Cytochrome基因外,PBDE-47和PCB153对雌雄大鼠其他各基因mRNA表达水平的影响具有交互作用(P<0.05).结论 PBDE-47可引起大鼠神经系统损伤,同时影响大鼠海马区钙信号诱导的凋亡相关基因mRNA表达水平,PCB153可增强PBDE-47的上述神经毒性作用.
-
单侧输尿管梗阻模型大鼠肾间质纤维化过程中血小板衍生生长因子D的表达
背景:血小板衍生生长因子在肾间质中通过诱导肾小管间质细胞增生、表型转化、炎性细胞浸润等导致肾小管间质纤维化.目的:观察血小板衍生生长因子D 在单侧输尿管梗阻模型大鼠肾脏组织中的表达水平及随时间的演变情况.方法:将成年健康雄性SD 大鼠60 只随机分为模型组及假手术组,将模型组大鼠左侧输尿管结扎剪断建立单侧输尿管梗阻模型,假手术组大鼠不结扎剪断仅游离左侧输尿管.术后3,7,14,21,28 d,通过免疫组化检测血小板衍生生长因子D 在肾脏组织中的表达分布情况,实时荧光定量RT-PCR 方法检测血小板衍生生长因子D mRNA 的表达水平及变化.结果与结论:假手术组血小板衍生生长因子D 仅少量表达于肾小球系膜细胞及血管平滑肌细胞,而在模型组,血小板衍生生长因子D 同时表达于肾间质纤维化区域,随纤维化程度加重,表达增多.同时模型组血小板衍生生长因子D mRNA 表达量较假手术组显著增多(P < 0.05),且表达随时间延长逐渐增多.提示血小板衍生生长因子D 在单侧输尿管梗阻模型肾间质纤维化过程中发挥着促纤维化的重要意义.
-
脂肪基质干细胞小肠黏膜下层双面复合的体外成软骨诱导
背景:使用体外构建的组织工程软骨治疗软骨损伤是目前的研究热点,料与支架材料的选择仍有较多问题尚待解决.目的:观察脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物在体外经成软骨诱导培养基诱导分化的效果.方法:将第3代脂肪基质干细胞接种于复水后的小肠黏膜下层双面,入成软骨诱导培养基,体外诱导培养7 d和14 d后,用实时荧光定量RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA,疫组织化学染色检测Ⅱ型胶原蛋白,苯胺蓝染色观察细胞外基质,描电镜观察体外成软骨诱导14 d后细胞在支架材料上的生长状况.结果与结论:Ⅱ型胶原mRNA实时荧光定量RT-PCR检测提示,外成软骨诱导后7,4 d的脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物Ⅱ型胶原mRNA的标化值与未诱导的脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物差异有显著性意义(P < 0.05),导 14 d与诱导7 d相比,异亦有显著性意义(P < 0.05).脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物成软骨诱导后14 d,型胶原免疫组织化学染色为阳性,苯胺蓝染色可见基质异染,诱导的复合物Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阴性.扫描电镜检测显示诱导14 d时,胞长满支架材料的双面.提示脂肪基质干细胞复合至小肠黏膜下层后,体外经成软骨诱导培养基成软骨诱导后,够向成软骨细胞分化.
关键词： 小肠黏膜下层 脂肪基质干细胞 成软骨 诱导 实时荧光定量RT-PCR -
荧光定量分析人皮肤瘢痕疙瘩组织中miRNA-34s的表达
背景：通过分析不同肿瘤组织与正常组织miRNA表达谱的差异，有可能筛选到特异性好、灵敏度高、可作为特定肿瘤分子标志物的miRNA。
目的：采用实时荧光定量RT-PCR检测miRNA-34家族(miRNA-34s：miR-34a/b/c)在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的差异表达，分析评价microRNA-34s在瘢痕疙瘩形成发展的作用及可能的机制影响。
方法：收集手术切除瘢痕疙瘩组织(10例)和正常皮肤(2例)；TRIZOL法提取标本的总RNAs并进行质检，再采用 Ambion′s miRNA Isolation Kit 从总 RNAs 中分离 microRNA，采用实时荧光定量 RT-PCR 技术检测miRNA-34s(miR-34a/b/c)在瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织中的表达水平。
结果与结论：miRNA-34s(miRNA-34a/b/c)在瘢痕疙瘩组织中均呈下调表达(P <0.01)。表明该家族成员参与了瘢痕疙瘩的形成发展，下调表达的miRNA-34s可能导致了瘢痕疙瘩的肿瘤性生长。 -
透明质酸对人骨关节炎软骨细胞骨桥蛋白和CD44表达的影响
背景：软骨进行性破坏为晚期骨关节炎的特征性病变，骨关节炎相关因子透明质酸、骨桥蛋白、CD44在骨关节炎软骨中表达增加。
目的：通过透明质酸干预体外培养的人膝骨关节炎软骨细胞，探讨透明质酸对人膝骨关节炎软骨细胞 CD44与骨桥蛋白表达的影响。
方法：将软骨标本进行体外培养获取纯化的软骨细胞，分为3组：空白对照组、透明质酸干预组(100 mg/L)和透明质酸酶干预组(200 mg/L)。培养48 h后，采用Real-time Q PCR检测软骨细胞骨桥蛋白mRNA，CD44 mRNA表达水平。用SPSS 17.0统计软件包分析骨桥蛋白mRNA和CD44 mRNA经透明质酸干预前后表达的差异。
结果与结论：透明质酸组的骨桥蛋白 mRNA表达水平较空白组高，透明质酸酶组的骨桥蛋白 mRNA表达水平较空白组低；透明质酸组及透明质酸酶组的CD44 mRNA表达水平均较空白组低。结果提示透明质酸可以上调骨关节炎软骨细胞骨桥蛋白的表达；透明质酸在骨关节炎软骨细胞内对 CD44表达的影响具有双相性，其影响结果可能与透明质酸的相对分子质量有关。 -
不同分期骨关节炎滑膜细胞中COX-2 mRNA表达的差异
背景：COX-2基因实际存在于关节成纤维样滑膜细胞里，影响骨关节炎症的发生、发展。阐明不同分期骨关节炎滑膜细胞中COX-2基因表达量的差异对进一步深入了解骨关节炎的发生与发展，以及滑膜细胞在这一过程中的作用，具有重要的理论意义。
目的：分析COX-2 mRNA在不同分期骨关节炎成纤维样滑膜细胞中表达的差异。
方法：收集膝骨关节炎病变滑膜44例及正常滑膜12例，经原代细胞培养生长至4代的成纤维样滑膜细胞用于实验，应用实时荧光定量RT-PCR检测骨关节炎和正常成纤维样滑膜细胞中COX-2 mRNA的表达情况，后使用2-ΔΔCt方法进行相对定量分析。
结果与结论：COX-2 mRNA 在骨关节炎的成纤维样滑膜细胞中的表达明显高于正常成纤维样滑膜细胞(P <0.05)，其中骨关节炎早期组表达高，与骨关节炎中期组、晚期组比较差异有显著性意义(P <0.05)，骨关节炎中期组与晚期组中表达量差异无显著性意义(P >0.05)。结果说明COX-2mRNA可能是骨关节炎症病变过程中的重要生物学指标，且主要起作用于骨关节炎病变早期。 -
HPV16 E6小干扰RNA与宫颈癌细胞中E6 p53 p21关系的研究
目的 探讨HPV16 E6小干扰RNA(siRNA)与宫颈癌CaSki细胞中E6、p53、p21之间的关系.方法 2004年9月至2005年3月于四川大学华西第二医院,应用化学合成针对HPV16 E6的siRNA借脂质体转染CaSki细胞,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术检测E6 siRNA转染前后细胞中HPV16E6、p53、p21 mRNA及其蛋白表达的变化.结果 转染24 h,E6 mRNA的表达显著低于空白组(P＜0.05).各时间点p53、p21 mRNA的表达差异无显著性意义(P＞0.05).转染48 h,E6蛋白表达明显下调,p53、p21蛋白表达相应升高.结论 HPV16 E6 siRNA能特异、高效地沉默宫颈癌细胞E6 mRNA的表达,减少对野生型p53的降解,恢复p53蛋白的功能活性.RNA干扰(RNAi)技术可为HPV感染相关性疾病提供一种新的特异性基因治疗方法.
-
实时荧光定量RT-PCR检测急性白血病中Bmi-1基因mRNA的表达及意义
[目的]建立荧光实时定量RT-PCR ( FQ RT-PCR)检测Bmi-1基因mRNA的方法并研究该基因在急性白血病细胞中表达的意义.[方法]根据 Genbank提供的序列,设计目的基因Bmi-1及内参基因GAPDH的扩增引物,将 Bmi-1及GAPDH RT-PCR扩增片段克隆入载体pMD18-T simple,经测序鉴定正确后,进行纯化、定量及系列稀释,应用 SYBR GreenⅠ荧光染料,建立检测Bmi-1 mRNA的FQ RT-PCR方法,并对其线性及特异性进行评价.应用此方法检测21例急性白血病及10例健康人外周抗凝血中Bmi-1 mRNA的表达水平.[结果]该方法的线性范围为1.0×103～1.0×108copies/μL,相关系数为-1.00,熔解曲线分析扩增产物显示单一的峰,熔解温度(Tm)为80.4℃.急性白血病患者的相对表达量为0.56±0.12,健康对照组中Bmi-1 mRNA的相对表达量为0.19±0.08,两者的表达差异有统计学意义(P<0.05).[结论]实时荧光定量RT-PCR方法检测Bmi-1基因表达,具有高敏感性和高特异性等优点,可作为进一步研究 Bmi-1基因的方法.Bmi-1基因参与急性白血病的发生,可能是一种新的肿瘤标志物.
-
c-IAP1在宫颈癌中的表达及临床意义
目的:检测凋亡相关基因在宫颈癌中的表达,探讨维吾尔族宫颈癌的发病机制及与临床病理指标的关系.方法:采用实时荧光定量PCR及免疫组化对45例宫颈癌及21例正常宫颈组织中c-IAP1进行检测,并分析其表达水平与相应临床病理指标的关系.结果:凋亡抑制基因c-IAP1在宫颈癌中表达上调,c-IAP1 mRNA在宫颈癌中的表达量是正常宫颈组织c-IAP1 mRNA表达量的3.39倍.与正常宫颈相比,宫颈癌组织中c-IAP1mRNA在不同临床分期、有无淋巴结、肿瘤直径、肌层浸润均呈现高表达,呈显著正相关(P＜0.05),与病理分化程度无关.在蛋白水平,c-IAP1在宫颈癌的不同临床分期、有无淋巴结、肿瘤直径、临床分期、肌层浸润及病理分级中的表达差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:宫颈癌组织中c-IAP1的高表达可能在宫颈癌抗凋亡机制中起着重要作用,这对宫颈癌的易感性预测、早期诊断、疾病监测及其分子靶向治疗的开展也具有重要的指导意义.
关键词： 宫颈癌 c-IAP1 实时荧光定量RT-PCR 免疫组化 -
肠道病毒71型手足口病病毒3种检测技术比较研究
目的 探讨不同方法在肠道病毒71型(EV71)检测中的效果对比分析,方便对EV71做出及时而有效的诊断,为该病快速鉴别诊断奠定基础.方法 采用ELISA、荧光定量RT-PCR、RT-PCR 3种方法对EV71病毒特异性和灵敏度进行综合分析.结果 通过对比分析,ELISA方法检出阳性18份,阳性率为11.32％;实时荧光定量PCR方法检出阳性53份,阳性率为33.33％;RT-PCR方法检出阳性51份,阳性率为32.08％.结论 3种方法中实时荧光定量PCR方法具有较高的灵敏度及特异性,更具优势,更能满足临床需要.
关键词： 肠道病毒EV71 ELISA 实时荧光定量RT-PCR RT-PCR -
内参照基因在实时荧光定量RT-PCR检测中的应用
目的 建立测定内参照β-actin表达量的实时荧光定量RT-PCR两步法检测方法.方法 根据Genbank 中人β-actin保守区域序列设计荧光PCR适用的引物和探针,构建质粒标准品建立标准曲线用于荧光PCR相对定量,检测荧光PCR方法的特异性和重复性.结果 建立了人β-actin实时荧光RT-PCR检测方法.结论 本实验建立的人β-actin表达实时荧光RT-PCR两步法检测方法特异性和重复性较好,为β-actin作为定量RT-PCR中内参照基因进行人其他功能基因和病原基因表达的定量分析奠定了基础.
关键词： 内参照基因 实时荧光定量RT-PCR -
实时荧光定量RT-PCR和血清学方法联合应用检测风疹病毒
目的 探讨实时荧光定量RT-PCR和血清学方法联合应用检测风疹病毒.方法 采用实时荧光定量RT-PCR及酶联免疫吸附试验对临床标本进行检测.结果 在58份临床标本中,实时荧光定量RT-PCR法检测阳性率为100％,酶联免疫吸附试验风疹IgM抗体阳性率为82.8％.结论 实时荧光定量PCR法适合用于疾病的早期诊断和鉴别诊断,可作为酶联免疫吸附试验的一个补充诊断方法.
关键词： 风疹病毒 实时荧光定量RT-PCR 酶联免疫吸附试验
