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良恶性胸腔积液鉴别中SP70检测的临床意义
目的 探讨SP70抗原的检测对鉴别癌性胸腔积液和非癌性胸腔积液的诊断价值.方法 采用病例对照研究.收集2011年7月至2012年2月经临床确诊的肺癌患者胸腔积液108例和非癌性胸腔积液122例,采用双抗体夹心ELISA法对胸腔积液中SP70抗原进行检测；同时与电化学发光法检测CEA、CYFRA21-1和NSE的结果进行比较；采用直接免疫荧光法对胸腔积液脱落细胞上的SP70抗原进行检测,并与HE染色法的脱落细胞学检测结果进行比较,各组间阳性率比较采用x2检验或Fisher确切概率法.结果 癌性胸腔积液患者中SP70、CEA、CYFRA21-1、NSE的阳性率分别为72.2％、58.3％、52.8％和30.6％,显著高于非癌性胸腔积液组(9.8％、13.1％、23.0％和19.7％),SP70、CEA、CYFRA21-1、NSE的特异度分别为90.2％、86.9％、77.0％和80.3％；非小细胞肺癌组的总阳性率显著高于小细胞肺癌组的阳性率(74.3％＞0.0％),差异有统计学意义(P=0.02＜0.05),癌性胸腔积液患者中SP70的阳性符合率高于传统脱落细胞学HE染色的阳性符合率(72.2％＞47.2％),差异有统计学意义(x2=14.03,P＜0.05).结论 测定胸腔积液中及脱落细胞上的SP70抗原,能提高癌性胸腔积液诊断的敏感度和特异度.
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梅毒螺旋体感染不同血清学诊断方法的临床评价
目的使用酶联免疫吸附测试验(ELISA)方法替代快速血浆反应素试验(RPR)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)方法确定诊断梅毒螺旋体感染的必要性.方法使用目前国内为常用的梅毒螺旋体感染诊断RPR和TRUST试剂及ELISA试剂检测阴阳性献血员标本,同时与梅毒螺旋体明胶凝剂试验(TPPA)的检测结果进行比较,从而得到各种试剂的检测假阴性和假阳性率.结果在对30份阳性和20份阴性标本的检测中,所用一种RPR试剂和两种TRUST试剂的假阳性率,分别为15.0%(3/20)、10.0%(2/2 0)和10.0%(2/20),假阴性率分别为30.0%(9/30)、23.3%(7/30)和43.3%(13/30);而两种ELISA试剂均无假阳性,有一家试剂出现1例假阴性.ELISA试剂的假阳性和假阴性率均明显低于RPR和TRUST试剂(P <0. 01).结论在梅毒螺旋体抗体的临床检测中,有必要使用ELISA方法替代RPR和TRUST方法.
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D-二聚体测定在肺栓塞诊断中的应用价值
目的探讨全自动免疫分析系统(VIDAS)快速定量检测D-二聚体(DD)在诊断肺栓塞中的临床价值.方法使用VIDAS DD测定法对可疑静脉血栓塞患者血浆中纤维蛋白降解产物D-二聚体进行检测,并对这些可疑肺栓塞患者进行3个月的随访,了解是否有肺栓塞或深部静脉栓塞的症状.结果共有104例患者参加检测,32例患者(30.8%)的D-二聚体检测值<494 ng/ml,72例患者血浆中的D-二聚体检测值>494 ng/ml, 其中有16例患者通过肺通气-灌注扫描(V/Q)证实为肺栓塞.VIDAS DD法的敏感性为100%, 阴性预期值为100%.结论 VIDAS DD法可作为排除诊断肺栓塞的首选筛选试验,可在临床诊断中推广应用.
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三、四代酶联免疫吸附试验应用于HIV-1早期感染者的比较
目的 评价三代ELISA及四代ELISA对于HIV早期感染血样的灵敏度、窗口期和一致率.方法 收集2008至2010年在沈阳市的男男同性恋人群随访中发现HIV抗体阳转及中国医科大学附属第一医院就诊患者中发现的蛋白印迹试验(WB)确认带型不全患者HIV早期感染者血浆67份,进行三代ELISA、四代ELISA、WB确认试验及HIV-1 RNA检测.比较三代ELISA、四代ELISA对阳转期标本的检测灵敏度、一致率并动态观察血清阳转过程分析窗口期.三代与四代ELISA试剂灵敏度比较卡方检验进行统计学分析.结果 67份早期HIV-1感染者血清标本中,三代ELISA检出56份阳性,11份阴性,灵敏度83.6％(95％ CI72.5％～91.5％),四代ELISA检出63份阳性,1份灰区,3份阴性,灵敏度94.0％(95％ CI 85.4％～98.3％),四代ELISA灵敏度高于三代ELISA(x2=16.1,P＜0.01).三代ELISA与四代ELISA一致率86.6％(95％ CI76.0％～93.7％).三代ELISA阳性者感染时间早为16 d,四代ELISA阳性者感染时间早为9d.三、四代ELISA窗口期存在明显的个体差异.结论 四代ELISA对于HIV早期感染标本的检测灵敏度明显高于三代ELISA,窗口期更短.四代ELISA更适用于高危人群中的HIV早期感染的筛查.
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ELISA检测肿瘤患者热休克蛋白90α的影响因素分析
目的 探讨影响ELISA定量检测肿瘤患者血浆中热休克蛋白90 α(Hsp90α)的不同相关因素.方法 实验采用比对研究,分别使用含EDTA-K2和EDTA-K3抗凝剂的真空采血管采集2012年3至7月在中国医学科学院肿瘤医院门诊就诊的72例肿瘤患者全血标本,进行Hsp90α定量检测.配制含不同浓度内源性干扰物质(溶血血红蛋白、乳糜等)的血浆样本,与正常样本同时检测Hsp90 α的浓度.使用t检验分析各配对血浆样本中Hsp90 α浓度值的差异.结果 EDTA-K2抗凝管采集的血标本中Hsp90α浓度为(156.4±67.6)ng/ml,EDTA-K3抗凝管采集的血标本中浓度为(53.9±26.6) ng/ml,差异有统计学意义(t=10.68,P ＜0.01).乳糜浓度＞5％时血标本中Hsp90α浓度低于(34.3±2.0)ng/ml,正常血标本中浓度为(37.7±1.3) ng/ml,差异有统计学意义(=3.96,P＜0.05).不同浓度溶血的血标本中Hsp90α浓度均大于(94.2±7.2) ng/ml,正常血标本中浓度为(67.0±4.4) ng/ml,差异有统计学意义(t=-9.17,P＜0.05).类风湿因子(RF)浓度为25 U/ml的血标本中浓度为(39.0±3.5)ng/ml,正常血标本中浓度为(35.3±1.7) ng/ml,差异有统计学意义(t=-2.37,P＜0.05).黄疸浓度为4g/L时的血标本中浓度为(38.4±2.1)ng/ml,正常血标本中浓度为(35.7±1.4) ng/ml,差异有统计学意义(t=-2.97,P＜0.05).结论 外源性物质和内源性物质对ELISA检测血浆中Hsp90α的浓度均有干扰,在实验过程中应严格做好质量控制,尽量避免假阳性及假阴性结果的出现.
关键词： 肿瘤 HSP90热休克蛋白质类 酶联免疫吸附测定 -
VCA－IgA 与 Rta－IgG 联合检测诊断鼻咽癌的效能研究
目的：探讨VCA－IgA与Rta－IgG联合检测对鼻咽癌诊断的临床价值。方法收集2013年5月至2014年11月在海口市人民医院体检中心3913名健康体检者（组）；男2367名、女1546名。于耳鼻喉科就诊后，经病理活组织检查确诊为鼻咽癌的169例鼻咽癌患者（组）；男118例、女51例。两组血清标本分别进行EB病毒Rta－IgG、VCA－IgA（ ELISA法）检测。组间差异比较用卡方检验，采用ROC曲线评价诊断效能。结果 EB病毒Rta－IgG分别为鼻咽癌组93．5％（158／169）、健康体检组2．4％（93／3913）； VCA－IgA 阳性率分别为鼻咽癌组79．3％（134／169）、健康体检组8．9％（349／3913）。Rta－IgG诊断鼻咽癌的敏感度93．5％和特异性97．6％，均高于VCA－IgA敏感度79．3％（χ2＝14．49，P＜0．05）和特异度91．1％（χ2＝157．15，P＜0．05）。采用VcA－IgA／Rta－IgG联合检测进行分析，未能有效改善鼻咽癌诊断的效果，检测敏感度降低为72．8％（123／169）。结论 Rta－IgG的诊断效能优于 VCA－IgA。采用 VCA－IgA／Rta－IgG 联合检测模式对鼻咽癌临床诊断效能未有提高。（中华检验医学杂志，2016，39：609－612）
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聚合酶链反应-微孔板杂交技术用于结核分枝杆菌的检测
目的建立结核分枝杆菌的PCR-酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,使PCR结果判定更加客观.方法我们使用玻璃粉吸附提纯模板DNA,将PCR引物5′端标记生物素,用PCR产物与微孔板中预先包被的克隆靶基因杂交,然后用酶标链霉亲和素与杂交体中的生物素结合,后用酶底物与所标记酶进行显色反应,通过测定其吸光度来判断结果.结果所建立的PCR-ELISA检测法可提高检测的灵敏度和特异性.对50份来自结核病人高度怀疑有结核分枝杆菌的标本检测表明,PCR-ELISA检出22份阳性,比抗酸染色法(7/50)、培养法(13/50)和PCR-电泳法(18/50)检出率高,而20份证实无结核分枝杆菌的标本,几种方法检查均为阴性.结论该法可敏感、特异和客观地检测临床标本中的结核分枝杆菌.
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应用化学发光法检测抗核抗体特定靶抗原/抗体的临床多中心研究
目的 研究化学发光法(CLIA)检测抗核抗体(ANA)特定靶抗原/抗体的临床应用价值.方法 多中心研究.2016年4至7月对6家合作医院收集的811份标本,采用CLIA和免疫印迹法(LIA)开展抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗史密斯(Sm)抗体、抗干燥综合征抗原A(SSA/Ro60)抗体、抗干燥综合征抗原B(SSB/La)抗体、抗着丝点蛋白B(CENPB)抗体、抗双链DNA(dsDNA)抗体、抗核小体(Nuc)抗体和抗核糖体P蛋白(Rib-P)抗体的平行检测,比较两种方法抗体检出率、检测特异性以及检测符合率,对系统性红斑狼疮(SLE)高度特异性抗体(包括抗Sm、dsDNA、Nuc和Rib-P抗体)的差异样本采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行复测,并结合SLE临床诊断信息进行McNemar检验分析.结果 CLIA与LIA在检测ANA特定靶抗原/抗体时,具有相当的抗体检出率和特异性.两种方法在检测抗RNP、SSA/Ro60、SSB/La和CENPB抗体时,表现出良好的一致性(Kappa>0.75),而在检测抗Sm、dsDNA、Nuc和Rib-P抗体时,一致性一般(0.4
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正交设计在包虫病ELISA试剂盒中的应用与评价
目的 采用正交实验筛选包虫病ELISA试剂盒佳条件及试剂盒制备,检测其检验效能.方法 以检测样品吸光度为评价指标,对试剂盒抗原包被浓度(A)、样品稀释倍数(B)、酶标抗原稀释倍数(C)3个因素的4个水平进行L16(43)正交实验,筛选佳条件,并由新疆医科大学第一附属医院标本库提供2011年3月至2013年6月收集的36份经金标准确认的泡状棘球蚴患者血清,56份经金标准确认的细粒棘球蚴患者血清,72份对照组血清(包括健康人、肝硬化、肝炎等).检测其敏感度、特异度,采用F检验进行统计学分析.结果 正交设计结果显示包虫病ELISA试剂盒的3个影响因素大小依次是:酶标抗原稀释倍数＞样品稀释倍数＞抗原包被浓度,佳制备条件A1B2C4,即抗原包被浓度1 mg/L,样品稀释倍数1∶100,酶标抗原稀释倍数1∶160000,为佳条件.通过对试剂盒3个因素4水平进行正交设计,比较各组合之间的吸光度,可见因素抗原包被浓度(A),F=1.181,P=0.393,因素样品稀释倍数(B),F=2.544,P =0.152,因素酶标抗原稀释倍数(C),F=2.544,P=0.039.本试剂盒对细粒棘球蚴病和泡状棘球蚴病的敏感度分别是83％(30/36)、91％ (51/56);特异度为91％(29/32)、83％ (33/40);漏诊率17％(6/36)、9％(5/56);误诊率9％(3/32)、18％ (7/40);阳性似然比8.86(83/9)、5.20(91/18);阴性似然比0.18(17/91)、0.11(9/83).结论 正交设计有良好的发展前景,能够有效简便的筛选出制备包虫病ELISA试剂盒的优条件,提高其检验效能.
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肺炎链球菌自溶素蛋白LytA对社区获得性肺炎的血清学诊断意义
目的 通过原核表达技术获取肺炎链球菌(ATCC49619)自溶素LytA重组蛋白(rLytA),以此为抗原检测其抗体在健康人及社区获得性肺炎(CAP)患者外周血中的水平,为CAP的血清学诊断奠定基础.方法 根据Genbank中公布的肺炎链球菌M66菌株LytA基因序列设计合成特异性引物.以ATCC49619株基因组DNA为模板,采用原核表达技术获取相对分子质量为56 000的重组蛋白rLytA.以rLytA为抗原,建立ELISA反应模式,测定健康人及CAP患者相应IgM抗体,并与痰培养结果比较.应用χ2检验评价结果差异.结果 通过原核表达技术成功获得肺炎链球菌重组蛋白rLytA.以此为抗原,测得CAP患者血清中IgM类抗LytA的抗体滴度高于健康对照组,差异有统计学意义(P=0.000),诊断的敏感度、特异度分别为27.8%和100.0%,痰培养的敏感度和特异度分别为19.4%和72.2%.血清学诊断的敏感度与痰培养相比差异无统计学意义(χ2=0.693,P=0.405),但特异度显著高于常规痰培养结果(χ2=14.316,P=0.000).阳性预测值为100%,IgM类抗LytA抗体的阳性结果对肺炎链球菌的感染具有确诊价值.结论 以重组蛋白LytA为抗原建立ELISA反应模式,检测IgM类LytA抗体,可能为链球菌感染性肺炎提供一条早期快速、客观诊断的途径.
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心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体制备及酶免疫法的建立
目的研制人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体,建立双单克隆抗体两点一步夹心酶免疫法(简称"双抗夹心ELISA").方法用亲和层析法直接从人心肌组织中提纯cTnI,经免疫、融合、筛选、克隆等杂交瘤技术,制备出3株特异性抗cTnI单克隆抗体,选用其中互补的2株2F11和9F5,分别制成生物素化抗体和酶标抗体,建立双抗夹心ELISA检测法.结果用双抗夹心ELISA和美国PBM公司Life sign Troponin I检测试剂对40名健康献血员和34例急性心肌梗塞患者血中cTnI水平进行检测, 本法低检测限为0.8 μg/L,两者符合率分别为97.5%和93.9%,符合临床诊断要求.结论双抗夹心ELISA特异性强,灵敏度、准确度和精密度较高,具有应用及推广价值.
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血清新喋呤的酶联免疫吸附法测定
目的建立血清新喋呤的酶免疫测定方法,并确定血清新喋呤的正常范围.方法通过碳二亚胺将新喋呤分别与牛血清白蛋白、鸡白蛋白连接制成新喋呤-蛋白质交联物,用新喋呤-牛血清白蛋白交联物免疫Balb/c鼠,通过细胞融合筛选出产生抗新喋呤的单克隆抗体,并采用该单克隆抗体建立了血清新喋呤的酶联免疫吸附竞争抑制法.结果 412例献血员(正常组)血清新喋呤为5.2±2.2 μg/L(±s),49例消化道恶性肿瘤为14.8±10.5 μg/L(±s),21例皮肌炎为16.3±11.4 μg/L(±s).t检验表明,采用酶联免疫吸附法测定,消化道恶性肿瘤组、皮肌炎组的血清新喋呤与正常组比较P值均<0.001.本方法检测的批内变异系数(CV)为0.0363,批间CV为0.0917.结论本法操作简便、方法敏感、正常值范围明确、重复性好,可用于临床研究.
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抗异质性胞核核糖核蛋白A2/RA33抗体酶联免疫吸附法的建立及临床应用
目的探讨酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗异质性胞核核糖核蛋白A2(hnRNP A2)/类风湿关节炎(RA)33抗体在不同风湿性疾病患者中的阳性率及对RA早期诊断的意义.方法以纯化的重组蛋白hnRNP A2为抗原,用ELISA检测RA 179例、系统性红斑狼疮(SLE) 141例、其他弥漫性结缔组织病(CTD)97例、血清阴性脊柱关节病(SPA)30例、骨关节炎(OA)10例、关节痛/关节炎59例、正常对照40名,比较抗hnRNP A2/RA33抗体在各组人群中的阳性率,并评价其与RA患者临床和实验室检查指标间的关系及早期诊断的价值.结果抗hnRNP A2/RA33抗体在RA患者中的敏感性为36.9%、特异性为87.1%,在SLE、其他CTD、SPA和OA患者中阳性率分别为19.2%、7.2%、6.8%和0.抗hnRNP A2/RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为43.3%.结论以纯化的重组蛋白hnRNP A2为抗原的ELISA是检测抗hnRNP A2/RA33抗体,早期诊断RA的可靠方法.
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血管紧张素Ⅱ1型受体和抗α1-肾上腺素能受体自身抗体检测方法及临床意义
目的建立抗血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1-受体)自身抗体和抗α1-肾上腺素能受体(α1-受体)自身抗体的间接酶联免疫吸附法(ELISA),并探讨这两种抗体与高血压的关系.方法以合成的AT1-受体和α1-受体细胞外第二环功能表位肽段(AT1-165～191和α1-192～218位氨基酸序列)作抗原,建立ELISA方法,检测98例降压未达标组、96例降压达标组患者和40名正常人血清中抗AT1-受体和α1-受体自身抗体.结果阳性参考血清批内和批间变异系数分别为0.066、0.072和0.097、0.101,用抗原吸收后,吸光度(A)值分别降低2.5倍和2.3倍,98例降压未达标高血压患者中抗AT1-受体自身抗体和抗α1-受体自身抗体阳性率分别为41.8%,36.7%,明显高于降压达标组患者(10.42%、13.54%)和正常血压组(7.5%、5%),均P<0.01.结论抗AT1-受体自身抗体和抗α1-受体自身抗体检测法的特异性和敏感性高、操作简便,有助于临床开展高血压病的免疫学监测.
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肝细胞癌组织和血清中肝细胞生长因子的临床意义
目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)在慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌(HCC)患者肝组织和血清中的表达水平及其临床意义.方法 收集2003年12月至2008年8月期间天津市第三中心医院11份正常、6份肝炎、20份肝硬化、60份HCC组织(高分化21份、中分化23份、低分化16份),及其癌旁0、1、2、3 cm组织(N0、N1、N2、N3)各24、21、54和43份.用实时荧光定量逆转录(RT)-PCR分析不同肝组织HGF mRNA表达；同时,用ELISA测定健康体检者、肝炎、肝硬化患者血清标本各20份及HCC患者57份术前1d、术后1周内血清标本的HGF浓度.多组间组织HGF mRNA水平比较用Kruskal-Wallis检验,两组间组织HGF mRNA水平比较用Mann-Whitney U检验.多组间血清HGF浓度比较用单因素方差分析,两组间血清HGF浓度比较用LSD-t检验.性别、年龄、肿瘤类型、肿瘤直径等临床因素对HCC患者组织、血清HGF水平的影响及其与患者预后的相关分析分别用Logistic回归分析及Cox比例风险模型.筛选出影响患者术后生存的独立预后指标,以中位数水平分层,由Kaplan-Meier生存曲线计算不同分层水平的死亡终点事件发生风险,并用Log-rank检验评价分层间死亡终点事件发生率.结果 实时荧光定量RT-PCR检测健康对照组、肝炎、肝硬化、N3、N2、N1、N0、HCC组HGF mRNA表达分别为0.99(0.78～1.66)、2.15 (1.06～3.40)、1.78(1.18～2.73)、4.59(2.67 ～8.63)、3.86(2.25 ～6.45)、3.12(1.59 ～5.74)、2.92(0.88 ～5.99)、0.48(0.19～1.06);ELISA检测血清HGF在健康体检者、肝炎、肝硬化及HCC患者术前1d、术后1周的浓度分别为(0.31±0.05)、(0.65±0.07)、(1.27 ±0.30)、(2.06±0.66)及(2.14±0.52)μg/L.不同肝组织相比,HGF mRNA在N3组织中表达高,而在HCC组织中的表达不仅低于以上各良性肝病组织,而且低于正常肝组织(U=196.50,P=0.03)；不同血清HGF浓度相比,HGF在肝炎、肝硬化、HCC患者血清中的浓度均明显高于健康对照组,且HCC患者术后1周的血清HGF浓度高于其术前血清HGF浓度(t=2.70,P＜0.01)；Logistic回归分析显示,HCC患者癌组织及血清HGF水平分别受肿瘤数目及Child-pugh肝功能分级影响,OR分别为0.15(95％ CI:0.03 ～0.72,P＜0.05)和0.13(95％口:0.27 ～0.89,P＜0.05).Cox比例风险模型分析显示,肿瘤组织HGF mRNA水平、血清HGF浓度是影响HCC患者术后生存的独立预后指标,OR分别为0.02(95％ CI:0.00 ～0.52,P＜0.05)和10.01(95％CI:1.16 ～86.23,P＜0.05).以肿瘤组织HGF mRNA 2-AACT中位数0.49对HCC患者进行分层分析显示,两组患者术后累计生存率差异无统计学意义(x2=0.13,P=0.72).以血清浓度中位数0.69 μg/L对HCC患者进行分层分析,HGF≥0.69 μg/L的HCC患者,其术后死亡的风险是HGF＜0.69 μg/L患者的2.84倍(95％ CI:1.03 ～7.92,P＜0.05).结论 HCC患者癌组织中HGF mRNA表达降低,但癌旁组织HGF mRNA表达和血清HGF浓度明显升高,且血清HGF浓度影响患者预后,检测血清HGF有望用于评估HCC患者预后.
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三种不同技术原理的第4代HIV诊断试剂的临床检测性能比较研究
目的 比较3种HIV第4代抗原/抗体联合诊断试剂针对HIV早期感染者标本、国际血清盘标本及临床常规标本的检测性能.方法 横断面研究.收集2009至2011年沈阳市男男同性恋人群随访中发现的HIV早期感染者标本37份、4套美国BBI公司、NABI公司和英国NIBSC的不同类型国际血清盘标本66份以及703份中国医科大学附属第一医院2011年10月间常规就诊患者的HIV筛查标本,分别采用化学发光试验(CLIA)、电化学发光试验(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)3种HIV第4代血清学诊断试剂进行检测,比较3种试剂的检测敏感度和特异度,通过x2检验进行统计学分析.结果 37份早期HIV-1感染者标本及22份HIV-1阳转血清盘标本中,ECLIA和CLIA试剂的敏感性均为96.61％ (95％ CI 91.5％ ～ 100.0％),高于ELISA试剂的敏感性83.93％(95％ CI 75.0％ ～92.9％)(x2=5.341,P＜0.05)；3种试剂对12份不同亚型的抗体血清盘标本的敏感性:ECLIA试剂＞ELISA试剂＞CLIA试剂；3种试剂对25份不同亚型的病毒裂解物血清盘标本的敏感性:CLIA试剂＞ECLIA试剂＞ELISA试剂；3种试剂对7份P24抗原定量血清盘标本的检出下限分别为:CLIA试剂0.705 IU/ml,ECLIA试剂0.843 IU/ml,ELISA试剂6.691 IU/ml;703份临床常规筛查标本中,3种试剂的特异性分别为100％ (CLIA)、99.86％ (ECLIA)和99.71％ (ELISA),差异无统计学意义(P=0.914).结论 HIV第4代CLIA和ECLIA血清学诊断试剂的检测敏感性优于ELISA试剂,其检测特异性未受到临床常见干扰因素的影响,两者更适用于临床常规筛查以及高危人群的HIV早期感染的筛查.
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血清基质金属蛋白酶9和乙酰肝素酶及组织蛋白酶诊断卵巢癌浸润转移程度
目的 探讨检测血清组织蛋白酶L(CL)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、乙酰肝素酶(Hpa)对卵巢癌浸润转移判断的临床应用价值.方法 用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和电化学发光免疫分析法(ECLIA)分别检测广西医科大学附属肿瘤医院2003年9月至2009年10月217例术前未治疗卵巢癌[国际妇产科联盟( FIGO)分期Ⅰ～Ⅱ期83例、Ⅲ～Ⅳ期134例]、100例良性卵巢肿瘤患者(良性卵巢肿瘤组)和101名健康妇女(健康对照组)外周血MMP-9、Hpa、CL含量；同时,对卵巢癌患者进行临床病理关联因素分析,并以卵巢上皮癌临床病理诊断为金标准,绘制受试者工作特征( ROC)曲线,以评价3项指标诊断术前卵巢癌患者浸润转移的敏感度和特异度.结果 血清中CL、MMP-9和Hpa含量在卵巢癌组分别为(21.23±8.17)、(193.95±42.49)、(7.68±2.32) μg/L,良性卵巢肿瘤组分别为(10.97±3.84)、( 143.66±28.47)、(4.86±1.37) μg/L,健康对照组分别为(5.59±1.75)、(57.99±11.42)、(2.77±0.80)μg/L,卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组和健康对照组比较,差异有统计学意义(t值CL分别为- 13.242和- 13.498,MMP-9分别为- 14.521和-21.290,Hpa分别为-10.896和- 18.280,P均＜0.001);卵巢上皮癌组血清CL含量[(21.59±8.24) μg/L]高于非卵巢上皮癌组[( 19.57±7.69) μg/L,F=11.209,P=0.048]；Ⅰ～Ⅱ期组血清中CL、MMP-9和Hpa含量分别为(19.66±7.83)、(182.63±42.30)、(7.21±2.05) μg,/L,低于Ⅲ～Ⅳ期组[分别为(22.64±8.31)、(202.81±39.74)、(8.51±1.92) μg/L,F值分别为12.452、70.565、195.122,P值分别为0.030、0.002和0.000]；卵巢上皮癌低分化组血清CL、MMP-9和Hpa含量分别为(23.04±7.67)、(200.12±40.82)、(8.22±1.92) μg/L,也高于高-中分化组[分别为(18.54±7.30)、(173.43±39.37)、(7.20±2.51)μg/L,F值分别为24.545、60.286、9.077,P值分别为0.004、0.035和0.001]；腹腔有肿瘤浸润转移组血清CL及MMP-9含量分别为(22.96±8.41)、(200.44±43.82) μg/L,高于无腹腔浸润转移组[分别为(19.07±7.36)、(181.04±36.10) μg/L,F值分别为12.210、18.084,P值分别为0.030、0.010]；有肿瘤远处转移组血清Hpa含量[(8.63±1.69) μg/L]高于无远处转移组[(7.93±2.11) μg/L,F=9.430,P =0.042].经ROC曲线分析,术前血清CL、Hpa、MMP-9含量测定诊断卵巢癌转移的敏感度分别为60.9％ (70/115)、69.6％ (80/115)和72.2％(83/115),特异度分别为57.4％(26/62)、67.2％ (20/62)和68.9％( 19/62).结论 卵巢癌患者血清CL、MMP-9和Hpa含量增高可能与肿瘤发生进展相关,血清3项指标检测对术前判断卵巢癌浸润转移程度有一定的临床参考价值.
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青海省献血者巨细胞病毒的血清学调查
目的为了解青海省献血者巨细胞病毒(CMV)感染和监控情况.方法应用间接酶联免疫吸附试验检测4 709名献血者CMV抗体阳性率;采用96孔板ELISA法检测CMV-IgM、IgG抗体.结果 4 709名献血者CMV抗体阳性率达57.7%,即2 614名CMV抗体阳性.女性CMV阳性率(60.7%)高于男性(53.3%).不同民族中,土族(49.8%)低,蒙古族高(64.8%).青海省献血者CMV感染与大多数欧洲国家的抗体血清预期值相近为40%～65%,较我国一般人群中抗CMV阳性率90%低.结论提示我省的CMV感染率较低,血液质量监控良好.
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时间分辨免疫荧光定量检测乙型肝炎病毒前S1抗原的研究
目的建立时间分辨免疫荧光定量分析乙型肝炎病毒PreS1抗原的方法.方法以基因重组的带有PreS1抗原的乙型肝炎表面抗原作标准品,应用双抗体夹心免疫荧光分析方法,用抗PreS1单克隆抗体和抗-HBs分别作为固相抗体和铕标记抗体,若样本中含有PreS1抗原,则形成抗体-抗原-铕标记抗体复合物,加增强液解离铕离子,采用时间分辨荧光测量技术,对乙型肝炎病毒PreS1抗原进行检测.结果自制TRFIA试剂检测PreS1抗原,单侧95%参考范围为0～0.26 ng/ml;自制TRFIA试剂与ELISA试剂对乙型肝炎患者血清标本中PreS1抗原的检测,TRFIA方法灵敏度高于ELISA方法,250份乙型肝炎患者血清标本中有3例标本ELISA方法结果为阴性,而用TRFIA方法可检测到PreS1抗原;对于弱阳性标本用ELISA方法检测不到时,TRFIA方法仍可检出.ELISA方法在一阳性标本1:4 096倍稀释时结果为阴性,而TRFIA方法在1:16 384倍稀释时仍为阳性;高、中、低三个浓度,批内和批间精密度测试变异系数(CV,%)均小于10%,平均回收率为103.3%;TRFIA方法检测PreS1抗原与HBsAg及HBeAg无交叉反应;50份我院正常体检者血清标本进行PreS1抗原的检测,结果均正常,特异性100%.结论 TRFIA方法定量检测PreS1抗原,灵敏度高,特异性强,能够准确及时敏感地反映患者体内乙型肝炎病毒的复制情况.
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冠心病患者血浆大内皮素水平与N末端脑钠肽及心功能关系的研究
目的 观察冠心病(CHD)患者血浆大内皮素(Big endothelin-1,Big ET-1)含量变化并探讨其与N末端脑钠肽(NT-proBNP)及心功能的关系.方法 选择经冠状动脉造影确诊的CHD患者1 292例,健康对照者160名,用酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定其血浆Big ET-1和NT-proBNP水平,并进行对比分析.结果 CHD患者组血浆Big ET-1和NT-proBNP水平[(2.82 fmol/ml)及(643.70 fmol/ml)]显著高于健康对照组[(2.06 fmol/ml)及(397.6 fmol/ml)],差异有统计学意义(P＜0.01);且冠心病心肌梗死(MI)组[(2.90 fmol/ml)及(801.55 fmol/ml)]＞心绞通(AP)组[(2.77 fmol/ml)及(539.95 fmol/ml)]＞健康对照组[(2.06 fmol/ml)及(397.6fmol/ml)],P＜0.01.方差分析显示CHD患者组血浆Big ET-1和NT-proBNP浓度都随着冠心病的严重程度加重(NYHA心功能分级升高)而显著上升,各组间差异均有统计学意义(P=0.024,P＜0.01);多因素相关分析表明血浆Big ET-1和NT-proBN浓度与美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级之间具有良好的正相关性(r=0.359,P＜0.01及r=0.602,P＜0.01),Big ET-1和NT-proBNP也密切相关(r=0.315,P＜0.01).结论 Big ET-1和NT-proBNP可能参与了冠心病及心功能损伤的病理生理过程,血浆BigET-1升高与NT-proBNP升高呈正相关.
