首页 > 文献资料
-
RT-PCR法检测HNP1基因在气管上皮细胞转染后的表达
采用脂质体转染法将人中性粒细胞防御素(HNP1)的cDNA重组真核表达质粒pBabe-Neo-HNP1导入无血清培养的人和兔的气管粘膜上皮细胞,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,在核酸水平检测HNP1在气管上皮细胞的表达.结果:在人和兔的转染上皮细胞中均可检测到HNP1mRNA的表达,而在未转染的上皮细胞中RT-PCR检测结果呈阴性.这一结果与作者先前用免疫组化法在蛋白质水平上检测的结果一致,并证明pBabe-Neo-HNP1转染至气管粘膜上皮细胞后能得到有效表达.
关键词: 防御素 气管上皮细胞 基因转染 逆转录-聚合酶链反应 -
hBD-2在皮肤领域的研究
1 概述在人体对抗外来病原微生物的天然免疫反应中,皮肤及黏膜上皮是第一道防线.新近发现另一防御物质抗菌肽,命名为人类β-防御素-2(human-β-defensins,hBD-2).它是一类广泛存在于昆虫、植物、动物及人类体内,具有强力广谱抗病毒、细菌、真菌及螺旋体作用的内源性抗生素肽.它们是参怀宿主天然免疫活动的重要组成部分[1].
-
β-防御素:治疗感染的新希望
天然免疫是抵御病原微生物入侵的初免疫反应,而内源性抗菌肽是天然免疫的重要介质.近20年来,已发现120余种抗菌肽,防御素是其中的一大家族,在自然界分布广泛,从植物、昆虫到动物均有表达.在人类,防御素按结构分为α-防御素、β-防御素两种亚型,α-防御素主要由中性粒细胞和小肠潘氏细胞产生,而β-防御素广泛表达于多种器官的上皮细胞和粘膜下腺体.β-防御素具有广谱高效的抗微生物作用,分布于机体抵御病原微生物入侵的第一道防线,在使机体免受外界微生物侵袭中有着重要的作用.本文就目前发现的四种人类β-防御素的特点及其与感染性疾病之间的关系进行一概述.
-
防御素及其生物学活性
内源性抗生素肽(endogenous antibiotic peptides)是近10多年来在天然免疫肽分子机制研究方面所获得的重要进展之一[1].内源性抗生素肽是指由真核细胞基因编码的肽类抗菌分子,而传统抗生素则是由微生物产生,且多为不同酶解的分步代谢产物.迄今已从不同种属动物(昆虫、被囊动物、两栖动物、鸟类、哺乳动物等)以及植物发现上百种分子,其中防御素(Defensins)由于其重要医学意义而特别引人瞩目.本文扼要综述防御素的分子结构、抗菌活性、基因表达及其在机体抗感染中的作用.
-
中药诱导小鼠防御素表达
目的 探讨中药诱导小鼠肺组织β-防御素2、3的表达.方法 将60只C57小鼠随机分为试验组和对照组,试验组分为4个药物组和2个对照组,每个药物组分为2个剂量组,分别腹腔注射小剂量和2倍剂量的黄芪、鱼腥草、板蓝根和香菇多糖,阴性对照组小鼠腹腔注射生理盐水,阳性对照组小鼠腹腔注射脂多糖.观察24h后处死,采取RT-PCR方法检测小鼠肺组织β-防御素2、3的表达.结果 黄芪小剂量组和2倍剂量组检测到小鼠肺组织β-防御素2表达,两组间差异有统计学意义(P<0.01),黄芪2倍剂量组检测到β-防御素3表达.结论 中药黄芪可诱导小鼠肺组织β-防御素2、3表达.
-
益生菌VSL#3对Oxazolone小鼠结肠炎结肠黏膜中β防御素-2表达的影响
目的 观察益生菌VSL#3对Oxazolone小鼠结肠炎结肠黏膜中β防御素-2表达的影响.方法 建立Oxazolone小鼠结肠炎模型并分为VSL#3治疗组、SASP治疗组、治疗对照组.免疫组化方法、RT-PCR及Western blot检测各组结肠粘膜组织中β防御素-2的蛋白及mRNA的表达.结果 免疫组化方法、RT-PCR检测及Western blot检测发现VSL#3治疗组小鼠结肠粘膜中β防御素-2的蛋白及mRNA的表达低于治疗对照组,与SASP治疗组比较差异没有显著性.结论 VSL#3对Oxazolone诱导的小鼠结肠炎有治疗作用,其作用机制可能与下调β防御素-2的表达有关.
-
抗菌肽及其临床应用现状
就抗菌肽的类型、理化特征及结构、临床应用前景及可能遇到的问题进行综述.
-
牦牛中性粒细胞防御素的分离纯化及抗菌活性
目的:分离牦牛中性粒细胞(PMN)防御素并检测其抗菌活性.方法:运用Percoll密度梯度离心法,从新鲜牦牛全血中分离纯化牦牛中性粒细胞,用50 mL/L冰乙酸抽提,提取液经Bio-Gel P-10聚丙烯酰胺凝胶过滤和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,对活性多肽进行质谱分析,并对其中3个肽进行氨基酸组成分析,用琼脂弥散法检测三种多肽的抗菌活性.结果:获得13种活性多肽,其中三个肽为牦牛中性粒细胞防御素1~3,并具有很强的抗菌活性.结论:PMN存在防御素并具有广谱抗菌活性,在天然免疫中发挥着重要作用.
-
汉中地区孕妇生殖道B族链球菌定植和防御素水平的相关性研究
目的 探讨陕西地区孕妇B族链球菌定植状况及其对防御素水平的影响.方法 2011年1月~2013年1月汉中市第二人民医院妇产科就诊的孕妇2 251例参与该研究.常规方法分离培养和鉴定B族链球菌.ELISA方法检测阴道冲洗液(VLF)中防御素HBD-2和HBD-5水平.结果 2 251例孕妇中,生殖道定植B族链球菌有810例,占36.0%,高于国内相关报道.B族链球菌定植孕妇阴道冲洗液中的HBD-2和HBD-5水平明显高于GBS非定植组(9.8±9.3 mg/L,77.5±66.4 mg/L vs 7.2±7.5 mg/L,27.3±21.7 mg/L).结论 孕妇B族链球菌定植状况值得重视,防御素在B族链球菌发病机制中可能起重要作用.
-
防御素与口腔疾病的关系
防御素(defensins)是在哺乳动物中发现的一类重要的内源性抗生素肽家族,具有广谱、高效的抗微生物活性,是机体天然免疫机制的重要组成部分.本文将就防御素的概况和在口腔疾病领域的研究进展作一综述.
-
人中性粒细胞多肽体外杀伤肿瘤细胞的实验研究
目的:观察人中性粒细胞多肽(human neutrophil peptides,HNP)对实体瘤胃癌细胞系和卵巢癌细胞系的毒性作用.方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞杀伤活性.结果:HNP对胃癌细胞系和卵巢癌细胞系的毒性作用呈剂量和时间依赖性,在100mg/L,8h,杀伤率达87%,比较二者的毒性作用,其差异不显著.结论:HNP对这两种肿瘤细胞均具有显著的毒性作用,该毒性作用在这两种肿瘤细胞中无特异选择性.
-
抗菌肽、防御素与皮肤病的关系
抗菌肽(AMPs)又名抗微生物肽,在自然界从细菌到哺乳动物中广泛存在着的一类具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤活性的多肽,是生物体防御素系统产生的一类小分子肽,构成了人体的先天性防御机制,可有效防御病原微生物感染。抗菌肽、防御素与皮肤病,如银屑病、外伤、特应性皮炎、性传播疾病、酒渣鼻等的关系已成为众多学者专家研究的热点。
-
β-防御素研究进展
防御素(defensins)是一族具有广谱抗微生物和细胞毒活性的多肽,是天然免疫的重要介质,属内源性抗生素肽(endogenous antibiotic peptides)家族.防御素在自然界广泛分布,包括哺乳动物、鸟类、两栖类、昆虫和植物.
-
卡介苗增强人肺腺上皮细胞β-防御素-1基因的转录
目的:检测卡介苗(BCG)胞壁蛋白对人β-防御素-1(hBD-1)基因表达的影响,并初步分析该基因5′-端旁侧区中的BCG作用元件.方法:经Sephadex G-150层析柱分离得到BCG细胞壁蛋白组份.用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和Northern杂交分析法检测hBD-1 mRNA在肺腺上皮细胞的表达.一系列逐渐缩短的hBD-1基因5′-端序列被连接入无启动子的pCAT Basic质粒,构建了CAT报告质粒.ELISA法检测报告基因表达.结果:热灭活的BCG全菌(50 mg/L)及分子量在18-30 kDa的胞壁蛋白组份(3 mg/L)刺激SPC-A-1细胞8 h后,hBD-1 mRNA表达明显增强.hBD-1基因-314到+54区域具有BCG诱导的转录活性,其中含有转录因子C/EBPβ、AP-1、CP2结合位点.结论:BCG胞壁蛋白组份(18-30 kDa)能够增强SPC-A-1细胞hBD-1 mRNA表达,其基因上游序列(-314/+54)含有C/EBPβ、AP-1、CP2结合位点,与BCG的诱导作用有关.
-
人源性抗菌肽的研究现况
抗菌肽又称为肽抗生素是约于20~40个氨基酸组成的一类具有生物活性多肽,它具有分子量小、热稳定、水溶性好、抗菌谱广等优点.除有非特异性的抗细菌、病毒、真菌、原虫、及抗肿瘤作用外,还是生物体天然免疫的重要组成.
-
防御素研究概况
防御素是近年来发现的一类广泛存在于生物界具有广谱抗微生物活性的小分子多肽,有抗细菌、真菌、螺旋体和部分病毒及杀伤肿瘤细胞等多功能效应,其效能强大,且至今尚未发现病菌株对它产生耐药性,有关研究目前已成热点,受到广泛关注.因此,积极研究和开发它意义重大,前景广阔.本文从防御素的来源着手,对其种类和分子结构、生物学活性、分子生物学特征、应用前景等方面均作了较全面的论述.