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体外微核技术及其进展
近年来,随着分子生物学技术(荧光原位杂交、抗着丝粒抗体染色等)的引进和自动化检测等研究的完善,大大拓展了微核试验的检测和应用范围.微核试验从早期建立的只能判断染色体断片而不能区分其来源的常规试验现已发展成为不仅能检测细胞微核率,还能分析微核来源为非整倍体毒剂还是断裂剂,并快速精确检测到非整倍体等多种遗传损害终点的新微核试验,并且其方法也由体内发展到体外.体外微核技术的研究将具有广阔的应用前景.
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几种汽油增氧剂的急性毒性和微核试验
随着无铅汽油的普遍推广使用,作为四乙基铅替代品的汽油增氧剂和抗爆剂--甲基叔丁基醚(methyltertiary-butyl ether,MTBE)对环境的污染问题也日益受到人们的重视.
关键词： 汽油增氧剂 小鼠、大鼠经口急性毒性 微核试验 -
丙烯酸-2-乙基己酯的3项致突变试验研究
目的 验证丙烯酸-2-乙基己酯(2-EHA)的遗传毒性.方法 采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验),小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试.Ames试验设每皿0.08、0.4、2.0、10.0和50.0山剂量组,另设自发对照组、溶剂对照组和阳性对照组;微核试验设278、555、1 110和2 220 mg/kg·bw剂量组,另设溶剂对照和阳性对照组;TK基因突变试验设12.5、25、50和100 μmol/L剂量组,另设溶剂对照和阳性对照组.结果 Ames试验中,加或不加S9的情况下,受试物对TA97、TA98、TA100和TA102菌株均未显示致突变作用.微核试验中,各剂量组微核率与对照组比较,差异无统计学意义.TK基因突变试验两较高剂量组突变频率均高于溶剂对照100×10-6以上,试验结果为阳性.结论 综合考虑前期试验结果及国外相关研究,认为丙烯酸-2-乙基己酯具有遗传毒性的可能性较小.
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11种中成药60钴-γ射线辐照前后的致突变试验观察
近年来由于中药卫生标准的严格实施[1],中成药的质量有了很大提高,但因中药品种繁多,来源复杂,有些还很难保证卫生质量.目前不少中药生产厂的产品在出厂前发现达不到卫生质量标准的,通常自行采取补救措施,即60钴-γ射线辐照灭菌,其辐照剂量随意确定,辐照后药品质量的变化,药理学活性是否降低、毒理学指标有否改变等等,均无科学数据来证实.为此我们列题[2]进行了研究.对11种中成药在大剂量辐照60钴-γ射线后和辐照前共22个受检药品,用致突变试验方法-Ames试验和微核试验进行了研究.
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妇女长期口服避孕药外周血淋巴细胞微核的变化
口服避孕药(oral contraceptive, OC)的出现对社会生活的各个方面,包括妇女健康、生育能力控制等方面都产生了很大影响.多年来的实践已认同口服避孕药的避孕效果,证明是一种有效性极高的避孕措施并在世界范围内广泛使用.对口服避孕药中激素含量和成分的不断改进,大大提高了口服避孕药的品质和安全性.
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国内外5种香烟凝集物的致突变性比较
烟草中可计量的化学物质有1 200多种.在吸烟过程中,香烟经不完全燃烧产生热裂解和热化合反应,又形成大量的有害化学物质,其中有致突变物、致癌物和促癌物,是引起人发生肺癌的主要原因[1].国内外大量资料及我们以前的实验都证实了香烟凝集物具有致突变性.我们采用Ames试验,微核试验,睾丸生殖细胞染色体畸变3种方法,对3种国产烟和2种进口烟的致突变性进行了比较.
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茶多酚对亚砷酸钠致小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用
地方性砷中毒是世界性公共卫生问题之一,流行病学研究表明砷是人类的一种公认的致癌物.长期饮用含砷化物的水可对体内染色体DNA造成损伤[1],亚砷酸钠是砷化物的一种,给小鼠染毒后可导致体内骨髓等多种脏器细胞的DNA损伤[2]及诱发微核的形成[3].这些研究均提示砷及其化合物有一定的遗传损伤作用,对于其导致遗传损伤的机制,有研究认为可能与其在代谢过程中产生的自由基有关[4].茶多酚(Teapolyphenols,TP)是一种从茶叶中提取出的纯天然复合物,约占茶干重的25%,它有30多种酚性物质,其中的儿茶素为重要,约占多酚总量的60%～80%.儿茶素类化合物因含有酚性羟基,极易发生氧化、聚合、缩合等变化,决定其具有较好的抗氧化能力和清除自由基的能力[5].本研究将以小鼠的骨髓细胞作为研究对象,以亚砷酸钠(Sodium arsenite,NaAsO2)进行小鼠体内急性染毒,在此基础上以茶多酚进行预防性干预,以单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)和微核试验作为遗传损伤的检测手段,观察茶多酚的预防性干预是否能对亚砷酸钠所致的遗传损伤具有保护性作用,从而对地方性慢性砷中毒的防治提供一定的实验依据.
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甲醛对人胚肺成纤维细胞的遗传毒性
整体动物中毒的表现都是继发于细胞中的异常变化.肺作为血气交换的重要场所,同时也是甲醛等众多气体污染物进入人体的门户及靶器官,是毒理学研究的重要对象.国际癌症研究机构将甲醛列为人体鼻咽癌可能致癌物,对细胞凋亡及细胞周期的研究尚未见报道,本实验通过研究甲醛对人胚肺成纤维细胞的致微核、细胞凋亡及对细胞周期的毒性作用,进一步探讨甲醛的遗传毒性,为甲醛的致突变性及其致癌机制提供新的信息.
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紫杉醇遗传毒性研究
目的 探讨紫杉醇的遗传毒性作用.方法 进行Ames试验,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)进行细胞毒性试验,并根据细胞毒性试验结果,在加和不加代谢活化系统的条件下,用CHL细胞进行体外哺乳动物细胞染色体畸变试验.结果 Ames试验结果为阴性;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验中,30.0 mg/kg· BW剂量组雌、雄小鼠微核率分别为20.4‰和20.0‰,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);细胞毒性试验中,5 000、1 667、556、185、62、21和7μg/ml剂量组RGR值分别为56.7％、63.6％、72.7％、73.2％、82.5％、89.2％和93.2％,显示紫杉醇有细胞毒性;在加和不加代谢活化系统的条件下5 000、1 667和556μg/ml剂量组致CHL细胞染色体畸变率分别为42.33％、27.67％、22.33％;39.33％、26.00％和20.33％,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 紫杉醇对原核细胞未显示致突变作用,在真核细胞体内和体外实验中均显示对染色体具有损伤作用.
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乙醇胺某些致突变试验研究
目的 检测乙醇胺的诱变性,为其安全性评价提供资料.方法 采用3种致突变试验:鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验),小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验.Ames试验设剂量组为0.08、0.4、2.0、10.0和50.0μl/皿,另设空白、溶剂、阳性对照组;微核试验设剂量组为343.75、687.5和1 375.0 mg/kg,另设阴性、阳性对照;TK基因突变试验设剂量组为4、6、8和10 mmol/L,另设阴性、阳性对照组.结果 Ames试验中,加或不加S9的情况下,乙醇胺对TA97和TA100菌株有致突变作用.微核试验中,雌雄鼠微核率均呈现剂量-反应关系;雄鼠低、中两剂量组以及雌鼠中剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异具有统计学意义.TK基因突变试验各剂量组突变频率与阴性对照比较,差异均无统计学意义.结论 在本次实验条件下,测试剂量范围内,Ames试验、微核试验结果提示阳性,TK基因突变试验显示阴性.乙醇胺遗传毒性尚需结合其他检测系统进行探究和验证.
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氯化汞诱发非整倍体效应的微核试验和CREST染色的研究
目的 探讨低浓度氯化汞在体外试验中对V79细胞非整倍体诱发效应.方法 体外培养条件下,低浓度氯化汞(0.005～10.0 μmol/L)染毒V79细胞,然后进行微核形态学分析并计算微核率;同时用CREST染色计算微核着丝粒阳性率.本试验采用SPSS11.5进行统计分析.结果 V79细胞经氯化汞染毒后,各剂量组的微核率均明显增加,呈现剂量-效应关系,也存在时间-效应关系;微核形状以圆形为主,与染色体断裂剂诱导的微核形状相似,但大微核发生率与VCR相似,即21.4%～27.9%.HgCl2各剂量组微核着丝粒阳性率为47.4～56.3%.结论 氯化汞在低浓度下依然造成细胞染色体的损伤,具有一定的非整倍体毒性和染色体断裂效应,但以非整倍体毒性为主.
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莱克多巴胺的微核与精子畸形试验评价
莱克多巴胺是一种用于提高猪瘦肉率的新兽药,其LD50(ICR小鼠)为1 829 mg/kg,属于低毒性药物.我们根据有关新兽药的评价要求[1],对其进行了有关的毒性评价,现将微核和精子畸形试验报道如下.
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维吾尔药刺山柑果风湿止痛贴的遗传毒性研究
刺山柑果为山柑科刺山柑(Capparis spinosa L.)的果实,我国主要分布于新疆、甘肃和西藏等地区,主要有祛风、散寒和除湿的作用,在维吾尔族民间有着广泛的应用[1].现代医学研究表明,刺山柑果的主要成分为黄酮类、生物碱类和甾体类化合物,具有显著的抗炎镇痛、抗氧化作用[1-4].刺山柑果风湿止痛贴是由刺山柑的果实制成的经皮给药剂型,其制备方法及应用已获得国家发明专利(专利号:ZL 201010612158.6),但与其相关的毒理学研究资料还未见报道.
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栎精的毒性和致突变作用
栎精是天然植物中提取的一种具有祛痰、止咳,并有一定的平喘作用小分子化合物.做为一种抗氧化剂,可以清除体内有害的化学物质氧自由基,使脑细胞少受氧自由基的损伤;同时研究表明栎精具有明显抗诱变作用[1-2].由于其自身结构上具有2个苯环的特点决定了栎精具有明显的抗突变作用又有明显的致突变性[3-4].本试验采用Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验研究栎精的致突变作用.
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5％D-柠檬烯水剂毒理学安全性评价
D-柠檬烯(D-limonene)又称苎烯,学名1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烯,分子式为C10H16,是天然活性单环单萜,广泛存在水果和蔬菜中,尤其是柑橘类果皮,橙皮精油中含量达90％ ～ 95％[1],柑橘皮挥发油中含量达77.85％[2].D-柠檬烯有止咳、祛痰、溶解胆结石,镇静神经中枢,还有很好的抗肿瘤功效,常用于医药工业[3].因其特殊的柠檬气味,广泛用于香精香料工业和食品工业.也是新型的天然防腐剂,抑菌防腐效果优于常用的防腐剂(山梨酸钾、苯甲酸钠)[1].
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蛋白核小球藻遗传毒性研究
小球藻是绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻,常见的种类有蛋白核小球藻、椭圆小球藻、普通小球藻等.自20世纪50年代起,美国、日本、以色列等国已将小球藻作为饲料添加剂.近年来,小球藻在食品领域的应用越来越广泛[1-2].现代研究表明,小球藻特别是蛋白核小球藻具有吸附Pb、Cd等重金属、增强小鼠的细胞免疫系统以及降低血糖等多种作用[3-6].目前对蛋白核小球藻是否具有的遗传毒性尚未见报道.考虑到蛋白核小球藻在食品和药品领域的应用日益广泛,有必要对其遗传毒性进行评价,本文采用体内和体外等3项遗传毒性实验对蛋白核小球藻的遗传毒性进行了研究.
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口腔脱落细胞微核技术在丙烯腈接触人群中的应用
目的探讨口腔脱落细胞微核技术在接触丙烯腈人群遗传损伤监护中的应用.
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凯易消毒剂的毒性评价
目的凯易消毒剂是美国凯易化学品公司生产的消毒剂,主要用于厨房用具及设备的消毒,其主要成分为二氯异氰尿酸钠.该药拟在我国上市,我们依据我国卫生部颁布的<消毒技术规范>的要求,对其进行了安全性评价.
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盐藻素抗突变作用的初探
盐藻素提取自高寒盐湖微藻--杜氏盐藻,富含天然类胡萝卜素(β-C),是有效清除自由基的抗氧化剂,有助于身体免受自由基的伤害,并能保护眼睛,促进身体组织的生长和复原.
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耐寒食品添加剂的急性毒性和致突变性
目的检测耐寒食品添加剂的急性毒性和致突变性.方法试验所用添加剂为粉剂,用蒸馏水配成混悬液,按<食品安全性毒理学评价程序和方法>进行.(1)小鼠急性经口毒性试验:选用体重为18～22g小鼠20只,雌雄各半,禁食6h后以15g/kg经口灌胃,连续观察7 d.(2)小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验选用体重24～30g小鼠50只,雌雄各半,设1.25、2.50和5.g/kg 3个剂量组,阴性对照组用蒸馏水,阳性对照组用环磷酰胺(CP40mg/kg).采用间隔24h两次灌胃,于末次给药后6 h处死动物,制片,每只鼠计数1000年PCE.(3)小鼠精子畸形试验:选用20～25g雄鼠40只,设1.25、2.50和5.00g/kg 3个剂量组,阴性和阳性对照物同微核试验,连续灌胃5 d,于第1次给药后35 d处死动物,取副睾制片,检查精子形态,计数精子畸形率和畸形分类.结果(1)小鼠给药后未见明显中毒症状,未出现死亡.
