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普通及合并白癜风的HBV感染者血清抗TRP-1抗体的检测及其临床意义分析
目的 检测普通及合并白癜风的HBV感染者血清抗酪氨酸酶相关蛋白-1自身抗体(autoantibodies to tyrosinaserelated protein-1,a-TRP-1)水平并分析其临床意义.方法 选取白癜风患者126例(其中合并HBV感染8例,合并a-TP0、a-TG阳性34例,其他白癜风病84例);无白癜风病史的普通HBV感染者84例(HbsAg、HbeAg、HbcAb阳性24例,HbsAg、HbeAb、HbcAb阳性60例);乙肝抗体阳性对照者96例(HbsAb、HbeAb、HbcAb阳性48例,HbsAb阳性48例);乙肝五项全阴性的健康对照者96例.用ELISA法和细胞免疫荧光法检测所有标本a-TRP-1表达水平,并对结果进行统计分析.结果 白癜风组a-TRP-1总阳性率为6.3% (8/126),其中合并HBV感染者、合并a-TPO及a-TG阳性者、其他白癜风患者a-TRP-1浓度为分别为948.2±68.3 U/mL、36.1±0.1U/mL、54.3±12.8U/mL,各组阳性率分别为100% (8/8)、0% (0/34)、0%(0/84);健康对照组为46.9±0.1U/mL,阳性率为0%(0/96).白癜风组中合并HBV感染者与健康对照组抗体浓度比较,差异有统计学意义(P<0.01),而a-TPO、a-TG阳性者、其他白癜风患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).普通HBV感染组中,HbsAg、HbeAg、HbcAb阳性者与HbsAg、HbeAb、HbcAb阳性者a-TRP-1浓度分别为868.7±161.4U/mL、756.7±157.5U/mL,阳性率分别为91.7% (22/24)、85.0% (51/60),与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);乙肝抗体阳性对照组中HbsAb、HbeAb、HbcAb阳性者与HbsAb阳性者分别为26.8±0.1U/mL、33.3±0.1U/mL,阳性率分别为0% (0/48)、0% (0/48),与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).细胞免疫荧光法检测结果显示,ELISA法检测的a-TRP-1抗体阳性血清与黑素细胞培养固定物反应后,在胞浆和胞膜处发出明亮荧光,荧光强度+++~++++,合并a-TPO、a-TG阳性及部分其他白癜风患者血清在胞膜处也有荧光,荧光强度约++,健康对照血清荧光暗淡或无荧光.结论 a-TRP-1抗体的高表达与HBV感染有密切关系,该抗体应该不是大部分白癜风患者具有代表性的血清标志物,在大部分没有白癜风的普通HBV感染者体内也可高水平存在,这可能是该类患者继发白癜风的预兆和重要原因.
关键词: 乙肝病毒 酪氨酸酶相关蛋白-1 自身抗体 白癜风 -
CEA、AFP、TPA及HBsAg联检在肝癌诊断中的意义
肝细胞癌(HCC)是常见的肿瘤之一, 甲胎蛋白(AFP)是HCC重要的肿瘤标志物,但其特异性仍有一定局限性[1].癌胚抗原(CEA)、组织多肽抗原(TPA)均可高浓度地存在于多种肿瘤病人的血清中[2,3],乙肝病毒(HBV)是肝细胞癌的重要致癌因子, 它们对HCC的诊断、病情监测均有一定的价值.我们对HCC病人进行了CEA、AFP、TPA及乙肝表面抗原(HBsAg)的联合检测, 分析它们的临床意义,现报道如下.
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TRFIA检测乙肝病毒e抗体的探讨
用ELISA,但为手工操作,易受多方面因素影响,而出现假阴性或假阳性结果,尤其是对乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)[1].随着免疫技术的不断发展,HBV血清标志物的测定方法也有了很大改进,其中时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)是近年来发展较快的一种高度灵敏的定量检测方法,其应用范围逐渐扩大[2].
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前S1抗原检测在乙肝转归的初步应用
乙型肝炎是由乙肝病毒(HBV)所致的一种以肝脏损害为主的全身性急性或持续性传染病.在我国人群中,HBV感染率一直较高,超过了10%.HBV的表面抗原包括前S1蛋白(pre-S1)、前S2蛋白(pre-S2)和S蛋白,其中pre-S1抗原是HBV与肝细胞膜上特异性受体相结合的主要蛋白成分,在HBV感染肝细胞和机体免疫应答的过程中起着重要作用[1].
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TR-FIA对低浓度HBV标志物检出的临床价值
乙型肝炎(简称乙肝)是我国重点防治的传染病之一,我国一般人群中表面抗原(HBsAg)阳性率在10%左右.随着抗病毒药物的临床应用,乙肝病毒(HBV)变异株也逐渐增多.为了加强对HBV潜伏期的预测、对乙肝病情动态的有效监测、对药物疗效的预测,作者通过酶联免疫吸附试验(ELISA)结合时间分辨荧光免疫测定(TR-FIA),能有效检测乙肝标志物(HBV M);特别对低浓度的HBV M的有效检测,在临床及流行病学中具有一定的价值[1].现初步报道如下.
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血清乙肝病毒抗体与HBV-DNA关系的临床分析
由于分子生物学技术的迅猛发展, 人们对乙肝病毒(HBV)相关抗体, 尤其是抗-HBs的临床意义有了新的认识.就此本院肠道门诊收集125例HBV相关抗体阳性血清, 应用全自动荧光定量PCR仪来检测血清HBV-DNA(拷贝/mL)与相关抗体间的关系, 分析如下:
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PCR体外扩增法和SPRIA法在乙肝病毒检测中的运用
目前,全世界的慢性乙肝病毒(HBV)感染者大约3.5亿,其中30%~40%为慢性乙型肝炎患者,每年大约有100万慢性乙肝患者因肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌死亡.随着分子生物学技术的迅速发展,PCR体外扩增法定量检测HBV-DNA技术在乙肝抗病毒诊断和治疗中得到运用,乙型肝炎病毒的传播控制和治疗效果得到了一定的改进.本文将300例乙型肝炎病毒携带者HBV-DNA检测阳性血清标本,再用SPRIA检测方法定量检测其乙型肝炎病毒五项.经过统计分析,探讨其组合模式、检测结果及相互关系在临床传染病预防和治疗中的意义.
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ADAR1通过RNA编辑上调ZNF655表达并促进人肝癌细胞系HepG2中HBV复制
目的 探讨细胞中ADAR1对锌指蛋白ZNF655的作用及其对乙肝病毒(HBV)复制的影响.方法 在人肝癌细胞系HepG2细胞中,利用桑格测序验证ZNF6553′UTR存在ADAR1 RNA编辑位点;RT-qPCR检测ADAR1和ZNF655 mRNA的表达及HBV total RNA 和 HBV 3.5 kb RNA的表达;双荧光素酶报告基因检测荧光素酶的相对表达;Western blot检测ADAR1和ZNF655蛋白的表达;ELISA检测ZNF655对HBV标志物HBsAg和HBeAg的影响.结果 ZNF655基因3′UTR上chr7:99575277位点在DNA水平为纯合型,在RNA水平为杂合型;ZNF655基因3′UTR上chr7:99575277位点的编辑型 G 比正常型 A 的荧光素酶活性显著升高(P<0.001);在转录和翻译水平,ADAR1都显著增加了 ZNF655的表达(P<0.001);ZNF655对 HBV 的表达起到促进的作用.结论 ADAR1通过编辑ZNF655的3′UTR上的chr7:99575277位点,使编辑位点A转换成G,上调了基因的表达,进而起到对HBV复制的促进作用.
关键词: 作用于RNA的腺苷脱氨酶1 锌指蛋白655 RNA编辑 乙肝病毒 -
HBV感染患者循环miR-24的表达与作用机制
目的 检测乙型肝炎病毒(HBv)感染患者血清中循环miR-24表达的变化,并探讨miR-24与HBV感染的关系及作用机制.方法 收集45例HBV感染者和22例健康正常对照者的一般临床资料和血清样本,用实时定量PCR(qRT-PCR)检测两者血清中miR-24的表达;用ELISA法检测乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝E抗原(HBeAg)的含量;在HepG2.2.15细胞中转染miR-24模拟物(mimic) 48 h,qRT-PCR检测HepG2.2.15细胞中miR-24表达;再用ELISA法检测HBsAg和HBeAg含量,并用qRT-PCR检测细胞中前C基因HBV RNA表达.结果 HBV感染组血清中循环miR-24的表达水平均显著低于对照组(P<0.01).HepG2.2.15细胞中HBsAg和HBeAg含量均显著高于HepG2细胞(P<0.01).在HepG2.2.15细胞中转染miR-24 mimic后,miR-24的表达显著增高(P<0.01);miR-24显著抑制了细胞中HBsAg和HBeAg分泌(P<0.01);并抑制了细胞中前C基因HBV RNA表达(P<0.05).结论 miR-24在HBV感染患者体内表达下调,增强miR-24表达的治疗策略有望使HBV感染患者受益.
关键词: microRNA-24 乙肝病毒 乙肝表面抗原 乙肝e抗原 -
乙肝病毒促进肝癌细胞系的转移侵袭力
目的 探讨乙肝病毒(HBV)对肝癌细胞转移能力的影响及其可能机制.方法 以初始汇合度为30%,将3种细胞系HL-7702(人正常肝细胞系)、HepG2(未转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)、HepG2.2.15(稳定转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)种植于96孔板中,待细胞增殖至70%汇合时,利用划痕器制造划痕伤口,置于活细胞动态成像系统中进行多时间点的显微拍照与数据采集,计算相对伤口密度(RWD),并通过免疫荧光染色与Western blot技术测定细胞中EphA2蛋白表达,分析其与RWD值的相关性.结果 细胞迁移实验中,划痕后24~96 h,HL-7702组RWD显著高于HepG2与HepG2.2.15组(P<0.01),划痕后72 ~ 144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P<0.01);细胞侵袭实验中,HL-7702细胞因不能穿过基质胶,而无RWD值;划痕后72~144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P<0.05或P<0.01).EphA2表达:与HL-7702组比较,HepG2与HepG2.2.15组细胞中EphA2表达水平显著升高(P<0.01),其中HepG2.2.15组中EphA2表达水平显著高于HepG2组(P<0.01),且两组肝癌细胞中EphA2的表达量与划痕实验的RWD值呈显著正相关(迁移实验:P<0.01;侵袭实验:P<0.01).结论 乙肝病毒可能促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与上调EphA2的异常表达有关.
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血清中乙肝病毒全长cccDNA的检测及其临床意义
共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)是乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)的复制中间体.HBV复制活跃时,cccDNA可从损伤的肝细胞释放入血.因此,血清中出现cccDNA是肝细胞受损的早期标志~([1]).本研究用长链PCR方法从血清中扩增HBV cccDNA全序列,结合血清中HBV PreS1抗原、HBV标志物和丙氨酸转氨酶(ALT)的检测结果,分析血清中cccDNA检出率与HBV PreS1抗原表达及肝细胞损伤的相关性.
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乙肝病毒基因分型
关键词: 乙肝病毒 -
农村儿童乙型肝炎疫苗未接种原因调查
乙型肝炎(乙肝)疫苗是预防乙肝有效的措施,自1992年乙肝疫苗纳入儿童计划免疫管理以来,新生儿乙肝疫苗接种率逐年增高.但我市农村仍有部分(10%左右)新生儿未接种乙肝疫苗,这部分儿童将可能成为新的乙肝病毒感染者.
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接种重组乙型肝炎疫苗(酵母)后抗体持久性观察
为观察重组乙型肝炎(乙肝)疫苗(酵母)(YDV)接种后的安全性和乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)持久性,从1997年开始使用血源乙肝疫苗(PDV)和YDV对6~8岁儿童进行了8年的观察,现将结果报告如下.
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440例接种乙型肝炎疫苗无应答大学生加强免疫的效果观察
现阶段,接种乙型肝炎(乙肝)疫苗是防制乙肝病毒(HBV)感染的一种重要手段,但仍有部分人在按常规接种后测不出抗体应答.为探讨提高其免疫应答的方法,对1998~2002级440名接种乙肝疫苗后无应答的大学生,分别接种不同剂量乙肝疫苗各3针,以期获得可以测出的免疫应答.
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白城市3~5岁儿童乙型肝炎疫苗免疫效果评价
为了解白城市3~5岁儿童乙型肝炎(乙肝)疫苗(HepB)免疫效果,为制定乙肝防制对策提供依据,于2003~2004年对该部分儿童采取随机抽样方式,进行了乙肝病毒(HBV)感染标志和乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)的检测,现将结果报告如下.
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2000年在一个州管教所的乙型肝炎爆发
2000年3月21日,在一个高度安全的州管教所发现了1例34岁的急性乙型肝炎(乙肝)患者(首发病例),并经血清学确诊.该患已在此关押了2.5年,由于出现了黄疸和异常的转氨酶而到管教所的门诊就医.据患者反映,在患病前6个月与同牢房的人有未采取保护措施的性行为,这是他患病的唯一危险因素.血清学检验显示,这位21岁同牢房的人有慢性乙肝感染.他说以前未曾出现过类似肝炎的临床症状,也不知道他有乙肝的慢性感染,但与首发病例和另外两位监犯(Y宿舍)曾有过未采取保护措施的性行为.从2000年5月15日开始,州卫生局、管教局和疾病控制与预防中心(CDC)开展了一项调查,以确诊其他病例和乙肝病毒(HBV)感染的危险性.
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乙型肝炎的预防
1乙型肝炎(乙肝)疫苗(HepB)预防接种HepB是预防乙肝病毒(HBV)感染的有效方法.中国卫生部于1992年将HepB纳入计划免疫管理,对所有新生儿接种HepB,但HepB及其接种费用需由家长支付;自2002年起正式纳入免疫规划,对所有新生儿免费接种HepB,但需支付接种费;自2005年6月1日起改为全部免费.
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乙型肝炎病毒的免疫清除与抗病毒治疗
1免疫系统乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)诱导的乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)是通过B淋巴细胞/浆细胞产生的(体液免疫).这些抗体只有当乙肝病毒(HBV)仍在细胞外时才有保护作用,一旦病毒进入细胞后抗体就失去作用,此时只有细胞免疫清除机制有效,主要是T-淋巴细胞.以下为T-淋巴细胞的性质和其作用机制.
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脐带血乙肝标志物筛查乙肝病毒宫内感染的探讨
目的 探讨脐带血乙肝标志物用于筛查乙肝病毒宫内感染的可能性. 方法 收集175例HBsAg阳性孕妇新生儿脐带血及24 h外周血,进行乙肝标志物和HBV DNA检测,6月龄时随访查外周血HBsAg. 结果 脐带血HBsAg阳性的新生儿外周血HBV DNA均为阳性,6月龄随访HBsAg阳性率均为100%.7例出生时注射了HBIG和乙肝疫苗的HBV DNA阳性的新生儿HBsAg随访阴转;8例脐带血HBsAg和HBV DNA均阴性的婴儿因直接母乳喂养HBsAg随访阳转. 结论 脐带血表面抗原可以作为筛查胎儿乙肝病毒宫内感染的指标.