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聪智灵对拟血管性痴呆小鼠海马乙酰胆碱酯酶的影响
目的:观察聪智灵对血管性痴呆(VD)模型小鼠脑组织海马区乙酰胆碱酯酶(AchE)活性及学习记忆能力的影响,探讨聪智灵对血管性痴呆的治疗效应及作用机制.方法:采用反复结扎双侧颈总动脉的方法复制VD模型,随机分为假手术组、模型组、聪智灵高剂量组、聪智灵低剂量组、尼莫地平组.造模当天动物苏醒后开始治疗,灌胃给药15 d后,采用跳台法检测小鼠学习记忆能力变化,分光光度法检测海马组织AchE活力.结果:模型组小鼠学习与记忆成绩较假手术组均显著降低(P＜0.01),各用药组小鼠学习与记忆成绩较模型组均显著提高(P＜0.05或P＜0.01);模型组小鼠海马组织AchE活性明显低于假手术组(P＜0.01),各用药组小鼠海马组织AchE活性显著高于模型组(P＜0.05或P＜0.01).结论:聪智灵具有保护脑缺血再灌注损伤的作用,其机制可能与提高海马组织内AchE活性、减轻脑缺血再灌注对海马区神经元损伤有关.
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不同温度连续射频与脉冲射频对兔半月神经节内神经元胞体乙酰胆碱酯酶的影响
目的：探讨三叉神经节射频后半月神经节内神经元胞体乙酰胆碱酯酶（ AChE）含量的变化。方法采用微创的方法，对家兔半月神经节行60，70和80℃3个温度连续射频和脉冲射频，分别于手术后1 d、7 d、14 d 和28 d 分批处理家兔取射频侧半月神经节。Leica 振荡切片机连续切片，KarnovskyRoot 直接显示 AChE 的方法使细胞呈色，采用 Im-age - Pro Plus 6.0图像分析系统对 AChE 阳性细胞数和平均灰度值进行定量分析。结果各温度射频组实验侧半月神经节内神经元胞体 AChE 平均灰度值显著高于对照侧，试验组AChE 阳性细胞数与对照组比较稍有减少。温度越高变化越明显。结论射频兔半月神经节后可导致相关神经元胞体 AChE 含量明显降低。
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脑灵汤对Alzheimer病模型大鼠行为学及海马胆碱能神经系统的影响
目的 观察脑灵汤对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力,以及对海马部位乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)的影响.方法 D-半乳糖腹腔注射联合三氯化铝(AlCl3)皮下注射诱导建立大鼠AD模型,造模前后进行Y-电迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力,药物干预后检测各组大鼠学习记忆能力、海马区AChE及ChAT活力.结果 治疗30 d后脑灵汤组学习记忆成绩比西药组及模型组显著提高(P均<0.05),海马区AChE活力较模型组及西药组显著降低(P均<0.01) ,ChAT活力较模型组及西药组显著升高(P均<0.01).结论 脑灵汤能降低大鼠海马组织区乙酰胆碱酯酶活力,升高胆碱乙酰基转移酶活力,改善脑内胆碱能系统的功能,从而提高AD模型大鼠学习记忆能力.
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痴呆模型小鼠脑神经组织生化工程指标的改变及乌圆补血口服液对其重建的影响
目的 研究老年痴呆(AD)小鼠模型脑神经组织生化工程指标的改变及乌圆补血口服液对其重建的影响.方法 将小鼠分成模型组、治疗组和正常组,模型组和治疗组小鼠腹腔注射D-半乳糖和亚硝酸钠混合液,每天1次,连续60d造模.造模30d后,治疗组用乌圆补血口服液灌胃治疗,模型组和正常组用等体积蒸馏水灌胃.y型水迷宫测定小鼠治疗前后记忆功能.实验结束,处死小鼠,取大脑制备10%脑匀浆,测定脑匀浆生化指标.结果 脑匀浆乙酰胆碱酯酶(TchE)活力模型组、正常组和治疗组分别为(1.709±0.498)IU/mg、(1.436±0.313)IU/mg、(1.182±0.157)IU/mg,模型组明显高于其他2组(P＜0.05和P＜0.01);丙二醛(MDA)含量分别为(7.935±0.775)μmol/L、(6.934±1.284)μmol/L、(6.356±0.799)μmol/L,模型组明显高于其他2组(P＜0.05);脑(O·-2)氧自由基清除率分别为(2.346±1.167)%、(7.366±3.413)%、(8.672±3.519)%,治疗组和正常组均明显高于模型组(P均＜0.01);实验前各组水迷宫错误率分别是9.91%,7.41%,14.81%;实验结束时错误率分别是10.10%,1.23%,1.39%,实验结束时模型组水迷宫错误率明显高于治疗组和正常组;其他生化指标脑蛋白含量、脑GSH-PX等各组间无显著性差异.结论 D-半乳糖和亚硝酸钠联合造痴呆模型小鼠大脑神经组织胆碱酯酶活性等生化指标有明显改变,乌圆补血口服液对其重建有明显的促进作用.
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拟老年痴呆症小鼠模型的建立及海尔福口服液对其治疗效果研究
目的研究铝中毒性拟老年痴呆症(AD)小鼠模型的建立方法及中药制剂海尔福口服液对其治疗效果.方法选用昆明种小白鼠76只,分成两批进行实验.第一批36只,分成正常组、模型组、治疗组,后2组用氯化铝灌胃造模115 d,治疗组于造模第8周开始用海尔福口服液1号和2号治疗;第二批40只,分成正常组、模型组、海1组、海2组,后3组用氯化铝和硝酸铝喂养造模3个月,海1组和海2组于造模第8周开始分别用海尔福口服液1号和2号治疗.实验前后测定第一批小鼠的大脑乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、ALT及血红蛋白,实验结束测定第二批小鼠AchE活力及血清和脑匀浆各项生化指标.结果第一批:模型组小鼠AchE活性明显高于正常组和治疗组(P＜0.01),血红蛋白明显低于2组(P＜0.01),血清ALT各组之间无明显差异;第二批:模型组AchE活性明显低于其余3组,而脑O·-2浓度、脑谷胱苷肽过氧化物酶活性、血清尿素含量明显高于其余3组.结论铝中毒性拟老年痴呆症表现在对大脑胆碱能系统的损害,模型小鼠脑AchE活性均明显下降;对氧自由基清除力也明显下降,同时对血红蛋白有一定的影响.而中药制剂海尔福口服液对其有明显的治疗作用.
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急性有机磷杀虫药中毒中间综合征的临床分析
目的 探讨急性有机磷杀虫药中毒中间综合征(intermediate syndrome,IMS)的诊断治疗.方法 回顾性分析10例IMS患者临床表现和治疗方法.结果 有机磷中毒中间综合征的10例患者均出现不同程度呼吸肌麻痹症,及时建立人工气道及机械通气和乙酰胆碱酯酶(AchE)复能剂应用,治愈8例,死亡2例.结论 IMS应早期识别,建立人工气道与机械通气是抢救成功的重要方法.
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高压氧联合活血填精补肾汤治疗血管性痴呆的临床疗效及其对乙酰胆碱酯酶活性的影响研究
目的：观察高压氧联合活血填精补肾汤治疗血管性痴呆（ VD ）的临床疗效及其对乙酰胆碱酯酶（ AChE）活性的影响。方法选取深圳市龙岗区人民医院2013年8月—2014年10月收治的VD患者100例，采用统计软件将患者随机分为治疗组和对照组，各50例。治疗组患者给予高压氧联合活血填精补肾汤治疗，对照组患者给予高压氧联合尼莫地平片治疗。治疗前、治疗3个月后分别采用简易智能状态检查量表（ MMSE）及日常生活活动能力量表（ ADL）评定患者认知能力和生活能力，并测定治疗前及治疗3个月后两组患者AChE活性。结果治疗前两组患者MMSE评分、ADL评分及AChE活性比较，差异无统计学意义（ P>0.05）；治疗后治疗组患者MMSE评分、ADL评分高于对照组，AChE活性低于对照组（P<0.05）。治疗组患者认知能力改善效果和生活能力改善效果均优于对照组（P<0.05）。结论高压氧联合活血填精补肾汤能有效改善VD患者的认知能力及生活能力，其机制可能与抑制AChE活性、改善胆碱能神经功能有关。
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HO-1基因转染对慢性脑缺血大鼠海马乙酰胆碱转移酶表达的影响
目的 探讨重组腺相关病毒介导血红素加氧酶-1(rAAV-rHO-1)基因转染对慢性脑缺血大鼠海马乙酰胆碱转移酶(CHAT)表达的影响.方法 健康雄性清洁级SD大鼠54只,体重250～300 g,10～11月龄,随机分成3组(n=18):假手术组(SH组)、慢性脑缺血组(IS组)和rAAV-rHO-1治疗组(HO-1组).HO-1组大鼠海马内注射rAAV-rHO-1 2 μ l × 109 v.g.,SH组和IS组注入等容量生理盐水.注射rAAV-rHO-1后7 d时,采用永久结扎双侧颈总动脉的方法制备慢性脑缺血模型.大鼠慢性脑缺血2个月后进行Morris水迷宫试验,测定学习记忆功能,随后每组处死15只大鼠,采用免疫组织化学法测定海马CA1区ChAT表达,采用免疫荧光化学染色法测定海马CA1区HO-1的表达,光镜下观察海马CA1区病理学结果,并计数神经元;每组处死3只大鼠,电镜下观察海马CA1区超微结构,并计数突触.结果 与SH组比较,IS组学习记忆能力降低,海马CA1区神经元计数和突触计数减少,IS组和HO-1组海马CA1区ChAT表达降低,HO-1组海马CA1区HO-1表达升高(P＜0.05或0.01);与IS组比较,HO-1组学习记忆能力提高,HO-1组海马CA1区ChAT和HO-1表达升高(P＜0.05).结论 rAAV-rHO-1基因转染可抑制大鼠慢性脑缺血后认识功能减退,其机制与升高海马神经元ChAT的表达有关.
关键词： 血红素氧化酶(脱环) 转染 乙酰胆碱酯酶 海马 脑缺血 -
新生大鼠七氟醚麻醉对发育期认知功能和海马乙酰胆碱酯酶活性的影响
目的 探讨新生大鼠七氟醚麻醉对发育期认知功能和海马乙酰胆碱酯酶( AChE)活性的影响.方法 出生7d的SD大鼠80只,体重12 ～ 16 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n＝16):A组和B组分别吸入3％七氟醚6h和2h;C组和D组分别吸入1.5％七氟醚6h和2h;E组只吸人氧气.待大鼠生长至断乳期(出生后16～21 d)和性成熟期(出生后55～60 d)时,采用Morris水迷宫实验测试认知功能.分别于出生后21和60d水迷宫实验结束后30 min处死大鼠,取海马组织,采用比色法测定AChE活性.结果 与E组比较,A组出生后17～20 d、B组和C组出生后18、19 d、D组出生后18d时逃避潜伏期延长,A组出生后21 d时AChE活性升高(P<0.05或0.01)；与A组比较,B组和C组出生后19、20d时逃避潜伏期缩短,出生后21 d时海马AChE活性降低(P<0.05或0.01)；与B组和C组比较,D组出生后19、20d时逃避潜伏期缩短(P<0.05)；五组大鼠原平台象限活动时间和穿越原平台次数、出生后60d时AChE活性比较差异无统计学意义(P＞0.05)；性成熟期各组逃避潜伏期差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新生大鼠接受七氟醚麻醉后,可短暂降低发育期认知功能,且与吸入浓度和时间有关,其机制可能与增强海马AChE活性有关.
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氧化反应在脓毒症大鼠膈肌乙酰胆碱酯酶活性降低中的作用
目的 评价氧化反应在脓毒症大鼠膈肌乙酰胆碱酯酶(AChE)活性降低中的作用.方法 清洁级健康成年雄性SD大鼠30只,体重220～ 260 g,采用随机数字表法分为3组:假手术组(S组,n=8)、脓毒症组(Sep组,n=12)和抗氧化剂组(Ant组,n=10).采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型,S组暴露盲肠后关腹.于术后3、6、12和18h时Ant组皮下注射抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸20 mg/kg,并于术后3h时皮下注射去铁胺20 mg/kg,S组和Sep组注射等容量生理盐水.于术后24 h时处死存活的大鼠,取膈肌测定MDA含量、AChE及髓过氧化物酶(MPO)、SOD、过氧化氢酶(CAT)的活性.计算SOD/CAT比值.结果 与S组比较,Sep组和Ant组膈肌AChE活性降低,MPO和SOD活性升高,Sep组膈肌MDA含量和SOD/CAT比值升高,CAT活性降低,Ant组CAT活性升高(P＜0.05);与Sep组比较,Ant组膈肌AChE和CAT活性升高,MDA含量、MPO和SOD活性和SOD/CAT比值降低(P＜0.05).结论 氧化反应部分参与了脓毒症大鼠膈肌AChE活性降低的过程.
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不同酶源乙酰胆碱酯酶的抑制剂筛选方法比较
目的:建立一种可靠、快速、便捷、经济的乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)抑制剂的筛选方法,为新药发现阶段AChE 抑制剂的筛选提供经济可靠的微量筛选方法,然后对植物提取物样品进行筛选.方法:分别采用电鳗AChE、人源红细胞AChE、大鼠海马区、纹状体匀浆液中的AChE 为酶源.以96 孔板为载体,利用优化的Ellman 方法,在生理pH 值和温度的条件下,以他克林和石杉碱甲作为阳性对照,检测对不同酶源AChE 的抑制作用,确定佳酶反应条件(佳底物浓度、反应时间、显色剂浓度),并对植物提取物样品的AChE抑制作用进行检测.结果:采用上述四种酶源的AChE 进行AChE 抑制剂微量筛选方法操作简便快速、可靠经济.其中应用电鳗AChE 进行筛选显示灵敏度较高,他克林和石杉碱甲对电鳗AChE 的抑制作用相当,而对人源红细胞AChE、大鼠海马区、纹状体匀浆酶源的抑制作用,石杉碱甲明显优于他克林,所筛选植物提取物对AChE均没有抑制作用.结论:本实验中所建立的筛选方法操作简便、快速、可靠经济,可用于纯化合物的筛选.
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参芪醒脑浸膏对东莨菪碱致小鼠痴呆模型学习记忆功能的影响
目的:通过研究参芪醒脑浸膏对氢溴酸东莨菪碱致小鼠痴呆模型的行为学及皮层中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和乙酰胆碱酯酶(acetyl cholinesterase,AChE)含量的影响,探索其防治阿尔茨海默病的可能作用机制.方法:ICR小鼠105只,随机分为7组,分别为对照组、对照+高剂量组、模型组、参芪醒脑浸膏低、中、高剂量组(1.25,2.5,5 g·kg-1)、多奈哌齐组(1 mg·kg-1),每组15只.对照组和模型组灌胃给予蒸馏水,其余各组灌胃给予相应剂量的药物,每日给药1次,连续给药14天,第15天进行行为学实验,采用氢溴酸东莨菪碱腹腔注射诱发小鼠记忆障碍建立模型,用Morris水迷宫、物体识别实验评价各组小鼠的学习和记忆能力.每只小鼠在进行行为学前的20分钟腹腔注射氢溴酸东莨菪碱,剂量为1 mg·kg-1;通过western blot方法检测各组小鼠皮层组织中ChAT和AChE蛋白表达的变化.结果:①Morris水迷宫实验结果显示,与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期延长,即学习记忆能力下降(P<0.05).与模型组相比,参芪醒脑浸膏低、中、高剂量治疗组小鼠的逃避潜伏期缩短,结果差异具有统计学(P<0.05).②新物体识别实验结果显示,模型组对新事物的探究能力下降,即辨别指数降低(P<0.05),参芪醒脑浸膏低、中、高剂量治疗组均能不同程度增加东莨菪碱致学习记忆障碍模型小鼠的相对辨别指数(P<0.05);③Western blot结果显示,与对照组相比,模型组AchE蛋白的表达量明显升高(P<0.05),与模型组相比,参芪醒脑浸膏治疗组则能不同程度降低AchE蛋白的表达量(P<0.05).ChAT蛋白的表达在各组之间差异均无明显的统计学(P>0.05).结论:中药参芪醒脑浸膏能明显改善东莨菪碱致老年痴呆小鼠模型的学习记忆能力,可能与降低脑内AchE蛋白的表达量,使脑内Ach含量增加有关.
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溴氰菊酯对德国小蠊AChE及GSTs作用研究
目的 通过研究溴氰菊酯对德国小蠊若虫和成虫的AChE和GSTs的影响,探讨溴氰菊酯在化学防治德国小蠊中的作用.方法 用药膜法测定东营市野外品系的德国小蠊的KT50；每隔一段时间选取与药膜接触的活体德国小蠊若虫,冰浴匀浆后用试剂盒测定AChE和GSTs的活力.结果 溴氰菊酯对德国小蠊的成虫和若虫的KT50相差不大,分别为19.9min和18.7min,差异无统计学意义.德国小蠊的若虫与成虫对GSTs有较大差异,成虫的GSTs活力是若虫的2倍多.经溴氰菊酯诱导后,若虫在35min相对活性高,达175％.对成虫的GSTs诱导作用在30min时诱导率达高,为109.93％.结论 生测结果显示,溴氰菊酯对AChE有抑制作用,对GSTs有诱导作用,对酶的活性抑制及诱导效应与时间成正相关.
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DDVP对德国小蠊乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响
目的:了解不同浓度敌敌畏(DDVP)对德国小蠊乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响,为探讨德国小蠊抗性机制及建立抗性生化检测方法提供理论依据.方法:采用分光光度法和微量板酶动力学法分别测定不同浓度DDVP作用下德国小蠊乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽S-转移酶的活性,应用SAS软件进行统计分析.结果:随着施药浓度增加,乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性逐渐降低,施药浓度在0.01%及以上各组的乙酰胆碱酯酶酶活性与对照组有显著性差异:施药浓度在0.02%及以上各组的谷胱甘肽S-转移酶活性与对照组有显著性差异.结论:乙酰胆碱酯酶是DDVP的主要靶标酶之一,谷胱甘肽S-转移酶是DDVP的重要代谢酶.
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急性有机磷中毒患者阿托品中毒13例分析
有机磷杀虫药对人畜的毒性主要是对乙酰胆碱酯酶的抑制,引起乙酰胆碱蓄积,致胆碱能神经兴奋和危象等症状,临床上特效解毒药:常用阿托品和胆碱酯酶复能剂.自1998年1月～2003年7月,我院抢救治疗有机磷农药中毒167例患者致阿托品中毒13例,现总结分析如下.
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胆碱酯酶检测的临床研究进展
胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)又称为酰基胆碱水解酶,以多种同工酶形式存在于体内,按照酶水解底物的专一性、水解速度的差异、对抑制剂敏感性以及组织分布特点,将体内ChE分为两种:一种为乙酰胆碱酯酶(AChE,也称真胆碱酯酶),人AChE是膜结合蛋白质,以多种分子形式存在,主要分布于神经组织,如脑白质和灰质、神经节内的神经细胞和神经肌肉接头,还分布于红细胞和血清等非神经组织中.
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交通任督法干预对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马AchE活性的影响
目的 探讨交通任督法对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆功能及海马乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响.方法 成年SD雄性大鼠40只,筛选剔除后随机分为假手术组、模型组、交通任督法针刺组、西药对照组,每组10只.采用两血管阻断加硝普钠降压法制备VD大鼠模型,造模成功治疗后采用Morris水迷宫测试学习记忆能力,酶联免疫吸附法检测海马AchE活性.结果 定位航行实验显示:逃避潜伏期和游泳路程方面,假手术组、交通任督法针刺组和西药对照组均短于模型组(p＜0.01).假手术组、交通任督法针刺组和西药对照组海马AchE活性均高于模型组(P＜0.01).结论 交通任督法能显著改善VD大鼠学习记忆能力,提高海马AchE活性可能是其作用机制之一.
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绿茶多酚对血管性认知功能障碍影响的相关机制探讨
目的 研究两种剂量的绿茶多酚对慢性脑低灌注后病理生理变化的影响,以探讨绿茶多酚改善血管性认知功能障碍的相关机制.方法 健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、双侧颈总动脉结扎(2VO)+生理盐水组、2VO+GTP100组[绿茶多酚100 mg/(kg·d)]、2VO+GTP400组[绿茶多酚400 mg/(kg·d)].采用大鼠2VO制备慢性脑低灌注模型,结扎后从第4周开始给药,给药4周后通过Morris水迷宫观察大鼠的空间学习及记忆功能,采用生化方法检测大鼠海马组织的MDA含量、超氧化物歧化酶(SOD)和乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性,并采用实时定量PCR方法检测海马组织Nrf2 mRNA的表达.结果 绿茶多酚缩短慢性脑低灌注大鼠的逃逸潜伏期,使大鼠在平台区的停留时间延长.绿茶多酚减少海马组织的MDA含量,增强SOD活性,但对AchE的活性没有显著影响,400 mg/(kg·d)剂量的绿茶多酚增强海马组织Nrf2 mRNA的表达.结论 绿茶多酚改善慢性脑低灌注后的认知功能损害,减轻海马组织的脂质过氧化反应及抗氧化能力,尤其是400 mg/(kg·d)的剂量,但对胆碱能系统没有显著影响.
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芪归健脑方对阿尔茨海默病病人血浆胆碱酯酶活性和认知能力的影响
目的：观察芪归健脑方对阿尔茨海默病(AD)病人血浆中乙酰胆碱酯酶(AChE)活性和认知能力的影响。方法选取AD病人60例,随机分为两组：芪归健脑方组和西药治疗组,各30例。芪归健脑方组口服芪归健脑方,每次100 g,每日2次。西药治疗组口服吡拉西坦(脑复康),每次0.8 g,每日3次。两组均连续治疗6个月,治疗前后分别测定血浆中 AChE活性,并应用简易智力状态量表评估智力障碍程度。结果两组治疗后 AChE活性和简易智力状态量表积分较治疗前均明显增加(P<0.05),但两组间治疗后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论芪归健脑方能提高AD病人血浆中AChE的活性,并且能明显改善其认知能力。
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针刺百会、大椎对老年性痴呆大鼠脑内SOD及AChE的影响
目的 探讨针刺百会、大椎对老年性痴呆大鼠的脑内超氧化物歧化酶(SOD)及乙酰胆碱酯酶(AChE)含量的影响.方法 选用纯系Wistar老年大鼠52只,随机分为假手术组、模型组、针刺组和西药组,采用β-淀粉样蛋白向海马CA1区定向注射制作老年性痴呆模型,进行百会、大椎针刺治疗.检测大鼠脑内SOD及AChE的含量.结果 针刺老年性痴呆大鼠的百会、大椎穴,可明显提高脑组织内SOD的含量,降低脑组织内AChE的含量,与模型组比较有统计学意义(P<0.05).结论 针刺能提高老年性痴呆大鼠的学习记忆能力,改善自由基代谢,促进老年性痴呆大鼠的智能恢复.
