南方红豆杉芽愈伤组织的诱导和培养

目的为研究南方红豆杉芽愈伤组织诱导条件、适培养基组成成分和紫杉醇含量的积累.方法以南方红豆杉芽为外植体,在MS培养基上,试验不同种类、不同浓度的激素及其组合对其愈伤组织诱导的影响.结果芽诱导的适培养基是MS添加2,4-D 2.0 mg/L和NAA 0.5 mg/L;对愈伤组织的增殖、驯化和紫杉醇含量的积累则以B5添加2,4-D 0.5 mg/L、NAA 1.0 mg/L和KT 0.5 mg/L为佳.结论本研究为植物组织细胞培养生产紫杉醇提供实验依据.

芸香科植物飞龙掌血愈伤组织细胞培养物生物碱成分的研究

目的:为研究芸香科各亚科及属之间的亲缘关系及化学分类基础.方法:对药用植物飞龙掌血(Toddalia asiatica)愈伤组织进行诱导生长和继代培养,收获培养7周的组织块,甲醇和乙酸乙酯提取物通过多次硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析等方法进行生物碱等化学成分的分离与结构鉴定.结果:为采用药用植物飞龙掌血愈伤组织细胞培养的方法制备喹啉呋喃类药用生物碱提供依据.

红豆杉细胞培养过程中抗褐变剂研究进展

利用红豆杉细胞培养技术直接分离得到紫杉醇是解决紫杉醇供需矛盾的佳途径之一.如何减轻和控制细胞培养过程中发生的褐变问题,又成为细胞培养法成败的关键因素.现就近几年来红豆杉细胞培养法生产紫杉醇过程中有关抗褐变剂方面的研究,从愈伤组织诱导、继代及细胞悬浮培养3个环节分别进行了简要论述.

刺五加组织培养与细胞工程进展

综述了国内外对刺五加组织培养与细胞工程研究的现状.分别从体细胞胚胎发生的影响因素:外植体的发育程度和类型、培养基、植物生长调节剂的种类和浓度以及作用特点、体细胞胚胎的形态发生过程与解剖学和人工种子的包埋与萌发;茎尖外植体的离体培养与快速繁殖;根癌农杆菌和发根农杆菌对愈伤组织和新生体胚的遗化转化;毛状根培养生产刺五加次生代谢产物的研究现状进行了评述,并进一步分析了其中存在的问题,提出了一些建议.

莫邪菊的离体培养研究初报

目的 为建立莫邪菊的离体培养体系.方法 以成熟果实中的种子为外植体,探讨不同生长调节剂对离体培养中愈伤组织诱导、不定芽的分化和试管苗生根的影响.结果 培养基配方为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA0.2 mg/L时,种子破壳萌发率为70%,胚轴处愈伤组织诱导率为100%;MS+6-BA 2.0 mg/L为合适的丛生芽诱导和增殖培养基配方;培养基为MS0时生根率为95%,生根效果好且配方简单,移栽的试管苗成活率可达95%.结论 该试验建立的离体培养体系可用于莫邪菊的离体培养.

102 欧洲红豆杉一年生针叶和枝条愈伤组织中紫杉醇的含量

296总状升麻叶愈伤组织的离体再生

利用UV-B照射作用诱导大果西番莲愈伤组织中黄酮类化合物的产生

西番莲属Passiflora植物组织培养物,主要用来在培育和种质保存过程中快速获得优良栽培品或根茎繁殖的多样性.但该属植物组织培养中次生代谢产物生物合成的特性鲜有报道.研究了紫果西番莲P.edulis、大果西番莲P.quadrangularis和西番莲P.incarnata愈伤组织的可用性.

激素对党参愈伤组织的诱导及其多糖含量的影响研究

以MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D0.2mg/l为诱导培养基时,党参的愈伤组织长势良好,愈伤组织诱导率和芽分化率均为100%,是适培养基.以党参愈伤组织为材料,经真空干燥后,用水杨酸法测多糖含量,平均值为9.16%.其中含量高的培养基组合是MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.2mg/L,为10.58%.实验表明,党参愈伤组织中多糖的合成与愈伤组织的生长情况成一定的正比关系.

营养因子对药用植物愈伤组织中次生代谢产物积累的影响

植物次生代谢产物是由植物通过次生代谢产生的一类细胞生命活动或生长发育正常运行的非必需化合物。自然界许多药用植物的有效成分都是植物次生代谢的产物。随着药用植物市场需求的增大，野生植物资源逐年减少，利用愈伤组织获得次生代谢产物是目前解决供不应求为行之有效的方法。通过查阅近几年的国内外文献，综述了营养因子对药用植物愈伤组织中次生代谢产物积累的影响，以期为进一步研究提供参考。

激素对菘蓝器官分化及愈伤组织诱导的影响

通过试验,采用含有不同的植物激素配比的培养基培养菘蓝不同外植体,研究激素对菘蓝器官分化及愈伤组织形成能力的影响.以菘蓝无菌苗的子叶和胚轴为外植体,研究在不同激素配比的条件下诱导形成愈伤组织和分化不定根、不定芽的能力.结果证明:在NAA0.1mg/L+6-BA0.1 mg/L(14d)、NAA0.5mg/L+6-BA1.0 mg/L(14d)、NAA0.5mg/L+6-BA0.1 mg/L(28d)三个条件下子叶的愈伤组织诱导率可达到100%;NAA(0 mg/L～0.1 mg/L)+6-BA1.0 mg/L的激素组合是诱导菘蓝外植体分化芽的可选浓度组合;一般对菘蓝生根培养不采用此两组激素组合,以1/2MS培养基附加NAA0.1mg/L可使不定芽生根率可达100%.

麻黄愈伤组织的诱导研究

麻黄草质茎纤维性比较强,诱导愈伤组织比较困难.研究结果说明:诱导麻黄愈伤组织以幼嫩、深绿色、较粗壮的草质茎节间部分为外植体较好;在MS+NAA 1.0(mg/l)+2,4-D 0.2(mg/l)和MS+NAA 0.1(mg/1)+6-BA0.1(mg/1)培养基上愈伤组织的诱导率均可高达100%.

蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶的变化规律研究

目的:研究蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶活性的变化与过氧化物酶同工酶的差异.方法:采用分光光度法测定过氧化物酶活性,采用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳分析过氧化物同工酶.结果:已分化愈伤组织的酶活性高于未分化愈伤组织,未分化愈伤组织、产生胚状体的愈伤组织及分化芽和根的愈伤组织的酶活性成线性递增关系.不同分化类型愈伤组织的过氧化物酶同工酶谱有明显的差异.三类愈伤组织都有酶带1和2,分化的愈伤组织都有3和5,分化芽和根的愈伤组织还有酶带4,分化芽和根的愈伤组织的酶带3比形成胚状体的愈伤组织的酶带3要宽,着色也深.结论:过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关;酶带1和2显示的两种同工酶与愈伤组织的增殖有关,酶带3和5是与分化有关的特异性蛋白质.酶带4可能催化器官发生特有反应,且对过氧化物酶的活性影响较大.

淫羊藿愈伤组织诱导研究

目的:利用组织培养技术获得淫羊藿愈伤组织,为后续药用成分提取及次生代谢产物测定奠定基础.方法:以淫羊藿的土芽和嫩叶为繁殖材料,研究淫羊藿愈伤组织诱导的适宜条件.结果:土芽的诱导率高于嫩叶的诱导率,在附加6-BA( 1.0mg/L)和NAA( 1.0mg/L)的MS+蔗糖(20g/L)+琼脂(6g/L)中,诱导率高,为90.0%.结论:在淫羊藿的愈伤组织诱导研究中,土芽可作为佳的繁殖材料.

东北红豆杉愈伤组织中松香烷型二萜类成分的分离与鉴定

目的 明确东北红豆杉(Taxus cuspidata)愈伤组织中的化学成分,为开发可持续利用的红豆杉资源提供物质基础.方法 采用硅胶柱色谱、制备型HPLC等手段对愈伤组织的乙酸乙酯和甲醇提取物进行分离和纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据并结合相关文献对化合物结构进行鉴定.结果 从东北红豆杉愈伤组织中共分离得到7个松香烷型二萜化合物,分别鉴定为hinokiol(1)、美丽红豆杉素A(taxamairin A,2)、美丽红豆杉素C(taxamairin C,3)、taxayunnin(4)、margoci-lin(5)、3,20-epoxy-12-methoxy-8,11,13-abietatriene-3,7,11-triol(6)和brevitaxin(7).结论 化合物1～7均为首次从东北红豆杉植物中分离得到.

东北红豆杉愈伤组织中紫杉烷类化合物的分离与鉴定

目的 明确东北红豆杉(Taxus cuspidata)愈伤组织中的化学成分,为开发可持续利用的红豆杉资源提供理论依据.方法 采用硅胶柱色谱、制备型高效液相色谱等手段对愈伤组织的正己烷和乙酸乙酯提取物进行分离和纯化;根据化合物的理化性质和波谱数据并结合相关文献对化合物结构进行鉴定.结果 从东北红豆杉愈伤组织中分离得到11个紫杉烷类化合物,分别鉴定为taxuyunnanine C(1)、2α,5α,10β-triacetoxy-14β-propionyloxy-4(20),11-taxadiene(2)、2α,5α,10β-triacetoxy-14β-isobutyryloxy-4(20),11-taxadiene(3)、2α,5α,10β-triacetoxy-14β(2'-methyl)butyryioxy-4(20),11-taxadiene(4)、云南红豆杉甲素(yunnanxane,5)、紫杉醇(paclitaxel,6)、taxol C(7)、baccatin Ⅵ(8)、1β-deoxybaccatin Ⅵ(9)、taxayuntin C(10)、baccatin Ⅰ(11).结论 化合物9、11为首次从东北红豆杉愈伤组织中分离得到,化合物1-4、8-10尚未在东北红豆杉中发现.

刺五加愈伤组织的诱导及愈伤组织状态调控

目的 获得适宜悬浮培养的刺五加愈伤组织.方法 利用植物组织和细胞培养技术,考察3种诱导培养基及9种继代培养基对刺五加愈伤组织的诱导及愈伤组织状态的影响.结果 以α -萘乙酸(α-Naphthaleneacetic acid) 2.0 mg · L-1 +6 -苄氨基嘌呤[N-(phenylmethyl)-1H-purin-6-amine,6-BA]2.0 mg · L-1诱导出的愈伤组织适于悬浮培养,叶和叶柄的诱导率分别为93.3%和100%;筛选出佳固体继代培养的外源激素配比为NAA 1.0 mg · L-1 +6-BA 1.0 mg · L-1,在此激素配比下,愈伤组织生长代谢迅速,性状稳定,呈易分散的颗粒状,易于分散,适合下一步的悬浮培养.结论 以刺五加嫩叶为外植体,NAA 2.0 mg · L-1 +6-BA 2.0 mg · L-1为诱导培养基,NAA 1.0 mg · L-1 +6-BA 1.0 mg · L-1为继代培养基可以获得适宜悬浮培养的愈伤组织.

狭叶柴胡愈伤组织诱导的研究

目的：研究诱导狭叶柴胡愈伤组织产生的条件。方法：通过使用不同激素（6－BA，2，4－D，KT）不同配比，优选诱导愈伤组织的佳培养基。结果：佳诱导条件为：MS培养基＋6－BA 3 mg／L，2，4－D 0．1 mg／L，KT 0．6 mg／L，在佳诱导条件下，愈伤组织生长良好。结论：调节植物激素的配比，可有效的诱导植物愈伤组织的产生。

益母草愈伤组织诱导与生物转化能力初探

目的:建立益母草愈伤组织培养体系,用于生物转化外源底物初探.方法:以MS为基本培养基,研究不同外植体及植物生长调节剂对益母草愈伤组织诱导及增殖的影响,并对获得的愈伤组织生物转化能力进行初探.结果:益母草子叶诱导率85.79％、真叶诱导率97.88％、下胚轴诱导率29.78％;诱导的适配方为MS +2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L;初期增殖适配方为MS +2,4-D0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L;长期继代适配方为MS +2,4-D 0.1 mg/L+6-BA 1 mg/L;佳继代周期10 d;获得的3种愈伤组织悬浮培养均具有转化外源氢醌生成熊果苷的能力.结论:益母草愈伤组织经优选增殖,有望成为转化外源物质的良好材料.

毛脉酸模无菌苗的制备及下胚轴愈伤组织诱导的研究

目的:建立制备毛脉酸模无菌苗及下胚轴愈伤组织诱导方法.方法:通过摩擦种皮、种子浸泡时间、消毒次数、消毒剂种类、消毒时间以及种子贮存时间等因素研究对种子发芽的影响,探讨建立无菌苗培养体系的佳方法；以获得的无菌苗的下胚轴为外植体,通过在MS基本培养基中附加6- BA和2,4-D两种激素不同配比筛选诱导愈伤组织的优培养基配方.结果:制备毛脉酸模无菌苗的方法为:挑选粒大饱满的新种子,120目砂纸摩擦种皮,蒸馏水浸泡24h,75％酒精中浸2min,无菌水冲洗3次,10％NaClO溶液处理10min,无菌水冲洗5次,将其放置在有两层湿润的无菌滤纸的培养皿中10h,再进行第2次消毒,10％NaClO溶液处理8min,无菌水冲洗5次,在无激素的MS培养基中培养即可获得大量无菌苗；下胚轴愈伤组织诱导的优培养基为MS+ 3.0mg/L 6 - BA+1.7mg/L 2,4-D.结论:建立了毛脉酸模无菌苗培养体系,得到下胚轴愈伤组织诱导的优培养基,为将来进一步研究奠定基础.