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茯苓总三萜抑制小鼠免疫反应及治疗大鼠佐剂性关节炎的实验研究
目的:观察茯苓总三萜(TPC)对小鼠免疫功能的影响以及对大鼠佐剂性关节炎的治疗效果,评估其应用前景.方法:脂多糖(LPS)及刀豆素A(Con A)刺激小鼠脾细胞活化,经茯苓总三萜作用后,MTT法检测细胞代谢(增殖)活力,ELISA法检测培养上清中IgG、IgM以及白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)的含量.采用兔红细胞免疫小鼠制备体液免疫反应模型,灌胃模型动物茯苓总三萜,溶血法和ELISA法分别检测模型动物血清中溶血素和白介素-4(IL-4)的水平.采用二硝基氟苯制备小鼠迟发型超敏反应(细胞免疫反应)模型,灌胃模型动物茯苓总三萜,检测模型动物耳廓肿胀度及脾脏和胸腺指数.制备大鼠佐剂性关节炎模型,灌胃模型动物茯苓总三萜,检测模型动物足趾肿胀度.结果:茯苓总三萜(40、20、10μg/ml)体外能减弱由LPS及Con A刺激小鼠脾细胞的代谢(增殖)活力,降低培养上清中IgG、IgM、IL-2、IFN-γ的水平;灌胃给药,茯苓总三萜(400、200、100 mg/kg)能降低体液免疫反应模型小鼠血清溶血素和IL-4的水平;大剂量(400mg/kg)和中剂量(200 mg/kg)时,能减轻迟发性超敏反应小鼠耳廓肿胀度,降低脾脏指数,改善大鼠佐剂性关节炎模型的足趾肿胀度.结论:茯苓总三萜能抑制小鼠的免疫反应,对大鼠佐剂性关节炎有治疗作用,显示潜在的应用前景.
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正交试验法优化白鹤藤中总黄酮和总三萜的提取工艺
目的 优化白鹤藤Argyreia acuta Lout.中总黄酮和总三萜的提取工艺.方法 通过预试验初步确定白鹤藤的化学成分;采用单因素试验和正交试验优化其总黄酮和总三萜的提取工艺.结果 白鹤藤中可能含有有机酸、酚类或鞣质、黄酮、三萜皂苷和香豆素等;总黄酮的佳提取工艺为:80％乙醇,液料比1∶40,于60℃提取80 min,含量为156.079 mg·g-1;总三萜的佳提取工艺为:60％乙醇,液料比为1∶50,于70℃提取80 min,含量为0.275 mg·g-1.结论 优选的工艺可为白鹤藤资源的研究提供理论依据.
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紫外分光光度法测定刺梨总三萜与总黄酮含量
目的 测定贵州野生和栽培刺梨总三萜与总黄酮的含量.方法 采用比色法测定刺梨中总三萜与总黄酮的含量.结果 野生和栽培刺梨鲜果、粗粉总三萜含量分别为2.578％、16.990％、1.129％、12.485％.野生和栽培刺梨鲜果、粗粉总黄酮含量分别为0.088％、0.746％、0.077％、0.721％.结论 利用比色法测定刺梨总三萜的含量,该方法操作简便、快速、稳定,可以用于刺梨的质量控制.
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枇杷叶及其炮制品中总三萜的含量分析
目的:比较枇杷叶生品与不同炮制品中总三萜的含量变化.方法:采用紫外可见分光光度法,以5%香草醛-冰醋酸溶液作显色剂,高氯酸为稳定剂,建立枇杷叶中总三萜类成分的含量测定方法,分别测定了枇杷叶不同炮制品中总三萜的含量.结果:枇杷叶生品总三萜含量1.56%、清炒制品1.47%、蜜炙品2.36%、姜汁炒制品2.20%、姜汤煮制品1.60%.结论:炮制对枇杷叶中总三萜的含量有影响,其中以蜜炙枇杷叶中的含量为高.
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黄花瓦松中总三萜成分的含量的测定
目的:本文以新疆产瓦松作为研究对象,采用比色法,测定瓦松有效成分总三萜的含量.方法:以齐墩果酸作为对照品,以5%香草醛-冰醋酸、高氯酸作为显色剂,在540nm波长处处测定样品吸收度.结果:齐墩果酸在4～16μg/ml线性范围内,线性关系良好,其回归方程为:A=0.1082C+0.1105,r=0.9981,所测瓦松中总三萜成分为1.51%,RSD=1.31%.
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藏药印度獐牙菜中总三萜和齐墩果酸的含量测定
目的:测定印度獐牙菜中总三萜和齐墩果酸的含量.方法:以齐墩果酸为对照品,分别采用可见分光光度法和高效液相色谱法,测定总三萜和齐墩果酸含量.结果:总三萜含量为7.81mg/g,齐墩果酸的含量为3.11mg/g.结论:本方法操作简便准确,重复性好.
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鲍姆纤孔菌总三萜的提取及其体外抗乳腺癌细胞MCF-7活性
目的 研究提取鲍姆纤孔菌中总三萜的佳工艺条件,比较鲍姆纤孔菌子实体总三萜和菌丝体总三萜的体外抗乳腺癌细胞(MCF-7)活性.方法 在单因素的基础上运用Box-Behnken中心组合设计,以超声温度、超声时间、乙醇浓度3个因素3水平的实验模型,建立提取回归方程.以响应曲面法(RSM)对实验结果进行分析,对鲍姆纤孔菌总三萜提取工艺进行优化;用CASY细胞分析仪检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,分析鲍姆纤孔菌子实体总三萜和菌丝体总三萜抑制乳腺癌细胞增殖和促进乳腺癌细胞凋亡活性.结果 修正优条件为超声时间40 min,乙醇体积分数为70％,超声温度为60℃,此条件下总三萜的高提取率为9.83 mg/g.验证实验结果平均提取率为9.81 mg/g,与模型预测值较为接近;鲍姆纤孔菌子实体总三萜在0.2 mg/mL时,菌丝体总三萜在0.4 mg/mL时,对MCF-7细胞的增殖有显著的抑制,抑制效果呈浓度相关性.鲍姆纤孔菌子实体总三萜在0.2 mg/mL时,菌丝体总三萜在0.4 mg/mL时,能显著增强MCF-7细胞的凋亡,增强效果呈浓度相关性.结论 曲面响应法可以对鲍姆纤孔菌总三萜的提取工艺进行优化;鲍姆纤孔菌三萜对乳腺癌细胞(MCF-7)有明显的抑增殖活性和凋亡诱导作用,呈浓度相关性,且子实体总三萜比菌丝体总三萜体外抗乳腺癌细胞(MCF-7)活性更强.
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正交试验结合体外抑制肠平滑肌收缩活性研究优化固公果根总三萜提取工艺
目的 利用正交试验结合体外模型测定固公果根总三萜(TTROG)提取物抑制大鼠离体肠平滑肌收缩活性,优化其提取工艺.方法 以熊果酸为对照品,采用香草醛-冰醋酸显色,紫外分光光度法测定TTROG提取物中三萜含量,单因素考察提取溶剂、料液比、提取温度、提取时间、提取次数对TTROG提取率的影响;在单因素实验的基础上采用正交试验法考察提取溶剂、料液比、提取时间对TTROG提取率的影响;通过张力传感器与BL-420生物实验多通道生理信号采集处理系统记录不同提取物对体外肠平滑肌收缩的抑制作用,利用加权方法使生物活性与提取率相结合评价TTROG的提取工艺.结果 TTROG的佳提取工艺条件为:提取溶剂80％乙醇,料液比1∶10,提取时间2h,提取温度80℃,提取次数3次;优条件下TTROG的提取率可达42.12 mg/g;TTROG提取物对十二指肠、空肠、回肠、结肠4个肠段都具有显著的抑制离体肠平滑肌收缩的作用,呈剂量相关性,对空肠的作用强,抑制率可达41.96％.结论 经优化后的TTROG提取工艺提取率高、稳定,且获取的TTROG提取物具有显著的抑制大鼠离体肠平滑肌收缩功能.
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山香圆叶总三萜体外抗肿瘤活性研究
目的:研究山香圆叶总三萜体外抗肿瘤活性.方法:采用MTT法,以抑制率和半数抑制浓度(IC50)为评价指标,分别对人肺癌细胞株A549,人胃癌细胞株SGC-7901,人肝癌细胞株HepG-2进行抗肿瘤活性筛选.结果:山香圆叶总三萜对肿瘤细胞增殖有抑制作用,且与药物浓度有相关性.
