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  • 急性白血病患儿维生素D受体表达研究

    作者:郑敏;何云燕;罗建明

    目的 通过检测急性白血病(AL)患儿维生素D受体(VDR)mRNA和蛋白质表达,从转录和翻译两个水平探讨VDR在AL中的表达和意义.方法 收集2009年1月至12月广西医科大学第一附属医院儿童血液科住院或门诊未经治疗的30例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿(ALL1组)、12例急性髓细胞白血病(AML)患儿(AML1组)、30例非肿瘤性血液病患儿(对照1组)的骨髓标本,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测3组骨髓细胞VDR mRNA表达.收集2009年9月至2010年4月广西医科大学第一附属医院儿童血液科住院或门诊未经治疗的30例ALL患儿(ALL2组)、10例AML患儿(AML2组)和30名健康体检儿童(对照2组)的外周血标本,提取外周血单个核细胞(PBMC),应用免疫细胞化学法和蛋白免疫印迹法检测VDR蛋白表达.结果 ALL1组、AML1组和对照1组骨髓均有VDR mRNA表达.ALL1组VDR mRNA表达量为(1.06±0.31)、AML1组VDR mRNA表达量为(1.13±0.34),均明显低于对照1组(3.10±0.18),3组差异有统计学意义(F=1701.00,P<0.01);而ALL1组与AML1组间VDR mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).免疫细胞化学法显示,ALL2组外周血VDR蛋白表达(27.82±1.78)%、AML2组外周血VDR蛋白表达(27.10±2.44)%,明显低于对照2组(59.02±3.46)%,3组间差异有统计学意义(F=1150.26,P<0.01);而ALL2组与AML2组VDR蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).蛋白免疫印迹法显示,ALL2组VDR蛋白表达(0.299±0.071)、AML2组VDR蛋白表达(0.290±0.094),明显低于对照2组(0.710±0.041),3组间差异有统计学意义(F=356.434,P<0.01);而ALL2组与AML2组VDR蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 所有检测的AL患儿骨髓及外周血单个核细胞中均表达VDR,但VDR表达可能与AL分类无关.

  • 惠州市人乳头瘤病毒感染分型特点分析

    作者:陈旭华;李云香

    目的:了解和分析广东省惠州市女性宫颈感染人乳头瘤病毒( HPV)基因型的分布情况,为各级医疗机构、疾控中心制定HPV感染的治疗方案及防范措施、为我国HPV疫苗的研发和使用提供科学依据。方法利用实时荧光定量聚合酶链( FQ-PCR)反应对从2014年1~7月在惠州市惠阳区人民医院和惠州市第二妇幼保健院进行体检的有性行为的女性共3673例进行HPV基因亚型检测,其中包括15种高危型( HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82)及5种低危型(HPV6、11、42、43、44)。结果 HPV的总检出率为22.65%(832/3673),其中高危型检出率为18.84%(692/3673),低危型检出率为2.86%(1053/673),混合型感染(感染型别多于两种及以上)检出率为0.95%(35/3673)。在20岁以下,21~25岁,26~30岁,31~35岁,36~40岁,41~45岁,46~50岁,50岁以上的不同年龄段HPV感染率分别为7.09%,15.51%,15.51%,19.35%,17.05%,11.67%,10.94%,2.88%。在感染HPV的832人中,高危型感染主要为16型(25.96%),52型(15.26%),18型(9.51%),33型(7.93%)及56型(7.33%)。低危型感染以11型(6.37%)为主,混合型感染以16/58型(1.80%)为主。结论在惠州市HPV高危型感染主要为16,52,18,33和56型,低危型感染主要为11型,高危型的流行导致了混合型16/58,16/18等感染的增多。

  • 病毒载量在乙肝肝硬化中的意义探讨

    作者:李延军;冯继红;徐光华

    探讨乙肝肝硬化患者中,病毒载量与肝功生化指标、周围血象及临床转归的相互关系.采用实时荧光定量PCR、全自动生化分析及全自动血球计数技术,对169例乙肝肝硬化患者血标本进行检测,在169例肝硬化患者中,ALT/AST<1,80例,ALT/AST>1,69例(t=2.52,P<0.05);白蛋白正常者53例,白蛋白异常者116例(t=2.80,P<0.01);总胆红素≥171.1μmol/L者,10例,总胆红素<171.1μmol/L者,159例(t=3.71,P<0.01);HCC发生率39.58%(19/48),HCC发生率9.52%(4/42),x2=4.24,P<0.05;WBC、PLT变化差异无显著性;在乙肝肝硬化中HBV DNA呈较高水平复制者,肝功能损害明显比低水平复制者为重;HCC发生与一定范围HBV复制水平相关.

  • 胃癌组织中Kiss-1 mRNA与Notch1 mRNA的表达及意义

    作者:段志英;李超;赵云霞;范红云;韩双双;于卫芳

    目的:探讨Kiss-1 mRNA与Notch1 mRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测胃癌和癌旁正常组织中Kiss-1 mRNA与Notch1 mRNA的表达情况,分析其与临床病理特征之间的关系。结果 Kiss-1 mRNA在胃癌组织中的表达较癌旁正常组织中降低(P<0.05);Kiss-1 mRNA的表达与胃癌的淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05),与胃癌的浸润深度、分化程度、远处转移无关(P>0.05);Notch1 mRNA在胃癌组中的表达较癌旁正常组织升高( P<0.05);Notch1 mRNA 的表达与胃癌的淋巴结转移、TNM 分期、分化程度密切相关( P<0.05),与胃癌的浸润深度、远处转移无关(P>0.05)。结论 Kiss-1在胃癌的发病过程中发挥抑癌基因作用,并通过抑制转移来影响胃癌的预后;Notch1在胃癌的发病过程中发挥癌基因作用,有潜力成为早期诊断胃癌的新型肿瘤标记物。

  • 红参中精氨酸双糖苷对小鼠的抗疲劳作用

    作者:黄宝亮;丁传波;王佳奇;郑毅男;刘文丛;张晶;徐晓华

    目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制.方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg-1)AFG组,每组20只,连续灌胃给药28 d后对小鼠进行强迫性游泳实验,检测各组小鼠体质量,脏器指数,强迫性游泳时间,乳酸(LD)、尿素氮(BUN)、肝糖原(Gly)水平及腓肠肌中PGC-1α基因表达水平.结果:与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠的体质量和脏器指数差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠强迫性游泳时间、Gly水平和PGC-1α mRNA基因表达水平均明显增加(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性;与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠血清中的LD和BUN水平明显降低(P<0.01).结论:AFG对小鼠有抗疲劳作用,其机制可能与能量代谢有关.

  • 人偏肺病毒检测方法的比较

    作者:任妍;陈昕;杜丽娜;赵晓东

    目的 比较几种人偏肺病毒(hMPV)的检测方法,为临床选择适当的检测方法提供依据.方法 不同稀释度的hMPV分别感染Vero-E6细胞,出现细胞病变(CPE)后,分别用RT-PCR、Real-time PCR和IFA进行检测,比较3种方法的灵敏度;10倍系列稀释滴度为10~(5.2) TCID_(50)/ml的hMPV,分别用RT-PCR及Real-time PCR进行检测,定量比较两种方法的灵敏度;分别用Real-time PER和IFA检测523份急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物.结果 IFA、RT-PCR和Real-time PCR分别可检出10~(-4)、10~(-5)、10~(-7)稀释度孔中的病毒;RT-PCR和Real-time PER检测的灵敏度分别为1.0×h10~3和1 TCID50/ml;在523份鼻咽分泌物标本中,IFA检测阳性率为9.18%,Real-time PCR检测阳性率为31.55%.结论 Real-time PCR检测鼻咽分泌物标本中hMPV为儿科临床早期诊断的佳方法;IFA可作为基层医院及hMPV相关严重呼吸道感染的检测方法.

  • 中医"血分论治"对寻常型银屑病患者外周血单个核细胞IFN-γ/IL-4表达影响的实验研究

    作者:李斌;王婕;范斌;李福伦;顾荻青

    目的 从T细胞免疫角度探讨从"血分论治"寻常型银屑病的作用机制.方法 选择32例寻常型银屑病患者(血热证组17例,血瘀证组15例),以10例健康人为对照,提取、体外培养外周血单一核细胞(PBMC);选取清洁级雄性Wistar大鼠,制作灌胃清热凉血方和益气活血方血清.采用实时荧光定量聚合酶链反应方法(FQ-PCR)分别观察不同中药血清刺激前后PBMC中IFN-γ/IL-4 mRNA的表达变化情况.结果 中药干预后,血热证(进行期)组IL-4 mRNA IFN-γmRNA和血瘀证(静止期)组表达水平均明显下降(P<0.05).结论 从"血分论治"寻常型银屑病可通过调节IFN-γ/IL-4的平衡发挥治疗作用.

  • HOTAIR促进卵巢癌恶性生物学行为

    作者:董立军;李岚;宋国军

    目的:研究沉默HOTAIR后对上皮性卵巢癌恶性生物学行为的影响.方法:实时荧光定量聚合酶链反应检测HOTAIR在卵巢癌细胞株SKOV3、OVCAR3和A2780的表达情况.沉默HOTAIR后,划痕实验检测卵巢癌细胞转移能力,侵袭实验检测卵巢癌细胞侵袭能力,胸腺嘧啶核苷类似物检测卵巢癌细胞增殖能力.结果:HOTAIR在SKOV3和OVCAR3细胞中表达高于A2780细胞;沉默HOTAIR后,卵巢癌SKOV3细胞转移 、侵袭和增殖能力降低;结论:沉默HOTAIR可以抑制卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为.

  • 血清miR-598-3p与CA153联合检测在乳腺癌诊断中的意义

    作者:苏谦;陈文举;王攀;李招云

    目的 探讨血清微小RNA-598-3p(miR-598-3p)检测及miR-598-3p与糖类抗原153(CA153)联合检测在乳腺癌诊断中的意义.方法 收集2013年1月—2014年9月在台州市中心医院确诊的100例乳腺癌患者、45例乳腺良性疾病患者及40名健康对照者血清标本,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-598-3p的表达水平,应用化学发光法检测血清CA153水平,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-598-3p、CA153及二者联合检测对乳腺癌诊断的敏感性和特异性.结果 乳腺癌患者血清miR-598-3p的表达水平下调,CA153水平升高,与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).miR-598-3p的表达量与乳腺癌TNM分期无相关性(P>0.05).ROC曲线分析结果显示,miR-598-3p诊断乳腺癌的敏感性和特异性分别为95.0%、85.0%;CA153诊断乳腺癌的敏感性和特异性分别为66.0%、65.0%.二者联合检测诊断乳腺癌的敏感性和特异性分别为96.0%、70.0%.结论 miR-598-3p对乳腺癌的诊断具有良好的敏感性和特异性,联合CA153检测可以提高对乳腺癌的诊断效能.

  • 实时荧光定量PCR在快速检测

    作者:陈旭;肖淑珍;董丹凤;杨海慧;李生香;倪语星;韩立中

    目的 评价实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的应用.方法 采用头孢西丁纸片扩散法和mecA基因PCR检测法,将85株临床分离的金黄色葡萄球菌区分为MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),并采用实时荧光定量PCR对这些菌株进行检测,评价MRSA检测中实时荧光定量PCR与目前常规检测方法的一致性.结果 根据头孢西丁纸片扩散法和mecA基因扩增结果进行分组,85株金黄色葡萄球菌中MRSA组菌株45株,MSSA组菌株40株;实时荧光定量PCR检测结果与上述结果完全一致,符合率为100%.结论 实时荧光定量PCR检测MRSA的结果与常规方法一致性好,且具有操作简便、耗时短等特点.作为一种快速检测方法,实时荧光定量PCR能将金黄色葡萄球菌的鉴定和MRSA的筛选结合起来,对于指导临床用药及MRSA医院感染控制具有重要意义.

  • 实时荧光定量聚合酶链反应检测沙门菌(A~F群)方法的建立和应用

    作者:田桢干;沈小明;方筠;张晓航;章琪;赵冰

    目的 建立实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测沙门菌,评价其优越性.方法 根据沙门菌保守的HilA基因序列合成引物和探针,建立快速检测沙门菌的实时荧光定量PCR.结果 所建立的实时荧光定量PCR具有简便、快速、敏感性高、特异性强、抗干扰性好和可重复性强等特点,与实际应用检测结果相符.结论 建立的实时荧光定量PCR可用于口岸食品和公共场所从业人员的沙门菌检测.

  • FQ-PCR检测造血干细胞移植受者HCMV感染及与淋巴细胞免疫表型变化的关系

    作者:方超平;王杨;沈茜;张军;张倩;李闻捷

    目的 探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV)DNA含量在异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)受者HCMV激活感染中的诊断价值和淋巴细胞免疫表型变化与HCMV激活感染的关系.方法应用FQ-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测allo-PBSCT后受者HCMV DNA和抗HCMV IgM抗体;用流式细胞仪测定淋巴细胞亚群.结果 39例allo-PBSCT受者中19例检出HCMV DNA(《30 d的有5例,2~3个月的13例,》100 d的1例).HCMV感染后血清HCMV、IgM阳性检出率非常低(4/19),且出现时间较晚.移植后早期HCMV DNA阳性组与阴性组及健康组比较CD4+细胞、CD19+细胞及CD4/CD8比值显著下降,CD8+细胞和CD16+56+细胞升高.HCMV阳性患者CD4/CD8比值在感染前后比较差异也有统计学意义.结论 allo-PBSCT后HCMV活动性感染易发生于allo-PBSCT后早、中期,高峰期在移植后30~60 d;HCMV活动性感染与细胞免疫功能紊乱互为因果,加重病情.

  • 实时荧光定量PCR快速检测脑膜炎奈瑟菌的临床价值

    作者:王崇义;史训忠;孙正林

    目的 探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速检测流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病原菌脑膜炎奈瑟菌(Nm)的临床价值.方法 收集70例疑似流脑病例的双份脑脊液标本,1份采用细菌培养法进行检测,另1份采用实时荧光定量PCR进行检测,比较2种方法的检出阳性率以及敏感性和特异性.结果 采用细菌培养法检出Nm阳性49例,阳性率为70.00%;实时荧光定量PCR检出Nm阳性67例,阳性率为95.71%,二者阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05).实时荧光定量PCR检测结果与细菌培养法阳性符合率为70.00%,其中有18例细菌培养法为阴性而实时荧光定量PCR为阳性.实时荧光定量PCR检测Nm的特异性为100%,无假阴性结果,阳性预测值为73.13%,阴性预测值为0.00%,检测下限为103拷贝/mL,线性范围为2×103~2×107拷贝/mL.结论 实时荧光定量PCR检测Nm敏感性高、特异性强,且快速简便,为流脑流行病学调查提供了一种快速、简便的病原学诊断手段.

  • 实时荧光定量 PCR 在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中的评价与应用

    作者:乔昀;赵英妹;仲俊;张珏;龚捷文

    目的:评价实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的临床应用价值。方法经培养鉴定的70例已知细菌中22例为 MRSA,48例为非 MRSA,对已知细菌用实时荧光定量 PCR 进行检测,了解该方法的特异性和敏感性。对临床88例医护人员和患者的鼻拭子进行实时荧光定量PCR 检测,了解医院内 MRSA 的携带情况。结果培养为 MRSA,实时荧光定量 PCR 检测结果均为 MRSA,敏感性为100%;培养为非 MRSA,实时荧光定量 PCR 检测结果均为非 MRSA,特异性为100%。实时荧光定量 PCR检测 MRSA 的敏感性可确定为1×103 cfu/mL。48例患者的鼻拭子 mecA 耐药基因阳性26例,金黄色葡萄球菌阳性28例,两者同时阳性(即为 MRSA)20例,MRSA 阳性检出率为41.6%;40例医护人员鼻拭子 mecA 耐药基因阳性12例,金黄色葡萄球菌阳性13例,两者同时阳性(即为 MRSA)9例,MRSA 阳性检出率为22.5%。结论实时荧光定量 PCR 可用于临床对 MRSA 的快速检测。

  • 荧光定量PCR检测VEGF-C、CEACAM-1在胃肠肿瘤中的表达及意义

    作者:周沐青;刘鷖雯;王颖智;何怡青;杨翠霞;高锋

    目的 观察血管内皮生长因子C(VEGF-C)和癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAM-1)在消化道癌组织和癌旁组织中的表达情况,探讨其表达与肿瘤分期的关系,与术前血清癌胚抗原(CEA)水平一起比较其在肿瘤诊断中的价值.方法采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测53例消化道肿瘤及相应癌旁对照组织中VEGF-C、CEACAM-1 mRNA表达水平;用全自动免疫发光分析仪测量患者术前血中CEA水平.结果 VEGF-C mRNA在癌组织中的表达显著高于相应癌旁对照组织(P<0.05),均值分别为2.65E-03和1.63E-03;CEACAM-1 mRNA在癌组织和癌旁组织中表达差异无统计学意义(P>0.05),均值分别为0.036 2和0.066 4;VEGF-C、CEACAM-1 mRNA在癌组织及癌旁对照组织中均有显著相关性(P<0.001);癌组织中肿瘤侵润较深组其CEACAM-1 mRNA显著高于肿瘤侵润较浅组(P<0.05);癌组织VEGF-C mRNA诊断消化道恶性肿瘤的符合率较血清CEA高(P<0.001).结论胃肠道肿瘤中CEACAM-1 和VEGF-C的表达量与肿瘤分期有关;VEGF-C mRNA在癌组织中的表达水平可作为胃肠恶性肿瘤的预测指标,也可在分子水平上作为判断胃肠肿瘤临床分期的辅助指标.

  • 实时荧光定量PCR检测CD44和RHAMM在胃肠肿瘤中的表达研究

    作者:王颖智;YANG Cuixia;刘鷖雯;HE Yiqing;杨思;CUI Lian;高锋

    目的 探讨CD44和透明质酸介导运动的受体(RHAMM)在胃肠肿瘤组织中的表达,研究其在肿瘤诊断中的价值.方法 收集病理分期为Ⅱ~Ⅲ级胃肠道恶性肿瘤样本30例,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对CD44和RHAMM进行定量分析.结果 CD44和RHAMM在癌组织中相对于管家基因GAPDH的表达中位数分别为1.587和1.074,正常组织中分别为0.704和0.098;肿瘤组织中,区域淋巴结转移组的CD44拷贝数/GAPDH拷贝数的中位数为1.650,未转移组相应的均值为1.431;区域淋巴结转移组的RHAMM拷贝数/GAPDH拷贝数的中位数为1.301,未转移组的中位数为1.064.区域淋巴结转移样本其CD44和RHAMM表达同步增高,肿瘤组织中CD44和RHAMM之间的相关系数(r)为0.96.结论 胃肠肿瘤中的CD44和RHAMM表达高于正常组织,且两者表达具相关性.CD44和RHAMM的表达量增加的多少不足以判断肿瘤是否有区域淋巴转移,CD44和RHAMM同时增高可能预示肿瘤的淋巴转移.

  • 急性乙型肝炎患者外周血单个核细胞颗粒溶素mRNA定量测定及临床意义

    作者:钱琤;陈波;周晔;谷明莉;蒋廷旺;吴传勇;陈燕;邓安梅;仲人前

    目的 应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测乙型肝炎(简称乙肝)患者外周血单个核细胞(PBMC)中颗粒溶素(GNLY)mRNA的表达,探讨GNLY基因表达水平与急性乙肝的关系.方法 实时荧光定量RT-PCR分别检测40例急性乙肝患者及100名正常对照的PBMC的GNLY基因表达水平,同时检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平.结果 急性乙肝患者发病期mRNA表达显著高于正常对照组(P<0.01),恢复期GNLY基因表达与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05).乙肝患者GNLYmRNA与血清ALT、AST呈正相关.结论 实时荧光定量RT-PCR检测GNLY mRNA的表达准确可靠.患者外周血GNLY基因表达水平与急性乙肝的发生发展存在一定的相关性.

  • 实时荧光定量PCR快速诊断肺炎链球菌

    作者:颜善活;孙雷;符可鹏;卓永光;杨善业;樊祖茜;黄永霞

    目的 建立实时荧光定量聚合酶链反应(PCR),用于肺炎链球菌检测和流行病学调查.方法 以肺炎链球菌自溶素(lyt)和溶血素(ply)的基因为目的序列分别设计引物和探针,将其分别与10株肺炎链球菌、13株非肺炎链球菌DNA以及不同浓度梯度的肺炎链球菌DNA进行荧光定量PCR,并将引物和探针应用于200例临床标本检测,同时通过传统的微生物培养鉴定的方法来验证荧光定量PCR的特异性和敏感性.结果 10株肺炎链球菌均获得了明显的扩增产物,13株非肺炎链球菌DNA无明显的扩增信号,其检测敏感性可达100 fg;200例临床标本,实时荧光定量PCR检测出42例肺炎链球菌阳性(阳性率为21%),而培养法阳性16例(阳性率为8%).结论 实时荧光定量PCR是一种敏感、特异、快速的检测肺炎链球菌方法,可用于肺炎链球菌的诊断和流行病学调查.

  • 胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性分析

    作者:田棣;何静;刘祎;张万菊;徐磊;陈功祥;周志统;胡芸文

    目的 了解胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性.方法分别用甲型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)和甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对171例疑似甲型H1N1流感(2009)患者鼻咽拭子标本进行检测,以实时荧光定量聚合酶链反应(FQpCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析试剂盒对不同病程以及不同病毒核酸载量标本检测的敏感性.结果 2种试剂盒的检测敏感性与标本的病毒核酸载量呈正相关(P<0.0l),病毒载量≥108拷贝/mL时均可达73.3%.同时,2种试剂盒的阳性检出率与标本的病程呈负相关(P<0.01),发病1~2d时分别为66.7%和62.5%,推测其在实际应用中的理论敏感性分别可达77.3%和74.6%.结论 胶体金免疫层析试剂盒检测甲型H1N1流感病毒(2009)在发病初期及病毒载量较高时有较好的检测效果,可帮助临床早期诊断和海关口岸等机构的现场筛查.但鉴于胶体金免疫层析法自身的局限性,其结果只能作为初步参考,终的确认结果应以PCR结果为准.

  • 耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌临床分离株的流行病学与耐药机制研究

    作者:张广慧;曹雪萍;俞静;刘瑛;葛艳

    目的:了解耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌流行病学情况以及耐药机制,帮助临床合理使用抗菌药物,为控制医院感染提供依据。方法收集耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌110株及敏感株6株,进行来源病区和标本种类的统计分析;应用重复序列聚合酶链反应(REP-PCR)进行基因型分型;使用PCR检测β-内酰胺酶基因(OXA、IMP、VIM等)及外排泵编码基因(adeA、adeB、adeC、adeJ、adeG)的携带情况;采用实时荧光定量PCR对比耐药菌株与敏感菌株的外排泵基因表达量的差异。结果110株菌株主要来自痰标本,重症监护病房(ICU)分离率高;所有菌株REP-PCR电泳图谱分为A~G 7型,110株耐药菌株均为A型,且均被检测到含有OXA-23、OXA-51基因,均未检测到含有OXA-24、OXA-58、IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2基因;外排泵编码基因adeA、adeB、adeC、adeJ及adeG的阳性率均为100%;耐药菌株外排泵编码基因adeA、adeB、adeC表达量明显高于敏感菌株。结论耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的流行型别基本相同,均为A型,应引起临床医护人员的高度重视;β-内酰胺酶基因(OXA-23、OXA-51)的表达以及外排泵基因(adeA、adeB、adeC)的过度表达与其对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性有关。

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